宫颈癌生物治疗宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班.ppt

20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,肿瘤生物治疗,应用现代生物技术及其产品进行肿瘤防治的新疗法，它通过调动宿主的天然防卫机制或给予天然（或基因工程）产生的针对性靶向性很强的物质来取得抗肿瘤的效应。,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,包括,免疫治疗 基因治疗 其他生物治疗,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,免疫治疗的方法,一。主动免疫 特异性免疫治疗 非特异性免疫治疗 二。被动免疫治疗 三。过继免疫治疗,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,非特异性免疫治疗,生物免疫刺激剂：BCG、短棒状杆菌、OK432 化学免疫刺激剂：左旋咪唑、西咪替丁、活化巨噬细胞的溶解物 化学治疗药物：环磷酰胺、长春新碱、顺铂 免疫调节药物：灵芝多糖、自然饮等 细胞因子：干扰素、IL-2、TNF,免疫治疗方法,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,特异性免疫治疗 是一种调动宿主自身抗肿瘤免疫应答的方法。 包括各种疫苗的治疗 如肿瘤疫苗、多肽疫苗、病毒疫苗、蛋白疫苗、DC疫苗等,免疫治疗的方法,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,被动免疫治疗,直接输入外源性活性物质抗肿瘤作用 方法 单克隆抗体治疗 细胞因子治疗,免疫治疗方法,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,过继免疫治疗,过继性免疫治疗是指将有免疫活性的自体或同种异体的免疫细胞或细胞因子输给患者，以提高患者的免疫功能。 方法： 克隆化CTL LAK细胞 肿瘤浸润淋巴细胞（TIL） 树突状细胞（DC） 细胞因子介导杀伤细胞（CIK）,免疫治疗方法,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,克隆化CTL,分离外周血单核细胞，加入IL-2培养，自体肿瘤细胞刺激 建立肿瘤特异性CTL克隆，扩增回输 难度大，难以推广,免疫治疗方法,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,LAK细胞,分离患者外周血淋巴细胞，IL-2激活、扩增，回输给患者 有广谱的抗瘤性，可杀伤同基因型、同种异体肿瘤细胞 在黑色素瘤、肾癌的治疗 有效率20，尤其在消除胸腹水及改善自觉症状效果明显,免疫治疗方法,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）,从肿瘤组织中分离出淋巴细胞，以IL-2激活、扩增，回输给患者 TIL的杀伤活性较LAK细胞强，抗瘤谱窄，临床应用的效果比LAK稍好。 操作极为复杂，难以得到足够的可用于治疗的细胞数量，对转移肿瘤不一定有效,免疫治疗方法,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,树突状细胞（Dendritic cells,DC ）,DC是机体免疫反应的始动者，在免疫应答的中具有独特的地位,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,树突状细胞（DC）,1.形态特点 2.来源、生长发育和功能特点,3.在免疫学中的地位,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,DC的功能特点,非成熟阶段 非常强的抗原摄取和加工能力 成熟阶段 非常强的抗原提呈能力 至今发现最强的专职抗原提呈细胞 特别之处：唯一的能在体外激活初始型T淋巴细胞,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,DC过继治疗的方法,1.分离前体细胞、培养 2.抗原冲击致敏DC 3.回输或免疫接种,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,利用DC治疗肿瘤的研究,Zitvogel 治愈了1cm3接种肿瘤的小鼠 B淋巴瘤治疗 前列腺癌治疗 黑色素瘤治疗,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,细胞因子诱导杀伤细胞（CIK）,应用多种细胞因子刺激，从外周血淋巴细胞中诱导、扩增出以CD3+CD56+、CD3+CD8+为主的异质细胞群。 具有NK细胞的某些特点，非MHC依赖性 方法 以IL-2 、CD3单抗、TNF-等刺激淋巴细胞增殖 致敏的DC与淋巴细胞混合，刺激抗肿瘤CTL增殖 淋巴细胞回输,免疫治疗方法,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,单克隆抗体治疗,“生物导弹”抗体 双特异性抗体 信号抗体 抗独特型抗体,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,“生物导弹”抗体,抗体的一端连接核素、毒素、化疗药物，利用抗原抗体特异性结合的特性，使药物直接在肿瘤细胞中起作用。 意义： 效率大大提高 负反应降低,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,生物导弹特点和局限性,生物导弹利用单克隆抗体导向，药物、毒素、同位素则发挥高效的杀伤肿瘤的作用，因而，疗效大大提高。 局限性 交叉反应对正常组织也有损害、 使用鼠源性单抗导致抗抗体影响继续使用效果，甚至过敏反应、 肿瘤表面抗原的调变减少与抗体结合。,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,双特异性抗体（BsMab）,抗体的两个Fab段能同时与两个不同的抗原结合。 双特异性抗体一臂结合肿瘤抗原，一臂结合免疫效应细胞。 抗体充当桥梁作用。 结合效应细胞的分子： 巨噬细胞FcR1 NK细胞的CD56和CD16 中性粒细胞FcRII T细胞CD3、CD28、CD2,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,信号抗体（signaling antibody）,单抗通过交联或封闭肿瘤细胞表面膜受体产生跨膜信号，直接影响或控制肿瘤的生长，导致肿瘤细胞凋亡。 