Chap巴比妥类药物分析.ppt

一、结构与性质关系分析,二、鉴别试验,三、杂质检查,四、含量测定,本 章 内容,1、常见巴比妥类药物结构,2、巴比妥类药物主要理化性质,一、巴比妥类药物性质与结构分析,巴比妥类药物结构通式,目 录,结构通式,（一）结构通式,丙二酰脲结构母核 C5位双取代衍生物。 共性:丙二酰脲 不同的理化性质:取代基团,苯巴比妥,白色有光泽的结晶性粉末,1、常见巴比妥类药物结构,苯巴比妥钠,白色结晶性颗粒或粉末,司可巴比妥钠,白色粉末,异戊巴比妥 （amobarbital）,白色结晶性粉末,异戊巴比妥钠,白色颗粒或粉末,注射用硫喷妥钠,淡黄色粉末,2、主要理化性质,溶解性,钠盐水解,弱酸性,不饱和烃类取代基的还原性质,与重金属离子的呈色反应,芳环取代基,紫外吸收特征,返 回,溶解性,钠盐皆易溶于水，不溶于有机溶剂； 非钠盐药物在水中极微溶解,溶于有机溶剂,返 回,弱酸性,二酰亚胺结构，水溶液中发生二级电离，呈现弱酸性 pKa为7.38.4,钠盐水解,返 回,吸湿情况下水解为无效物质 室温和pH10以下水解较慢 温度升高以及pH超过11，水解加速。 药典规定本类药物钠盐应检查碱度,与重金属离子的呈色反应,在适宜pH条件下，可与金属离子，如Ag+、Cu2+、Co2+、Hg2+等，生成有特征颜色的物质。,返 回,不饱和烃类取代基的还原性质,司可巴比妥钠的取代基：含有双键具有还原性，与氧化性试剂反应,芳环取代基,苯巴比妥 及苯巴比妥钠 均含有苯环 取代基，可利用苯环的特征反应 区别此类药物和不含芳环的巴比妥类药物。,返 回,紫外吸收特征,酸性条件：没有紫外吸收 碱性条件：电离成共轭体系，电离分为二级：碱性不同，UV不同。 根据pH = 2、10、13条件下吸收情况的不同，可对巴比妥类药物进行鉴别及含量测定 硫喷妥钠在酸性和碱性条件下均有紫外吸收。,巴比妥类药物的紫外吸收,pH = 2，无吸收 pH = 10，一级电离，吸收峰240nm； pH 13，二级电离，吸收峰255nm。,硫喷妥钠： 酸性时，具有287nm和238nm两个吸收峰 pH = 10时，304nm和255nm pH = 13时，只有304nm,（一）丙二酰脲类的鉴别试验,（二）钠盐的鉴别试验,（三）取代基的鉴别试验,（四） 红外吸收光谱,（五）熔点测定,【课堂活动】,二、巴比妥类药物的鉴别试验,药典四部通则“一般鉴别实验”收载 包括银盐反应和铜盐反应。,（一）丙二酰脲类的鉴别试验,1银盐反应,试剂：碳酸钠溶液，硝酸银试液 现象：“一清二白” 苯巴比妥、苯巴比妥钠、异戊巴比妥、异戊巴比妥钠、司可巴比妥钠的鉴别。,取供试品约0.1g，加碳酸钠试液1ml与水10ml，振摇2分钟，滤过，滤液中逐滴加入硝酸银试液，即生成白色沉淀，振摇，沉淀即溶解；继续滴加过量的硝酸银试液，沉淀不再溶解。,返 回,方法,2铜盐反应,试剂：铜吡啶试液 巴比妥类药物为紫堇色或紫色 含硫巴比妥类药物呈绿色。,方法：取供试品约50mg，加吡啶溶液（110）5ml溶解后，加铜吡啶试液1ml，即显紫色或生成紫色沉淀,（二）钠盐的鉴别试验,根据钠离子 性质鉴别钠盐类药物。 苯巴比妥钠、司可巴比妥钠、注射用硫喷妥钠,中国药典（2015年版）四部“一般鉴别实验”钠盐,（1）取铂丝，用盐酸润湿后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，火焰即显鲜黄色。 （2）取供试品的碳酸钾溶液，加焦锑酸钾试液，煮沸置于冰水中冷却，生成白色沉淀。,2Na+ +K2H2Sb2O72K+ +Na2H2Sb2O7 ,（三）取代基的鉴别试验,返 回,（1）苯环的鉴别实验,与硫酸-亚硝酸钠的反应,取供试品约10mg，加硫酸2滴，与亚硝酸钠约5mg，混合，即显橙黄色，随即转橙红色；,哪种药物含苯环？,甲醛-硫酸反应,取供试品约50mg，置试管中，加甲醛试液1ml，加热煮沸，冷却，沿管壁缓缓加入硫酸0.5ml，使成两液层，置水浴中加热，接界面显玫瑰红色。,（2）不饱和烃取代基的鉴别实验,司可巴比妥钠具有烯烃，可与氧化试剂发生反应,（2）司可巴比妥钠药典鉴别实验,取本品0.1g，加水10ml溶解后，加碘试液2ml，所显棕黄色在5分钟内消失。