课件：蛋白质.ppt

第 二 章 蛋白质化学,第二章的知识网络,第二章 蛋白质化学,第一节 蛋白质的概念、分类和功能 第二节 蛋白质的分子组成 第三节 蛋白质分子的结构 第四节 蛋白质结构测定与多肽人工合成 第五节 蛋白质的理化性质 第六节 氨基酸及蛋白质的分析和分离,第一节 蛋白质的概念、分类和功能,一、蛋白质的概念,二、蛋白质的分类,三、蛋白质的功能,一、蛋白质的概念,蛋白质是由许多氨基酸通过肽键相连形成的高分子含氮化合物； 蛋白质是生命的物质基础； 英文名称protein，是“最原初的” “第一重要的”意思，是由20种L型-氨基酸组成的生物大分子； 占人体干重的45；最简单的单细胞（大肠杆菌）每个菌体约有3000种不同的蛋白质； 机体的新陈代谢的全部化学反应均有蛋白质（酶）的参与；,二、蛋白质的分类,1根据蛋白质分子的组成成分分类 2根据溶解度分类 3根据分子形状分类 4根据蛋白质的生物学功能分类,蛋白质,组成,单纯蛋白：只有氨基酸，多数蛋白,结合蛋白：与非蛋白质物质结合，如核蛋白、糖蛋白和脂蛋白,溶解性,清蛋白（白蛋白）：溶于水 球蛋白：微溶于水，溶于稀盐 醇蛋白：不溶于水，溶于乙醇,形状,球蛋白：球形、易溶解。,纤维蛋白：形似纤维、不溶于水,功能,活性蛋白：如酶、激素、受体、膜蛋白,非活性蛋白：胶原蛋白、角蛋白、弹性蛋白,二、蛋白质的分类,此外，还可以根据蛋白质的特定结构域或氨基酸模体特性分类； 根据结构与功能的关系，将具有相同或类似结构域或模体的蛋白质（同源蛋白质）归为一大类、一类或一组，分别称为超家族、家族或亚家族；,胶原蛋白,生物体内胶原蛋白网,球状蛋白,肌红蛋白,血红蛋白,三、蛋白质的功能,1、生物催化功能 2、结构功能 3、转运功能 4、运动功能 5、营养和贮存功能 6、调控功能 7、保护和防御功能 8、接受和传递信息功能,酶,1、生物催化功能,人体的毛发、蜘蛛网的网丝等都是结构蛋白,2、结构功能,毛发的结构,一根毛发周围是一层鳞状细胞（scale cell），中间为皮层细胞（cortical cell）。皮层细胞横截面直径约为20 m。在这些细胞中，大纤维沿轴向排列。所以一根毛发具有高度有序的结构。,大原纤维,微纤维,二聚物,原细丝,微纤丝,卷发(烫发)的生物化学基础,永久性卷发（烫发）是一项生物化学工程，-角蛋白在湿热条件下可以伸展转变为-构象，但在冷却干燥时又可自发地恢复原状。,因为-角蛋白的侧链R基一般都比较大，不适于处在-构象状态，此外-角蛋白中的螺旋多肽链间有着很多的二硫键交联，这些交联键也是当外力解除后使肽链恢复原状（-螺旋构象）的重要力量。,血红蛋白属于运输蛋白,3、运输功能,血红蛋白的功能,运输氧和CO2 对血液的pH起缓冲作用 因为HbO2在释放出一分子氧的同时，结合一个氢质子。这样就可以消除由于呼吸作用产生的CO2引起pH的降低。,煤气中毒的机制,一氧化碳（CO）也能与血红素Fe原子结合。由于CO与血红蛋白结合的能力是O2的200倍，因此，人体吸入少量的CO即可完全抑制血红蛋白与O2的结合，从而造成缺氧死亡。急救方法是尽快将病人转移到富含O2的环境中（如新鲜空气、纯氧气或高压氧气），使与血红素结合的CO被O2置换出来。