理论止血与血栓检验

教学大纲,掌握：凝血酶原时间（PT）测定、活化部分凝血活酶时间(APTT)测定、血小板(PLT)计数的正常参考值与临床意义。 熟悉：临床常见出血性疾病的检查要点。 了解：常用纤溶功能检查的项目和临床意义。,止血与血栓检测的应用,手术前病人出凝血机能检查 抗凝及溶栓治疗效果的监测 血栓性及DIC疾病的预测和诊断 凝血因子缺乏及出血性疾病疾病的诊断,掌握,常用止血与凝血检测内容,一、止血: 二、凝血: 三、抗凝： 四、纤溶：,掌握,熟悉,止血主要相关因素: 血管壁的结构、功能， 血小板的质和量 部分凝血因子有关(血管性假血友病因子vWF致血小板的粘附聚集功能发生障碍 ，由内皮细胞、巨核细胞及血小板合成 )。,第一节、止血的检测,熟悉,止血相关的检测项目： 筛查：包括出血时间（BT）、血小板计数（PLT）、血块收缩时间（CRT）。 诊断： 1）血小板体积 （MPV）、血小板功能检测（包括血小板粘附、聚集和释放试验）。 2） 血小板相关抗体测定 3）VWF检测,一、出血时间（bleeding time,BT）,概念： 止血: 血管损伤后自然出血到自然仃止的过程. 止血的基本过程： 血管收缩 血小板凝聚成白色血栓 形成纤维蛋白凝块,Clot Formation,Clot Dissolution,方法 用标准弹簧针或刀片刺破皮肤2-3mm深，观察出血自然停止的时间 参考区间 BT测定器法 6.92.1min 9min为延长,意 义,2. BT延长 PLT 常50109/L 血小板功能异常： 血管壁异常：遗传性毛细血管扩张症 血管性假性血友病（VWD）、DIC 3BT缩短 某些严重高凝状态或血栓性疾病 心梗、脑梗、DIC高凝期,二、束臂试验,毛细血管壁完整性 内皮结构与功能 血小板质与量,异常,脆 性 通透性,压力,易出血,原 理,方 法 血压计袖带 上臂加压8min 在前臂直径5cm 圆圈内计数出血点,(收缩压+舒张压)2,参考区间 男性0-5个 女性0-10个 10个为异常 意 义 本实验观察血管壁、血小板的综合止血作用 1.异常提示：毛细血管脆性、通透性 2. 常见于： 血管壁结构与功能异常 血小板质与量异常 缺乏vWF因子,三、血小板的检测,（一）血小板计数,（二）血块收缩试验,熟悉,止血：血液由流动的液体状态转变成不流动的凝胶状态称为血液凝固。 主要与凝血因子 有关 筛查试验：APTT、TT、PT 诊断试验：测各凝血因子,第二节 凝血的检查,IIa Ca2+ VIII- VIIIa III Plt- PF3 Ca2+ IIa Xa VVa Ca2+,正常凝血过程（瀑布学说）,F3磷脂 凝血酶原(II) 凝血酶(IIa) 纤维蛋白原(I) 可溶性纤维蛋白 稳固性纤维蛋白,内源性途径,胶原等带负电荷表面,PKa PK,XIIXIIa HMWK,外源性途径,组织损伤释放,组织因子（III）,XI XIa,IIa,IX IXa,VIIa VII,XIII XIIIa,参加因子：,所需时间：,X Xa,（凝血旁路）,VIII、IX、XI、XII V、X、 II、I III、VII,Ca2+、PF3、磷脂,38min,常用凝血筛选试验,一、活化部分凝血酶时间测定(aPTT),PF3 白陶土 Ca艹 测定凝固所需的时间（内源性） 甲、乙、丙血友病 vWF缺乏（VIII-R） 严重的肝脏疾病 使用抗凝剂治疗 DIC,XII,XI,Ca+,Ca+,Ca+,I,VII,II,X,V,IX,VIII,Ca+,二、血浆凝血酶原时间测定（PT）,组织凝血活酶 （外源性） 磷脂 Ca艹 测定凝固所需的时间 VII、V、X、II、I、XIII因子缺乏 VITK缺乏 严重的肝脏疾病 使用抗凝剂治疗 