盐酸金霉素分子印迹电化学传感器的研制.pdf

第 4 3卷 2 0 1 5年 2月 分析化学 ( F E N X I H U A X U E) 研究报告 C h i n e s e J o u rna l o f A n a l y t i c a l Ch e mi s t r y 第2期 21 221 7 D OI ： 1 0 1 1 8 9 5 j i s s n 0 2 5 3 - 3 8 2 0 1 4 0 6 8 6 盐酸金霉素分子印迹 电化学传 感器的研 制 高 杨 王 伟 刘英姿 陶 强 万 雪 张娟琨 ( 天津市工业微生物重点实验室， 教育部工业微生物重点实验室，天津科技大学 生物工程学院，天津 3 0 0 4 5 7 ) 摘要构建了一种选择性检测盐酸金霉素( C T C ) 的分子印迹电化学传感器。在 N a C 1 0 溶液中， 以邻氨基 酚( O A P ) 为功能单体， 盐酸金霉素( C T C) 为模板 ， 通过循环伏安法在玻碳电极表面上聚合制备了C T C印迹敏 感膜( M I P s ) 。在含 0 0 0 5 m o V L K 3 F e ( C N ) 及 0 1 m o l L K C 1 的磷酸盐缓冲液( P B S ) 中， 应用差分脉冲伏 安法( D P V) 研究了传感器的响应性能。D P V峰电流差与 C T C浓度在 2 O 1 0 一 6 1 1 0 m o l L范围内呈线 性关系， 检出限为 1 5 x 1 0 mo l L( 3 ( r ) 。实验表明， 用甲醇 H ： S O 混合洗脱溶液可以使传感器再生， 对 C T C 的测定具有良好的重现性 ， 并具有良好的储存稳定性。传感器对于干扰物氯霉素及青霉素没有响应 ， 结构相 似的四环素、 土霉素有微弱的响应， 显示了良好的选择性。在牛奶和鸡肉实际样品中所测得的 C T C加标回收 率为 8 6 4 一 9 6 9 。与文献报道的 C T C检测方法相比， 本传感器具有低的检测限， 操作简便， 整个过程无 需衍生化处理， 响应快 ， 成本低。 关键词分子印迹聚合物；电化学传感器 ； 邻氨基酚； 盐酸金霉素 1 引 言 金霉素( C h l o r t e t r a c y l i n e ， C T C ) 属四环素类光谱抗生素的一种， 可由链霉菌培养液中提取出或以半 合成方法生产， 能够有效抑制革兰阳性菌、 阴性菌 、 立克次 氏体等， 抗菌范 围较广 。广泛应用于鱼类 、 禽 畜疾病的预防与治疗 ， 添加于饲料 中能够增加禽畜 日增重及饲料转化率。但由于药物滥用 ， 残留于动物 性食品中的金霉素对人体健康构成了潜在的危害 卫 J 。大部分国家对动物性食 品中金霉素的残 留做 出 了严格的限定。我国国标 G B T 2 2 9 9 0 - 2 0 0 8和 G B T 5 0 0 9 1 1 6 - 2 0 0 3 规定了牛奶及畜、 禽肉中金霉素残 留量， 其中牛奶中最高限量为0 1 g m L 。 目前 ， 检测金霉素 的常用方法包括高效液相色谱法 ( H P L C ) 、 免疫分析法 、 毛细血管 电泳 法 、 微生物培养法 ， 其 中， H P L C法虽然应用最广 ， 检测结果精准可靠 ， 但对样品纯度要求较高 ， 无法 满足大批量样本快速筛查的需要 ； 免疫分析法对样品纯度要求不高， 但检测结果重现性差 ； 毛细血管电 泳法分析速度快， 但灵敏度低 ； 微生物培养法适合大量样 品筛选 ， 但受抗菌活性杂质的影响不适于定量 分析 。 分子印迹聚合物 ( MI P s ) 具有较强的特异性 的分子识别能力 ， 且耐高温、 高压及酸碱腐蚀 ， 在制备 不同功能的传感器方面， 已得到广泛应用 口 。由于兼具操作简便 、 造价低廉 、 易于 自动化等优势 ， 基 于电化学聚合法 所制 备 的印迹膜传 感 器近 年来得 到迅 速发展 H 卜” ， 所 用 的单 体包 括苯胺 和 吡咯 等 ，巧 。而以邻氨基酚为单体， 可在不同电极表面电聚合， 膜厚度可控制在 1 0 1 0 0 n m， 且羟基作为潜 在的配位位点， 可进一步提高传感器的性能 。本研究采用循环伏安( C V ) 法， 以盐酸金霉素为模板分 子 ， 邻氨基酚为聚合单体 ， 构建了测定盐酸金霉素的分子印迹敏感膜 电化学传感器 ， 与 G u e r r e i r o等 制 备的金霉素印迹聚合物膜离子选择性电极相比， 本传感器具有更低的检测下限， 操作更简便。整个过程 无需衍生化处理 ， 响应快 ， 成本低 ， 选择性 良好 ， 可以满足盐酸金霉素痕量分析 的要求 ， 有望在食品检测 中得到更好的应用。 