,伸缩蛋白与结构蛋白可共同完成肌肉的运动,4、运动功能,西非丛林地区的黑人擅长短跑、跳远、篮球等需要强爆发力的项目； 合成辅肌动蛋白的ACTN3基因的某种变异体在西非裔黑人的基因库中频率很高； 这些变体所合成的肌动蛋白恰恰提高了肌肉快速运动能力；,关于奥运会上的牙买加选手,卵清蛋白属于贮藏蛋白,5、营养和储藏功能,胰岛素,6、调控功能,免疫球蛋白属于保护蛋白,7、保护和防御功能,某些蛋白可在细胞内和细胞间进行信号传递,8、接受和传递信息功能,第二节 蛋白质的分子组成,多数蛋白质含: 碳(C) 5056% 氢(H) 68% 氧(O) 1924% 氮(N) 1319% 硫(S) 04% 有些蛋白质含有磷 少数含铁、铜、锰、锌、钴、钼等 个别还含有碘 各种蛋白质的含氮量平均为16,第二节 蛋白质的分子组成,凯氏（Kjedahl）定氮法,每克样品含氮的克数 6.25100 =100克样品中蛋白质的含量(克%),关于奶粉中的三聚氰胺（C3H6N6 ）,分子式,关于奶粉中的三聚氰胺,各地报告患儿共6244例 158人肾衰竭3人死亡,情况报告,含氮量很高（66.6%），生产工艺简单、成本很低，给了掺假、造假者极大地利益驱动; 有人估算在植物蛋白粉和饲料中使蛋白质增加一个百分点，用三聚氰胺的花费只有真实蛋白原料的1/5; 三聚氰胺作为一种白色结晶粉末，没有什么气味和味道，掺杂后不易被发现等也成了掺假、造假者心存侥幸的辅助原因;,为什么要用三聚氰胺呢？,危 害,1994年国际化学品安全手册表明:长期或反复大量摄入三聚氰胺可能对肾与膀胱产生影响，导致产生结石。 为什么我们还这样做呢？,第二节 蛋白质的分子组成,一、组成蛋白质分子的基本单位氨基酸 二、肽键与肽,一、蛋白质分子的基本单位氨基酸,一、蛋白质分子的基本单位氨基酸,一、蛋白质分子的基本单位氨基酸,常用方法：硫酸或盐酸处理 浓度:盐酸为6 mol/L 硫酸为4 mol/L 条件:回流煮沸20 h左右 优点:不引起消旋作用，得到L-氨基酸 缺点:色氨酸完全被沸酸所破坏 羟基氨基酸（丝、苏）部分被水解 天冬酰胺和谷氨酰胺的酰胺基被水解下来,（酸水解）,常用方法：用氢氧化钠处理 浓度: 5 mol/L 条件:共煮1020 h 优点:色氨酸稳定 缺点:多数氨基酸遭到不同程度的破坏， 并且产生消旋现象；所得为D型和 L型混合氨基酸；碱水解引起精氨 酸脱氨，生成鸟氨酸和尿素,（碱水解）,一、蛋白质分子的基本单位氨基酸,优点:不产生消旋作用，也不破坏氨基酸 缺点:需要几种酶协同作用，酶水解所需时间较长,（酶水解1）,（牛胰蛋白酶）,水解位点,R1：赖氨酸（Lys） 精氨酸（Arg） 特点：专一性较强，水解速度快,N,H,C,H,C,O,R,4,N,H,C,H,C,O,R,3,N,H,C,H,C,O,R,2,N,H,C,H,C,O,R,1,OH,（牛胰蛋白酶）,糜蛋白酶,N,H,C,H,C,O,R,4,N,H,C,H,C,O,R,3,N,H,C,H,C,O,R,2,N,H,C,H,C,O,R,1,水解位点,R1：苯丙氨酸（Phe） 色氨酸（Trp） 酪氨酸（Tyr） 特点：水解稍慢,OH,糜蛋白酶,胃蛋白酶,N,H,C,H,C,O,R,4,N,H,C,H,C,O,R,3,N,H,C,H,C,O,R,2,N,H,C,H,C,O,R,1,水解位点,R1：苯丙氨酸（Phe） 色氨酸（Trp） 苏氨酸（Thr） 亮氨酸（Leu） 特点：水解速度较快,OH,胃蛋白酶,一、蛋白质分子的基本单位氨基酸,氨基酸是含有氨基的酸,一、蛋白质分子的基本单位氨基酸,除了甘氨酸以外，组成蛋白质的所有氨基酸都有手性碳原子。