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文档简介
实验八 微生物无菌接种、分离和纯化技术,实验目的,学习和掌握微生物无菌接种技术 学习和掌握超净工作台的使用方法 学习和掌握涂布分离和划线分离等微生物分离纯化技术,实验原理,微生物无菌接种技术 在无菌条件下，用接种工具从原菌种中挑取少许菌体，接入到新培养基上扩大培养的技术 常用接种工具 接种环：划线、斜面转接、液体培养基 接种针：固体穿刺培养 接种勾：多用于丝状微生物转接 接种铲：多用于丝状微生物转接 无菌移液管： 液体培养基间的接种,实验原理,无菌接种技术的注意事项 要点：防止污染，严格的无菌操作 接种场所必须进行严格的消毒处理（接种间） 实验室：在超净工作台上进行 接种者的双手要进行消毒处理，一般用75%酒精或0.01%新洁而灭擦洗 接种工具、管、瓶口接种前后要通过灼烧灭菌 塞子不能脱手,实验原理,于接种之前打开接种室和超净工作台紫外灯消毒30min，同时打开风机 接种时必须关闭紫外灯,无菌接种技术的基本操作,转接斜面 （斜面接种）,1、标记,2、左手持斜面,3、灼烧接种环,4、取塞，灼烧管口,5、冷却，取菌转接,6、重烧管口，盖塞,7、重烧接种环,微生物的分离纯化技术,分离：从混杂的群体中把各种微生物分开 纯化：进一步分离，得到纯培养物 菌落纯：由一个或几个相同种细胞所得到的群体 形态、结构、生物学特性基本相同的群体 研究一般特性 菌株纯：由一个细胞繁殖得到的后代（纯培养） 应用研究、生产,微生物的分离,常用菌种分离方法固体平板分离 倒平板法 （Pour-plate Technique） 涂布平板法（Spread-Plate Technique） 平板划线法 （Streak-Plate Technique）,倒平板法,涂布平板法,1、取样,2、沾燃烧酒精,3、灼烧,4、涂布,平板划线法,分区划线分离要点： 仅第1次划线需要取菌。 其他每区划线之前一定要把残余的菌体烧掉；待接种环完全能却后通过前1区划线 相隔的区域不要交叉 接种环要在培养基表面划线，不要空划，也不要划破培养基 整个过程要无菌操作,实验内容,1、倒平板：每人倒至少2个牛肉膏蛋白胨平板 2、细菌斜面接种：每人1支，牛肉膏蛋白胨固体斜面培养基 3、涂布法分离混合微生物：每组4个牛肉膏蛋白胨平板，不同稀释度菌悬液 4、划线法纯化分离：每人一个牛肉膏蛋白胨平板,实验报告,1、培养基的配制和消毒灭菌（过程） 2、微生物的无菌接种、分离和纯化技术 3、结果：划线及涂布分离的效果 4、分析讨论 操作过程及结果中遇到的问题，解决方法,思考题,微生物接种时，采
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