药物分析第六章芳酸类非甾体抗炎药物的实际分析.ppt

1,第六章 芳酸类 非甾体抗炎药物的分析,2,结构,性质,鉴别,杂质检查,含量测定,体内药物分析,3,芳酸类非甾体药物 药理作用：抗炎、抗风湿、止痛、 退热、抗凝血 应用：关节炎、发热、各种慢性疼痛,4,分类,水杨酸 邻氨基苯甲酸 邻氨基苯乙酸 芳基丙酸 吲哚乙酸 苯并噻嗪甲酸,5,第一节 典型药物的结构与性质,一、典型药物与结构特点 苯环各种取代基 羧基游离、盐、酯 氨基酰胺,6,水杨酸类,7,典型药物：,8,邻氨基苯甲酸类,典型药物：,9,邻氨基苯乙酸类,典型药物：双氯芬酸钠,10,芳基丙酸类,典型药物：布洛芬、酮洛芬、萘普生,11,吲哚乙酸类,典型药物：吲哚美辛,12,苯并噻嗪甲酸类,典型药物：吡罗昔康、美洛昔康,13,其他非甾体抗炎药,14,二、主要理化性质 （一）酸性 游离羧基酸性较强 芳酸芳取代脂肪酸 可用酸碱滴定法测定含量,15,（二）水解性 酯键、酰胺键能水解 水解产物可用于鉴别 水解反应可用于定量测定,16,（三）光谱特征 红外：鉴别 紫外：鉴别、含量测定、均匀度、溶出度,（四）基团或元素特性 酚羟基、二苯甲酮、芳伯胺基、硫元素,17,第二节 鉴别试验,一、与三氯化铁反应 1.水杨酸反应 与三氯化铁反应生成紫堇色配合物,18,注意： 1.反应条件：pH46 ，强酸性环境产物分解 2.反应灵敏，在稀溶液中进行 3.不同药物产物颜色略有差异 4.阿司匹林紫堇色,19,2.酚羟基反应 对乙酰氨基酚加三氯化铁显蓝紫色,20,二、缩合反应 1.酮或醛结构与肼基缩合,21,三、重氮化偶合反应 芳香第一胺类鉴别反应 具芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物,22,直接：对氨基水杨酸钠、盐酸普鲁卡因、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺 间接：对乙酰氨基酚（扑热息痛）、醋氨苯砜、贝诺酯,23,四、氧化反应 甲芬那酸+硫酸+重铬酸钾深蓝色 棕绿色 吲哚美辛+硫酸+重铬酸钾紫色 吲哚美辛+盐酸+亚硝酸钠绿色 黄色,24,五、水解反应,25,六、特征元素的反应 1.氯元素的鉴别 两种鉴别方法 2.硫元素的鉴别,26,七、光谱法 （一）紫外-可见分光光度法 1.最大吸收波长发 2.最大与最小吸收波长法 3.吸光度法 4.吸光度比值法 （二）红外分光光度法,27,八、色谱法 （一）TLC 对照品与供试品斑点位置一致 （二）HPLC 对照品与供试品保留时间一致,28,第三节 特殊杂质及其检查法,一、阿司匹林和双水杨酸酯 杂质来源： 原料残存（生产过程中乙酰化不完全） 水解产生（贮存过程中水解产生）,29,（一）合成路线：,30,（二）阿司匹林中游离水杨酸及有关物质 1.水杨酸 来源：原料、水解产物 酚羟基有色醌类杂质,检查方法HPLC法 固定相：ODS 流动相：乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水 按照外标法以峰面积计算,31,2.有关物质的检查,32,检查方法HPLC法 固定相：ODS 流动相：A 乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水 B 乙腈 对照液：0.5%供试品溶液 要求：供试品溶液杂质峰面积和不得大于对照液峰面积,33,（三）双水杨酸酯中游离水杨酸的检查 水杨酸+Fe3+显色 测定530nm吸光度 要求：供试品溶液吸光度小于对照液 原料药：0.5% 制剂：1.5%,34,二、甲芬那酸中2,3-二甲基苯胺 （一）合成工艺,35,（二）检查方法 GC程序升温法检查2,3-二甲基苯胺 限度：0.01% 供试品溶液、对照品溶液,36,三、二氟尼柳中有关物质的检查,37,1.有关物质A,高低浓度对比法 方法：,38,供试品,对照品,39,判断： 控制杂质斑点个数，控制杂质种类 供试品溶液所显杂质斑点不得深于对照溶液的主斑点（或荧光强度）,40,优点：以供试品的稀溶液作为对照液，不需要杂质对照品，简单、价廉，还可配成几种限量的对照溶液； 缺点：不同物质，不同Rf值比较，准确度差、直观性差。,41,2.有关物质B HPLC法 固定相：C18 流动相：水-甲醇-乙腈-冰醋酸 检测波长：254nm 要求：杂质峰面积和小于对照液主 峰面积,42,第四节 含量测定,一、酸碱滴定法 1. 直接滴定法,43,阿司匹林 ChP（2010） 取本品约0.4g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml，溶解后，加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）滴定。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。,44,45,（1）测定方法及计算 反应摩尔比为11,（2）讨论 中性乙醇 溶解阿司匹林且防止酯键水解。“中性”是对中和法所用的指示剂而言,46, 优点：简便、快速 缺点：酯键水解干扰（不断搅拌、快速滴定） 酸性杂质干扰（如水杨酸） 适用范围：不能用于含水杨酸过高或制剂分 析，只能用于合格原料药的含量测定,47,2. 水解后剩余滴定法 酯的一般含量测定方法,阿司匹林:,2NaOH（过量）H2SO4Na2SO42H2O,水解：,剩余滴定：,48,USP方法：取本品约1.5g，精密称定,加入氢氧化钠滴定液（0.5mo1/L）50.0m1，混合，缓缓煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（0.25mo1/L）滴定剩余的氢氧化钠，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的氢氧化钠滴定液（0.5mol/l）相当于45.04mg的C9H8O4。,49,反应摩尔比为12 优点：消除了酯键水解的干扰 缺点：酸性杂质干扰,50,取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于阿司匹林0.3g），置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）溶解后，振摇使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）至溶液显粉红色，再精密加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）40m1，置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。,3.两步滴定法 阿司匹林片、阿司匹林肠溶片 氯贝丁酯,51,第一步 中和,52,第二步 水解后剩余滴定,水解：,2NaOH（过量）H2SO4Na2SO42H2O 药物与氢氧化钠反应摩尔比为11 本法消除了酸性杂质的干扰，降低了酯键水解的干扰,53,片剂含量测定结果的计算,54,二、紫外可见分光光度法 1. 直接紫外可见分光光度法 2.柱分配色谱紫外分光光度法 三、HPLC,55,第五节 体内药物分析 一、血浆中阿司匹林与水杨酸的HPLC测定法 二、人血浆中布洛芬的HPLC测定与立体选择性代