,透视式,投影式,(甘油醛的D型、L型),L氨基酸,D氨基酸,组成蛋白质的氨基酸大都为L型,氨基酸的构型,一、蛋白质分子的基本单位氨基酸,1氨基酸的分类 2不常见的蛋白质氨基酸和非蛋白质氨基酸 3氨基酸的一般理化性质 4氨基酸的化学反应,一、蛋白质分子的基本单位氨基酸,1氨基酸的分类,（1）按侧链R基的化学结构特点 （2）根据R基团的极性 （3）根据酸碱性质 （4）按氨基酸是否能在人体内合成,1氨基酸的分类,（1）按侧链R基的化学结构特点 1）脂肪族氨基酸 2）芳香族氨基酸 3）杂环氨基酸 （2）根据R基团的极性 1）非极性R基氨基酸 2）极性R基氨基酸 （不带电荷的、带正电荷的、带负电荷的）,1氨基酸的分类,（3）根据酸碱性质 1） 酸性氨基酸 2） 碱性氨基酸 3）中性氨基酸 （4）按氨基酸是否能在人体内合成分类 1）必需氨基酸 2）半必需氨基酸 3）非必需氨基酸,（1）按侧链R基的化学结构特点,1）脂肪族氨基酸 2）杂环氨基酸 3）芳香族氨基酸,一氨基一羧基氨基酸，有甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸 含羟基氨基酸，有丝氨酸和苏氨酸 含硫氨基酸，有半胱氨酸和蛋氨酸（常称甲硫氨酸） 一氨基二羧基氨基酸，有天冬氨酸和谷氨酸 二氨基一羧基氨基酸有赖氨酸和精氨酸 含酰胺基氨基酸有天冬酰胺和谷氨酰胺,1）脂肪族氨基酸,一氨基一羧基氨基酸1,1）脂肪族氨基酸,一氨基一羧基氨基酸2,1）脂肪族氨基酸,一氨基一羧基氨基酸3,1）脂肪族氨基酸,一氨基一羧基氨基酸4,1）脂肪族氨基酸,一氨基一羧基氨基酸5,1）脂肪族氨基酸,甘丙缬亮异脂链,含羟基氨基酸有丝氨酸和苏氨酸1,1）脂肪族氨基酸,含羟基氨基酸有丝氨酸和苏氨酸2,1）脂肪族氨基酸,含硫氨基酸有半胱氨酸和蛋氨酸（甲硫氨酸）,1）脂肪族氨基酸,2个半胱氨酸通过二硫键连接形成胱氨酸,含硫氨基酸有半胱氨酸和蛋氨酸（甲硫氨酸）,丝苏半蛋羟巯添,一氨基二羧基氨基酸有天冬氨酸和谷氨酸1,1）脂肪族氨基酸,一氨基二羧基氨基酸有天冬氨酸和谷氨酸2,二氨基一羧基氨基酸有赖氨酸和精氨酸1,二氨基一羧基氨基酸有赖氨酸和精氨酸2,天谷精赖组酸碱,含酰胺基氨基酸有天冬酰胺和谷氨酰胺1,1）脂肪族氨基酸,含酰胺基氨基酸有天冬酰胺和谷氨酰胺2,1）脂肪族氨基酸,2）杂环氨基酸,杂环族氨基酸共2种 组氨酸、脯氨酸,杂环族氨基酸共2种1,亚氨基酸,杂环族氨基酸共2种2,3）芳香族氨基酸,芳香族氨基酸共3种 酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸,芳香族氨基酸共3种1,芳香族氨基酸共3种2,2019/8/30,79,可编辑,芳香族氨基酸共3种3,脯酪苯色杂芳环,（2）根据R基团的极性,非极性R基氨基酸 有丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、色氨酸和脯氨酸等8种 