2 0 1 4 - 0 8 - 1 2收稿 ； 2 0 1 4 1 0 - 2 0接受 本文系天津市科委资助项目( N o 1 4 R C C F S F 0 0 1 4 0 ) E - ma il ：z h a n g j k t u s t e d u c a 第2期 高 杨等 ： 盐酸金霉素分子印迹电化学传感器的研制 2 1 3 2 实验部分 2 1 仪器与试剂 L K 2 0 0 5 A型电化学工作站( 天津市 兰力科化学 电子高技术有 限公 司) ； 电化学测试采用三电极 系 统 ， 玻碳电极为工作电极 ( G C E， = 4 m m) ， 铂片 电极为对 电极 ， A g A g C 1 电极为参 比电极 ( 天津艾达恒 晟科技发展有限公 司) ； 超声波清洗机 ( 宁波新芝生物科技股份有 限公 司) 。 盐酸金霉素 ( C h l o r t e t r a c y c l i n e ， C T C ， 纯度 9 7 ， 上海生工生物工程有限公司) ， 配制成浓度为 11 0 m o l L储备液， 于 4避光保存， 使用时逐级稀释； 其它试剂均为分析纯； 牛奶和鸡肉购于本地 超市 ； 实验用水均为二次蒸馏水 。 2 2玻碳 电极 的 预处 理 将玻碳电极依次用 1 0 ， 0 3 0和 0 0 5 m粒度的 O t A 1 O ， 抛光粉研磨抛光， 而后依次用 H N O ( 1 + 1 ) 无水乙醇和二次蒸馏水分别超声清洗 23 mi n ， 再将 电极置于 0 5 m o l L H S O 溶液 中用循环伏 安法活化 ， 扫描范 围为- - 0 11 0 V， 反复扫描直至得到阴、 阳极峰对称且稳定 的循环伏安( C V) 图为止 ， 峰峰电位差在 6 4 m V以下 ， 取 出电极待用。 2 3 分子印迹及非分子印迹修饰电极的制备 将0 1 g邻氨基酚 ( O A P ) 溶于 0 1 m o l L H C 1 0 中， 并加人 0 4 m o l L N a O H调节至弱酸性 ( p H 5 5 ) ， 定容至 2 5 0 m E ( 3 6 7 m mo l L ) 。从 中移取 9 mL ， 向其 中加入 1 m L 0 0 0 1 mo l L盐酸金霉素 ( C T C ) ， 混合均匀。通 N 2 除 O 约 1 5 m i n ， 再将三电极系统浸入到含有 C T C和 O A P的 N a C 1 0 4 底液中， 采用 C V法扫描 3 0圈， 扫描电位为_ o 21 2 V， 扫描速度为 5 0 mV s ， 在玻碳电极表面得到电聚合膜 ， 即制得含 C T C的聚合膜电极( C T C M I P P O A P G C E ) 。将玻碳电极浸入含有 l O m L甲醇_ () 5 m o l L H 2 S O 4 混合溶液 ( 1 ： 4 ，v v ) 洗脱 2 4 h ， 二 次蒸馏水淋洗 1 mi n ， 得到 留有 C T C分子构 型孔穴 的分 子印迹敏感膜 ( MI P P O A P G C E ) 。在 同样条件下 ， 制备不加入 C T C印迹分子的非印迹膜修饰电极 ( P O A P G C E) 。 2 4实际样品分析 5 m L牛奶置 于 5 0 m L离 心管 ， 加人 2 0 mL MC l l v a i n e E D T A缓冲液及 2 m L三氯 乙酸 ， 漩 涡混合 2 m i n ， 在4下以4 0 0 0 r m i n 离心2 0 m i n ， 取上清液待用。称取5 0 0 g 切碎的肉样置于5 0 m L 锥形瓶 中， 加入 5 HC 1 0 溶液 2 5 m L， 于振荡器上振荡提取 1 0 mi n ， 移人离心管 中， 以 2 0 0 0 r mi n离心 3 mi n ， 取上清液经 0 4 5 m滤膜过滤 ， 收集滤液待用 。分别取两份上清液及滤液 2 m L， 用 P B S分别稀释至 1 0 mL作为样品溶液。 3结果与讨 论 3 1 电化学制备分子印迹聚合膜 图 1 A为模版分子 C T C存在下玻碳电极上 O A P电聚合过程 中的 C V曲线。由 C V曲线可见 ， 0 A P 的电化学聚合是一个不可逆的过程。从扫描的第二圈开始， 电流便出现明显的骤降， 并随着 C V扫描圈 数的增多， 电流缓慢下降至背景值， 这表明了电极表面上逐渐覆盖并形成了致密的非导电聚合膜， 阻止 了 O A P的进一步氧化， 使得伏安电流响应受到抑制。而图 1 B为不加入 C T C的 O A P电聚合的 C V曲 线 ， 与图 1 A相比并无显著差异 ， 这表明 C T C的存在不干扰 O A P的电聚合。 3 2 分子印迹效应 采用 C V及 D P V法表征 了不同电极在 0 0 0 5 m o l L K 3 F e ( C N) 6 的磷酸盐缓冲液 ( P B S ，p H 6 4 ) 中的特性( 图 2 ) 。