血小板测试方法学.ppt

ADVIA 2120/120 二维血小板检测,背景介绍,常规自动化 PLT 检测（一维）,检测原理：利用血小板体积单一参数来检测和计数 检测技术： 电阻法 (Coulter 原理) 光学法 PLT体积检测范围： Sysmex 1 - 40 fL Coulter 2 - 20 fL CellDyn 1 - 35 fL HSystems 1 - 20 fL （Optical） 局限性：仅依靠PLT 体积参数排除干扰因素，无法准确区分： Microcytes 、RBC fragment、RBC ghost、Large PLT,Abbott CellDyn 4000 Data Optical PLT 180 * Impedance PLT 248 * * difference due to Microcytes,电阻抗法,光学法,常规 PLT 检测技术,存在不足,血小板检测面临的挑战,RBC fragments WBC fragments 和 complexes 细菌、寄生虫 细胞碎片 、杂质 大血小板 、血小板微泡 交叉污染 血小板聚集 抗凝集影响,测试原理,ADVIA 2120 2DPLT检测,二维参数：PLT体积 (V) 和 折射指数 (MPC) 采用专利的Mie原理进行激光散射分析 对血小板细胞逐一进行二维检测 提高对血小板、 细胞碎片、低色素细胞和小红细胞的鉴别 PLT体积检测范围：1 - 60 fL 血小板计数包 括大血小板（20fL） 提高对化疗、免疫性血小板减少症（ITP）、 Bernard-Soulier综合症、骨髓增值症等大血小板样本计数的准确性,RBC/PLT试剂,细胞球形固定,RBC,Platelets,参考文献： Tycko PH，Met MH,Epstein EA, Grinbaum:红细胞体积与血红蛋白的流式细胞光散射测定，应用光学24（9）：1355-1365（1985）,流式细胞技术PLT检测原理,流式细胞技术PLT检测原理,线性范围： 5 3500 X 103/L 体积范围： 1 - 60 fL 包括大血小板 20fL（RI: 1.351.40） 排除干扰：RBC fragment、ghost、 microcytes,2DPLT 检测细胞散射图,高角度 (5 to 15 ),低角度 (2 to 3 ),参数: Large PLT MPC MPM PCDW P Count-2D PCT PDW PLTN PLTX PLTY PMDW R Count-2D RBC-2D Count RBC Fragments RBC Ghosts,解释: 大血小板计数 平均血小板成分浓度 平均血小板聚集 血小析成分分布宽度 在血小板测定中血小板的原始计数 血小板压积 血小板体积平均分布宽度 血小板折射率平均值 血小板高角度信号(放大)平均值 血小板低角度信号(放大)平均值 在血小板测定中红细胞原始计数 在血小板测定中红细胞计数 红细胞碎片计数 红细胞影计数,ADVIA 2120/120 PLT检测参数,15 项研究参数（供实验室、临床研究）,2 项报告参数：PLT 和 MPV,测试表现,ADVIA 120 2DPLT与电阻抗法 和免疫法检测 比较研究,三种不同PLT检测方法: CD61单克隆抗体免疫法 PLT计数（公认参考方法） 电阻抗计数法 ADVIA 120 2DPLT检测法 Study by Dr. Samuel Machin, University College, London Results published in the British Journal of Haematology 2000 108:2, 228-235,Discrepant Samples in Machin Study,One-dimensional PLT counts VS Reference manual counts,J. Kunicka, G. Fischer, J. Murphy, D. Zelmanovic. “Improved platelet counting using two-dimensional laser light scatter”. AJCP (2000), in press.,two-dimensional platelet counts VS Reference manual counts,J. Kunicka, G. Fischer, J. Murphy, D. Zelmanovic. “Improved platelet counting using two-dimensional laser light scatter”. AJCP (2000), in press.,two-dimensional platelet and one-dimensional PLT counts VS the reference manual counts,J. Kunicka, G. Fischer, J. Murphy, D. Zelmanovic. “Improved platelet counting using two-dimensional laser light scatter”. AJCP (2000), in press.,Relationship between the RBC fragment count and the difference between the