极性但不带电荷的R基氨基酸 有甘氨酸、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、天冬酰胺和谷氨酰胺等7种 带负电荷的R基氨基酸 有天冬氨酸和谷氨酸 带正电荷的R基氨基酸 有赖氨酸、精氨酸和组氨酸3种,非极性R基氨基酸,极性但不带电荷的R基氨基酸,带负电荷的R基氨基酸,带正电荷的R基氨基酸,（3）根据酸碱性质,酸性氨基酸 一氨基二羧基氨基酸，有天冬氨酸、谷氨酸 碱性氨基酸 二氨基一羧基氨基酸，有赖氨酸、精氨酸、组氨酸 中性氨基酸 一氨基一羧基氨基酸，除上述酸性和碱性氨基酸外，其余15种氨基酸都属于中性氨基酸,（4）按氨基酸是否能在人体内合成,必需氨基酸 指人体内不能合成的氨基酸，必须从食物中摄取，有8种：甲硫氨酸、缬氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、色氨酸、苏氨酸（甲携来一本亮色书） 半必需氨基酸 指人体内可以合成但合成量不能满足人体需要（如发生代谢障碍、婴幼儿生长时期）的氨基酸，有2种：组氨酸、精氨酸 非必需氨基酸 指人体内可以合成的氨基酸。包括除了上述必需和半必需氨基酸外，其余的10种氨基酸,甘丙缬亮异脂链，丝苏半蛋羟巯添，天谷精赖组酸碱， 脯酪苯色杂芳环，天冬酰胺谷酰胺，都有密码属常见。,2不常见的蛋白质氨基酸和非蛋白质氨基酸,-丙氨酸,-氨基丁酸,其它见：课本,H2N-CH2-CH2-COOH,H2N-CH2-CH2-CH2-COOH,3氨基酸的一般理化性质,（1）一般物理性质 （2）氨基酸的酸碱性质,（1）一般物理性质,形状和味感 -氨基酸都是白色晶体，各种氨基酸结晶形状不同，滋味不同 溶解性和熔点 除胱氨酸和酪氨酸外，氨基酸一般都能溶于水中，但各种氨基酸在水中的溶解度差别很大。除脯氨酸和羟脯氨酸能溶于乙醇或乙醚中以外，所有氨基酸易溶于稀酸或稀碱溶液中。氨基酸的熔点很高，一般在200以上 旋光性 除甘氨酸外，所有天然氨基酸含有至少一个手性-碳原子，因此都具有旋光性,（1）一般物理性质,光吸收性 在可见光区域，20多种氨基酸都没有光吸收，但在红外区和远紫外区域（200 nm）均有光吸收。由于色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸分子中R基含有苯环共轭键系统，故在近紫外区（200400 nm）显示特征性的吸收谱带。,（1）一般物理性质,苯丙氨酸的max257 nm 酪氨酸的max275 nm 色氨酸的max280 nm,（2）氨基酸的酸碱性质,氨基酸的两性解离 氨基酸的等电点 氨基酸的甲醛滴定,氨基酸的两性解离,氨基酸分子中既含有氨基又含有羧基，在晶体状态或在水溶液中主要是以兼性离子的形式存在：,兼性离子亦称偶极离子，是指在同一氨基酸分子上带有能放出质子的-NH3+正离子和能接受质子的-COO负离子，是两性离子。,氨基酸的两性解离,加酸时,H+,H+,总电荷 “+”,氨基酸的两性解离,加碱时,总电荷 “”,OH ,OH,氨基酸的两性解离,C,O,O,C,H,H,3,N,+,R,C,O,O,C,H,H,2,N,R,完全质子化的氨基酸可以看成是多元酸，侧链不能解离的中性氨基酸可看作是二元酸,它的分步解离如下：,两性离子,碱性溶液,酸性溶液,氨基酸的两性解离,其中K1和K2分别代表第一步解离（-碳原子上-COOH的解离）和第二步解离（-碳原子上-NH3+的解离）的（表观）解离常数。