608例泌尿生殖道支原体的检测及药敏分析.doc

608例泌尿生殖道支原体的检测及药敏分析 李拥军 山东省淄博市中心医院输血科，山东淄博255036 摘要目的探究低离子聚凝胺技术在临床输血检验中的应用价值。方法该院对320例受血者及供血者分别以盐水法和低离子聚凝胺技术(ManualPolybreneTest，MPT)进行交叉配血试验，分析比较两种方法的准确度、稳定性、灵敏度及平均耗时等情况。结果盐水法平均耗时7.2min，阳性检出率为1.88%（6/320），且6例阳性结果中只有3例在显微镜下可窥见到的特异性细胞凝集；MPT法平均耗时4.5min，阳性检出率为4.06%（13/320），检出阳性的13例均可在显微镜下见到特异性细胞凝集。结论低离子聚凝胺技术在临床输血检验中具有操作简便、快速及准确度高、稳定性强、灵敏度高等优点，能有效减少输血反应，保证输血安全，具有较高的临床应用价值。 关键词低离子聚凝胺技术；输血检验；盐水法；应用价值 R446.1A1674-074（4）02（c）181-02 作者简介李拥军（1965-），男，山东淄博人，本科，主管技师，主要从事临床输血工作，邮箱：leeyj1xx163.。 随着医学的发展，输血已作为一种成熟的医疗手段，被广泛地应用于临床治疗和抢救过程中。输血过程中避免溶血性输血反应，保证输血安全是治疗的关键。因此，输血前需采用科学可靠的方法进行交叉配血试验，传统常用的盐水法虽然操作简便、成本低，但只能检出不相匹配的LgM抗体，而对不完全抗体IgM无法进行检出1，存在一定的局限性，无法满足大量需求和交叉配血时间紧迫。低离子聚凝胺技术(ManualPolybreneTest，MPT)对IgM抗体和IgG抗体检验效果好，且试验过程简单、易于操作、结果准确、灵敏度高，便于常规和急诊配血。为了探究低离子聚凝胺技术在临床输血检验中的应用价值，该院xx年1月xx年1月对320例受血者及供血者采用盐水法和MPT法进行交叉配血试验，并对比了两种方法的试验结果，现报道如下。 1资料与方法 1.1一般资料 选取该院收治的320例受血者为研究对象，其中男176例，女144例；年龄369岁，平均年龄35.5岁；320例患者无严重血液疾病，所有血样均采用盐水法和MPT法进行交叉配血试验。 1.2试验原理 聚凝胺（又名溴化己二甲铵）是一种高价阳离子聚合物，当红细胞悬液中加入聚凝胺后，产生了大量正电荷，继而使得红细胞表面唾液酸所带的负电荷中和，提高了分子活性，使红细胞相互接近，并发生非特异性凝集。在加入重悬液后红细胞凝集散开，红细胞未被致敏的会出现可逆的非特异性凝集，属于阴性反应；在加入重悬液后红细胞凝集不散开，红细胞被致敏的会出现不可逆的非特异性凝集，属于阳性反应2，由此可特异性地检出相应的血型Ag或Ab(IgG、IgM)。 1.3试剂与仪器 该研究中MPT法采用的聚凝胺介质试剂盒为珠海贝索生物技术有限公司产品，试剂有低离子溶液、重悬液、凝聚胺溶液等。盐水法选用普通生理盐水为介质。仪器：试管、显微镜、离心机、电热恒温水箱等。 1.4方法 MPT法：取两支试管，分别标注受血者、供血者的姓名，区分主测管、次测管。加入2滴受血者血清、1滴3%的供血者红细胞悬液于主测管中，加入2滴供血者血清、1滴3%的受血者红细胞悬液于次测管中。然后，加入低离子介质0.7mL于两支试管中，混匀，室温下静置1min后加入2滴凝聚胺溶液，混匀，室温静置15s，用离心机3000r/min（相当于1000g离心力）18s，倒掉上清液，使管底剩余0.1mL液体。轻摇试管，观察到试管出现明显凝集后，在主测管及次测管中滴入2滴重悬液，轻摇试管，再次观察试管中是否有红细胞凝集，如有则判断为阳性；若红细胞凝集消失，则判断为阴性。 