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文档简介
急性肾衰竭动物模型的建立,【实验目的】,1.学习复制急性肾衰竭动物模型的方法 。 2.观察急性肾衰竭时机体的典型表现及血 酐水平的变化。 3.掌握急性肾衰竭的概念及发病机制 。,【实验原理】,急性肾功能衰竭 指各种原因在短期内引起肾脏泌尿功能急剧障碍,以致机体内环境出现严重紊乱的病理过程,临床表现有水中毒、氮质血症、高钾血症和代谢性酸中毒等,急性肾功能不全的分类 根据病因学,临床上将急性肾功能不全分为肾前性、肾性、肾后性三种。,急性肾功能的发病机制,肾缺血,肾中毒,血流动力学异常,肾小管损伤,滤过膜受损,皮质缺氧,髓质充血,肾小管阻塞,原尿反漏,滤过系数,外髓部供氧,GRF,少尿,【实验动物】,健康家兔,雄性,体重1.51.8Kg,【实验器材和药品】,20%乌拉坦溶液、庆大霉素注射液(1ml:4万单位)、150U/ml肝素、0.9%生理盐溶液、苦味酸 BL-420F实验系统、哺乳动物手术器械一套、动脉导管、动脉夹、膀胱导尿管、注射器(2ml、5ml)、皮头针一套、水浴箱、离心机、丝线,【实验步骤】,家兔称重、分组-体重相似为一组,并且实验组和对照组体重相同或相似,生理盐水作静脉点滴输液-耳缘静脉滴注,家兔固定-仰卧位固定,剪去颈部和上腹部毛、麻醉- 20%氨基甲酸乙酯注射液4ml/kg,耳缘静脉注射麻醉,在麻醉状态下,做颈总动脉插管,并连接到试验系统-取血1mL测血肌酐和在实验系统上读取血压以及记录此时在尿量,在麻醉状态下,自耻骨联合上方腹部正中线切开皮肤,切口长46cm,夹闭肾动脉-沿腹白线打开腹腔,将内脏推向左侧,打开后腹膜,暴露肾蒂,分离肾动脉,实验兔和夹闭肾动脉30分钟,对照组肾脏不夹闭。,二组家兔耳缘静脉注入庆大霉素4万U/Kg,每隔10分钟,取一次尿液,测定尿量,并做尿肌酐试验。共取三次。,颈总动脉取血,做血肌酐试验,最后将家兔一并处死,取出肾脏,观察并比较家兔的肾脏。,血、尿肌酐测定方法(见表1)和内生肌酐清除率的计算从颈总动脉取血置盛有肝素的离心管内,离心后取血浆,按下表进行实验。 表1 血浆和尿液肌酐含量测定,-,2019/8/30,11,可编辑,计算:,【观察项目】,表2 处理前和处理后对照组家兔各指标变化,表3 处理前和处理后实验组家兔各指标变化,【预期实验结果】,二组家兔兔子血压升高,呼吸加深加快,心率加快,尿量减少,血/尿肌酐的浓度增高,内生肌酐清除率升高,各项症状明显易于测定。,正常肾脏切面图,急性肾衰竭肾脏切面图,急性肾衰竭镜下图,毒素引起的肾小管坏死通常弥散性累及肾小管,而由缺血(如心衰引起的严重低血压)引起的肾小管坏死则成片状受累。,【注意事项】,1.选择体重相差不超过250g的家兔进行对照 2.注意麻醉药的剂量与注入剂量、观察麻醉情况。 3.专人测定血/尿肌酐 4.颈总动脉插管
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