丁卡因半数致死量.ppt

1,机能实验教学 2012.5.,丁卡因半数致死量测定,2,药物毒性试验的目的在于揭示某一药物的毒性强度、选择性、发展过程以及所造成的损伤是否可逆、能否防治等。 通常将药物毒性试验的方法按照给药时间的长短和观察方法的不同，分为急性毒性试验、亚急性毒性试验、慢性毒性试验和特殊毒性试验。,3,实验背景,1927年 “评量药剂致命程度的度量方式” LD50 （J.W.Trevan）首先提出 。 定义: 1. “能杀死一半试验总体之有害物质、有毒物质或游离辐射的剂量”。 2. 指在质反应中引起50%实验对象死亡时的药物剂量。 评价药物毒性大小、效价强度、治疗指数。,4,即在给予较大剂量的药物后，观察动物的中毒症状及死亡率，求出致死量（LD50），并初步估计其致死原因。 致死量与毒性成反比，即致死量愈小表示药物的毒性愈大，反之毒性愈小。 药物的致死量： 1. 最小致死量（MLD） 2. 半数致死量（LD50) 3. 全致死量 （LD100 ),急性毒性试验,5,特殊毒性：致突变、致畸、致癌试验,1. 反应停事件 短肢 （海豹肢）。在德国、英国和日本等造成1万名畸形儿的悲惨事件。 2. 水俉病 精神迟顿，大脑麻痹症。发生率高达6% 由药源性和非药源性引起的疾病，特别是新药进入临床后的使用所产生的，有时是无法事先预测的。 为此，需要广大的医护工作者进行大量的临床观察，总结其不良反应及疗效。,6,急性毒理试验 （）,24小时内一次或多次给药后连续观察动物产生的毒性反应和死亡情况。其观察应从定性和定量两方面进行。 定性： 主要观察用药后动物有哪些中毒表现（如是否耸毛、蜷卧、耳壳苍白或充血、突眼、步履蹒跚、瘫痪、昏迷、抽搐、惊厥、呼吸困难、大小便失禁等），毒性反应出现和消失的速度，涉及哪些组织和器官，最主要的可能毒性靶器官是哪个，损伤程度及可逆程度如何，中毒死亡过程中的特征，可能的死亡原因是什么等。 定量：观察药物毒性反应与剂量的关系，求出LD50及其相关的统计量。,7,测定LD50的意义,(1) 新药申报 必须提供的资料 (2) 药物毒性大小 评价药物优劣的重要参数 (3) 评价药物安全性 治疗指数 安全范围,8,药物安全性的指标,治疗指数：可以从用相同动物，以相同的给药方式测得的和，算出药物的治疗指数。以初步估计该药的安全性。 一般认为治疗指数在以上的药物才可能具有试用意义。目前用于临床的药物，其治疗指数在以上。 治疗指数（ TI ）= LD50/ED50；,9,.安全范围：较好的药物安全性指标是：之间的距离，即安全范围，其值越大越安全。 药物的安全性与药物的剂量（或浓度）有关。,10,实际应用价值,药物筛选的第一步： 药物的毒性高低。 动物的实验性研究中，推算出治疗剂量（取的几分之几）。 在临床上，一般可取/ 开始试用，由小到大慢慢增加到不能耐受为止，从中探索出疗效满意和毒性较小的剂量。 任何一种新药过渡到临床前，都必须先做测定。,11,LD50 指导原则：,1. 使用最少的动物获得最大的信息 2. 两种以上给药途径（静脉1） 啮齿类 非啮齿类 3. 给药后观察14天 4. 记录所有现象 病变 尸检 镜检 需详细记录，以备复查及供临床使用时参考,12,实验设计基本原则：,1. 对照与均衡： 减少和消除实验误差齐同可比 (p63) 空白 正常 安慰剂 自身 组间（相互） 2. 随机： 1. 样本数 减少抽样误差 2. 条件一致 主观因素 3. 重复：实验条件（品系、方法、指标、剂量）控制一致。,13,【目的】 了解药物毒性的概念 了解药物测定的步骤和方法,14,【原理】,局麻药： 对各类组织都无损失性影响。 丁卡因 为局麻药，它通过抑制神经细胞膜Na+内流,阻止神经动作电位的产生和冲动的传导，而产生局麻作用。 随着剂量加大，动物会相继出现一系列的症状直至死亡。,15,实验方法（简单实验）,一. 预实验： 目的：初步摸出和死亡剂量，求公比 1.40 （r:1.11-1.33) 方法：取只小鼠，分三组，各小组剂量按等比数列 （2:1； 3:1） （1） 求出：（a) 0% ； (b) 100% （2） 公式求公比 （3） 按公比 算给药剂量：a , ar , ,16,动物：昆明种小鼠 体重18-22g 雌雄各半 分组：随机化 （体重、性别构成比相同） 12只/ 组 2只/剂量 分成5-6个剂量组 药品：注射用盐酸丁卡因 50mg /瓶 浙江九旭药业有限公司 批号：201110012 器材：,正式实验,17,. 给 药 ：0.20ml/10g, 腹腔注射 低 高 15min观察后，再注下一剂量。 . 观 察 ：记录中毒症状的各种表现(PPT6) 观察时间：1.5 h . 记录：出现中毒症状的时间，和死亡的时间及数量。,实 验：,18,【注意事项】,1. 实验时，不要把各组剂量搞混，剂量要准确。 2. 注射部位要正确，以免将药物注入肠腔、脏器或膀胱内。 3. 外环境（室温20，安静） 4. 动物死亡以后，立刻解剖取出肝脏，冰箱保留备用。,19,表： 盐酸丁卡因的小鼠毒性试验结果（全班）,D（mg/kg ) LgD n 死亡数 P P2 31.8 38.1 45.7 54.8 65.7 78.8,20,实验报告记录要求,实验题目 实验日期 实验时温度 药物