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文档简介

实验诊断 Laboratory diagnosis,诊断学教研室 孙言平,概 念,综合运用物理学、化学、生物学等实验技术对病人血液、体液、分泌液、排泄物及组织标本等进行检验,以反映机体功能状态、病理变化或病因的客观资料,学习方法和要求 1、了解原理与方法、标本采集处理 2、重点掌握各项常用检验的参考值及其 临床意义 3、学会运用检验结果,结合临床资料综 合分析,进行诊断和防治工作,血 液 一 般 检 测,血液的组成,血浆 血液 红细胞(RBC) 血细胞 白细胞(WBC) 血小板(PLT),血液一般检查-主要内容,全血细胞计数(CBC) 血细胞形态学检查 网织红细胞检查 ESR,全血细胞计数,标本采集和保存 检测方法 自动血细胞分析仪计数 显微镜计数,标本的采集和保存,标本采集 抗凝剂:常用K2EDTA,终浓度为(1.52.2) mg/ml,一般不用枸橼酸钠、肝素 采血方法: 静脉采血法(静脉真空采血法) 毛细血管采血法 样本的保存 室温(1825度)下保存,4小时内送检,一、红细胞和血红蛋白的测定,Epo,(一)参考值,红细胞数(RBC) 血红蛋白(Hb) 成年男性 (4.05.5)1012 / L 120160g / L 成年女性 (3.55.0)1012 / L 110150g / L 新生儿 (6.07.0)1012 / L 170200g / L,红细胞的生成除主要受Epo调节外,也直接或间接地受雄激素及其他神经体液因素的调节,(二)临床意义,1、RBC Hb增多 2、RBC Hb减少 3、RBC形态改变,(二)临床意义,1、RBC Hb增多 标准:成年男性 RBC 6.01012 / L Hb 170g / L 成年女性 RBC 5.51012 / L Hb 160g / L,1、RBC Hb增多,(1)相对性增多:由于血浆水分减少血液浓缩。严重 呕吐、 腹泻、大汗、大面积烧伤等 (2)绝对性增多 1)继发性 Epo代偿性增多:新生儿、高原居民;先心病、 COPD等 Epo非代偿性增多:某些肿瘤与肾脏疾病,如肾癌、肾胚 胎瘤、多囊肾、肝细胞癌、卵巢癌及 子宫肌瘤等 2)原发性:即真性红细胞增多症,系多能干细胞受累所致,2、 RBC Hb 减少,贫血 标准:男性 Hb 120g / L;女性 Hb 110g / L 轻度 Hb 90g / L 重度 Hb 30g / L 中度 Hb 60g / L 极重 Hb 30g / L 1)生理性减少:老、幼、孕 2)病理性减少:见于各种贫血,根据病因和发 病机制分为三大类,贫血的病因与发病机制分类,一、红细胞生成减少 1.骨髓造血障碍:再障;纯红再障 2.细胞分化和成熟障碍: 1)DNA合成障碍:巨幼细胞贫血; 2)Hb合成障碍:缺铁性贫血;铁粒幼细胞贫 血等 二、红细胞破坏增多(溶血性贫血) 红细胞内在异常;红细胞外在异常 三、红细胞丢失(失血性贫血) 急性;慢性,以下两种情况值得注意 在某些病理情况下,Hb和RBC的浓度不一定能正确反映全身红细胞总容量的多少 大量失血 水潴留 脱水 大细胞贫血或小细胞低色素性贫血,二者浓度不成比例,(三)RBC形态学改变,1、RBC大小异常 2、RBC内血红蛋白含量改变(染色反应异常) 3、RBC形态异常 4、RBC结构异常 RBC形态检查与Hb、RBC计数结果相结合可粗略地推断贫血原因,对贫血的诊断和鉴别诊断有很重要的临床价值,正常红细胞 瑞氏染色:双凹圆盘形,细胞大小相似,平均直径7.5m(直径范围69 m);淡红色,中央1/3为生理性淡染区;胞质内无异常结构,小RBC: 6 m 