骨碎补药理作用的研究进展史.doc

医药导报 2006年 7月第 25卷第 7期685骨碎补药理作用的研究进展陈 顺, 关延彬(华中科技大学同济医学院药学院药剂教研室, 武汉 430030) 摘 要 骨碎补是一味传统中药, 临床应用广泛。综述骨碎补的药理作用研究进展, 骨碎补具有补肝肾强筋骨、预防骨质疏松, 以及抗炎, 防止链霉素和卡拉霉素发生不良反应, 降血脂作用等。 关键词 骨碎补; 药理作用; 研究进展 中图分类号 R 285 文献标识码 A 文章编号 1004-0781( 2006) 07-0685-03骨碎补是一味常用中药, 为水龙骨科多年生附生蕨类植物 槲蕨 D rynar ia fortunei(K unze) J. Sm 的根茎。传统中医认为骨碎 补性味苦温归肾肝经, 具有补肾强骨、续伤镇痛功效, 用于肾虚 腰痛、耳鸣耳聋、牙齿松动、跌打闪挫、筋骨折伤; 外治斑秃、白 癜风等症。笔者就其近几年骨碎补的药理作用研究进展作一 综述。1 补肝肾强筋骨作用1. 1 对骨损伤骨质生长的作用 骨碎补具有补肝肾强筋骨的 传统功效, 在历代伤科专著中骨碎补在处方中出现次数较多。 宋元时期始用于治疗骨痹症, 迄今仍为骨伤科常用药。动物实 验证明, 骨碎补对新生小鸡骨的生长发育有促进作用, 用药组 股骨的湿重和体积大于对照组, 单位长度皮质骨内钙、磷、羟脯 氨酸和氨基己糖都明显高于对照组。对长管骨径度方向上的 促进作用大于对长度方向, 对蛋白多糖的合成促进作用在时间 上先于其他成分, 在程度上高于其他成分 1 。用大鼠后腿股骨 下端实验性骨伤模型研究槲蕨、中华槲蕨以及槲蕨根茎主要成 分柚皮苷对骨伤的影响, 结果表明他们对大鼠实验性骨损伤的 愈合均有促进作用, 提示柚皮苷是槲蕨根茎的主要成分 2 。在对大鼠骨折愈合实验中发现骨碎补能增加骨痂厚度, 提 高骨折愈合质量。推测骨碎补促进骨折愈合的机制可能提高 血钙、磷的浓度乘积, 促进钙、磷沉积, 增强机体内成骨细胞增 殖活动, 提高血清碱性磷酸酶 ( ALP ) 的活性以及增加转化生长 因子 ( TGF- 1 )在骨痂组织中的表达, 促进骨折愈合 3 。通过组织培养和同位素示踪法发现骨碎补明显促进培养 中鸡胚骨原基的钙化, 同时提高了培养组织中 ALP 的活性和促进蛋白多糖的合成, 并证明促进蛋白多糖的合成是促进钙化的 重要因素 4 。碎补水相和醇相提取物中分别存在有较高活性的促成骨细胞 增殖、分化和钙化的物质, 具有进一步研发成抗骨质疏松或骨 质吸收新药的前景。Sun等 6 采用破骨成骨细胞共培养体添加不同浓度的骨碎 补提取物, 发现骨碎补提取物对骨细胞作用的最佳浓度为 1 mg mL-1, 能增加胞内 AL P 含量, 同时培养递质中酸性磷酸酶( ACP )、前列腺素 2( PGE2 )含量显著增加, 用 N o rthern b lo t分析 骨桥蛋白 ( osteopontin) 和骨连接蛋白 ( osteonectin) 的 mRNA 表达, 发现在加入提取物后表达调控均降低, 与对照组比较, 形成 的多核破骨细胞更小更有活性, 但是没有找到大破骨细胞。结 果表明加入提取物后, 增加破骨细胞的移动性, 有利于成骨细 胞的早期分化, 不利于成骨细胞的矿化, 适合骨折的早期治疗。在比较单味中药对体外培养成骨细胞相关基因表达的影 响实验中发现骨碎补能促进骨细胞骨形态发生蛋白 ( BM P-2) 的表达, 对于分化转录因子 ( cbfa l)和胰岛素样生长因子 ( IGF ) 的表达没有促进作用 7 。通过在大鼠胫骨打孔的方法建立单 因素干扰模型, 在不同时间点, 采用原位杂交方法检测骨愈合 过程中 、 、 型前胶原 mRNA、( TGF- 1 ) mRNA、( BM P-2) mRNA 及血管内皮生长因子 ( VEGF ) mRNA 表达的动态现察。 结果上述观察指标在正常组各时间点均无阳性表达; 模型组在 不同时间点的不同细胞中表达强度不同; 与模型组比较骨碎补 组在 ( TGF- 1 ) mRNA、( BM P-2) mRNA 和 型前胶原 mRNA 的表达上有显著变化, 骨碎补组不同基因的作用不同, 作用时间 点不同, 作用强度不同。