VPA_和SAHA_对内膜癌细胞凋亡和_E-cad_基因表达影响_

中国肿瘤临床 中国肿瘤临床 中国肿瘤临床 中国肿瘤临床 中国肿瘤临床 中国肿瘤临床 中国肿瘤临床2009年第36卷第19期 VPA和SAHA对内膜癌细胞凋亡和E-cad基因表达影响* 伊铁忠陈星于红丽糜若然郑建华 哈尔滨医科大学附属第一医院妇产科 （哈尔滨市150001） 摘要目的：观察组蛋白脱乙酰基酶抑制剂 （HDACIs） 丙戊酸 （VPA） 和软木酰苯胺氧肟酸 （SAHA） 抑制子宫内 膜癌细胞RL-952和HEC-1-B增殖过程中， 细胞周期和凋亡情况以及E-cad基因表达的变化。方法：以VPA和 SAHA作用于内膜癌细胞， 应用噻唑蓝 （MTT） 比色法对细胞增殖进行检测。流式细胞仪检测细胞的周期变化和凋 亡诱导作用， 透射电镜观察细胞凋亡形态。应用逆转录-聚合酶链反应 （RT-PCR） 法观察药物作用后细胞内E-cad mRNA表达的情况。结果：VPA和SAHA作用HEC-1-B和RL-952细胞随着药物浓度的增加生长抑制率明显增加， VPA为6.77%93.25%和3.24%89.25%， SAHA为5.61%97.36%和2.56%87.85% （P0.05）。 经 VPA 和 SAHA作用后RL-952和HEC-1-B细胞E-cad基因 上调幅度无差异 （P0.05） ， 见表2。 表2VPA和SAHA对HEC-1-B和RL-952细胞 E-cad基因mRNA表达的影响 Table 2The mRNA expression of E-cad in HEC-1-B and RL-952 cells after treatment with VPA and SAHA 3讨论 子宫内膜癌的发生和发展是一个多步骤、 多阶 段相互作用的级联结果， 涉及到多种基因的异常改 变， 其中由于抑癌基因异常组蛋白去乙酰化而引起 的基因组不稳定与基因表达调控的改变， 是抑癌基 因沉默、 转录抑制， 从而使其表达失活的一个重要 机制 1。染色质DNA缠绕的核小体的动态改变及 局部重塑是基因表达调控中的关键步骤， 影响到相 关细胞的功能、 分化及增殖。而乙酰化修饰是染色 质重塑中最重要的机制之一。因此， 在肿瘤的发生 过程中， 基因由于组蛋白去乙酰化失活同基因本身 突变导致基因失活同样重要 2。组蛋白的乙酰化是 高度可逆的， 组蛋白的乙酰化与基因表达正相关， 而去乙酰化有助于形成沉默性的染色质。因此应 用HDACIs激活沉默基因的转录治疗肿瘤， 目前在 某些肿瘤的治疗上已经取得较好结果 3。 VPA是短链芳香族脂肪酸盐， 在欧洲肿瘤研究 所正在进行乳腺癌的临床前期研究阶段， SAHA是 含有氧肟酸的脂肪族化合物。它们作用机制主要 是通过氧肟酸基团鳌合HDAC催化中心的锌离子， 分组 对照组 VPA SAHA 与对照组比较P0.05） ， 同一药物作用后RL-952和HEC-1-B细 胞间E-cad基因上调无差异 （P0.05） 。提示这两种 药物作用的效果是相似的， 其机制可能是通过解除 转录抑制， 增加受抑基因的表达。HDACIs的抗肿 瘤机制之一是通过增加组蛋白乙酰化而上调基因 表达， 尽管受影响的基因不足基因总数的2， 但却 具有特殊的功效。维生素D上调蛋白-1/硫氧还蛋 白结合蛋白-2也具有促进细胞分化和抑制细胞增 殖的作用， 其在结肠癌组织中失活， 而在转化细胞 中可被SAHA诱导活化 10， 本研究结果与该机理相 一致。今后对于此类药物对肿瘤细胞抑制作用的 研究仍须多方面深入， 为临床应用奠定基础。 参考文献 1Shao Y, Lu J, Cheng C, et al. Reversible histone acetylation in volved in transcriptional regulation of WT1 geneJ. Acta Bio chim Biophys Sin (Shanghai), 2007, 39(12): 931-938. 2Tyteca S, Legube G, Trouche D. To die or not to die: a HAT trickJ. Mol Cell, 2006, 24(6): 807-808. 3Shankar S, Srivastava RK. Histone deacetylase inhibitors: mecha nisms and clinical significance in cancer: HDAC inhibitor-in duced apoptosisJ. Adv Exp Med Biol, 2008, 615: 261-298. 4Finnin MS, Donigian JR, Cohen A, et al. Structures of a histone deacetylase homologue bound to the TSA and SAHA inhibitorsJ. Nature, 1999, 401 (6749): 188-193. 5Fedier A, Dedes KJ, Imesch P, et al. The histone deacetylase inhib itors suberoylanilide hydroxamic (Vorinostat) and valproic acid induce irreversible and MDR1-independent resistance in human colon cancer cellsJ. Int J Oncol, 2007, 31(3): 633-641. 6Takai N, Ueda T, Nishida M, et al. Histone deacetylase inhibi tors induce growth inhibition, cell cycle arrest and apoptosis in hu man choriocarcinoma cellsJ. Int J Mol Med, 2008, 21(1): 109-115. 7Ueda T, Takai N, Nishida M, et al. Apicidin, a novel histone deacetylase inhibitor, has profound anti-growth activity in hu man endometrial and ovarian cancer cellsJ. Int J Mol Med, 2007, 19(2):301-308. 8Perret E, Leung A, Feracci H, et al. Trans-bonded pairs of E-cadherinexhibitaremarkablehierarchyofmechanical strengthsJ.ProcNatlAcadSciUSA,2004,101(47): 16472-16477. 9Muller T, Bain G, Wang X, et al. Regulation of epithelial cell mi gration and tumor formation by beta -catenin signalingJ. Exp Cell Res, 2002, 280(1): 119-133. 10 Butler LM, Zhou X, Xu WS, et al. The histone deacetylase inhibi tor SAHA arrests cancer cell growth, up-reg