由 D P V表征曲线( 图 2 A) 可知 ， 裸 电极 ( G C E) ( 曲线 a ) 具有 了较大的还原峰电流 ， 说 明探针离子 F e ( C N) 在 G C E表 面发 生 了 电化 学反 应 ， 从 而产 生 了峰 电流。而非 印迹 膜 电极 ( P O A P G C E) ( 曲线 d ) 相 较于 G C E， 几 乎没 有还原 峰 出现 ， 这 是 由于覆盖 于 电极 上 的不含 C T C的 P O A P G C E电极是非导 电的， 阻碍了探针 F e ( C N) 的扩散传递。印迹膜电极 ( MI P P O A P G C E) ( 曲 线 b ) 相对于 P O A P G C E而言 ， 还原峰电流有 了明显的大幅度提高 ， 这是 由于 C T C MI P P O A P G C E膜经 洗脱后所留有的印迹孔穴为 F e ( C N ) r 提供了传质通道， 在电极表面发生了电化学反应。而洗脱再 2 1 4 分 析 化 学 第 4 3卷 2 图 1 O A P电化学聚合的循环伏安曲线： ( A)加入 C T C的 O A P的 N a C I O 4底液； ( B) O A P的 N a C I O 4 底液( 扫速 ： 5 0 m V s ， 扫描次数： 3 O ) F i g 1 C y c l i c v o h a mmo g r a ms f o r t h e e l e c t r o c h e mi c a l p o l y me r i z a t i o n o f o - a mi n o p h e n o l( OAP) i n t h e p r e s e n c e( A)a n d a b s e n c e( B)o f c h l o r t e t r a c y l i n e( C T C )i n s o d i u m p e r c h l o r a t e a q u e o u s s o l u t i o n( S c a n r a t e ： 5 0 m V s ， c y c l i n g n u mb e r ： 3 0 ) 吸附 C T C的印迹膜电极( 曲线 c ) 相较于 M I P P O A P G C E则 出现峰电流值 的下降 ， 说明 2 X 1 0 m 。 1 L C T C经印迹膜所 留有的孔穴， 被吸附至 MI P P O A P G C E电极上， 一部分印迹孔穴被吸附上的 C T C阻塞 ， 使得 F e ( C N ) 传质通道减少。c V法与 D P V法的表征结果相符。 一 B 图2 不同电极在含0 0 0 5 m o l L F e ( C N) 6 、 0 1 m o l LK C 1 的磷酸盐缓冲液( p H 6 4 ) 中的差分 脉冲伏安图( A) 和循环伏安图( B ) F i g 2 D i ff e r e n t i a l p u l s e v o h a m mo g r a ms( A )a n d c y c l i c v o l t a m m o g r a m s( B)o f t h e e l e c t r o d e s i n p h o s p h a t e b u ff e r s o l u t i o n o f p H 6 4 c o n t a i n i n g 0 1 mo l L KC 1 a n d 0 0 0 5 m o l L K 3 F e ( c N ) 6 ( a )G C E；( b )MI P P O A P G C E；( c )C T C 8 d MI P - P O A P G C E；( d )P O AP G C E 。A图： 电位范围 ： _ J 0 I0 6 V 电位增量： 4 m V s ， 脉冲幅度： 5 0 m V s ， 脉冲宽度： 5 s ， 脉冲间隔： 0 1 s ； B图： 电位范围： - 0 1 0 6 V ， 扫描 速度 ： 5 0 mV s 。 ( a )G C E；( b) MIP P O AP G C E；( c )C T C a a MI P - P O A P GC E；( d) P O A P G C EA：s c a n r a n g e ：- 0 1 0 6 V p o t e n t i a l i n c r e me n t al：4 mV s ，p u l s e a mp l i t u d e： 4 0 mV s ， p u l s e wi d t h：5 s，p u l s e i n t e r v al ：0 1 s ；B：S C a l l r a n g e： -0 1 - 0 6 V，s c a n r a t e：5 0 mVs 3 3 吸附时间对 C T C分子印迹膜电化学响应的影响 响应时间是表征传感器性能的一个重要参数， 将 M I P P O A P G C E膜电极浸入一定浓度金霉素溶液 中进行静置吸附， 每隔2 m i n 取出， 并用二次蒸馏水淋洗干净， 在0 0 0 5 m o l L K 3 F e ( C N ) P B S中用 D P V法检测。