由此可知, 在骨愈合过程中, 骨碎补对( TGF- 1 ) mRNA、( BM P-2) mRNA 基因表达具有有益的调节作用唐 琪等 5 制备骨碎补的水、醇提取液, 考察其促细胞增 殖作用, 结果表明 0. 01 m g L-1骨碎补水提液能促进 M C3T3-E1 细胞数量增加; 0. 01 m g L-1骨碎补水提液和醇提液能使 S 期 细胞百分率提高, G1期细胞百分率减少; 100 m g L-1骨碎补醇 提液能使细胞 ALP 的活性升高 ( P 0. 05), 能明显促进细胞骨 钙素合成和分泌 ( P 0. 01) ; 1 m g L-1骨碎补水提液及 0. 01 m g L-1 骨碎补醇提液均可促进细胞钙化 (P 0. 05) 。提示骨-1 收稿日期 2005-10-21 作者简介 陈 顺 ( 1981 - ), 男, 湖北仙桃人, 在读硕士, 主要从事药物新剂型研究工作。电话: 027- 83691969, E-m ai:l c_shun eyou. com。1. 2 对骨质疏松的作用 刘宏泽等 9 在探讨丹参和骨碎补对 激素性股骨头坏死的防治机制及其交互作用中发现骨碎补能 提高血钙血磷水平, 能激活成骨细胞, 提高股骨头的骨密度, 能 预防激素性骨质疏松。骨碎补有部分抑制糖皮质激素引起的 骨丢失的作用, 在实验剂量下对醋酸可的松引起的骨质疏松虽 有抑制作用, 但不能完全阻止其发展 10 。用骨碎补提取的有效成分骨碎补总黄酮, 采用双能 X 线骨 密度测量仪研究其对去卵巢大鼠骨质疏松模型骨密度的影响。 结果表明, 骨碎补总黄酮能明显提高大鼠的骨密度, 与对照组 比较差异有显著性。实验从骨密度和血清白细胞介素 ( IL )-4、 IL-6、肿瘤坏死因子 ( TNF ) - 水平方面揭示中药骨碎补总黄酮 治疗骨质疏松症的作用机制, 从而证明中医学 肾主骨 理论的686H erald ofM ed icine Vo l 25 No 7 July 2006物质基础之一是骨密度和血清 IL-4、IL-6、TNF- 水平。而骨碎 补总黄酮对卵巢切除所致的骨质疏松症具有明显提高骨密度 和调整血清 IL-4、IL-6、TNF- 水平的作用, 是发挥中药疗效的 物质基础 11 。给去卵巢大鼠灌服骨碎补总黄酮 6个月后, 大鼠的组织形 态计量学指标骨小梁体积百分比 ( TBV ) 明显增高, 骨小梁吸收 表面百分比 ( TRS)以及骨小梁形成表面百分比 ( TF S), 活性生 成表面百分比 ( AFS), 骨小梁矿化率 ( MAR )和骨小梁骨生成率 ( BFR ), 骨质平均宽度 ( O SW ) 和骨皮质矿化率 ( mAR ) 均明显降 低, 表明骨碎补总黄酮对卵巢切除所致的骨质疏松症具有明显 的防治作用 12 。研究骨碎补对大鼠骨髓破骨细胞体外培养的作用。采用 大鼠长骨骨髓体外培养的方法, 通过检测抗酒石酸 磷酸酶 ( TRACP )阳性细胞生成数反映破骨细胞的生成情况。结果 20% 骨碎补提取液组及固邦组 TRACP 阳性破骨细胞数的形成 受到明显抑制, 与空白对照组比较差异有极显著性 (P 0. 05)。结果表明骨碎补可抑制骨 髓体外培养中破骨样细胞的生长, 主要抑制破骨母细胞向成熟 破骨细胞转化, 但与浓度有关 13 。Jeong等 14 用破骨细胞成骨细胞共培养物来考察骨碎补在 骨吸收中的作用, 在实验中分别用磷脂酰肌醇 3( P I3)激酶抑制 药渥曼 青霉 素 ( W T ) 和蛋 白 抑制 药、蛋 白 激 酶 C 抑 制 药 ( Ca lphostin C) 为对照考察骨碎补对破骨细胞介导组织蛋白酶 K 在破骨细胞中的成熟与转运作用, 发现骨碎补与 WT 作用类 似, 在骨吸收过程中抑制组织蛋白酶 K 前体的胞内转运与成 熟。这些结果提示骨碎补对防治绝经后骨质疏松症和卵巢功 能低下导致的骨质疏松症都有其作用。1. 