《经典伪狂犬》PPT课件.ppt

,猪伪狂犬病,一、发生与危害 二、流行现状 三、主要临床症状 四、主要病理变化 五、病原学与流行病学调查 六、诊断方法及应用 七、防治,猪伪狂犬病 （Porine pseudorabies PR）,伪狂犬病是由伪狂犬病毒(Pseudorabies virus, PrV)引起的多种家畜和野生动物的急性传染病。 该病在猪呈爆发性流行，引起妊娠母猪流产、死胎，公猪不育，新生仔猪的大量死亡，育肥猪呼吸困难、增长停滞等，是危害全球养猪业的重大传染病之一。 在除猪外其它动物呈散发形式，但往往呈致死性感染。,一、发生与危害（1）,我国上世纪90年代，许多规模化猪场发生严重的流产、死胎、新生仔猪大量死亡，有的猪场一个产仔季节死亡仔猪达6000多头，死亡数百头至数千头的猪场几乎是常事。 伪狂犬病毒是属于高度潜伏感染的病毒，而且这种潜伏感染随时都有可能被机体内外和环境变化的应激因素刺激而引起疾病爆发。,一、发生与危害（2）,现阶段，随着养猪业的发展，疫苗的普及，规模化猪场爆发该病的机率大大减少，主要表现为散发和局部爆发。但现阶段猪病复杂，如果免疫未做好，或猪只的健康状况差，仍然容易爆发伪狂犬。 常与猪瘟、猪圆环病毒病、猪繁殖与呼吸综合征、猪传染性胸膜肺炎、副猪嗜血杆菌病等混合感染，导致严重的PRDC爆发，造成饲料报酬低，给养猪业造成了巨大的经济损失。,二、流行现状,对我国20多个省市伪狂犬病的流行情况进行了调查，发现猪场阳性率高达80%，猪群阳性率为60%左右。,三、主要临床症状,妊娠母猪流产，产死胎和木乃伊胎，以产死胎为主。 新生仔猪大量死亡、日龄以内仔猪死亡率为100% 。 断奶仔猪发病死亡，发病率2040%，死亡率1020%，主要表现为神经症状、拉稀、呕吐等。,母猪不发情、返情、屡不孕等。 公猪不育、发生睾丸肿胀、萎缩，失去种用能力。 育肥猪表现为慢性呼吸道症状、增重迟缓、饲料报酬降低、推迟上市的时间,猪伪狂犬病临床症状（1）,猪伪狂犬病：死胎,猪伪狂犬病临床症状（2）,新生仔猪死亡 左：1日龄仔猪死亡 右：3日龄仔猪死亡,猪伪狂犬病临床症状（3）,上：新生仔猪死亡时 尖叫、四肢作划 水状 下：新生仔猪腹泻、 死亡,猪伪狂犬病临床症状（4）,病猪站立不稳、行动摇摆、四肢张开 病猪出现神经症状：作划水运动或圆圈运动 病猪腹泻,猪伪狂犬病临床症状（5）,病猪出现神经症状并有转圈现象,四、主要病理变化,脑膜充血，出血和水肿 扁桃体、肝和脾脏常可见散在的白色坏死点 肺可见水肿，同时有小叶性间质性肺炎 流产胎儿脑可见出血点，肾和心肌出血，肝和脾脏有白色坏死点 组织变化主要表现在神经系统呈弥漫性非化脓性脑膜炎,猪伪狂犬病病理变化（1）,脑组织充血、出血,猪伪狂犬病病理变化（2）,脑组织充血、出血 肝脏白色坏死灶 肾脏针尖状出血点,猪伪狂犬病病理变化（3）,肾脏散在针尖状出血点,脾脏有散在黄白色坏死结节。,肺脏呈现淤箅及轻微水肿，散在分布有点状出血与黄白色坏死灶。,猪伪狂犬病病理变化（4）,肺脏散在分布点状、片状出血。,猪伪狂犬病病理变化（5）,肺的白色坏死灶,肺脏白色坏死灶,五、病原学与流行病学,伪狂犬病毒属于疱疹病毒科，目前，多种与毒力和免疫原性相关的基因均已被定位和测序，如TK、gG、gE、gB、gC、gD、gI等，其中TK为该病毒主要的毒力基因。