结果表明， 随着 吸附时 间延长 ， 峰 电流逐渐下降 ， 表 明印迹位点逐渐被金霉素分子所 占 据， 当吸附时间超过 2 0 m in 后， 峰电流基本达到平衡。因此选择2 0 m i n 为最佳吸附时间。 3 4 C T C印迹膜的选择性 选择四环素、 土霉素、 氯霉素及青霉素作为干扰物并采用 D P V法考察 M I P P O A P G C E膜电极对 C T C的选择性 。分别测定了修饰膜印迹电极对含 5 x 1 0 ， 7 5 x 1 0 - 6 ， 1 x l 0 ， 1 5 x 1 0 ， 2 x 1 0 ， 4 x 1 0 第 2期 高 杨等： 盐酸金霉素分子印迹电化学传感器的研制 2 1 5 和 8 x 1 0 m o l L的盐酸金霉素及干扰物溶液的响应， 计算相对峰电流变化率( A i i 。 ) ， 其中， 为 M I P P O A P G C E膜电极对各种物质 响应前后 的峰 电流差 值 ， 为印迹膜经洗脱后的峰 电流值。如图 3所示 ， 氯霉素和青霉素对盐酸金霉 素几 乎无干扰 ， 土霉素 和四环素产生了极微弱 的电流响应 。这是 由于氯霉 素及青霉素与 C T C的结构差别较大 ， 电化学响应信 号变化极其微弱 ， 而土霉素和 四环素 与 C T C的结构 相似 ， 这使得有少量 土霉素及 四环素 能够被 吸附到 印迹分子修饰 电极 的孔穴 上 ， 从而引起微 弱的 电化 学响应 ， 但对 C T C并没有形成显著 干扰 。这说 明印 迹膜修饰电极与模板分子之间的作用不单是 由与其 互补的官能团所决定 ， 立体结构互补 所形成 的印迹 孔穴也有较大影响。 3 5 印迹膜 电极 的电化学响应及标准曲线 印迹膜传感器在含 0 0 0 5 m o l L K F e ( C N) 6 的 1 0 mL P B S ( 含 0 1 m o l L K C 1 ， p H 6 4 ) 中逐次加 图 3 不 同物质在分子印迹膜 电极 上的相对 峰电流变 化率 F i g 3 A i i 0 r a t i o c h a n g e s o f MI P s e n s o r c o n c e n t r a - t i o n o f d i ff e r e n t s u b s t a n c e s a ： 盐 酸金霉 素；b ： 四环素 ；C ： 土霉素 ；d ： 氯霉素 ； e ： 青霉素。 a，c h l o r t e t r a c y c l i n e； b，t e t r a c y c l i n e； c， o x y t e t r a c y c l i n e ； 人等分试样 2 0 L的 1 x l 0 m o 1 L的 C T C， D P V法进 ， c h 1 0 a m p h e c 0 l ； 。 ， p e n i c iJ l i 行测定 ( 图4 A) 。将 MI P P O A P G C E膜 电极在 空 白溶液 中所测得 的峰电流与 吸附不 同浓度 C T C的 C T C M I P P O A P G C E膜电极所测得的峰电流的差( ， ) ， 与 C T C浓度的作图， 得到测定 C T C浓度的标 准 曲线 ( 图4 B) 。C T C在 2 0 1 0 一 6 1 x 1 0 mo l L范围内与 D P V峰电流减少量呈线性关系 ， 线性方 程为 ， ， =1 1 1 9 + 2 7 9 4 3 x ， R ： 0 9 9 8 9， C T C的检出限为 1 5 x l O m o l L ( 3 o - ) 。 不 同方法检测 C T C的结果见表 1 。与其它方法相 比， 本传感器具有更低浓度的线性范围， 检出限也 更低， 适用于快速检测低浓度水平的盐酸金霉素。 图 4( A) 不 同盐酸金霉 素浓 度下的差分脉冲伏安 图； ( B ) 盐酸金霉素浓度与峰 电流差 的关 系 F i g 4 ( A)D P V c u r v e s o f MI P P O A P G C E a f t e r a d s o r p t i o n i n d i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n s o f C T C and ( B )c u r r e n t p e a k d i f f e r e n c e V S C T C c o n c e n t r a t i o n o n MI P P O A P G C E 表 1 本方法与其它方法检测金霉素的结果比较 T a b l e 1 C o mp a r i s o n o f d e t e c t i o n r e s u l t s o f C T C b y t h i s me t h o d a n d l i t e r a t u r e me t h o d s 加 踟 加 0 2 1 6 分 析 化 学 第4 3卷 3 6 印迹膜电极的重现性与稳定性 使用过的印迹膜电极在洗脱溶液甲醇- () 5 m o l L H S O 混合溶液( 1 ： 4 ， V V ) 中超声清洗5 m i n ， 并 用二次蒸馏水淋洗后即可使 电极基本能恢复到使用前的响应值 。