体液细胞学及检验规范化.ppt

体液细胞学及检验规范化,内 容,尿液细胞学检测 脑脊液、浆膜腔积液细胞学检测 粪便、前列腺、精液细胞学检测,尿液细胞学检测 - 尿液沉渣检查标准化,一、材料与器材 （一）留置标本的容器 1.收集和运送尿液容器 2.用于离心尿液的离心管 3.用于尿沉渣分析的玻片,一、材料与器材,（二）尿沉渣检测尿沉渣的量 （三）离心机：水平式离心机 相对离心力（RCF）应在400g左右。 离心机转速与RCF的换算公式为： r/min=1000G/(11.18半径1/2,不同直径 不同转数,离心半径为20cm时,1338r/min(1350r/min） 离心半径为16cm时,1495r/min(1500r/min) 离心半径为10cm时,1892r/min(1900r/min),一、材料与器材,（四）显微镜尿沉渣检查 （五）自动化设备 （六）计算机数据处理系统,二、标本的收集及运送,（一）标本的收集 （二）标本的运送 （三）标本的标记 （四）标本的接收,三、尿沉渣检验的操作步骤,（一）离心 （二）镜检沉渣 取1滴充液到专用尿沉渣检测板里，计数1l计算区内的管型或细胞数报告。 尿结晶、细菌、寄生虫等以每一高倍视野 -、+、+、+报告。,显微镜观察尿结晶、细菌、寄生虫等报告方式,三、尿沉渣检验的操作步骤,（三）尿沉渣的检查内容应包括： 1.细胞：红细胞、白细胞、吞噬细胞、上皮细胞、肿瘤细胞 2.管型：透明管型、细胞管型、颗粒管型、蜡样管型、细菌管型、脂肪管型、混合管型、宽形管型 3.结晶：磷酸盐、草酸钙、尿酸结晶和药物结晶 4.细菌、寄生虫（或卵）、酵母菌、精子、粘液。 5.临床医生特殊要求的其他成分。,三、尿沉渣检验的操作步骤,（四）有条件的实验应开展各种尿液有形成分的染色检查，以便于有形成分的进一步鉴别；具备多种类显微镜进行尿沉渣分析的实验室，建议配置相差显微镜、暗视野显微镜，提高尿沉渣的鉴别能力。,标准流程,新鲜尿液混匀，取10ml放在离心试管内，以400g的速度离心5分 离心后将上清弃去，沉渣量约0.2ml，轻摇使沉渣混合均匀。 取一滴置于载物片上，用1818mm盖玻片覆盖标本。 显微镜下观察。先以10倍物镜观察全片，注意有无管型等较大成分存在，再换40倍物镜观察有形成分的种类和数量。观察10个视野并记录所见倒的细胞和管型数量，以最低值至最高值的方式报告。结晶等有价值的病理发现应如实报告。,脑脊液细胞学检测,标本采集,一般由腰穿刺术取得 CSF分别收集于3-4只无菌试管内，每管12ml，第一管作细菌学检查，第二管作化学或免疫学检查，第三管作常规检查. 标本采集后应立即送检。,显微镜检查,细胞总数计数方法: 取混匀的CSF滴入计数池,沉淀片刻,低倍镜计数10个大方格内的红、白细胞数,总和 106即得每升CSF的细胞总数。 如果细胞数较多,可计数1个大方格的细胞数乘以10,再乘106。,白细胞计数及直接分类方法:,非血性CSF: 1. 取小试管1只，内放冰醋酸1-2滴，转动后倾去，滴入混匀的CSF 3-4滴，3-5分钟后混匀充入计数池，同上计数。,白细胞计数及直接分类方法:,2. 计数后直接换成高倍镜根据细胞核的形态分别计数单个核细胞和多核细胞共100个，以百分率表示。细胞数少于100时直接写出单核、多核细胞的具体个数。,白细胞计数及直接分类方法:,血性CSF： 用1%冰醋酸稀释CSF后进行计数，结果乘 以稀释倍数。 细胞总数-白细胞数=红细胞数,注意事项,（1）脑脊液细胞计数应及时进行，一般应在1小时内进行。 （2）细胞计数时，须注意把红细胞或淋巴细胞与新型隐球菌相区别,临床意义:,1.正常脑脊液中无红细胞,白细胞: 成人(0-8) 106 /L, 儿童(0-15) 106 /L 新生儿(0-30) 106 /L 主要是淋巴及大单核细胞,两者7:3,临床意义,2.化脑白细胞数明显增加,通常1000 106 /L,以多核为主; 3.结脑白细胞数中度增加,一般500 106 /L,以早期以多核为主,很快过渡到后期则以单个核细胞为主.,临床意义:,4.病脑白细胞数仅轻度增加,以淋巴细胞为主. 5.脑寄生虫病：细胞数可增加，以E为主。 6.出血性疾病：多为红细胞 7.肿瘤：细胞数正常或轻度增加，以L为主.,浆膜腔脊基液细胞学检测,浆膜腔积液分类和发生机理,漏出液（exudate）：为非炎症性积液， 大分子物质及有形成分少 渗出液（transudate）：为炎症性积液 血管通透性增加，大分子物质及有形成分多,渗出液与漏出液的鉴别诊断,浆膜腔穿刺液的采集和保存,标本由临床医师采集 送验标本最好留取中段液体于消毒容器试管 常规及细胞学检查约留取2毫升 生化检验留2毫升 厌氧菌培养留1毫升 如查结核杆菌则约需10毫升。