DIC,XII,XI,Ca+,Ca+,Ca+,I,VII,II,X,V,IX,VIII,Ca+,XIIIa,XIII,凝血酶,纤维 蛋白,纤维蛋白原,纤维蛋 白单体,IXa,Xa,Va,凝血酶原,(Prothrombinase),PL, Ca2+,VIIIa,PL, Ca2+,X,共同途径,三、共同途径,共同途径因子: V, X, XIII, II, I,共同途径试验 (TT、FIB),Ca+,Ca+,I,II,X,V,凝血酶 测定凝固所需的时间 DIC 使用抗凝剂治疗 FIB是急性时相反应蛋白 FIB由肝脏合成,（一）凝血酶 (TT),参考区间 24g/L,参考区间 24g/L,增高：妊娠、心梗、急性肾炎、恶性肿瘤等。,降低：DIC、原发性纤溶症、重症肝炎等。,熟悉,诊断试验 血浆纤维蛋白原定量 血浆因子、和促凝活性测定 血浆因子、促凝活性测定 血浆因子定性试验 可溶性纤维蛋白单体复合物测定,三个体系 抗凝血酶-III、 蛋白C系统、 组织因子途径抑制物。,第三节、抗凝血试验,筛查： PT、APTT、TT延长，FIB正常 诊断： AT-活性与抗原测定 、蛋白C系统检测 、组织因子途径抑制物（TFPI）检测 、肝素,(一) 抗凝血途径(蛋白C),FVIIIa,FXa,FX,FVa,PL, Ca2+,凝血酶原,凝血酶,纤维蛋白原 纤维蛋白,蛋白 C,活化蛋白C APC,Thrombin-Thrombomodulin Complex,FV,蛋白 S 灭活,纤溶酶原激活剂抑制物 (PAI-3) a1抗胰蛋白酶 (抑制凝血酶因子a、纤溶酶 ) a2巨球蛋白 (抑制纤溶酶 ),(二) 抗凝血途径(ATIII),纤维蛋白,FXa,Va,纤维蛋白原,PL,FX,(三) 抗凝血途径(TFPI),抗凝血酶III,TF FVIIa,TFPI可与a和a形成无活性的复合物,Heparin (cofactor),第四节 纤溶活性检测,一、纤维蛋白降解产物测定,增高见于原发与继发性纤溶亢进(DIC)、恶性肿瘤、白血病、肺栓塞、深部静脉血栓形成和各种疾病引起的休克，溶栓治疗时FDP可显著增高。,二、D-二聚体测定,D二聚体在原发性纤溶亢进症时正常，在继发性纤溶亢进则显著增高，是两者鉴别的重要标志。增高见于深部静脉血栓形成、肺梗塞、DIC、继发性纤溶亢进等疾病。,纤溶亢进筛检试验的选择与应用,血栓和止血检查复习,Tests of thrombus and haemostasis,?,原发性血小板增多症 血小板数量增加 vWD 血小板功能异常， 凝血因子缺乏 过敏性紫癜 单纯血管通透性和脆性增加 所致的血管性紫癜 特发性血小板 血小板数量减少 减少性紫癜,临床应用：抗血栓治疗的监测,使用肝素时：用APTT及血小板监测 口服抗凝剂：用PT监测 PTR=PT（病人）/PT（正常人） INR=PTRISI ISI：国际敏感指数，INR：国际标准化比值 INR（0.81.5）,PTR（0.851.15） 口服抗凝剂INR应控制在2.03.0之间,批内 室内。,精密度,室间质评比对试验（内部比对，外部比对）,正确度,查线性范围 查临床可能达到的值 取高值标本，稀释液稀释 计算回收率,可报告范围,性能验证要点,参考区间,验证：每年一次，每组用20份健康人样品检测后进行验证。 更换试剂：敏感度接近时，可用5份健康人标本进行结果比对。,最大稀释倍数测定,4.可报告范围计算： （1）上限为线性范围上线稀释倍数 （2）下限为线性范围低限,小 结,本章节的主要内容是： 凝血和抗凝机制，毛细血管壁与血小板相互作用的试验，血小板计数的正常参考值和临床意义，凝血功能检验如：凝血酶原时间，活化部分凝血活酶时间测定的原理，正常参考值和临床意义。临床常见出血性疾病的原因；实验室检查的要点；播散性血管内凝血（DIC）的定义及过筛试验和确证试验。,思