,通过测定滴定曲线可以求得氨基酸的解离常数,C,O,O,C,H+H+,H,3,N,+,H,C,O,O,H,C,H,H,3,N,+,H,C,O,O,C,H+H+,H,2,N,H,K2,Gly +,Gly ,Gly ,K1=AOH+/ A + K2=AH+/ AO,氨基酸的两性解离,pH = pK + log,质子受体,质子供体,通过氨基酸的滴定曲线，当已知pK1和 pK2等数据时，可用下列Handerson-Hasselbalch公式求出在任一pH条件下一种氨基酸溶液中各种离子所占的比例。,氨基酸的等电点,当溶液为某一pH值，氨基酸分子中所含的 -NH3+和-COO-数目正好相等时（净电荷为0）,这一pH值即为氨基酸的等电点，简称pI。在等电点时，氨基酸既不向正极也不向负极移动，即氨基酸处于两性离子状态。,氨基酸的等电点,C,O,O,C,H,H,3,N,+,R,C,O,O,C,H,H,2,N,R,在酸性溶液中 （pH pI）,在晶体状态或水溶液中 （pH=pI）,在碱性溶液中 （pHpI）,丙氨酸pI的计算,C,O,O,C,H+H+,H,3,N,+,CH3,C,O,O,C,H,H,2,N,CH3,Ala+,Ala ,Ala,K1=AlaH+/ Ala+ Ala+= AlaH+/ K1 K2=AlaH+/ Ala Ala=Ala K2/ H+ 到达等电点时， Ala+= Ala Ala H +/ K1 = Ala K2/ H +，即： K1 K2 = H +2 两边取负对数：lg H +2= lg K1lg K2 lg H + =pH lg K1 = pK1 lg K1 = pK2 2pH = pK1 pK2 令pI为等电点时的pH， 则： pI （pK1 pK2）/2,+H+,氨基酸的等电点,天冬氨酸pI的计算,Asp+,Asp ,Asp ,C,O,O,C,H,H,3,N,+,CH2,C,O,O,H,C,O,O,C,H,CH2,Asp =,C,O,O,C,H,H,2,N,CH2,C,O,O,等电点时为Asp pI （pK1 pKR）/2,H,3,N,+,氨基酸的等电点,赖氨酸pI的计算,Lys+ +,Lys +,Lys ,C,O,O,H,C,H,H,3,N,+,(CH2)4,NH3+,C,O,O,C,H,H,3,N,+,(CH2)4,NH3+,C,O,O,C,H,H,2,N,(CH2)4,NH3+,K1,K2,KR,Lys ,C,O,O,C,H,H,2,N,CH2,NH2,等电点时为Lys pI （pK2 pKR）/2,氨基酸的等电点,侧链不含解离基团的中性氨基酸，其等电点是它的pK1和pK2的算术平均值：pI = (pK1 + pK2 )/2 同样，对于侧链含有可解离基团的氨基酸，其pI值也决定于两性离子两边的pK值的算术平均值 酸性氨基酸：pI = (pK1 + pKR)/2 碱性氨基酸：pI = (pK2 + pKR)/2,氨基酸的甲醛滴定,氨基酸不能直接用酸、碱滴定定量测定 其原因是氨基酸的酸、碱滴定终点时pH过高（1213）或过低（12），超出酸碱滴定指示剂的显色范围 