土壤硝态氮和铵态氮的测定方法.doc

土壤硝态氮测定方法一、原理：过滤后的样品经过一个开放的镀铜镉还原器通道后，硝酸根被还原成亚硝酸根，亚硝酸根通过磺胺处理后，与N-(1-萘基)-乙二胺二盐酸盐偶联，形成深红色的偶氮染料，然后在550nm或者520nm比色分析。二、样品处理土壤鲜样采取四分法处理，根据实验用量进行过筛（比目大小视样品含水量而定）。过筛后的土样，取出5g土样放入离心管，加入25ml氯化钾提取液（2moL/L），震荡2小时后进行离心（8000 g ，15min），静置后过滤，取上清液测定。若不能及时测定，放入4冰箱保存。三、试剂配制：试剂用水：蒸馏水或去离子水。（1）显色试剂：（棕色玻璃瓶，避光保存）150ml水，加入25ml浓磷酸，冷却至室温后，加入10g磺胺，再加入0.5g N-(1-萘基)-乙二胺二盐酸盐溶解。用水定容至250ml。加入2.0ml浓缩探针清洗液（表面活性剂）。（2）氯化铵-EDTA缓冲液（ammonium chloride-EDTA）：把85g氯化铵和0.1g 乙二胺四乙酸二钠盐（EDTA-Na2）溶解于水，定容至1L。用浓氨水调节PH至8.5。（3）硝化组件缓冲液：用来清洗OTCR(镀铜镉还原器通道)取100ml的氯化铵-EDTA缓冲液，稀释至1L。调节PH至8.5。（4）2%硫酸铜：10g 五水硫酸铜（CuSO4.5H2O）溶于水，定容至500ml。（5）5mol/L盐酸：小心慢慢加入50.69ml浓盐酸于水中，冷却后定容至100ml。（6）硝酸盐存储溶液(1g/L)：（溶液6个月内有效）7.218g硝酸钾溶于水，定容至1L，加入1ml氯仿（防腐剂）。（7）比色管清洗液：（定容时缓慢，防止出现泡沫，室温保存,两个月内有效）取50ml比色管清洗液，加水定容至1L。（8）进样针清洗液：（定容时缓慢，防止出现泡沫，室温保存，两个月内有效。）取0.5ml进样针清洗液，加水定容至1L。四、测定方法：土壤硝态氮测定采用SmartChem全自动间断化学分析仪。土壤铵态氮测定方法一、样品处理土壤鲜样采取四分法处理，根据实验用量进行过筛（比目大小视样品含水量而定）。过筛后的土样，取出5g放入离心管，加入25ml KCL提取液（2moL/L），震荡2小时后进行离心（8000 g ，15min），静置后过滤，取上清液测定。若不能及时测定，放入4冰箱保存(最长保存期限28天)。二、试剂配制：试剂用水：蒸馏水或去离子水。空气中存在氨，易被吸收，故试剂用水不宜久放。（1）苯酚钠溶液：（棕色玻璃瓶，避光保存，可稳定两周）称取8g氢氧化钠，溶于水，待冷却到室温后，加入20.75g苯酚，定容至250ml。（2）次氯酸钠溶液：（每日新鲜配制）取25ml的安替福民（次氯酸钠溶液），定容至50ml。加入0.5ml浓缩的进样针清洗液，反转5次混合均匀。（3）乙二胺四乙酸二钠盐（5%）：溶解25g乙二胺四乙酸二钠盐，加入3粒氢氧化钠，稀释定容至500ml。加入3ml浓缩的进样针清洗液，反转5次混合均匀。（4）硝普钠溶液：（棕色玻璃瓶，冷藏保存，每周更新）溶解0.075g 二水合硝普钠（亚硝基铁氰化钠），稀释定容至100ml。加入1.0ml浓缩的进样针清洗液，并反复5次混匀。（5）储备溶液(1g/L，1000ppm)：溶解3.819g无水氯化铵，稀释定容至1L。（6）比色管清洗液：取50ml比色管清洗液，加水定容至1L。室温保存。（定容时缓慢，防止出现泡沫,室温保存,两个月内有效。）（7）进样针清洗液：取0.5ml进样针清洗液，加水定容至1L。（定容时缓慢，防止出现泡沫,室温保存,两个月内有效。）三、测定方法：土壤铵态氮测