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第六章 环境因素对微生物的影响,概述 第一节 物理因素对微生物的影响 第二节 化学因素对微生物的影响 第三节 生物因素对微生物的影响,概 述(1),灭菌:指杀死一切病原、非病原菌及芽胞或孢子,使物体上无任何活细菌存活的方法。 消毒:指用物理或化学方法杀灭病原微生物,而对非病原微生物及其孢子、芽胞并不要求全部杀死的方法。用于消毒的化学物质称为消毒剂。 防腐:利用化学药品或其他方法阻止微生物繁殖与发育的方法谓之防腐。所使用的化学药物称为防腐剂。,概 述(2),无菌法:系指杜绝任何病原性或非病原微生物进入动物机体或其他物体的方法。 抑菌作用:指某些物质或因素具有阻碍微生物生长繁殖的作用,即抑菌作用。,概 述(3),杀菌作用:指某些物质或因素具有杀灭微生物的作用。 抗菌作用:指某些药物或因素具有抑制或杀灭微生物的作用。 过滤除菌:指通过过滤作用除去液体或空气中存在的细菌。,第一节 物理因素(1),一温度因素对微生物的影响 (一)生长温度范围:腐生菌广 病原性窄 。,第一节 物理因素(2),(二)高温对微生物的影响: 高温对微生物有明显杀灭作用。生物对高温的抵抗力视其种类、发育阶段 温度高低与作用时间而异。 1.影响高温杀菌作用的因素: (1)微生物的类型: 细菌芽胞无芽胞细菌 或 繁殖体;嗜热菌 嗜温 嗜冷 肉毒6h,破伤3h,无芽胞细菌、真菌和繁殖体、病毒 6070 几分钟 (2)菌龄及发育时的温度: 老龄菌 对数期菌,第一节 物理因素(3),(3)加热的温度和时间 热毙点:一定时间内杀灭一定量的细菌所需的温度。 热毙时:一定温度下杀灭一定量的细菌所需的时间。 无芽胞杆菌(伤寒、结核)6263 2030分钟 一般细菌6070 30分钟 100 几分钟 (4)细菌的浓度 浓度大时间长 (5)介质: 水 在一定范围内,水分越多杀灭细菌所需温度越低,芽胞水分少耐热。,第一节 物理因素(4),2.高温杀菌原理: 蛋白质、核酸 氢键破裂 蛋白质变性凝固 失去生物学活性 3.热力杀菌法: 火焰杀菌法: (1)干热: 热空气法:繁殖体1.5小时 芽胞:140 3小时 真菌孢子:115 1.5小时 160 2小时 (140 3小时) 煮沸灭菌:100 1020分钟 加入1%a2CO3 25%石碳酸 外科手术器械,注射器针头等.,第一节 物理因素(5),流通蒸气灭菌:100 30分可杀死细菌繁殖体, 但不能杀灭芽胞。 间歇灭菌法:用于易被高温破坏的物品 。如糖培养基。 巴氏消毒:杀死病原菌和其它细菌的全部繁殖体。 湿热: 6163 30分钟 杀死总细菌90%,全部病原菌。 7172 1530秒钟 132 1秒钟 高压蒸气灭菌:压力较高、沸点升高,杀死全部细菌芽胞 能耐高热物品 15磅/英寸 121.3 1.05公斤/厘米 1530分钟。 注意事项:应排出原有的冷空气 注意灭菌物品不要互相挤压过紧,保证蒸气通畅,第一节 物理因素(6),(三)低温对微生物的影响 淋球菌 脑膜炎球菌 流感 敏感 菌种 510低温保存 伤寒 白喉 不敏感 毒种 -20 -50 -70 液态氮气 -196 液态氢气 -250 冷冻干燥保存菌种、毒种、疫苗。 对细菌、真菌不宜长期冰冻保存,避免反复冰冻与融化。 “玻璃化学” 1525最危险温度区 低温形成结晶对原生质挤压,穿刺,破坏。,第一节 物理因素(7),二干燥的影响 不同种类的微生物对干燥的抵抗力差异很大。 淋球菌、鼻疽 几天 结核杆菌 90天 芽胞、孢子 几年或更长 微生物对干燥的抵抗力虽然很强,但在干燥条件下不能生长繁殖。 干燥保存法,食品的盐淹/糖渍达到抑菌的目的,夺去菌体内水分,造成微生物的生理干燥。