,在碱性条件下使高锰酸钾溶液褪色,（3）硫元素的鉴别实验,中国药典（2015年版）对注射用硫喷妥钠的鉴别,硫代巴比妥,适宜方法,硫离子,硫化物反应,硫喷妥钠药典鉴别实验方法：,取本品约0.2g，加氢氧化钠试液5ml与醋酸铅试液2ml，生成白色沉淀；加热后沉淀变为黑色。,（四）熔点测定,司可巴比妥钠、异戊巴比妥钠、苯巴比妥钠、注射用硫喷妥钠。 钠盐类药物，在进行熔点测定之前，需要先酸化，分离出游离巴比妥母体药物再测定熔点。,返 回,（五） 红外吸收光谱,中国药典对巴比妥类药物原料鉴别,（六）色谱法（七）显微结晶法（略）,【课堂活动】,巴比妥类鉴别实验制剂与原料药有没有区别，试以苯巴比妥片为例加以说明？,有区别。苯巴比妥片需要先用无水乙醇提取后，与辅料分离，才可以鉴别。,药物粉末,加水溶解,苯巴比妥,溶解性差,全部溶解,注射用硫喷妥钠和司可巴比妥钠,铜吡啶试液,紫色,铜吡啶试液,绿色,紫色,注射用硫喷妥钠,司可巴比妥钠,目 录,已知有三种药物粉末，可能为苯巴比妥、注射用硫喷妥钠和司可巴比妥钠，如何利用简单的试验来鉴别？试验现象如何？,杂质来源,检查项目,中国药典2015版苯巴比妥【检查】,三、巴比妥类药物杂质检查,目 录,杂质来源,生产和贮存过程,反应中间体,副产物,分解产物,影响药物质量,返 回,三、巴比妥类药物杂质检查,中国药典2015版苯巴比妥【检查】,（一）酸度,（二）乙醇溶液的澄清度,（三）中性或碱性物质,三、巴比妥类药物杂质检查,中国药典2015版苯巴比妥【检查】,（一）酸度,三、巴比妥类药物杂质检查,取本品0.20g，加水10ml，煮沸搅拌1分钟，放冷，滤过，取滤液5ml，加甲基橙指示液1滴，不得显红色。,（二）乙醇溶液的澄清度,苯巴比妥酸 等杂质 苯巴比妥酸不溶于乙醇 苯巴比妥溶于乙醇,取本品1.0g，加乙醇5ml，加热回流3分钟，溶液应澄清。,返 回,（三）中性或碱性物质,酰胺、酰脲类等杂质 不溶于氢氧化钠而溶于乙醚 提取容量法测定限量,取本品1.0g，置分液漏斗中，加氢氧化钠试液10ml溶解，加水5ml、乙醚25ml，振摇1分钟，分取醚层，用水振摇洗涤3次，每次5ml，取醚液用干燥滤纸滤过，滤液置105恒重的蒸发皿中，蒸干，105干燥1小时，遗留残渣不得过3mg。,返 回,巴比妥类药物常用含量测定方法,（一）银量法,（二）溴量法,（三）紫外分光光度法,四、巴比妥类药物含量测定,（一）、银量法,适宜的碱性溶液，银离子，定量结合成银盐 测定本类药物及其制剂的含量 中国药典（2015年版），异戊巴比妥及其钠盐和制剂、 苯巴比妥原料、苯巴比妥钠的原料及注射剂 苯巴比妥片剂的含量测定改为高效液相色谱法。,反应式,中国药典2015版方法,基本原理,（一）、银量法,定量关系,试验注意事项,返 回,四、巴比妥类药物含量测定,1银盐反应反应式,返 回,四、巴比妥类药物含量测定,基本原理,（一）、银量法,巴比妥类药物,AgNO3,可溶性一银盐,稍过量 AgNO3,二银盐沉淀,终点,溶液混浊，指示终点,四、巴比妥类药物含量测定,（一）、银量法,溶剂系统：甲醇和3无水碳酸钠溶液 终点指示：银-玻璃电极系统电位法,获得敏锐终点的改进,四、巴比妥类药物含量测定,返 回,中国药典2015版苯巴比妥的含量测定,取本品约0.2g，精密称定，加甲醇40ml使溶解，再加新制的3无水碳酸钠溶液15ml，照电位滴定法，用硝酸银滴定液（ 0.1mol/L ）滴定。每1ml硝酸银滴定液( 0.1mol/L ) 相当于23.22mg 的苯巴比妥（C12H12N2O3） 。,返 回,定量关系,（一）、银量法,滴定度,计算公式,四、巴比妥类药物含量测定,返 回,滴定度 T=23.22mg/ml,苯巴比妥的分子量为232.24，1mol硝酸银相当于1mol苯巴比妥，所以T=？,（一）、银量法,返 回,四、巴比妥类药物含量测定,计算公式,1. 无水碳酸钠溶液需临用时新鲜配制，因碳酸钠会吸收空气中的CO2，产生NaHCO3，使含量下降； 2. 银电极在使用前需要使用稀硝酸浸洗12分钟，再用水冲洗干净后使用。,（一）、银量法,试验注意事项,四、巴比妥类药物含量测定,返 回,计算示例,称取苯巴比妥0.2146g，用银量法测定含量，滴定到终点时用去AgNO3滴定液（0. 0985mol/L)9.12ml，每1ml AgNO3滴定液（0. 1mol/L) 相当于23.22mg的C12H12N2O3，求其含量。