盐水法：按照全国临床检验操作规程相关规定规范操作。盐水法与MPT法同步进行。 2结果 采用盐水法和MPT法对320例血样进行交叉配血试验，结果显示，MPT法过程简单、操作简便，平均耗时4.5min，明显少于盐水法（平均耗时7.2min）。MPT法准确率高，320例中有13例检测结果呈阳性，阳性检出率为4.06%；稳定性强、灵敏度高，阳性结果中的13例样本在显微镜下均可见特异性细胞凝集。传统盐水法准确率相对较低，稳定性一般，灵敏度一般，320例样本中只检出6例阳性结果，3例可见特异性细胞凝集，阳性检出率为1.88%。见表1。 3讨论 为了规范医疗机构合理用血，推广科学用血技术，保证临床用血的安全，国家卫生和计划生育委员会（原卫生部）于2000年6月根据医疗机构临床用血管理办法制定了临床输血技术规范，为输血医务人员提供正确、安全、规范地从事输血工作的纲领性文件3。凡输注全血、浓缩红细胞、红细胞悬液、洗涤红细胞、冰冻红细胞、浓缩白细胞、手工分离浓缩血小板等患者，应进行交叉配血试验，以避免溶血性反应，保证输血安全。因此，输血前必须对供血样本和受血者进行交叉配血试验，而交叉配血试验方法对试验结果有着重要的影响。目前临床常用的有盐水法、MPT法等，传统的盐水法虽然操作简单、费用低廉，但只能检出IgM抗体，不能检出不配合的IgG抗体，这就降低了准确率，一旦造成漏检就可能引起输血反应。可见，盐水法准确率不高，且无法满足临床应用的需求。而MPT法能检出完全抗体和不完全抗体，能促进红细胞及不规则抗体的反应4，且此方法灵敏度高、准确度高，操作简单、价格低廉，适合基层医院广泛应用。MPT法作用原理是通过低离子介质降低介质的离子强度，从而促进红细胞和相应抗体发生反应。在MPT法试验过程中，红细胞悬液中滴入聚凝胺溶液后，产生大量正电荷，继而使得红细胞表面的负电荷中和，红细胞表面的电位降低，从而提高了分子活性，使得红细胞发生非特异性凝集，当加入重悬液后，凝集现象不消失。 该组试验通过对比盐水法和MPT法的临床应用，得出盐水法虽然操作简单、成本低，但其检测不出不规则抗体，对ABO以外的抗体不能检测，其中不规则的抗体大多为IgG类，主要是由于免疫刺激、输血、妊娠产生，通过盐水法不能被凝集，只有被致敏的相应抗原才能够出现凝集5。而MPT法不仅操作简单、费用低廉，更重要的是能同时检出完全抗体和不完全抗体，避免迟发性溶血反应发生，避免漏检，可为临床治疗诊断提供参考依据6。该研究过程中发现聚凝胺法是从凝集到无凝集的一个发生过程，因此，试验过程中要注意解聚的时间和掌握试管振摇的力度。MPT法平均耗时4.5min，略少于祁蕙燕7研究中的6min，应考虑样本数量及试验人员操作成熟度的影响。该组盐水法、MPT法的阳性检出率均略高于龙亚银8的研究数据，应考虑检验样本中有无溶血性患者及长期输血史患者，溶血性患者及长期输血患者所占比例越高，阳性检出率越高。因此，MPT法与盐水法具有准确性高、稳定性强、操作简单等优点，可快速准确的检测出不规则抗体IgG，不会发生漏检现象，具有很好的应用价值，值得在各医院推广使用。 参考文献 1陈欣荣.交叉配血方法应用效果评价J.中国医药指南，xx，11(8):574-575. 2叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程M.3版.南京:东南大学出版社，xx:258. 3赖顺华，蔡国斌，徐小丹.浅谈低离子聚凝胺技术在临床输血检验中的应用价值J.中国医药指南，xx，10(33):96-97. 4叶旭英，曹颖.低离子聚凝胺用于输血检验价值分析J.中外医学研究，xx，11(11):45-46. 5秦江萍.低离子凝聚胺技术在临床输血检验中的应用J.现代诊断与治疗，xx，23（12）：2207-2208. 6