3 抗炎作用 刘剑刚等 15 采用二甲苯所致小鼠耳廓肿胀实 验、醋酸所致小鼠毛细血管渗透实验及大鼠蛋清足踞肿胀实 验、大鼠棉球肉芽肿增生实验, 观察骨碎补总黄酮的抗炎作用。 结果表明骨碎补总黄酮具有抗炎作用, 并能抑制毛细血管渗透 性的增高。1. 4 对牙齿生长的作用 骨碎补能促进体外培养人牙龈成纤 维细胞在牙周病根面上附着和生长, 提示其可能直接参与牙周 结缔组织新附着形成的过程 16 。陈莉丽等 17 建立实验性大鼠 牙槽骨吸收模型, 了解中药骨碎补对大鼠牙槽骨吸收的疗效, 结果表明骨碎补水提液对大鼠实验性牙槽骨吸收有明确的疗 效, 能抑制骨质吸收、促进骨质再生。2 预防链霉素和卡拉霉素发生不良反应早在 20世纪 70年代就有用骨碎补的补肾活血防治链霉素 耳毒性的报道。 50% 骨碎补液作为溶剂和链霉素一起应用时, 链霉素的生物效价、体外抗菌活性、患者血清药物浓度以及链 霉素的 pH 值和澄明度均无改变。从形态学上观察骨碎补对链 霉素所致耳毒性的解毒作用, 结果显示骨碎补可使链霉素所致 耳蜗一回和二回外毛细胞的损伤减轻, 对链霉素耳毒性有一定 的解毒作用 18 。骨碎补主成分柚皮苷具有脱敏和抗变态反应 性能, 活血解痉, 改善局部微循环和营养供给, 促进药物排泄,解除链霉素对第 8对脑神经的损害, 对缓解链霉素的毒副作用 有其独特疗效, 作用快, 疗效高且确切, 安全可靠, 无不良反 应 19 。通过对实验组及对照组动物脑干听觉诱发电位 ( A BR )波潜伏期、阈值的比较, 全耳蜗铺片毛细胞损伤计数统计及 对毛细胞超微结构的扫描和透射电镜的观察证明, 骨碎补对卡 拉霉素的耳毒性有一定的预防作用。另外, 从肾脏的石蜡切片 观察到, 耳毒性与肾损害呈正相关, 并认为骨碎补的解毒机制 可能是通过肾脏的保护实现的 20 。3降血脂作用 骨碎补具有预防家兔血脂升高、降低高脂血症的作用。具 有明显的防止动脉粥样硬化斑块的形成, 其降脂作用需用药时 间稍长, 在连续用药 5 10周后, 才能出现明显的效果。骨碎补 对实验性高脂血症有抗血管内皮损伤作用, 促进肝肾上腺内胆 固醇代谢过程, 使无粥样硬化区主动脉壁、肝脏、肾上腺中胆固 醇含量明显下降。骨碎补抗动脉硬化的活性成分之一骨碎补 多糖酸盐, 能保护肝及肾上腺的细胞器, 抗细胞内高胆固醇的 损伤从而增强细胞功能, 改变细胞内胆固醇代谢过程 21, 22 。4 其他药理作用骨碎补还有强心作用, 增加小鼠耐低氧能力, 镇痛、镇静。 有降低家兔血小板聚集的功能。此外骨碎补双氢黄酮苷能诱 导激活肝药酶, 加速异戊巴比妥钠的代谢, 缩短催眠时间, 且单 独使用可使小鼠产生明显的镇静作用。骨碎补酒治疗刺瘊临 床观察疗效良好, 加甘油可治疗寻常疣, 复方骨碎补酊治疗眼 睑慢性肉芽肿有效, 复毛姜酊治疗斑秃有效, 还可治疗鸡眼、乳 汁缺少、顽固性皮炎以及老年痴呆等。5结束语 骨碎补具有良好的接骨续伤的功效。目前临床用来治疗 跌打损伤的中成药中, 大多含有骨碎补。在促进骨折愈合的研 究中, 现大力开发从复方或单味中药中提取有效成分以促进骨 折愈合。 Sun等 23 已有研究利用骨碎补提取物固定于修饰磷 酸氢钙陶瓷 (M CHP )表面作为释药系统, 结果表明其具有缓释 功效。国内也有用骨碎补总黄酮开发的胶囊剂强骨胶囊, 作为 中药抗骨质疏松。这些都表明骨碎补已得到广大药学研究者 的青睐。另外, 骨碎补对氨基苷的解毒作用和降脂作用也应引 起重视, 相信对氨基苷类新制剂和降脂类制剂的开发有所提 示。 参考文献 0 1 马克昌, 高子范, 冯 坤, 等. 骨碎补提取液小鸡骨发育的促进作 0 J . 中医正骨, 1990, 2 ( 4): 7- 9. 2 周铜水, 刘晓东, 周荣汉. 骨碎补对大鼠实验性骨损伤愈合的影响 J . 中草药, 1994, 25( 5): 249- 250, 258. 3 王华松, 黄琼霞, 许申明. 骨碎补对骨折愈合中血生化指标及TGF- 1表达的影响 J . 中医正骨, 2001, 13( 5 ): 6- 8. 4 王志儒. 用放射性同位素45 Ca对中草药骨碎补治疗骨伤作用原理的探讨 J . 