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文档简介
水溶C100中还原型抗坏血酸的测定 -2, 6-二氯酚靛酚滴定法,回顾,维生素定义;特点;分类 维生素C;存在形式;理化性质;生理功能 维生素C缺乏症;每日摄入量;来源 维生素C的营养状况评价,一、目的,了解营养评价中实验室检查的意义 掌握食物中还原型VitC测定方法 掌握如何对食物中还原型VitC的含量进行分析及评价,抗坏血酸含有-OH基,具有较强的还原性,能还原染料2,6-二氯酚靛酚。 该染料在酸性溶液中呈红色,被还原后为无色。 在没有杂质干扰时,一定量的食物溶液还原标准染料的量与其中的抗坏血酸成正比。,二、原理及步骤,蓝色,红色,无色,步骤,用标准维生素C溶液标定2, 6-二氯酚靛酚染料; 用标定后的2, 6-二氯酚靛酚染料滴定样品,测得其还原型维生素C的浓度。,操作步骤,0.1%抗坏血酸标准储备液(1mg/ml),冰箱保存待用(已配制)。 1%草酸溶液:1g草酸充分溶解后洗入100ml量筒中,加蒸馏水至100ml刻度,搅匀备用(已配制) 。 配制抗坏血酸标准应用液:用移液管取1ml 0.1%抗坏血酸标准储备液于50ml容量瓶,加1%草酸至刻度,摇匀,留用。(1mg/50ml) 空白试验:在三角烧瓶中加入10ml 1%草酸,用2,6-二氯酚靛酚染料滴定至粉红色,保持15秒不褪色为终点。记录结果Cml。(两次) 标定二氯酚靛酚染料:在三角烧瓶中加入5ml抗坏血酸应用液、5ml 1%草酸,混匀,用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色,保持15秒不褪色为终点。记录所用染料Aml。,2, 6-二氯酚靛酚染料的标定,操作流程,1ml染料相当于还原型维生素C的mg,水溶C100稀释液制备:市售水溶C100饮料冰箱待用。使用前用草酸溶液稀释10倍(已制备)。 水溶C100稀释液中抗坏血酸浓度测定:在三角烧瓶中加入5ml水溶C100稀释液、5ml 1%草酸,混匀,用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色,保持15秒不褪色为终点。记录结果B ml。(两次),样品中还原型维生素C的浓度的测定 (采用标定的2, 6-二氯酚靛酚染料滴定),操作流程,样品中还原型维生素C浓度,注意事项,由于抗坏血酸在许多条件下都容易被氧化,因此,测定过程要迅速,并且应避免接触铜、铁等金属,一般不超过2min 。 样品中可能有其他杂质也能还原2, 6-二氯酚靛酚,但还原速度比还原型维生素C慢,故滴定时以15s内粉红色不褪去为止; 维生素C标准品溶液:短期、棕色瓶、冷藏; 滴定终点的判断 结果分析与讨论,配制抗坏血酸应用液:用移液管取1ml 0.1%抗坏血酸标准母液于50ml容量瓶,加1%草酸至刻度,摇匀,留用。 空白试验:在三角烧瓶中加入10ml 1%草酸,用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色,保持15秒不褪色为终点。记录结果C(ml)。(两次) 标定二氯酚靛酚染料:在三角烧瓶中加入5ml抗坏血酸应用液、5ml 1%草酸,混匀,用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色,保持15秒不褪色为终点。记录所用染料A(ml)。 1ml 二氯酚靛酚相当于抗坏血酸Tmg,T=0.1/(AC)。(两次) 水溶C100稀释液中抗坏血酸浓度测定:在三角烧瓶中加入5ml柠檬汁稀释液、5ml 1%草酸,混匀,用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色,保持15秒不褪色为终点。记录结果(Bml)。(两次),C样(mg/L)=,(B C) T,5 ml, 10, 1000,THANK YOU,还原型抗坏血酸能还原染料2, 6-二氯酚靛酚,自身氧化为脱氢型,在酸性溶液中, 2, 6-二氯酚靛酚显示红色
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