,表1 应用PCR技术作猪伪狂犬病病原学调查 样 品 数 量 阳 性 率 阴 性 率 死亡仔猪 3140 1520（48.4%） 1620（51.6%） 活猪鼻拭子 1590 1200（75.0%） 390（25.0%） 猪 场 24 15（62.5%） 9（37.5%）,表2 应用血清中和试验作猪伪狂犬病血清流行病学调查 样 品 数 量 阳 性 率 阴 性 率 血清污染份数 血 清 4260 1710（40.1%） 2290（59.9%） 26 猪 场 24 13（54.2%） 11 （45.8%）,表3 应用乳胶凝集试验作猪伪狂犬病血清流行病学调查 样 品 数 量 阳性率 阴性率 血 清 3950 2170（54.9%） 1780（45.1%） 猪 场 21 14（66.7%） 7（33.3%）,病原学诊断 病毒分离鉴定 PCR 核酸探针 动物接种试验,六、诊断方法及应用,ELISA抗体检测试剂盒和乳胶凝集试验抗体检测试剂盒 进行抗体检测采血时应对猪群分组 母猪：后备母猪；1-2胎；3-4胎；5-6胎；7-8胎；8胎已上 仔猪：1-3周龄仔猪；4-8周龄仔猪； 9-14周龄仔猪；15-18周龄仔猪； 19周龄以上 定期进行抗体水平监测，根据实际情况调整免疫程序,血清学诊断,猪伪狂犬病病毒 ELISA和乳胶凝集试验抗体检测试剂盒,伪狂犬病研究相关证书,伪狂犬病乳胶凝集试验（LAT）,上图：伪狂犬病LAT诊断试剂盒 下图：LAT检测猪伪狂犬病血清抗体,七、防治,主动免疫 疫苗的种类与选择 - 灭活疫苗 - 弱毒疫苗 - 基因缺失疫苗 免疫程序 - 灭活疫苗 - 弱毒疫苗,被动免疫 高免血清 康复母猪血清 对象：珍贵种猪和仔猪 其它防制措施 灭鼠 严格控制犬、猫、鸟类和其它禽类进入猪场 严格控制人员来往 定期消毒 血清学监测,灭活疫苗：在体外培养病毒强毒株，用甲醛等灭活病毒制成疫苗。 弱毒疫苗：通过非猪源细胞或鸡胚传代致弱，或在突变剂的作用下获得。Bartha株、BC株、BUK株、MK-21株、MK-35株、ALFORT-26株及NIA-4株等。 基因缺失疫苗： 第一代基因缺失疫苗:TK基因缺失。 第二代基因缺失疫苗: TK-/gG-、TK-/gE-、TK-/gC- 第三代基因缺失疫苗:多价基因工程疫苗,猪伪狂犬病疫苗的选用,猪伪狂犬病灭活疫苗：以自国内某猪场分离鉴定的免疫原性极好的猪伪狂犬病病毒强毒鄂A株为种毒，在传代细胞上增殖后收获的病毒液经灭活、浓缩、纯化、乳化等工艺而制成。该疫苗安全性高、免疫原性好。 TK-/gG-和TK-/gE-双基因缺失弱毒疫苗：以鄂A株为亲本株应用基因工程方法构建的双基因缺失突变株为种毒，在细胞上增殖后收获的病毒液经配苗、冷冻干燥等工艺而制成。但相比较而言，TK-/gG-疫苗的免疫原性和免疫效果要略高于TK-/gE-疫苗。,猪伪狂犬病灭活疫苗新兽药证书,兽药批准文号 兽药生字（2006）170041044,猪伪狂犬病活疫苗（HB-98株）,伪狂犬病活疫苗产品,兽药批准文号 兽药生字（2006）170041056,兽药批准文号 兽药生字（2005）170047018,猪伪狂犬病灭活疫苗的使用,颈部肌肉注射。 推荐免疫程序： 后备种猪：断奶时每头2ml，间隔2842日，加强免疫接种1次，每头2ml； 妊娠母猪：产前一个月免疫1次或每年免疫三次，每次每头2ml； 种公猪：每年免疫三次，每次每头2ml。