因此使用 同一支 印迹膜 电极对 2 1 0 m o l L C T C平行测定 5次， R S D为 1 9 ， 显现出较好的重现性 。将此印迹膜电极储存于 4冰箱 中， 2周后在相同条件下下对 2 x l O m o l L C T C的测定值降至初始响应的 9 0 3 。经 4周后 ， 响应值降 至初始响应的 8 2 7 ， 具有 良好的长期稳定性。 3 7 样品分析 取市售的牛奶和鸡 肉样 品， 经本 方法检测均未检出 C T C 。向牛奶及鸡 肌肉组织 空 白样 品溶液 中加入 0 1 ， 0 2和 0 5 mo l L的 C T C， 每个浓度 平行测定 3次 ， 经 MI P P O A P G C E膜 电极吸附后 ， 置人含 0 0 0 5 m o l L K F e ( C N ) 6 、 0 1 mo l L K C 1 的 P B S中 检测 ， 测定结果如表 2所示。回收率 为 8 6 4 一 9 6 9 ， R S D为 1 7 6 8 ， 可满足实际样品分析 的需要。 表2 牛奶及鸡肉组织样品中 C T C的加标回收率 T a b l e 2 R e c o v e r y o f C T C i n mi l k a n d c h i c k e n mu s c l e t i s s u e s a mp l e s Re f e r e nc e s 1 Fa n g H ，Ha n Y L，Yi n Y M ，Pa n X，Yu Y L Ch e mo s p he r e ，20 1 4，96：515 6 2 A l a b o u d i A， B a s h a E A， Mu s a l l a m I o d C o n t r o 1 ， 2 0 1 3 ， 3 3 ( 1 ) ： 2 8 1 2 8 6 3 P a t y r a E， K o w a l c z y k E， K w i a t e k K B V e t L P u l a w y ， 2 0 1 2 ， 5 6 ( 3 ) ： 3 2 9 3 3 3 4 WA N G L e i ， X U Z h i X i u ， Z H A N G X i a o S o n g ， S H A O X u e - G u a n g C h i n e s e A n a 1 C h e m ， 2 0 0 3 ， 3 1 ( 1 ) ： 5 2 5 4 王 蕾，徐智秀， 张孝松， 邵学广分析化学， 2 0 0 3 ， 3 1 ( 1 ) ： 5 2 5 4 5 L e T ， Y i S H， Z h a o Z W ， We i WF o o d A d d i t C o n t a m ， 2 0 1 1 ， 2 8 ( 1 1 ) ：l 5 1 6 1 5 2 3 6 WU Y u X i a n g ， L I U Z h i - G u o ， H A N Z e n g F e i ， Z H A N G L u ， S U N T i a n F o o d S c i ， 2 0 0 8 ， 2 9 ( 7 ) ： 3 4 8 3 5 1 武玉香， 刘志国， 韩增飞，张 露 ， 孙 田食品科学， 2 0 0 8 ， 2 9 ( 7 ) ： 3 4 8 3 5 1 7 8 9 1 O 1 1 Z H A N G L a n ， L I N Z i A n ， X I E Z e n g - H o n g C h i n e s e A n a ly s i s a n d T e s t i n g T e c h n o l o g y a nd I n s t r u m e n t s ， 2 O 1 1 4 ， 1 0 ( 1 ) ： 1 8 2 3 张 兰， 林 子俺 ， 谢增鸿分析测试技 术与仪 器 ， 2 0 0 4 ， 1 0 ( 1 ) ： 1 8 2 3 L I U X i n g Q u an ，F E N G Z h e n ，Y A O L e i ，L I B o - B