抗体相当于受体结合配体的代替物，模拟或调整信号活性。 这种抗体又称为信号抗体，并能致敏肿瘤细胞，使其对传统的DNA损伤药物的敏感性增强。,免疫治疗方法,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,针对酪氨酸激酶受体的单抗、小分子,单抗类分子靶向药物常用的有 Herceptin(贺赛汀) Rituximab(美罗华) IMC-C225 (Erbitux) Avastin 小分子化合物常用的有： Glivec(STI571, 格列卫) ZD1839(Iressa) OSI774 (Tarceva),98年 FDA批准上市 用于HER2受体的乳腺癌,2003年 FDA 批准上市 用于 NSCLC 第三线单药治疗,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,抗独特性抗体,根据免疫网络理论，机体产生的抗体的某些空间结构可能成为另一抗体的识别、结合位点。识别第一抗体的抗原抗体结合部位的第二抗体则与最初的抗原具有空间结构类似的特点。 第二抗体可以代替抗原诱发免疫反应。,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,独特型网络调节, Ig分子上兼有抗原结合特性和抗原决定簇功能的部位称为独特型，抗体的独特型可被体内某些具有相应抗原决定簇识别受体的细胞识别，从而产生抗独特型抗体.进一步形成独特型网络 独特型网络的细胞：ARC；内影象组；抗独特型组；非特异平行组,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,宫颈癌的免疫治疗,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,子宫颈癌疫苗,人乳头瘤病毒 HPV 与子宫颈癌的关系早已得到证实 超过20 种的预防性或治疗性抗 HPV 疫苗正在进行临床或临床前试验。,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,以 HPV疫苗为代表的特异性免疫治疗结合细胞因子等非特异性免疫治疗可能对子宫颈癌的预后产生重大 改 善 ； 而 预 防 性 疫 苗 对 抗HPV 感染的保护作用，将会有效的降低子宫颈癌的患病几率。,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,以 HPV为基础的疫苗,研究发现在90%左右子 宫 颈 癌 患 者 中 可 检 测 到 HPV， 尤 其 是 HPV16、18、31、33、45、58 型为子宫颈癌的高危型。 现已明确，HPV 早期蛋白中的E6和 E7, 主要与病毒细胞转化功能及致癌性有关；而晚期蛋白 L1 和L2 分别为HPV的种特异性抗原和型特异性抗原。,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,由于目前已经鉴定的HPV有 100 多型，且培养困难，并具有潜在的致癌性，因此HPV 减毒活疫苗或死疫苗暂时不适合用于临床。 当前研究的策略主要是针对高危型 HPV E6、E7, 特异性靶位构建治疗性疫苗和利用L1、L2 病毒结构蛋白研究预防性疫苗。,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,治疗性疫苗：,主要有 HPV 多肽疫苗 HPV 载体疫苗 融合蛋白疫苗和嵌合疫苗,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,HPV多肽疫苗,目前已经确认有 3个由 HPV16 E7 编码的多肽具有免疫原性。 这些多肽在离体及体内条件下均能激发细胞毒性T淋巴细胞(CTL) 反应，从而对肿瘤细胞起杀伤作用。,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,HPV多肽疫苗的临床试验（1）,Van Drriel等 I期临床试验 应用 HPV E7 多肽和 pan-DR 辅助多肽的复合疫苗免疫19例晚期子宫颈癌患者，未发生明显副反应，其中 2例病变在 1年内维持静止状态，15 例进行性恶化，另 2例经随后的辅助化疗而肿瘤消退,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,这一结果提示 HPV16 E7 多肽疫苗治疗是有效的，尤其对终末期患者仍有一定疗效 。 HPV E7 多 肽 仅 对HLA-A2 具有高亲和性，受此HLA组织型的 限制，该疫苗仅能对有限的患者起作用。 免疫治疗和化疗应该有机的结合使用,Van Drriel等 I期临床试验,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,HPV多肽疫苗的临床试验（2）,Stelar 等研究 两次 HPV16 E7脂肽疫苗接种后7例患者中 5例发生特异的 CTL反应。,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,HPV 多肽疫苗的临床试验（3）,美国食品与药品管理局 （FDA.）已批准用HPV 16 E7脂肽疫苗进行临床期试验，随访情况良好，但其最佳免疫途径、免疫剂量等问题尚需进一步研究。,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,HPV 载体疫苗,将编码病毒蛋白的基因重组到机体细胞中，由机体细胞合成病毒蛋白后表达在细胞表面，再引发一系列的免疫应答反应。 根据这一原理，通过腺相关病毒 AAV 将 HPV E6 和E7 抗原基因转染到DC中，可以有效提高抗原的呈递，以激活 CTL的杀伤作用。,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,临床前试验,Liu和Chiriva-Internati等 腺相关病毒（AAV）分别转染 HPV16 E6 和 E7至 DC，结果显示.AAV 可以将载体染色体整合入细胞，从而激活 DC，进一步触发显著的杀伤反应。 AAV可能可以进行临床试验 但是目前的研究显示，尽管 AAV可以提高抗原呈递效果，其效率仍不能让人满意。,HPV载体疫苗,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,融合蛋白疫苗和嵌合疫苗（1）,Adams 等 I期临床试验 将HPV 嵌合基因 治疗8 例晚期子宫颈癌患者 结果 所有患者体内均产生抗疫苗的IgG抗体，其中 3 例产生特异性抗 HPV 抗体，免疫9周后可检测到 HPV特异性的 CTL，但在 14和 20周消失；2例在注射疫苗 15和21 周临床随访时，状态良好。