食品微生物学菌落总数检验中不确定度的评定.pdfVIP

作者简介 李玉玲 (1955- ), 女, 主管技师, 主要从事微生物检 验工作。 =经验交流 食品微生物学菌落总数检验中不确定度的评定 李玉玲, 宋莉莉 (天津市西青区卫生防病站, 天津 300380) 关键词 不确定度; 菌落计数;稀释度 中图分类号 TS20113 文献标识码 C 文章编号 1004- 8685( 2005) 07- 0880- 02 目前, 国际上统一使用的检测和校准实验能力的通用要 求是 ISO/IEC导则 17025 : 1999 。在内容和技术要求方面强化 了评定测量不确定度。根据 CCIBLAC/AG05附录规定进行菌 落总数测试要求, 测试的样品是均匀的, 每个样品都包含可以 计算得出数目的微生物, 在实验室内不同人员按规定的测试 方法进行 1。每个样品做平行样, 必须由同一测试人员进行 操作, 测试完成后得到的测试结果, 取对数, 用于菌落总数不 确定度的评定。根据这些规定, 我们对食品样品奶粉进行卫 生微生物菌落总数检测后进行不确定度的评定。 1 材料与方法 111 测试样品 奶粉 20份。 112 检验方法 依据 GB/T4789. 2- 2003食品卫生检验方法微生物学部 分 2。 113 检验过程 11311 取样 以无菌操作称量 25 g样品, 放入含有 225m l 灭菌生理盐水的三角瓶内, 经充分振摇后制成 1B10的均匀稀 释液。 11312 稀释样品 用 1m l灭菌吸管吸取 1B10稀释液 1 m, l 沿管壁注入含有 9m l灭菌生理盐水的试管内, 充分振摇后制 成 1B100的均匀稀释液;另取 1 ml灭菌吸管, 按上述操作顺序 做 10倍递增稀释液, 每递增稀释一次, 换用一只灭菌吸管。 11313 选择稀释倍数 根据样品的卫生状况选择 1B100和 1B1 000稀释度, 分别在做 10倍递增稀释的同时, 以吸取该稀 释度的吸管取 1 ml稀释液注入灭菌平皿内, 每个稀释度做 2 个平皿。而后将有稀释液的平皿内注入 45e左右营养琼脂 约 15 ml转动混均, 同时做空白对照, 待琼脂凝固后, 将平皿放 置 36e? 1e孵箱内培养 48? 2 h 。 11314 菌落计数 用菌落计数器记录每个平皿的菌落数, 菌 落数选择 30 300之间的稀释度, 乘以稀释倍数报告菌落总数。 114 奶粉菌落总数测定的不确定度评定 我们实验室用同一批次的奶粉制备了 20个样品, 由实验室 内不同人员在同一段时间内按 GB478912- 2003方法进行重复 测试, 每个样品做平行样, 得到 20个样品菌落总数的测试结果 (见表 )本方法取样严格按 GB478911- 2003规定进行, 显示样 品是均匀, 稳定的。不确定度的来源主要包括: 重复性 (测试环 境、 培养时间、 培养温度、 休约、 样品的均匀性、 取样的重复性、 人 员的计数)培养条件 (培养时间允差、 培养适度的允差 )取样 (稀 释体积、 取样体积 )等, 由于微生物检测中, 影响结果的因素很 多, 我们用统计学的方法 (A类 )评定测量不确定度。 2 结果与讨论 检测结果见表 1。 表 1 检测结果 编号 测定结果 X1103X2103 取对数结果 lgX1lgX2 均值 log X 残差平方和 161471231806231857331831801001311 271271831857331892131877401000606 351441831732431681231706801001311 4613614317982318062317922010001 561751831826131763431794701002014 661471531806231885131840701002374 76156123181293179243182070100021 841741231672131623231647701001196 96196193183883183883183880 10613614317982318062318022010001 1161761931826131838831832501000081 1271671931880831897631889201000141 136126153179243181293188920100021 146145183180623176343 178301000768 1561571231812931857331835101000986 166126133179243179933169010100024 1761161831785331832531808901000853 1851351631724231748231736301000286 195125163171631748231732101000518 205125163171631748231732101000518 2123181271101013823 根据贝塞尔公式, 可计算出检验结果对数值标准偏差的 合并样本标准差: SP= 2 ( lgxi-lgx)2 /20( 2-1) 1 /2= 01013823/201/2= 01026, uc= SP/ 2= 01026/ 2= 01019。其 扩展不确定度为 U= kuc。取置信水平 95 %, v= 20, 查 t分布 表: 得 t95(20) = 21086。 故: U= 2108601019= 01039 报告:当检验记录以 2次测量对数值的平均值表示时, 其 取值区间分布于 ? 01039之间。当检验结果以 2次测量平均 值表示时, 相对于对值再取反对数得取值区间分布。 样品菌 (下转第 896页 ) 880中国卫生检验杂志 2005年 7月 第 15卷 第 7期 Chinese Journal ofHealth Laboratory Technology , Jul 2005; Vol 15 No 7 B1 , B2 , G1 andG2 in spicesusing a multifunctional column clean- up J1 J Chro matogrA, 2001, 932(1 /2): 153- 1571 19 Scott PM, TrucksessMW1Application of i mmunoaffinity colu mns to mycotoxin analysis J1 JAOAC I nt , 1997 , 80( 5): 9411 20 DragacciS, GleizesE, Fremy J M, et al1Use of i mmunoaffinity chro 2 matography as a purification step for the deter m ination ofaflatoxinM1 in cheeses J1Food Addit Contam, 1995 , 12( 1): 59- 651 21 Stroka J , Anklam E, Joerissen U1Deter m ination ofaflatoxin B1 in ba2 by f ood ( infant f or mula) by i mmunoaffinity column cleanup liquid chro matography with postcolu mn bro m ination :collaborative study J. 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