i n C h i n e s e l， Mo d e r n Foo d S c i e n c e a n d T e c h nol o g y ， 2 0 1 1 ，2 7( 4 ) ： 46 546 7 刘兴泉，冯 震， 姚 蕾， 李博斌现代食品科技， 2 0 1 1 ， 2 7 ( 4 ) ： 4 6 5 4 6 7 P u o c i F ， I e m m a F ， C i r i l l o G， C u r c i o M， P a fi s i 0 I ， S p i z z i r r i U G， P i c c i N E u r P o l y m ， 2 0 0 9， 4 5 ( 6 ) ： 1 6 3 4 1 6 4 0 A m u t E， F u Q， F ang Q， Hu R， X i a o A， Z e n g A， C h a n g C P o l y r n R e s ， 2 0 1 0 ，1 7 ( 3 ) ： 4 0 1 - 4 0 9 Z H A N G L i a n Mi n g ，L I J i a n - P i n g ， P A N Ho n g C h e n g C h i nes e A n a 1 C h e m ， 2 0 1 2 ， 4 0 ( 7 ) ：1 0 2 5 - 1 0 3 0 张连明，李建平， 潘宏程分析化学， 2 0 1 2， 4 0 ( 7 ) ： 1 0 2 5 1 0 3 0 1 2 Ro s y ，C h a s t a H ，G o y a l R N T a l a n t a，2 0 1 4，1 2 5：1 6 7 1 7 3 1 3 WA N G L i n ，T A N X u e 。 C a i ，Z H A O D a n D a n ，L I U L i ，L E I F U H o u ，H U A N G Z a i Y i n ，G O N G Q i C h e m C h i n e s e U n i v e r s i t i e s ， 2 0 1 2 ， 3 3 ( 8 ) ：1 7 0 8 1 7 1 3 王 琳 ， 谭学才， 赵丹丹，刘 力， 雷福厚，黄在银， 龚 琦高等学校化学学报， 2 0 1 2 ， 3 3 ( 8 ) ： 1 7 0 8 1 7 1 3 1 4 Z H A N G J i n ，X U L a n ， WA N G Y a Q i o n g ， L V R u i H o n g C h i n e s e A n a 1 C h e m ， 2 0 0 9 ， 3 7 ( 7 ) ： 1 0 4 1 1 0 4 4 张 进， 徐 岚，王亚琼 ，吕瑞红分析化学， 2 0 0 9 ， 3 7 ( 7 ) ： 1 0 4 1 1 0 4 4 1 5 Q I Y u B i n g ， L I U Y i n g ， S O N G Q i J u n C h i n e s e I， A n a 1 C h e m ， 2 0 1 1 ， 3 9 ( 7 ) ： 1 0 5 3 1 0 5 7 齐玉冰， 刘 瑛， 宋启军分析化学， 2 0 1 1 ， 3 9 ( 7 ) ：1 0 5 3 - 1 0 5 7 1 6 T u e c e fi R， A rea l P M S c i a n A N C a n a d i a n， C h e m ， 2 0 1 2， 9 1 ( 2 ) ： 9 1 1 1 2 1 7 G u e r r e i r o J R L ， F r e i t a s V， S a l e s M G F Mi c r o c h e m ， 2 0 1 1 ， 9 7 ( 2 ) ：1 7 3 1 8 1 第 2期 高 杨等： 盐酸金霉素分子印迹电化学传感器的研制 2 1 7 Pr e p a r a t i o n o f a n El e c t r o c he mi c a l S e ns o r f o r De t e r m i n a t i o n o f Chl o r t e t r a c y c l i n e Ba s e d o n M o l e c u l a r l y I mpr i n t e d Fi l m G A O r a n g ， WA N G We i ， L I U r i n g - Z i ， T A O Q i a n g ，WA N X u e ， Z H A N G J u a n K u n ( K e y L a b o r a t o r y o fI n d u s t r i a l Mi c r o b i o l o g y of t h e Mi n i s t