one- and two-dimensional PLT counts in 260 samples,J. Kunicka, G. Fischer, J. Murphy, D. Zelmanovic. “Improved platelet counting using two-dimensional laser light scatter”. AJCP (2000), in press.,两类PLT 检测方法比较,ADVIA 2120/120 二维参数 PLT体积和折射指数（RI） 线性范围宽：53500，适用于极高和极低PLT值样本 准确区分并排除microcytes, RBC fragments 和 RBC ghosts对 PLT 计数的干扰 潜在的临床应用价值的参数 ： MPC和MPM,常规检测仪器 一维参数 仅PLT 体积（V） 线性范围窄：02000，尤其对低PLT值样品差 干扰颗粒可能被误计入血小板总数，造成PLT过高；或因大血小板漏计而PLT过低,临床应用,ADVIA 2120/120血小板检测 临床表现和临床意义,高值 PLT 计数： 对血小板增多症患者降细胞治疗的监控 低值 PLT 计数： 提示血小板输血的适应症 对患者化疗全程监控 对先天性、免疫性和非免疫性血小板减少症的检测、监控 对提高血小板的药物治疗的监控 移植后的骨髓恢复情况的监控,理想血球分析仪：更精确、更广的血小板检测能力,Bernard Soulier 综合症,ADVIA 120 PLT = 68,000 / uL 电阻法： PLT = 24,000 / uL,动物猫的 RBC 和 PLT 检测,猫的血液中含有非常大的PLT和非常小的RBC RBC: 8.2 x 10 12/L MCV: 44.8 fL PLT: 447 x 10 9 /L MPV: 17.1 fL,大血小板、小红细胞病例 Case #503,ADVIA 2120 2D - PLT 检测： PLT 49,000 Large PLT 16,000 MPV 15.8 fL ADVIA 2120 报警提示： MICRO (+), Large Platelets (+) 手工 PLT 计数 47,000 30% Large Platelets, Microcytes,血小板减少症（ RBC fragments） Case #58642,ADVIA 2120 2D PLT检测： 10 x 103 cells/uL 10 x 103 RBC Fragments 手工计数： 8 x 103 cells/uL 一维光学法检测： 22 x 103 cells/uL,异形红细胞症和小红细胞症 病例 Case #304,ADVIA 2120 2D - PLT 检测： PLT 144,000 RDW 28.5% MPV 10.7 fL ADVIA 2120 报警提示： MICRO (+), HYPO (+), ANISO (+) 手工法 PLT 计数： PLT 117,000,优势总结,ADVIA 2120/120 2D-PLT检测总结,ADVIA 2120/120 是唯一真正采用二维方法（体积和折射指数）实现对PLT 准确检测的血球分析仪 无论正常还是干扰因素的样品, ADVIA 2120/120在血小板检测的精密度及准确性方面与参考方法以及形态学观察都有很好的吻合度 ADVIA 2120/120 2D-PLT 检测技术明显优于电阻抗法和光学法，尤其在血小板疾病以及异常干扰的临床病例,Selected References,Improved Platelet Counting: Multi-Dimensional Analysis of Platelet Light Scatter. J. Kunicka, G. Fischer, J. Murphy, D. Zelmanovic. Amer. J. Clin. Path. 2000 (In Press). Advances in Routine Laboratory Platelet Counting. S.J.Machin, P.Harrison, D. Grant and C.Briggs. British Journal of Haematology 2000 108:2, 228-235 Use of Mean Platelet Component to Measure Platelet Activation on the ADVIA 120 Haematology System. M.G. Macey, E. Carty, L. Webb, E.S. Chapman, D. Zelmanovic, D. Okrongly, D.S. Rampton, A.C. Newland. Cytometry 38, 250 2019 Stability Of Various Anticoagulated Whole Blood Specimens For Use In Ex Vivo Platelet Activation Measurements. E. S. Chapman, G. Kling, W. Canfield, D. Zelmanovic. Blood 2019 94:63B, 10, Suppl. 1 Abstract # 3437. Monitoring In Vitro And Ex Vivo Platelet Activity: Comparison