低色素+小细胞(缺铁性、珠Pr生成障碍性) 高色素+小细胞(遗传性球形细胞增多症),RBC大小异常,大RBC: 10m,染多色性或含有嗜碱性点彩,溶贫、巨幼贫、恶性贫血,RBC大小异常,巨RBC: 15m 缺乏叶酸及维生素B12巨幼贫,RBC大小异常,RBC大小不均:相差一倍以上,严重的增生性贫血,尤为巨幼贫为最明显,RBC大小异常,RBC大小异常,RBC形态异常,RBC形态异常,RBC形态异常,RBC形态异常,常见于珠Pr生成障碍性贫血,RBC形态异常 见于HbS病,镰形红细胞,RBC形态异常,是MF的特征之一,也可见于珠Pr生成障碍性贫血、溶贫等,RBC形态异常,RBC形态异常,红细胞缗钱状形成:MM 原发性巨球Pr血症等,正常色素性:淡红色圆盘状,中央有生理性浅染区。正常人,急性失血、再障、白血病,RBC染色反应异常,低色素性:淡、扩大;缺铁、珠蛋白、铁粒幼,RBC染色反应异常,高色素性:深、消失;巨幼贫,RBC染色反应异常,多色性:淡灰蓝或紫灰色;未完全成熟;增多反映骨髓造血功能活跃,红系增生旺盛。见于增生性贫血,RBC染色反应异常,RBC染色反应异常,简称点彩红细胞,指在瑞氏染色条件下,成熟红细胞或幼红细胞的胞质内出现形态不一的蓝色点状物,即核糖核酸(RNA),属于未完全成熟红细胞,其颗粒大小不一、多少不等。多见于增生贫、重金属中毒,常作为铅中毒诊断筛选指标,RBC结构异常,RBC结构异常,Howell-jolly小体:位于成熟红细胞或晚幼红胞质中1或多个紫红色圆形小体,RBC结构异常,Cabot环:红细胞内出现环形或8字形线状结构,1) 嗜碱性点彩 表示红系增生旺盛 2) Howell-Jolly小体 并伴有紊乱, 3) Cabot环 临床意义相似,RBC结构异常,有核RBC:只存在于正常成人骨髓中,见于外周血涂片上即为病理现象。多见于增生性贫血;急、慢性红血病及红白血病;MF等所致的髓外造血,RBC结构异常,六、 血细胞比容和红细胞有关参数,血细胞比容(HCT) 红细胞平均值 MCV、MCH、MCHC 红细胞体积分布宽度(RDW),血细胞比容(HCT),1、定义:指每升血液中血细胞所占容积, 又称血细胞压积(PCV) 2、参考值 温氏法:男:0.400.50L/L;平均0.45L/L. 女:0.370.48L/L;平均0.40L/L. 3、临床意义:反映红细胞增多或减少,红细胞平均值 平均红细胞容积(MCV) 平均红细胞血红蛋白含量(MCH) 平均红细胞血红蛋白浓度( MCHC ),RBC平均值的计算,RBC平均值的计算,1L=11015 fl 1g=11012 pg,参考值 MCV:80100fl MCH:2734pg MCHC:320360g/L 临床意义:进行贫血的形态学分类 (281页表5),红细胞体积分布宽度(RDW),1、定义:是反应外周血红细胞体积大小变异的指标 2、参考范围:11.5%14.5% 3、临床应用 1)贫血的形态学分类(281页表6) 2)有助于缺铁性贫血的早期诊断 3)鉴别缺铁性贫血和海洋性贫血,二、白细胞检测 白细胞计数和白细胞分类计数,(一)参考值,白细胞数(WBC) 成人 (410) 109 / L 新生儿 (1520)109 / L 6个月2岁 (1112)109 / L 白细胞增多:成人高于10109 / L 白细胞减少:成人低于 4 109 / L,5种白细胞正常百分数和绝对值,细胞类型 百分数 绝对值( 109 / L ) 中性粒细胞 (N) 杆状核(Nst) 15 0.040.5 分叶核(Nsg) 5070 27 嗜酸性粒细胞 (E) 0.55 0.020.5 嗜碱性粒细胞 (B) 01 00.1 淋巴细胞 (L) 2040 0.84 单核细胞 (M) 38 0.120.8,(二)临床意义,由于外周血中白细胞的组成主要是中性粒细胞和淋巴细胞,尤其以中性粒细胞为主。