r y o fE d u c a t i o n ，T i a n j i n Key Lab o r a t o r y of I ndu s t r i a l Mi c r o b i o l o g y ， C o l l e g e ofB i o e n g i n e e r i n g， T i a n fi n U n i v e r s i t y ofS c i e n c e& T e c h n o l o g y ， T i a n j i n 3 0 0 4 5 7 ，C h i n a ) Abs t r a c t An e l e c t r o c h e mi c a l s e n s o r ha s be e n d e v e l o p e d f o r t h e s e l e c t i v e de t e r mi n a t i o n o f c h l o r t e t r a c y c l i n e ( C T C)u s i n g t h e mo l e c u l a r l y i m p ri n t e d t e c h n i q u e A m o l e c u l a r i m p ri n t e d p o l y me r( M I P )o n t h e s u r f a c e o f a g l a s s y c a r b o n e l e c t r o d e( G C E)w a s p r e p a r e d b y e l e c t r o p o l y m e r i z a t i o n o f 0 一 a m i n o p h e n o l( O A P)i n t h e p r e s e n c e o f C T C i n t h e s o d i u m p e r c h l o r a t e ( N a C 1 0 4 ) s o l u t i o n u s i n g c y c l i c v o l t a m m e t r y ( C V) T h e e l e c t r o c h e m i c a l p e rf o r m a n c e o f t h e s e n s o r w a s s t u d i e d b y u s i n g d i f f e r e n t i a l p u l s e v o l t a m me t r y( D P V) A l i n e a r r e l a t i o n s h i p b e t we e n t h e p e a k c u r r e n t d i f f e r e n c e a n d t h e CTC c o n c e n t r a t i o n wa s fou n d i n t h e r a n g e o f 2 0xl 04_6 1 x l 0 mo l L w i t h t h e d e t e c t i o n l i mi t o f 1 5 x 1 0 墙m o l L( 3 t r ) A f t e r r e g e n e r a t i o n b y w a s h i n g wi t h t h e mi x t u r e o f me t h a n o l a n d s u l f ur i c a c i d，t h e s e n s o r s h o we d e x c e l l e n t r e p r o du c i b i l i t y a n d g o o d s t a bi l i t y Th e MI P e l e c t r o d e e x h i bi t e d a l mo s t n o r e s p o n s e t o c h l o r a mp he n i c 0 l a n d p e n i c i l l i n，a n d v e r y we a k r e s p o ns e s t o t e t r a c y c l i n e a n d o x y t e t r a c y c l i ne，pr o v i n g a g o o d s e l e c t i v i t y Re c o v e rie s o f s t a n d a r d a d d i t i o n me a s u r e d i n t h e a c t u a l s a mp l e s o f mi l k a n d c h i c k e n me a t we r e b e t we e n 8 64一9