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文档简介
肉毒梭菌,1,2,形态特征,3,肉毒梭菌,一、肉毒梭菌的生物学特性 1、形态与染色 肉毒梭菌属于厌氧性梭状芽胞杆菌属,革兰氏染色阳性(老龄菌是阴性),约为41m的大杆菌, 多单在,偶见成双或短链,两侧平行,两端钝园,直杆状或稍弯曲,芽胞为卵圆形,大于菌体宽度,位于次极端,使菌体呈匙形或网球拍状,偶有位于中央,常见很多游离芽胞。 有48根周生鞭毛,运动迟缓,无荚膜。,4,病毒因子,5,2、培养特性,最严格的厌氧菌 生长最适温度:28 37 :pH为6.87.6,产毒的最适pH为7.8 8.2。 产毒培养温度:不同菌型产毒的最适培养温度不完全相同。C、D型温度高些为宜,35 培养3d即可,而E型菌低温度长时间培养效果较好。 对营养要求不高 :在普通培养基上都能生长。,肉毒梭状芽孢杆菌菌落,在固体培养基表面上,形成类圆形,边缘不整齐,约3毫米左右的菌落。菌落半透明,表面一般比较光滑也有的呈颗粒状,界线不明显,向外扩散。呈绒毛网状,常常扩散成菌苔。,6,2、培养特性,在含有肉渣的液体或者半流动培养基中,肉毒梭菌生长旺盛且产生大量气体,A、B、F三型表面浑浊,底部有粉状和颗粒状沉淀,并能消化肉块,变黑有臭味;而C、D、E三型表明清亮,絮片状生长,粘贴于管壁。,肉毒梭状芽孢杆菌菌落,在葡萄糖鲜血琼脂平板上,菌落较小,扁平,颗粒状。中央低落,边缘不规则,有的菌落还有大的溶血环。 在卵黄琼脂平板上生长,菌落及其培养基周围表面覆盖着特有的彩虹样薄层,但G型没有。,7,3、抵抗力,本菌芽胞抵抗力强,在湿热100可生存5小时;干热1802小时、高压蒸汽12130分钟才能将本菌芽胞杀死。肉毒毒素不耐热,10020分钟即可破坏。,8,二、肉毒梭菌的致病性,肉毒梭菌能产生外毒素即肉毒毒素(大分子蛋白),根据毒素的抗原特异性将其分为A、B、C (1、2) 、D、E、F、G七个型别。与毒素型别相对应,肉毒梭菌也分为同样的七个型别。其中A、B、E、F四型毒素对人有不同程度的致病性。 A型毒素经602分钟加热,差不多能被完全破坏,而B、E二型毒素要经702分钟才能被破坏;C、D二型毒素对热的抵抗更大些;C型毒素要经过902分钟加热才能完全破坏,不论如何,只要煮沸1分钟或75加热510分钟,毒素都能被完全破坏。肉毒毒素对酸性反应比较稳定,对碱性反应比较敏感。某些型的肉毒毒素在适宜条件下,毒性能被胰酶激活和加强。,9,致病物质,主要依靠神经外毒素。其作用机制:肉毒杆菌毒素作用于胆碱能运动神经末梢,以某种方式拮抗钙离子的作用,干扰乙酰胆碱从运动神经末梢的释放,使肌纤维不能收缩。肉毒杆菌毒素不阻断神经兴奋的传播,神经和肌肉都没有兴奋性和传导性的损害。这种作用也称为化学去神经作用。,10,致病机理 肉毒毒素是一种神经麻痹毒素,主要抑制神经末梢释放乙酰胆碱,引起肌肉松弛麻痹,特别是呼吸肌麻痹导致死亡。 肉毒毒素的毒性极强,是目前已知在天然毒素和合成毒剂中毒性最强的生物毒素,据称,精制毒素1克能杀死400万吨小白鼠,一个人的致死量大概1微克左右。 肉毒中毒一年四季均可发生。美国以罐头发生中毒较多,日本以水产品较多;我国以发酵食品(如:臭豆腐、豆瓣酱、豆豉等)发生中毒较多。,11,所致疾病,成人肉毒中毒 该病是单纯性毒素中毒,而非细菌感染引起。多见于食入肉毒毒素食品后,数小时或数十小时可出现以神经末梢麻痹为主的症状,患者出现斜视、复视、眼睑下垂,严重的出现吞咽、咀嚼困难、口齿不清,进而因膈肌麻痹而死亡。患者神志清醒,不发热,很少有胃肠道症状。,12,婴儿肉毒中毒 多见于2周8个月的婴儿。由于婴儿肠道的特殊环境及缺乏拮抗肉毒梭菌的正常菌群,又食入被梭菌污染的食品,该菌在肠道内生长繁殖并产生毒素,毒素被吸收而致命。最早出现的症状是便秘,吸乳、啼哭无力,其他症状与成人肉毒中毒类似。,13,三 微生物学检验,1、取.粪便检查在显微镜检查可见革兰阳性芽胞杆菌。 2. 细菌培养:将可疑食物、呕吐物或排泄物加热煮沸20分钟后,接种于血琼脂培养基作厌氧培养,可分离出肉毒梭菌。 3. 毒素试验 (1)动物试验 将检查标本浸出液饲喂动物,或作豚鼠、小白鼠腹腔内注射。可引起动物四肢瘫痪而迅速死亡。婴儿型者则可用婴儿粪便浸出液作动物试验。 (2)中和试验 将各型抗毒素血清0.5ml注射小白鼠腹腔内,随后接种标本0.5ml同时设对照组,从而判断毒素和定型。 (3)禽眼睑接种试验 将含有毒素的浸出液0.10.3ml,注入家禽眼内角下方眼睑皮下,出现眼睑闭合、或出现麻痹性瘫痪和呼吸困难,经数十分钟至数小时死亡,可作为快速诊断。 4. 毒素检测 应用抗肉毒毒素抗体进行中和试验,检查病人血清中肉毒毒素,可对毒素分型。 5肌电图检查:有肌纤维颤动、单次刺激反应降低,多次刺激电势反而增高,有短持续期小波幅多相运动、电势增加等表现。可作为辅助诊断。,14,四 防治原则,预防本病的主要方法: 1、加强食品卫生管理和监督 2、对可疑食品可煮沸半小时以上,破坏肉毒毒素。 3、对患者早期注射足量的多价肉毒抗毒素,同时加强护理和对症治疗,尤其是维持呼吸功能,降低死亡率。,15,临床应用,在了解了毒素的结构与功能以及作用机制后,人类开始用毒素来作为有效药物。肉毒毒素被助恶治疗眼睑痉挛、痉挛性斜颈、痉挛性发音困难等疾病 美容 除皱,16,去除动态皱纹的原理,将收缩造成皱纹的肌肉麻痹掉,使肌肉不收缩,连带的也去除了皱纹。一般在注射后三、四天就可以看到效果,一周后效果就很明显。效用期约三至六个月,平均四个月。若皱纹再出现,视个人需要,可重复施打。 肉毒杆菌毒素除皱还是有一定的并发症和副作用,如注射局部有头痛;抬头纹处注射不当时会发生睑下垂;鱼尾纹处注射不当时会发生复视及闭眼不全;因注射剂量不准确,一侧多、一侧少会发生不对称的结果;进针刺破血管偶而发生出血或血肿;大剂量、反复注射可能会引起免疫复合物疾病;肌肉麻痹的结果是不能做各种表情,17,18,副作用,尽管如此,肉毒杆菌毒素除皱还是有一定的并发症和副作用,如注射局部有头痛;抬头纹处注射不当时会发生睑下垂;鱼
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