故在大多情况下,白细胞总数的增加或减少主要受中性粒细胞数量的影响。因此,白细胞的增加或减少通常就与中性粒细胞的增加或减少有着密切关系和相同意义,中性粒细胞,中性粒细胞生成 中性粒细胞增多 中性粒细胞减少 中性粒细胞的核象改变 中性粒细胞形态异常,中性粒细胞生成,中性粒细胞生成,干细胞池 分裂池45天(原粒、早幼粒、中幼粒) 成熟池35天(晚幼粒、杆状核) 储备池35天( 杆状核、分叶核) 外周血液1012小时(循环池、边缘池) 组织中13天 死亡,中性粒细胞增多,生理性增多 病理性增多 反应性增多 异常增生性增多,中性粒细胞增多,生理性增多 1. 年龄:WBC分类计数,不同年龄差别很大, 主要为粒细胞同淋巴细胞比例变化 2.日间变化 3.妊娠和分娩 4.气温、情绪、运动等可致暂时性升高 呈一过性增高,不伴有白细胞质量的变化,中性粒细胞增多,病理性增多 1. 反应性增多 机体对各种病因刺激的应激反应,动员 骨髓贮备池中的粒细胞释放或边缘池粒细 胞进入血循环。增多的粒细胞大多为成熟 的分叶核粒细胞或较成熟的杆状核粒细胞,1.反应性增多 多见于:,1)急性感染 2)广泛组织损伤或坏死 3)急性溶血 4)急性失血,5)急性中毒: 6)恶性肿瘤 7)其他:风湿、痛风、 缺氧及某些药物,急性感染或炎症:最常见 1)细菌:化脓性球菌最明显,杆菌(大肠b、绿脓) 2)病毒:流热、乙脑、狂犬病等 3)其他:真菌、放线菌、立克次体(斑疹伤寒)、 螺旋体(钩体、梅毒)、寄生虫(肺吸虫) 增高程度与病原体种类、感染部位和程度以及机 体的反应性等有关,反应性增多,广泛组织损伤或坏死:严重外伤、手术创伤、大面积烧伤、冻伤以及血管栓塞(心肌梗死、肺梗死)所致局部缺血性坏死等使组织严重损伤者,在1236h内WBC增高,以N增多为主,反应性增多,急性溶血:缺氧、分解产物刺激BM贮备池粒细胞释放 急性失血:大出血,WBC 12h内迅速上升,达(1020)109/L,主要是N增多。内出血(消化道大出血、脾破裂、输卵管妊娠破裂)更显著。其增高常早于RBC、Hb的下降,反应性增多,急性中毒: 1)外源性:化学物质、药物如汞、铅、安眠药;生物毒素如昆虫毒、蛇毒;植物毒素如毒蕈中毒 2)内源性:尿毒症、糖尿病酮症酸中毒、子痫、内分泌疾病危象,反应性增多,恶性肿瘤:非造血系恶性肿瘤(刺激释放、产生促粒细胞生成因子、破坏释放调控),WBC持续增高,以N增多为主,反应性增多,其他:类风湿性关节炎、自免溶贫、痛风、严重缺氧;应用皮质激素、肾上腺素等,反应性增多,异常增生性增多,急性髓细胞白血病(AML) 1)粒细胞白血病 ( M1, M2 , M3, M4, M6 ) 慢粒白血病(CML) 真红 2)骨髓增殖性疾病 原发性PC增多症 (MPD) 原发性骨髓纤维化症 其特点为:以一种血细胞成分增多为主,常伴有一种或两种其他血细胞的增多,中性粒细胞减少,粒细胞减少症:中性粒细胞绝对值低于 1.5 109 / L 粒细胞缺乏症:中性粒细胞绝对值低于 0.5 109 / L,中性粒细胞减少,1、感染:病毒常见;G 杆菌(伤寒)。 某些 严重细菌感染WBC非但不高反而可降低 2、血液疾病:再障、粒细胞减少症、部分白血 病(非白血性白血病)、 巨幼贫、恶组等 3、理、化因素:放射线、化学物品及药物 4、单核-吞噬细胞系统功能亢进:脾亢等 5、自身免疫性疾病:如SLE,中性粒细胞的核象改变,中性粒细胞的核象是指粒细胞的分叶状况,它反映粒细胞的成熟程度,而核象的改变可反映某些疾病的病情和预后 核左移:周围血中出现不分叶核粒细胞的百 分率超过5%者 核右移:周围血中中性粒细胞核出现5叶或更 多分叶,其百分率超过3%者,中性粒细胞的核象改变,核左移:周围血中出现不分叶核粒细胞的百分率超过5%时,称为,(1)、核左移 再生性左移:核左移+WBC。