金佛山地区三种升麻化学成分的初步研究.doc

金佛山地区三种升麻化学成分的初步研究 罗川章文伟谭秋生罗舜邓才富* 重庆市药物种植研究所，重庆南川408435 基金项目：重庆市科委基本科研业务费资助。 作者简介：罗川（1982-），男，重庆南川人，助理研究员，主要从事中药化学质量研究。 通信作者：邓才富，副研究员，E-mail：dcf0509126. 【摘要】目的：对重庆金佛山地区升麻、小升麻和南川升麻三种升麻的化学成分进行初步研究。方法：在三种升麻生物碱、皂苷、黄酮、有机酸存在判定基础上，分别测定四种大类的含量。结果：三种升麻的生物碱与有机酸的含量呈明显的负相关关系，金佛山地区三种升麻的生物碱、总皂苷和总黄酮含量分布一致，以南川升麻的含量最高。结论：研究结果可为南川升麻的保护性研究提供科学依据，对金佛山地区升麻药材的野生抚育栽培提供支持。 关键词升麻；小升麻；南川升麻；化学成分 【】R284.1【文献标志码】A【】1007-8517(xx)03-0023-02 升麻属（Cimicifuga）植物为毛茛科（Ranunculaceae）多年生草本1，大多可作药用。升麻始载于名医别录，是一味常用中药。李时珍曰：“其叶似麻，其性上升，故名。”升麻性味甘、辛、微寒，入肺、脾、胃经。升麻具有清热解毒、升举阳气、发表透疹的功效，主治风热头痛、齿痛、咽喉痛、子宫脱垂等症2。药理研究表明，升麻属植物所含的异阿魏酸（IFA）和阿魏酸（FA）具有抗炎、解热、镇痛、抗溃疡、降压、镇静、解痉、抗惊厥、抑制核苷转运及抗病毒等作用3-4。其药理活性成分主要分布大类为生物碱类、皂苷类、黄酮类、有机酸类5。 重庆市金佛山为国家级自然保护区，是我国中亚热带常绿阔叶林森林生态系统保存最完好的地区之一，共有植物资源5000余种。有小升麻、短果升麻、升麻、南川升麻、单穗升麻等分布6，其中小升麻、升麻、南川升麻三个品种分布较为集中，在海拔14001800m区域相互交错。通过对金佛山几种升麻主要化学成分的研究，为以后进一步的研究工作打下基础。 1仪器与材料 1.1仪器梅特勒（上海）AL-104型分析天平；JA21002型上海越平电子天平；上海龙跃DHG-9623A型立式鼓风干燥器；北京兴时利和ZN-08中药粉碎机；上海摩尔MoLecuLar标准智能型纯水机；SmartTesterCP-401型酸度计；搅拌器；索氏提取器；抽滤器。 1.2材料药材采自重庆金佛山北坡地区，经项目组邓才富副研究员鉴定分别为升麻C.foetidaLinn、小升麻C.acerian(Sieb.EtZu.)Tanaka和南川升麻C.nanchuanensisHsiao三种；所用试剂均为分析纯；水为现制纯水。 2方法与结果 2.1生物碱的测定 2.1.1生物碱存在判定碘化铋钾试验：取试样的稀酸水溶液1ml，加碘化铋钾试剂12滴，颜色为棕黄色至棕红色，属阳性反应；碘液试验：取样品水溶液1ml，加碘碘化钾试剂12滴，生成沉淀为褐色或暗褐色，属阳性反应；雷氏铵盐试验：取试样的稀酸水溶液（pH34）1ml，加2%雷氏铵盐试剂，生成沉淀为黄红色，属阳性反应；苦味酸试验：取试样的中性水溶液，加苦味酸饱和水溶液一滴，生成沉淀为黄色，属阳性反应。 2.1.2生物碱含量测定取样品粉末50g，置于1000ml锥形瓶中，加入水约600ml，用20%盐酸调至pH为2，浸泡过夜，尼龙布过滤，得滤液，用浓氨水调pH至89，然后迅速用氯仿萃取得到氯仿液，无水硫酸钠干燥，回收氯仿至干，得总生物碱（油状物），同时做空白。 