若向氨基酸溶液中加入过量的甲醛，由于甲醛与氨基酸中的氨基（-NH2）反应生成羟甲基化合物而降低氨基的碱性，反应向右进行，促进了氨基酸-NH3+的酸性解离，释放出H，使反应的终点pH从1213下降至9附近，可以用酚酞作指示剂用标准NaOH溶液加以滴定这就是氨基酸的甲醛滴定法,氨基酸的甲醛滴定,甲醛反应,R,CH,NH3+,COO,HCHO,R,CH,NHCH2OH,HCHO,R,CH,N(CH2OH)2,羟甲基氨基酸,二羟甲基氨基酸,COO,COO,4氨基酸的化学反应,（1）-氨基参加的反应 （2）-羧基参加的反应 （3）-氨基和-羧基共同参加的反应 （4）侧链R基参加的反应,4氨基酸的化学反应,巯基反应 颜色反应,茚三酮的反应 成肽反应,与亚硝酸 酰基化 烃基化 形成西佛碱 脱氨基和转氨基,成盐和成酯 成酰氯 叠氮 脱羧,（1）-氨基参加的反应,与亚硝酸反应 酰基化反应 烃基化反应 形成西佛碱反应 脱氨基和转氨基反应,与亚硝酸反应,原理：自由氨基能与亚硝酸反应释放出氮气，每分子的自由氨基可生成一分子氮气（范斯莱克氨基测定法） 在生产上常用此法来测定蛋白质的水解程度,R,CH,COOH,NH2,+ HNO2,R,CH,COOH,OH,+ N2,+ H2O,酰基化反应,氨基酸的氨基可与酰化试剂，如酰氯或酸酐在碱性溶液中反应生成酰胺 该反应在多肽和蛋白质的人工合成中可用于保护氨基 常用的酰化试剂包括苄氧甲酰氯、对甲苯磺酰氯、叔丁氧甲酰氯、邻苯二甲酸酐、丹磺酰氯等,酰基化反应,5-二甲氨基萘磺酰氯（丹磺酰氯）。它具有强烈的荧光，可用荧光光度计快速检出，灵敏度高,酰基化反应,丹磺酰氯反应,氨基酸氨基的一个氢原子可被烃基（包括环烃及其衍生物）取代,烃基化反应,AA DNFB+多肽 蛋白,+ HF,DNP- AA DNP-多肽 DNP-蛋白,原理：在弱碱性溶液中，氨基酸的-氨基很容易与DNFB作用，生成稳定的黄色DNP-氨基酸（ 2，4一二硝基苯氨基酸），多肽或蛋白质N-末端氨基酸的-氨基也能与DNFB反应。 用途：可以用来鉴定多肽或蛋白质NH2末端氨基酸，亦称Sanger反应。,烃基化反应,R,CH,NH2,+ HF,+,NO2,F,COOH,R,CH,N,COOH,H,pH89,NO2,DNP-氨基酸,烃基化反应,用途：可以用来鉴定多肽或蛋白质NH2末端氨基酸，亦称Edman反应,弱碱,AA PITC + 多肽 蛋白,AA PTC多肽 蛋白,HF,PTH-AA + 少一个AA的多肽或蛋白,苯异硫氰酸酯,苯氨基硫甲酰氨基酸,苯乙内酰硫脲氨基酸,烃基化反应,苯异硫氰酸酯,苯氨基硫甲酰氨基酸,苯乙内酰硫脲氨基酸,形成西佛碱反应,氨基酸的-氨基与醛类化合物反应，生成称为西佛碱的弱碱 赖氨酸的侧链氨基也能发生该反应,脱氨基和转氨基反应,氨基酸在氧化剂或酶（如氨基酸氧化酶）的催化作用下可脱去-氨基，转变成相应的-酮酸 是生物体内氨基酸分解代谢的重要方式之一,（2）-羧基参加的反应,成盐和成酯反应 成酰氯反应 叠氮反应 脱羧反应,成盐和成酯反应,氨基酸与碱作用即生成盐，其中重金属盐不溶于水。 氨基酸的羧基可与醇反应，生成相应的酯。,成酰氯反应,将氨基酸的氨基用适当的保护基（如苄氧甲酰基）保护以后，其羧基可与五氯化磷或二氯亚砜作用生成酰氯。 