结直肠癌的基因检测.ppt

结直肠癌的基因检测,2000年4月16日，梅艳芳姐姐梅爱芳因子宫颈癌病逝，终年41岁。 2003年12月30日，梅艳芳因子宫颈癌病逝，终年40岁。 2015年3月11日，梅艳芳二哥梅德明因喉癌病逝，终年62岁。,基因检测,朱莉（2013）曾检查出BRCA1基因缺陷，意味着她拥有87%和50%的几率罹患乳癌和卵巢癌，再加上拥有癌症家族史，她的母亲就曾被查出患有乳癌，并最终死于卵巢癌。朱莉当年实施双侧乳腺切除手术，引发全球关注。2015年朱莉又以公开信的形式正式宣告，为了避免患癌，继两年前切除乳腺之后，她又接受了卵巢和输卵管手术,基因检测的概念,基因：遗传信息 基因检测是通过组织、体液或细胞对个体遗传信息进行检测的技术，其检测的信息可以是由DNA、RNA、蛋白质等物质承载。通过不断进步的生物信息学技术手段链接遗传学、表观遗传学、蛋白质组学，不断加深人们对于生命的物质本质的认识。,基因检测在结直肠癌诊断治疗中的作用 （1）为筛查提供依据 （2）尽早诊断 （3）为治疗方案提供优化 （4）指导用药,结直肠癌与基因检测,结直肠癌与基因检测,基因检测在结直肠癌诊断治疗中的作用 （1）评估遗传风险 （2）评估化药的疗效及副作用 （3）指导靶向药物使用 （4）指导免疫治疗,结直肠癌基因检测与遗传风险评估,发病前十位恶性肿瘤数据,结直肠癌遗传风险评估,风险评估/遗传咨询 国家癌症中心调查数据显示，2015年全国预计新增大肠癌376300例，死亡191000例，均位居第五（ Cancer statistics in China,2015, CA-Cancer J Clin.2017 ）。 大部分大肠癌呈散发，但家族性肿瘤综合征在肠癌中也很常见。 估计约有10-30%的患者具有家族聚集现象，其中5-6%与研究较为明确的多种遗传综合征明确相关 -详细的家族史 -详细的医学和手术治疗史 -相关的表现进行直接检查 -风险咨询 -教育支持 -遗传检测讨论 -知情同意,遗传学特点,连续（或间断）几代中发生大肠癌（垂直遗传） 男女遗传度相等，即一级亲属携带几率为50% 患者及亲属相关器官的肿瘤易感性提高 发病年龄早 多处原发癌,为什么要关注遗传性大肠癌,一、重视度低、知名度低 二、遗传性结直肠癌并不罕见 - 10%-25%结直肠癌患者有家族史 - 近10%患者有明确致病基因 三、临床表现复杂：表现为综合征 - 相同表型不同基因型 - 相同基因型不同表型,NCCN指南建议： 1、大约20%的结直肠癌伴有家族聚集性，新诊断的腺瘤或浸润性癌患者，其一级亲属患结直肠癌的风险增加。 2、对于遗传性结直肠癌，要求患者通常在进行基因测序前进行2轮的筛选：首先基于家族史，其次是对肿瘤组织进行初始检测。 3、为了甄别那些可能属于遗传性结直肠癌的患者，可以对结直肠癌标本进行2项初始检测：免疫组织化学检测错配修复蛋白表达(MMR)；分析微卫星不稳定性(MSI)。,为什么要关注遗传性大肠癌,Lynch 综合征,Lynch综合征（林奇综合征），又称遗传性非息肉病性结直肠癌（HNPCC），占结直肠癌患者2-4%，一种呈常染色体显性遗传的家族性肿瘤综合征，主要由错配修复基因（mismatch repair gene，MMR）缺失引起(MLH1、MSH2、MSH6、PMS2、EPCAM），hMLH1和hMSH2突变约占检出的种系突变的90，hMSH6突变约占7-10，hPMS2突变占不到5。 患者MMR基因缺失，主要是由基因突变或启动子甲基化引起，其中MLH1和MSH2基因突变占所有基因改变的90以上。MMR基因突变或启动子甲基化可导致MMR基因功能缺失，从而引起含有错配碱基、核苷酸插入或缺失的DNA分子不能正常修复，最终引起广泛的MSI。,MMR蛋白IHC结果判读标准,Lynch 综合征,dMMR：MMR基因缺失； pMMR：MMR基因正常；,MSI-H：高度微卫星不稳定； MSI-L：低度微卫星不稳定； MSS： 微卫星稳定。,微卫星不稳定性（MSI）是指DNA甲基化或者基因突变致错配修复基因缺失，从而导致微卫星重复序列插入或缺失，继而长度改变，与肿瘤的发生密切相关。约15%的结直肠癌中存在MSI，主要是微卫星序列碱基对的替换和移码突变。散发性肠癌中最常见的就是hMLH1基因启动子区高甲基化，导致MSI的发生。,Lynch 综合征,MSI检测,肿瘤中的MSI-H（又称dMMR）是指在预先确定的微卫星重复标记组中具有一定比例改变的肿瘤，丧失MMR活性。其检测意义、运用和提示作用均与IHC 相似，尽管两者略有互补性。MSI的检查主要采用美国国立癌症研究所推荐的的5个微卫星标记(D2S123、 D5S346、 D17S250 、BAT25和 BAT26)。PCR主要是检测DNA分子链上的MSI状态，国内通常对以