,浆膜腔穿刺液的采集和保存,为防止出现凝块，细胞变性、细菌破坏自溶等，应即时送检及检验。 常规及细胞学检查可用EDTAK2抗凝。 生化检查标本可用肝素抗凝。 加留1管不加任何抗凝剂用以观察有无凝固现象。,浆膜腔积液细胞学检查,-显 微 镜 检 查,1. 细胞计数及分类：,细胞总数计数方法: 低倍镜计数10个大方格内的红、白细胞数 总和 106即得每升浆膜腔积液的细胞总数 如果细胞数较多,可计数1个大方格的细胞数乘以10,再乘以106,1. 细胞计数及分类：,白细胞计数 漏出液500 106/L,1. 细胞计数及分类：,(1)直接分类法 a.非血性胸腹水: 高倍镜根据细胞核的形态分别计数单个核细 胞和多核细胞共100个，以百分率表示。细 胞数少于100时，直接写出单核、多核细胞的 具体个数。,1. 细胞计数及分类：,b.血性胸腹水： 用1%冰醋酸稀释后进行计数，结果乘以稀释倍数 细胞总数白细胞数=红细胞数 胸腹水白细胞校正数胸腹水白细胞测定值出血增 加的白细胞数 出血增加的白细胞数外周血白细胞数*脑脊液红细 胞数外周血红细胞数,1. 细胞计数及分类：,(2)染色分类法 离心沉淀，瑞氏染色,油镜分类 漏出液：主要为淋巴和间皮细胞 渗出液：各种细胞增多的临床意义不同,2.细胞分类的临床意义,正常浆膜腔积液 无红细胞 白细胞:(0-8) 106 /L,主要是淋巴细胞,2.细胞分类的临床意义,(1)红细胞： 多见于恶性肿瘤、结核或穿刺出血 (2)中性分叶核粒细胞： 常见于化脓性渗出液和早期浆膜结核 (3)淋巴细胞： 主要提示慢性疾病，如结核、梅毒、肿瘤等,2.细胞分类的临床意义,(4)嗜酸性粒细胞： 见于变态反应、寄生虫病、多次穿刺刺激等所致的渗出液。 (5)间皮细胞：表示浆膜刺激或受损。,2.细胞分类的临床意义,(6)狼疮细胞：偶见于SLE患者的浆膜液。 (7)癌细胞：大量形态不规则、胞体大小不等、核偏大并可见核仁及胞质染色较深的细胞。,常规操作流程,观察外观,混匀,计数,细胞分类,粪便检查,一、直接涂片法 1.用生理盐水将粪便涂成薄片 2.制成涂片后，覆盖片 3.虫卵报告方式 未找到注明“未找到虫卵”；找到几种报告几种 4.红细胞、白细胞报告方式：细胞数/HP,直接涂片镜检临床意义,1细胞 (1)白细胞（脓细胞）: 正常粪便中不见或偶见。细菌性痢疾，可见大量白细胞,直接涂片镜检临床意义,(2)红细胞: 细菌性痢疾时红细胞少于白细胞，散在分 布，形态正常。 阿米巴痢疾时红细胞多于白细胞，多成堆存 在并有残碎现象。,直接涂片镜检临床意义,(3)巨噬细胞: 为一种吞噬较大异物的单核细胞;胞体较中性粒细胞为大，圆形、卵圆形或不规则形，核形多不规则，含有吞噬颗粒及细胞碎屑。见于细菌性痢疾和直肠炎症,直接涂片镜检临床意义,(4)肠粘膜上皮细胞: 为柱状上皮细胞，结肠炎症、伪膜性肠炎时粪便中大量存在。 (5)肿瘤细胞: 乙状结肠癌、直肠癌时粪便可能发现成堆的癌细胞。,直接涂片镜检临床意义,2食物残渣 正常粪便中偶见淀粉颗粒和脂肪小滴等未及充分消化的食物残渣。,直接涂片镜检临床意义,(1)淀粉颗粒: 腹泻者、慢性胰腺炎粪便中可在粪便中大量出现。 (2)脂肪小滴: 急、慢性胰腺炎及胰头癌时，粪便中脂肪小滴增多,直接涂片镜检临床意义,(3)肌肉纤维: 肠蠕动亢进、腹泻时可见。 (4)植物细胞及植物纤维:植物细胞形态多种，有圆形、长圆形、双层细胞壁,直接涂片镜检临床意义,3寄生虫和寄生虫卵,前列腺液细胞学检查,标本采集与处理 前列腺标本一般由临床医生行前列腺按摩术后获得，可直接涂于玻片上或收集在洁净的试管中，并立即送检。,前列腺液细胞学检查,检查方法： 1. 湿片法检查，特殊情况可用涂片染色检查。湿片法操作简便、快速，临床常用。 2. 涂片染色检查可清晰辨认细胞结构，适合于检查炎症细胞和癌细胞，有助于前列腺炎和恶性肿瘤的诊断及鉴别诊断。,前列腺液细胞学检查,检查内容及报告方式 1.卵磷脂小体（lecithin bodies) 高倍视野中卵磷脂小体数量（百分数） 2.RBC 正常偶见RBC（5/HP)。增多见于前列腺炎、结核、结石或肿瘤、按摩用力过重。 3.白细胞 正常前列腺液白细胞10/HP，前列腺炎时白细胞增多并成堆分布。,前列腺液细胞学检查,精液显微镜检查,精子活力分析 ）精子活动率检查 精子活动率（）活动精子数（活动精子数不活动精子数）* 正常:精子活动率50%,）精子活动力检查,A级 活动良好，精子呈直线运动D级 B级 活动较好，精子活动，但方向不定 C级 活动不良，活动迟钝，原地转动 D级 不活动，死精子 正常:A级活动精子25 A级和B级的精子5,