该反应使氨基酸的羧基活化，使之易与另一氨基酸的氨基结合，因此常用于多肽的人工合成。,叠氮反应,YNH,CH,COOH,R,NH2NH2,+2H2O,YNH,CH,CO NH NH,R,HNO2,YNH,CH,CON3,R,用途：可活化羧基，常用于人工合成肽过程,酰化氨基酸,酰化氨基酸的肼衍生物,酰化氨基酸叠氮,脱羧反应,在氨基酸脱羧酶的催化下，生物体内的氨基酸可脱去羧基，放出二氧化碳并生成相应的一级胺。,肉类腐败,（3）-氨基和-羧基共同参加的反应,与水合茚三酮反应 成肽反应,与水合茚三酮反应,用途：常用于氨基酸的定性或定量分析（570 nm）,与水合茚三酮反应,脯氨酸及羟脯氨酸与茚三酮反应产物,N+,黄色化合物,与水合茚三酮反应,一个氨基酸的-羧基和另一个氨基酸的-氨基脱水缩合而成的化合物叫肽，形成的键叫肽键，又称为酰胺键，写作-CO-NH- 在蛋白质分子中，氨基酸借肽键连接起来，形成肽链。,成肽反应,用途：是多肽和蛋白质生物合成的基本反应,成肽反应,（4）侧链R基参加的反应,半胱氨酸侧链上巯基参与的反应 侧链R基参加的重要颜色反应,半胱氨酸侧链上巯基参与的反应,巯基与卤化烷反应（碘乙酸反应）,与卤化烷（如碘乙酸、碘乙酰胺、甲基碘等）迅速反应，生成相应的稳定烷基衍生物。 可用于巯基的保护，应用在肽合成工作中。,半胱氨酸侧链上巯基参与的反应,巯基很容易受空气或其它氧化剂氧化，一种是半胱氨酸氧化形成二硫键（disulfide bond），生成胱氨酸，-SH与-S-S-自成一氧化还原体系，在机体氧化还原作用中起一定作用。,巯基的氧化反应,半胱氨酸侧链上巯基参与的反应,用途：形成二硫键,二 硫 键,半 胱 氨 酸,胱 氨 酸,半 胱 氨 酸,C,H,N,H,2,COOH,C,H,2,S,C,H,N,H,2,COOH,C,H,2,S,半胱氨酸侧链上巯基参与的反应,二硫键：是由二个半胱氨酸残基的侧链之间形成的。即胱氨酸的残基中的二硫键。 二硫键类型：可以使两条单独的肽链共价交联起来（链间二硫键）；也可以使一条链的某一部分形成环（链内二硫键）。,侧链R基参加的重要颜色反应,米伦试剂为硝酸汞、亚硝酸汞、硝酸和亚硝酸的混合液； 当蛋白溶液中加入米伦试剂后即产生白色沉淀，加热后沉淀变成红色； 由于酚类化合物有此反应，酪氨酸含有酚基，故有此反应。,侧链R基参加的重要颜色反应,Tyr中的酚基能将Folin试剂中的磷钼酸及磷钨酸还原成蓝色化合物（钼蓝和钨蓝的混合物），利用该反应，可以检测Tyr或含Tyr的蛋白质。,侧链R基参加的重要颜色反应,芳香族氨基酸，特别是Tyr、Trp或含Tyr、Trp的蛋白质在溶液中遇到硝酸后，先产生白色沉淀，加热则变黄，再加碱颜色加深为橙黄色。这是因为苯环被硝化，产生了硝基苯衍生物。皮肤、毛发、指甲遇浓硝酸都会变黄。,侧链R基参加的重要颜色反应,硝基酚（黄色）,邻硝醌酸钠（橙黄色）,侧链R基参加的重要颜色反应,坂口反应 Arg的胍基能与次氯酸钠（或次溴酸钠）及-萘酚在氢氧化钠溶液中产生红色物质，可用来鉴定含有Arg的蛋白质，也可用来定量测定Arg的含量。,侧链R基参加的重要颜色反应,乙醛酸反应 凡含有吲哚基的化合物都有乙醛酸反应，由于Trp含有类似结构，因此Trp或含Trp的蛋白质都有此反应。 在Trp或含Trp的蛋白质溶