北京中医学院学报, 1980, 3( 3 ): 13. 5 唐 琪, 陈莉丽, 严 杰. 骨碎补提取物促小鼠成骨细胞株M C 3T3-E1 细胞增殖、分化和钙化作用的研究 J . 中国中药杂志, 2004, 29( 2): 164- 168. 6 Sun J S, Chun Y L, Dong G C, e t a .l Th e effect of Gu-Su i-Bu医药导报 2006年 7月第 25卷第 7期687(D ryna riae Rh izom a ) on bon e cell activities J . B iom ateria ls,( 12 ): 1685- 1697.2002,23 ( 16): 3377- 3385. 15刘剑刚, 谢雁鸣, 邓文龙, 等. 骨碎补总黄酮抗炎作用的实验研究 7 冯 伟, 傅文彧, 魏义勇, 等. 单味中药对成骨相关基因表达的影 J . 中国天然药物, 2004, 2 ( 4): 232 - 234.响 J . 中医正骨, 2004, 16 ( 3): 6- 9. 16刘 斌, 司徒镇强, 吴军正, 等. 枸杞和骨碎补对 HGF 体外附着 8 董福慧, 郑 军, 程 伟. 骨碎补对骨愈合过程中相关基因表达与生长的影响 J. 中华口腔医学杂志, 1992, 27 ( 3): 159 - 161.的影响 J . 中国中西医结合杂志, 2003, 23 ( 7): 518 - 521. 17陈莉丽, 唐 琪, 严 杰, 等. 骨碎补提取液对实验性牙槽骨吸收 9 刘宏泽, 王文瑞. 丹参与骨碎补注射液防治激素诱发股骨头坏死疗效的研究 J. 中国中药杂志, 2004, 29( 6) . 549- 553.的实验研究 J . 中国骨伤, 2003, 16( 12 ): 726- 728. 18戴小牛, 童素琴, 贾淑萍, 等. 骨碎补对链霉素耳毒性解毒作用的 10 马克昌, 高子范, 张灵菊, 等. 骨碎补对大白鼠骨质疏松模型的影实验研究 J . 南京铁道医学院学报, 2000, 19( 4 ): 248- 249.响 J . 中医正骨, 1992, 4 ( 4): 3- 4. 19王玉亮, 胡增茹, 李凤婷. 骨碎补防治链霉素不良反应的临床应 11 谢雁鸣, 许勇钢, 赵晋宁, 等. 骨碎补总黄酮对去卵巢大鼠骨密度用 J . 临床荟粹, 2000, 15( 158 ): 694.和细胞因子 IL-6、IL-4、TNF- 水平的影响 J . 中国中医基础医 20张桂茹. 中药骨碎补对卡那霉素耳毒性预防效果的实验研究学杂志, 2004, 10 ( 1): 34 - 37. 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Int Imm unopharmacol, 2003, 3人参皂苷 Rg3的研究进展张南生1, 张秀华1, 李文峰2( 温州医学院附属第一医院 1. 药剂科; 2. 放疗科, 温州 325000) 摘 要 综述人参皂苷 R3对肺癌、胃癌、肠癌、乳腺癌、肝癌等肿瘤的研究及临床应用进展, 为肿瘤的辅助性治 疗, 并对防止术后癌症复发和转移提供参考。同时阐述人参皂苷 Rg3对慢性阻塞性肺疾病的干预作用及抗病毒作用。 关键词 人参皂苷 R g3; 参一胶囊; 抗肿瘤; 肺疾病, 阻塞性, 慢性 中图分类号 R 979. 1文献标识码 A文章编号 1004-0781( 2006) 07-0687-03人参皂苷 R g3是存在于天然药物人参中的一种四环三萜 皂苷, 其结构已由日本著名天然药物化学家北川勋 ( 1980年 ) 鉴 定, 分子式为 C42H72O13, 相对分子量为 784。目前从人参中分离 出 40余种人参皂苷 单体成分, 其中重要成分人参皂苷 R g3 的 研究仅有 20余年历史, 但其抗肿瘤作用却广受重视。而由人 参皂苷 Rg3单体组成的中药一类新药参一胶囊, 随着临床应用的增加, 其作用进一步得到肯定。现将目前的研究与临床应用 进展作一综述。1 抗肿瘤作用人参皂苷 Rg3具有抑制肿瘤生长