,第一节 物理因素(8),三辐射对微生物的影响 (一)可见光:一般无大影响 培养基中加入一些染料可增强可见光线的杀菌作用 称光感作用。对原生动物、病毒、细菌、毒素、噬菌体均有灭活作用。 美兰 伊红 对G 较G敏感 汞溴红 沙黄 对 G敏感 某些细菌或病毒经光感作用后,毒性或活力消失但 抗原作用不变制造疫苗或菌苗。,第一节 物理因素(9),(二)日光 细菌在直射阳光下半/数小时 炭疽芽胞 20小时 (三)紫外线:13604000A(108) (25302650A) 紫外线 仅限于照射物体的表面 对紫外线抵抗力 病毒 G G 芽胞 繁殖体 紫外线消毒 工作室 手术室 紫外线照射可灭活,但不损伤其抗原性。,第一节 物理因素(10),1紫外线对微生物的作用机理: 杀菌作用 DNA链 诱发变异 形成TT 胸腺嘧啶二聚体 DNA同一链上相连两个TT变成二裂体,使A的掺入受影响复制,产生突变。从而改变配对,而形成错误的碱基次序,而引起突变。 2光复活作用: 经紫外线照射受损的微生在可见光的作用下可逐渐恢复活力。两者相差40000倍 黑暗 190 1087102 光照 190 1083107,第一节 物理因素(11),(四)X射线和放射性同位素对微生物的影响 1X射线为 高能电子兹波 0.61360A 具有杀菌和诱变作用,但杀菌作用较紫外线为弱。波长越短、杀菌力越强 细胞的发育阶段,浓度,氧气的存在与X的作用有关(有些因素存在增强杀菌作用) 致死量以内的X射线可使微生物发生突变。 X青霉菌生产青霉菌株 X炭疽菌弱毒炭疽苗,第一节 物理因素(12),2放射性同位素的影响: 广泛用于医学 C060 I131 P Na24 杀菌诱变 一般常用的诱变剂量是以微生物死亡9099.9%的剂量 C060照射引起曲霉,糖化酶活力提高40% R射线照射可育成菌苗和疫苗毒株,消毒培养基、培养器皿。 新的诱变剂快中子、较X、射线具有较大的电离密度,可引起诱变。,第一节 物理因素(13),四、 超声波对微生物的影响 超声波 9000周/秒 可听波 超声波具有杀菌作用芽胞 、小病毒对其不甚敏感,对细菌、酵母、大病毒敏感。 破坏菌体和细胞结构。 消毒 诱变 提取病毒 灭菌 五、激光,第二节 化学因素对微生物的影响 (1),形态 生长 发育 繁殖 化学因素 促进微生物发育 毒害 诱变 致死 致病力 (浓度低 高 ) 抗菌性 选适当培养基、培养环境 用于 : 病原菌的分离鉴定 消毒、灭菌 诱发变异,第二节 化学因素对微生物的影(2),一、消毒剂对微生物的作用 消毒剂:使细菌细胞原生质变性沉淀或使酶类的SH基或其它成份被氧化而起到杀灭或抑制病原微生物的作用。 常用的消毒剂: (一)酸类: H 细菌表面两性物质的电离程度 影响细菌的吸收、排泄、代谢 使菌体蛋白质、核酸水解,酶类失去活性,死亡 常用的酸类消毒剂有: 1无机消毒剂:硼酸(12%弱、粘膜消毒),第二节 化学因素对微生物的影响 (3),2有机消毒剂:甲、醋、乳酸。 (二)碱类: OH 水解菌体蛋白和核酸 ,破坏菌体结构和酶 分解菌体中糖类 对碱类抵抗力 芽胞 GG 病毒 对病毒病消毒常用碱类 510%生石灰乳 510%草木灰 23% 烧碱 病毒 14% NaOH、KOH 芽胞 、繁殖体,产物逸出而受损或死亡。 阳离子表面活性剂: 抗菌谱广、效力快、对组织无刺激性G、G- 对真菌、病毒也有作用,但对绿脓、芽胞无效。 阴离子表面活性剂: 对G有作用。 阳 新洁尔灭、消毒净、杜灭芬 用于消毒皮肤、粘膜、器械、工作服 阴 肥皂,第二节 化学因素对微生物的影响 (4),(三)重金属: 与SH结合 使菌体蛋白变性或沉淀 升汞 0.1% (只供外用) 硫柳汞 1/50001/10000 (四)氧化剂:氧化作用 KMO4 0.1% H2O2 3% 放出离子O,第二节 化学因素对微生物的影响 (4),(五)卤素:渗透菌体细胞膜,氧化作用。 