,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,融合蛋白疫苗和嵌合疫苗（2）,Lin 等 I期临床试验 将 E7和溶酶体相关的膜蛋白基因融合，构形嵌合基因 E7/LAMP-1 重组病毒疫苗 结果显示，可以增强 CD8+ T细胞的抗原呈递 ， 提 高 疫 苗 的 抗 肿 瘤 反 应 。,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,融合蛋白疫苗合嵌合疫苗（3）,Chen 等 I期临床试验 用 E7/LAMP-1 重组病毒疫苗进行研究，也发现该疫苗可以产生强烈的E7特异性 C8+ T细胞反应。,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,树突状细胞疫苗,Santin等 发表于Lancet杂志 2002年 用HPV18 E7蛋白DC疫苗对 1例 27岁放、化疗抵抗且广泛转移的子宫颈癌复发患者进行免疫治疗，结果双肺病灶消退，病人生活质量明显改善。,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,目前正在进行临床试验,1。Phase II Pilot Study of Clinical Activity and Proteomic Pathway Profiling of the EGFR Inhibitor, ZD1839 (Iressa; Gefitinib), In Patients With Epithelial Ovarian Cancer Or Cervical Cancer 2。Phase II Adjuvant Study of the Recombinant Vaccinia Virus Vaccine Expressing the Human Papilloma Virus 16, 18, E6 and E7 in Early Cervical Cancer 3。Phase II Study of Whole Body Hyperthermia Combined With Doxorubicin HCl Liposome and Fluorouracil in Patients With Metastatic Breast, Ovarian, Endometrial, or Cervical Cancer 4。Study of MN Protein Expression as a Potential Diagnostic Biomarker of Cervical Dysplasia and/or Neoplasia in Patients With Atypical Glandular Cells of Undetermined Significance,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,5。Phase II Study of SGN-00101 Immunotherapy in Patients With Grade III Cervical Intraepithelial Neoplasia 6。Phase II Randomized Study of SGN-00101 Vaccine in Human Papillomavirus-16-Positive Patients With Atypical Squamous Cells of Undetermined Significance or Low-Grade Squamous Intraepithelial Lesions of the Cervix 6。Phase II Study of Cetuximab and Cisplatin in Patients With Advanced, Persistent, or Recurrent Carcinoma of the Cervix 7。Cetuximab, Cisplatin, and Radiation Therapy in Treating Patients With Stage IB, Stage II, Stage III, or Stage IVA Cervical Cancer,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,预防性疫苗,HPV晚期区 (L) 编码主要衣壳蛋白 L1和次要衣壳蛋白L2，其中 L1 为糖蛋白，结构保守，是主要的种特异性抗原，L2为核蛋白，是型特异性抗原，起组蛋白作用。 研究发现 L1主要结构病毒蛋白能自我组装成病毒样颗粒 (VLPs)，可以产生高水平的中和抗体。因而可利用重组 L1 和 L2亚单位病毒结构蛋白，自我装配成病毒样颗粒用于预HPV感染。,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,宫颈癌的防性疫苗,2个重要的试验 2002年 Merck 公司的 HPV16 L1 单价疫苗 2004年 葛兰素史克公司的 HPV16/18 L1 双价疫苗,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,Merck 公司的 HPV16 L1 单价疫苗,III期随机对照试验 2392例 （1623岁），宫颈HPV16DNA(-)/血清HPV(-) HPV16 VLPs疫苗 安慰剂 持续性感染 0 3.8% CIN 0 9例,N Engl J Med 2002;347:1645-51.,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,2价HPV16/18 L1 VLPs 疫苗,生产商葛兰素史克 2价HPV16/18 L1 VLPs 疫苗（AS04） 北美和巴西1113例1525岁血清学HPV阴性妇女中进行3次免疫接种 。经过27个月随访，发现疫苗的有效率为： 对一过性感染保护率91.6%, 持续性感染保护率100， 异常细胞学92.9%,Lancet. 2004 Nov 13;364(9447):1757-65.,20050411,宫颈癌规范化治疗和研究新进展学习班,总结,现代免疫治疗有非常光明的前途 不久的将来成为妇科恶性肿瘤临床治疗的一种不可缺少的辅助手段 临床治疗应该清楚免疫治疗的地位 与三大常规治疗有机结合 多种