,（二）、溴量法,5位取代基含有双键 的巴比妥类药物 利用双键的加成特点，采用溴量法测定含量。 中国药典（2015年版）司可巴比妥钠及其制剂,四、巴比妥类药物含量测定,反应式,中国药典2015版方法,基本原理,定量关系,（二）、溴量法,溴量法滴定液,四、巴比妥类药物含量测定,返 回,反应式,（二）、溴量法,返 回,四、巴比妥类药物含量测定,基本原理,（二）、溴量法,与药物反应 的溴滴定液,剩余,I2,KI,过量、定量 溴滴定液,Na2S2O3滴定,V=V总V剩,四、巴比妥类药物含量测定,返 回,中国药典2015版司可巴比妥钠的含量测定,（二）、溴量法,取本品约0.1g，精密称定，置250ml碘瓶中，加水10ml，振摇使溶解，精密加溴滴定液（0.05mol/L）25ml，再加盐酸5ml，立即密塞并振摇1分钟，在暗处静置15分钟后，注意微开瓶塞，加碘化钾试液10ml，立即密塞，摇匀后，用硫代硫酸钠滴定液（ 0.1mol/L ）滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml滴定液( 0.05mol/L ) 相当于13.01 mg 的司可巴比妥钠（C12H17N2NaO3）。,四、巴比妥类药物含量测定,返 回,（二）、溴量法,溴量法滴定液,溴易于挥发，且具有较强的腐蚀性，影响滴定液浓度的准确性，不直接用溴配制溴滴定液 溴滴定液：定量的溴酸钾和过量的溴化钾混合配制，酸性条件下，二者反应生成新生态的溴，与被测物质作用,四、巴比妥类药物含量测定,BrO3-+5Br - +6H+ = 3Br2+3H2O,溴酸钾3.0g与溴化钾15g，加水溶解使成1000ml,0.05mol/L 溴滴定液的配制,四、巴比妥类药物含量测定,返 回,定量关系,（二）、溴量法,滴定度,计算公式,四、巴比妥类药物含量测定,返 回,滴定度 T=13.01 mg/ml,（二）、溴量法,司可巴比妥钠的分子量为260.27，1mol溴或1mol硫代硫酸钠与0.5mol司可巴比妥钠相当，所以试验中溴滴定液和硫代硫酸钠的滴定度13.01mg。,返 回,四、巴比妥类药物含量测定,计算公式,V0,空白试验回滴定所消耗硫代硫酸钠滴定液的体积（ml）； 空白试验：消除滴定过程中仪器、试剂及溴挥发等引入的误差,四、巴比妥类药物含量测定,要注意V0,称取司可巴比妥钠0.1078g，用溴量法测定含量，总共加入溴滴定液（0. 05mol/L)25ml，剩余的溴用Na2S2O3滴定液（0. 1011mol/L) 滴定到终点时用去16.80ml，空白试验用去Na2S2O3滴定液25.00ml。每1ml溴滴定液（0. 05mol/L) 相当于13.01mg的司可巴比妥钠，求其百分含量。,称取司可巴比妥钠胶囊（标示量为0.1g）20粒，除去胶囊后测得内容物总量为3.0780g，称取0.1536g，用溴量法测定含量，共加入溴滴定液（0. 05mol/L)25ml，剩余的溴用Na2S2O3滴定液（0. 1008mol/L) 滴定到终点时用去17.94ml，空白试验用去Na2S2O3滴定液25.00ml。每1ml溴滴定液（0. 05mol/L) 相当于13.01mg的司可巴比妥钠，计算该胶囊中百分标示量。,（三）、紫外分光光度法,适宜的酸碱度条件产生特征紫外吸收 灵敏度高，专属性强 紫外分光光度法应用于巴比妥类药物的制剂分析及体内药物分析 中国药典（2015年版）注射用硫喷妥钠,四、巴比妥类药物含量测定,中国药典2015版方法,基本原理,定量公式,（三）、紫外分光光度法,四、巴比妥类药物含量测定,返 回,（三）、紫外分光光度法,基本原理,硫喷妥钠 酸性条件下，有287nm和238nm两个吸收峰 pH = 10时，吸收峰移至304nm和255nm pH = 13时，只有304nm的吸收峰。,返 回,四、巴比妥类药物含量测定,（三）、紫外分光光度法,中国药典2015版注射用硫喷妥钠的含量测定,取装量差异下的内容物，混合均匀，精密称取适量（约相当于硫喷妥钠0.25g），置500ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取适量，用0.4氢氧化钠溶液定量稀释制成每1ml中约含5g的溶液，照紫外-可见分光光度法，在304nm的波长处测定吸光度；另