,我们研制的TK-/gG-和TK-/gE-双基因缺失活疫苗是以鄂A株为亲本株应用基因工程方法构建的双基因缺失突变株为种毒，鄂A株分离自中国流产母猪，免疫原性好，为最适合中国猪群应用的猪伪狂犬病疫苗。 缺失了伪狂犬病毒的主要毒力基因TK，高度安全，可用作于新生仔猪（未吃初乳）的超前免疫。,伪狂犬病活疫苗的特点,缺失了gG基因：伪狂犬病毒编码的gG蛋白是一种趋化因子结合蛋白，由于gG与机体本身的趋化因子结合，使趋化因子不能发挥功能，导致机体不易或难以识别侵入的病毒。将gG缺失后消除了与机体本身的趋化因子结合的可能，游离的趋化因子能迅速识别病毒，不仅提高了疫苗的免疫原性，而且很快产生抗体，从而达到治疗效果。,可用于发病仔猪的紧急预防接种，具有明显的急救和预防效果。 也可用于断奶仔猪和生长育肥猪的免疫 可预防各种年龄猪的伪狂犬病，具有明显的促生长作用。,产生的抗体水平高、作用时间快、安全性高、免疫效果好等方面都超过国外的同类产品； 用于紧急预防注射，16-24h左右产生极显著的治疗效果； 通过在全国几百万头份的临床应用充分证实了这一效果的确实性和可靠性。,伪狂犬病活疫苗的使用,用法 ：按瓶签注明头份，用稀释液稀释，各 滴 鼻或肌肉注射1ml(1头份)。 规格：10头份瓶、20头份瓶 贮藏：28保存，有效期为6个月；-20以下保存，有效期为18个月。,推荐免疫程序,仔猪：1-3日龄内滴鼻1头份；6-8周龄左右肌肉注射1头份； 后备母猪：6月龄左右肌肉注射免疫1次，间隔1个月后加强免疫1次，产前1个月左右再免疫1次； 经产母猪：每4个月免疫1次，每次1头份； 种公猪：每4个月免疫1次，每次1头份。,注意事项,每次免疫时，先少量注射，观察半天左右，如无反应再大量注射； 滴鼻时，应尽量把鼻子多捏一会，以免疫苗浪费； 疫苗在运输、保存、使用过程中应防止高温、消毒剂和阳光照射。 应对注射部位进行严格消毒。 疫苗稀释后限2小时内用完。 出现过敏反应时，马上注射肾上腺素,伪狂犬病活疫苗对妊娠母猪的安全性试验,伪狂犬病活疫苗与国外同类产品的技术参数比较:对猪的免疫效果比较,各种疫苗产生中和抗体的能力强弱顺序依次为：伪狂犬病活疫苗全病毒油乳剂灭活苗Begonia株Bartha株。另外，伪狂犬病活疫苗、Begonia株和Bartha株试验组中均是注射用生理盐水溶解的疫苗按规定的每头剂量使用，没有加入其它佐剂，抗体测定的结果表明，它们诱发的抗体滴度分别为1:25.82,1:14.25和1:6.73，说明我们所推荐使用的疫苗株其本身的免疫原性优于Begonia和Barhta 株。,不同品牌的伪狂犬病活疫苗免疫效果的比较,2006年12月北京兽医总站在北京地区的几个大猪场进行了相关实验，试验方案及结果如下：,3个猪场各选择120头6070日龄猪，分为4个组，免疫前检测猪群的伪狂犬病以及其它疾病抗体； 分别用4个公司疫苗，按照说明书使用； 免疫后20天采血，分离血清； 用国外某公司的伪狂犬病抗体水平检测试剂盒、鉴别疫苗免疫动物和野毒感染试剂盒进行检测； 根据免疫动物抗体阳转率和抗体水平，评价疫苗的免疫效果。,实验方案,表11 昌平猪场免疫后伪狂犬病抗体水平（PrV-ELISA）检测结果（采用IDEXX公司试剂盒检测),表11 昌平猪场免疫后伪狂犬病抗体水平（PrV