氟、氯、溴、碘 氟化钠杀灭真菌和病毒。 1020%漂白粉 15%碘酒 碘甘油 碘溶液 (六)酚:石碳酸 5%数小时,杀死芽胞(真菌和病毒不敏感)。 莱苏儿 肥皂乳化的甲酚 2% 515分钟 细菌死亡。,第二节 化学因素对微生物的影响(5),(七)醇:杀菌作用主要是脱水作用,使蛋白质凝固,变性,分子量大杀菌力强(丁醇 丙醇 乙醇) (八)醛:10%甲醛 排泄物、金属器械的消毒、房舍的熏蒸。甲醛可以使毒素减毒、菌体死亡但保持抗原性 制类毒素、 疫苗。 (九)染料:抑菌作用,具有选择性的抑菌作用 2%龙胆紫 皮肤粘膜消毒 孔雀绿和煌绿抑制G,促进沙门氏生长。三型布氏杆菌对甲基紫、碱性复红、染料敏感度 不一。,第二节 化学因素对微生物的影响 (6),(十)表面活性剂:(清洁剂、去污剂)吸附细菌表面,改变膜通透性,使菌体内酶、辅酶和中间代谢产物逸出而受损或死亡。 阳离子表面活性剂: 抗菌谱广、效力快、对组织无刺激性,对G、G、真菌、病毒也有作用,但对绿脓、芽胞无效。 阴离子表面活性剂: 对G有作用。 阳离子类:新洁尔灭、消毒净、杜灭芬用于消毒 。 如皮肤、粘膜、器械、工作服等。 阴离子类:肥皂。,第二节 化学因素对微生物的影响 (8),影响消毒剂消毒作用的因素 1.药物的特异性 碱病毒 胆汁、龙胆紫、孔雀绿G 2.浓度 选择有效而安全的杀菌浓度 70%酒精 种类、真、病、细、G G 3.微生物的种类及其特性 状态 芽胞、繁殖体 发育阶段 生长 静止 4.有机物的存在 覆盖被消毒物 蛋白质与消毒剂结合 5.温度 10 重金属25倍 石炭酸58倍 6.PH: 7.时间:作用时间越长,消毒越彻底。,第二节 化学因素对微生物的影响 (9),化学治疗剂消除宿主体内病原微生物或其它寄生物的化学药品。其对宿主及寄生物具有选择作用,能选择性地阻碍微生物的某些代谢环节,使其生命活动受到抑制或死亡,而对宿主无害。,第二节 化学因素对微生物的影响 (10),金葡菌 多量对氨基苯甲酸 有些微生物不合成叶酸 对磺胺药(耐药、不敏感) (二)其它抗代谢药物的抑菌作用 主要代替中间代谢物,合成在生理上无活性的化合物,对细菌呈抑制作用。 8重氮G(鸟嘌呤)替代鸟嘌呤。,第三节 生物因素对微生物的影响 (1),寄生:一种生物从另一种生物获得其所需的营养赖以为生,并对后者呈现有害作用。 共生:两种或多种生物相处时,彼此不相互损害而互有利者,谓之共生。 拮抗:指一种生物在生长过程中,能产生一种对他种生物呈现毒害作用的物质,从而抑制或杀死他种生物的现象。,第三节 生物因素对微生物的影响 (2),一、抗菌素对微生物的影响 抗生素:由某些真、细、放线菌产生的能杀灭或抑制另一些微生物的物质。 2500年前用霉豆腐治疗疮痈。 目前各种抗菌素2500余种。 植物抗菌素 如黄连、黄柏、大蒜、鱼腥草、板兰根。,第三节 生物因素对微生物的影响 (3),二、噬菌体对微生物的作用(Bacteriophage) 寄生于真、细、放线菌的病毒,一般呈蝌蚪形,营专营性寄、具“种”型特异性。 烈性噬菌体:指侵入寄主细胞后,抑制寄主细胞代谢,而形成大量子代噬菌体使寄主细胞崩解,释放出大量子代噬菌体,重新感染其它寄主细胞。这种现象称溶菌现象,这称烈性噬菌体。 温和噬菌体:溶源性细菌。指侵入细菌后噬菌体DNA与细胞DNA并存,均以一定速度在细菌体内复制,并不发生溶菌现象。这样的噬菌体称温和型。带有温和型噬菌体的细菌称溶源性细菌。,第三节 生物因素对微生物的影响 (4),第三节 生物因素对微生物的影响 (5),三、杀细菌素:某些细菌产生的对相应细菌具有抑制或杀菌作用的蛋白质。 一
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