表示机体的反应性强,骨髓造血功能旺盛,能释放大量粒细胞至外周血。见于感染、急性中毒、急性溶血、急性失血等 1)轻度左移:WBC略,N略,Nst5%,感染轻,机体抵抗力强 2)中度左移:WBC,N,Nst10%,少数晚幼及中毒性改变,严重感染 3)重度左移:WBC明显,N明显,Nst25%,出现更幼稚的粒细胞,常见于粒白或N类白,中性粒细胞的核象改变,(1)、核左移 退行性左移:核左移+WBC不增高或 严重感染(伤寒、败血症)机体反应低下,骨髓释放粒细胞的功能受阻 再障、粒减骨髓造血功能减低,粒细胞生成和成熟受阻,中性粒细胞的核象改变,中性粒细胞的核象变化,明显左移,原粒,左移,正常,右移,中幼,杆状核,晚幼,早幼,2叶,3叶,4叶,5叶,核右移:周围血中分叶核粒细胞分叶过多,分叶在5叶以上者超过3%,常伴有WBC减低。见于巨幼贫及BM造血功能减退。,(2)、核右移 缺乏造血物质、DNA减低或BM造血功能减退。见于巨幼细胞性贫血、恶生贫血,应用抗代谢药物治疗,炎症恢复期。疾病进行期突然出现核右移,表示预后不良,中性粒细胞的核象改变,中性粒细胞的核象改变,中性粒细胞形态异常,1、中毒改变 细胞大小不均 空泡形成 中毒颗粒 核变性 2、球形包涵体 3、巨多分叶核粒细胞:见于巨幼贫或抗代谢药 治疗后 4、Auer小体:白细胞质中呈紫红色细杆状物, 1条或多条,只出现于白血病细胞 5、其他,大小不等:病程较长的化脓性炎症,N大小悬殊,内毒素作用下骨髓前期细胞发生顿挫不规则分裂所致,中毒颗粒:比正常中性颗粒粗大,大小不等,分布不均匀,染色较深,呈黑色或紫黑色。此种颗粒在较严重的化脓性感染及大面积烧伤等情况下多见,空泡:可为单个,但常为多个。大小不等,亦可在核中出现。被认为细胞脂肪变性或颗粒缺失,核变形:胞体肿大、结构模糊、边缘不清晰、核固缩、核肿胀、核碎裂和核溶解等,以上各种改变可单独出现或同时存在于中性粒细胞中,它反映细胞损伤程度,Dhle bodies:局部嗜碱性区域,呈圆形、梨形或云雾状,界限不清,染成灰蓝色,直径约12m。常见于严重感染,巨多分叶核中性粒细胞:胞体大,直径达1625m,核分叶在5叶以上,甚至在10以上,染色质疏松。常见于巨幼贫、抗代谢药物治疗后,Auer bodies:紫红色细杆状物质,长约16m,1 条或数条不定。只出现在白血病细胞中,故见到棒状小体即可确诊为白血病,中性粒细胞形态异常,1、中毒改变 2、球形包涵体(Dohle bodies) 3、巨多分叶粒细胞 4、棒状小体(Auer bodies),嗜酸性粒细胞的生理功能:抑制嗜碱性粒细胞和肥大细胞合成与释放活性物质,吞噬其释出颗粒,并分泌组胺酶以破坏组胺,从而起到限制过敏反应的作用。 【参考值】 成人(0.020.5)109/L,嗜酸性粒细胞,1.变态反应性疾病:支气管哮喘、药物过敏、荨麻疹、 异体蛋白过敏、血管神经性水肿、血清病等 2.皮肤病:湿疹、剥脱性皮炎、银屑病等 3.寄生虫病:血吸虫、华支睾吸虫、肺吸虫、线虫等 4.血液病:慢粒、真红、多发性骨髓瘤、E白血病 5.某些恶性肿瘤:尤其是癌转移或有坏死灶的恶性肿瘤 6.某些传染病:恢复期,唯独猩红热急性期 7.