2.2有机酸的测定 2.2.1有机酸存在判定取粗粉5g，加10倍量水，回流提取2次，1h/次，过滤，合并提取滤液，取适量滤液，测其pH值，为弱酸性。 2.2.2有机酸含量测定分取样品20g两份，用索氏提取器，加10倍量95%甲醇，用水浴加热回流提取2次，5h/次；将提取液转移到500ml容量瓶中，用95%甲醇定容，用移液管准确吸取50ml提取液于锥形瓶中；用NaOH标准溶液进行滴定。同时做空白试验。 2.3皂甙的测定 2.3.1皂甙存在判定取药材粗粉5g，加10倍量水，回流提取2次，1h/次，过滤，合并提取滤液，振摇后生成的气泡在15min内不消失，属阳性反应。 2.3.2皂苷含量测定取两份样品各20g，先用石油醚脱脂；将水液倒入索氏提取器，加入95%乙醇200ml，水浴加热回流2次，5h/次；将提取液浓缩后加入丙酮，进行过滤（以100ml为量，反复多次加入，以不再产生沉淀为止）；干燥沉淀，称量得总皂苷。 2.4黄酮的测定 2.4.1黄酮存在判定取样品粗粉10g，加5倍95%乙醇及60%乙醇在水浴上分别回流2次，1h/次，过滤，合并提取滤液，（取滤液浓缩成浸膏）加少量12%盐酸溶液过滤，附在滤纸上的残渣以少量乙醇溶解，得乙醇液；取乙醇液适量置试管中，加少许镁粉振摇，再滴加几滴浓盐酸，水浴上加热12min，观察颜色有明显变化，属阳性反应；取乙醇液适量滴于滤纸上，与1%三氯化铝乙醇液纸斑反应后，置于紫外灯下观察，有明显荧光，属阳性反应。 2.4.2黄酮含量测定称取1.5g的石灰粉（CaO），置于干净的小研钵中，加入10ml水后研成乳液备用；将样品20g置于500ml烧杯中，加水300ml，在搅拌下加入上述制备的石灰乳，调节pH值至89，加热至微沸，维持pH值至30min，趁热抽滤；弃去滤渣，冷至6070，用浓HCL调节pH至45，静置1h，析出粗制芦丁，抽滤，弃去滤液，收集粗制芦丁；将粗制芦丁悬浮于蒸馏水中，加热煮沸15min，然后趁热过滤，弃去不溶物，充分静置，过滤，收集芦丁结晶，在6070条件下干燥，得精制芦丁。 2.5不同品种升麻的化学成分含量不同品种升麻四类化学成分差异较大。生物碱含量与有机酸呈明显的负相关关系，结果见表1。 3结论与讨论 研究对金佛山地区在海拔14001800m区域分布较为集中的升麻、小升麻和南川升麻三个品种的生物碱、有机酸、总皂苷和总黄酮含量进行了初步研究，从实验结果可以看出，除生物碱与有机酸的含量呈明显的负相关关系外，金佛山地区三种升麻的生物碱、总皂苷和总黄酮含量分布一致，都以南川升麻的含量最高，其中南川升麻的生物碱含量是小升麻的2.5倍左右，是升麻的4倍多，优势明显。 南川升麻为金佛山地区的特有种，只在金佛山北坡海拔1700m以上的地区有少量分布7。本研究的结果可以为南川升麻的保护性研究提供科学依据，同时对金佛山地区升麻药材的野生抚育栽培提供支持。 参考文献 1中国科学院中国植物志委员会中国植物志（第27卷）M北京：科学出版社，1979：93-103 2潘瑞乐，陈迪华，斯建勇升麻地上部分化学成分研究J药学学报，xx，38(4)：272 3国家药典委员会中华人民共和国药典（一部）M北京：中国医药科技出版社，xx：50 4全国中草药汇编编写组全国中草药汇编（上册）M北京：人民卫生出版社，