其他:风湿性疾病、皮质功能减退症等,嗜酸性粒细胞增多,广州管圆线虫病 福寿螺 北京蜀国演义酒楼 北京友谊医院热带病研究所 纪爱萍,嗜酸性粒细胞减少,1、长期应用皮质激素 2、伤寒极期、大手术、烧伤等应激状态,嗜碱性粒胞,参考值:成人(00.1)109/L 增多 1、过敏性疾病:药物、食物、吸入物超 敏反应等 2、血液病:CML、MF、慢性溶血等 3、恶性肿瘤:特别是转移癌,淋巴细胞,参考值:成人(0.84)109/L,淋巴细胞,增多: 1、生理性增多:儿童期,出生后46天至46岁 2、病理性增多 1)感染:病毒;细菌(百日咳、结核、布氏杆菌) 2)急淋、慢淋,淋巴瘤 3)急性传染病恢复期 4)移植排斥反应: 移植物抗宿主反应( GVHR ) 移植物抗宿主病( GVHD ),移植物抗宿主反应 ( graft versus host reaction GVHR ),免疫功能严重低下的个体接受含有大量免疫细胞的异体移植物后,移植物中的免疫细胞可被受者的组织相容性抗原激活,产生针对受者组织器官的免疫应答,导致受者组织损伤,即GVHR,淋巴细胞,减少 1、应用皮质激素、烷化剂等 2、丙球缺乏症、免疫缺陷性疾病、长期接触 放射线等,异形淋巴细胞,在某些因素刺激下,可使淋巴细胞增 生,并出现某些形态学变化,这种形态变 异的不典型淋巴细胞,称,根据细胞形态学特点将其分为以下三型,型(泡沫型):最多见,胞体比正常L稍大,多为圆形、椭圆形或不规则形。核圆形、肾形或分叶状,常偏位。核染色质粗糙,呈粗网状或小块状,排列不规则。胞质丰富,染深蓝色,含空泡或呈泡沫状,型(不规则型):胞体较大,外形常不规则,可有多数伪足。核形状及结构与型相同或更不规则。染色质粗糙致密。胞质丰富,染淡蓝或灰蓝色,有透明感,边缘处着色较深,一般无空泡,型(幼稚型):胞体较大,核圆形或卵圆形。染色质细致呈网状排列,可见12个核仁。胞质深蓝色,可有少数空泡,异形淋巴细胞,正常人不超过2%。增高见于: 1、病毒感染:传单、流热等 2、药物过敏 3、输血、血透、体外循环术后 4、其他:免疫性疾病、放疗等,单核细胞,主要功能 1、诱导免疫反应 2、吞噬杀灭某些病原体 3、吞噬清除衰老死亡细胞 4、抗肿瘤活性 5、对白细胞生成的调节,单核细胞增多 1、生理性增多 儿童、婴幼儿 2、病理性增多 1)某些慢性感染疾病:结核、疟疾、感染 性心内膜炎等 2)急性传染病恢复期 3)某些血液病:急单、 粒缺恢复期; MDS、恶组、淋巴瘤等,单核细胞,附:类白血病反应,定义:指机体对某些刺激因素所产生的类似白血病表现的血象反应。周围血中白细胞数大多明显增高,并可有数量不等的幼稚细胞出现。当病因去除后,类白血病反应也逐渐消失 病因:很多,以感染及恶性肿瘤最多见,附:类白血病反应,类型 (1)中性粒细胞型 (2)嗜酸性粒细胞型 (3)淋巴细胞型 (4)单核细胞型,中性粒细胞类白与慢粒鉴别,类白 病因 有原发病 表现 原发病症状 WBC 中度增高 粒细胞中毒 明显 E、B细胞 不增多 RBC PLT 无明显 M 无明显改变 NAP 积分明显增高 Ph染色体 无,慢粒 无 消瘦低热显著脾大 显著增高各期均见 不明显 常增多 早期轻度、晚期均少 明显异常 积分显著减低,可为0 90%以上阳性,三、网织红细胞(Ret)计数,是晚幼红细胞到成熟红细胞之间尚未完全成熟的红细胞,胞质中尚残存多少不等的核糖核酸等嗜碱性物质,(一)参考值,百分数:成人 0.0050.015(0.5%1.5%) 绝对值:(2484)109/L,(二)临床意义,Ret增多 1、反映骨髓造血功能 Ret减少 2、作为贫血治疗的疗效判断及诊断性 治疗观察的指标 3、作为某些疾病病情观察指标,四、血小板(PC)计数,在血液中,血小板是最小的细胞。血小板在电子显微镜下像橄榄形、盘状,也有不规则形。正常人1/3的血小板平时贮存在脾脏

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