xx年平顶山市手足口病实验室检测结果分析.doc

xx年平顶山市手足口病实验室检测结果分析 王轶李军伟孙南叶 平顶山市疾病预防控制中心检验科，河南平顶山467001 摘要目的对平顶山市xx年手足口病实验室检查结果进行分析,了解xx年平顶山市手足口病病原学特征,为实验室诊断手足口病提供参考。方法采集xx年平顶山市各地送检的499例手足口病患者的粪便、肛拭子、咽拭子、疱疹液和脑脊液等标本507份，应用RT-PCR技术检测样本中的肠道病毒、肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CA16)。结果499例手足口病患者的507份各类样本中,检测到肠道病毒（PE）阳性84份，EV71病毒特异性基因片段阳性167份,CA16特异性基因片段阳性125份。499例手足口病病例中,阳性376例，阳性率75.35%；其中EV71阳性167例，占阳性人数44.41%，CA16阳性共125例，占阳性人数33.24%，EV71的检出率较CA16高。已检验499例中，重症患者133例，阳性109例，阳性率81.95%；其中EV71共91例,占阳性人数83.49%，CA16共9例，占阳性人数8.26%。结论EV71是xx年平顶山市手足口病的优势病原体；同时EV71是引起手足口病重症病例的主要毒株类型。 关键词手足口病;逆转录-多聚酶链反应;肠道病毒属;肠道病毒71型；柯萨奇病毒a组16型 R725.1A1672-5654（xx）06（b）-0036-02 作者简介王轶（1980-），女，研究生，汉族，河南平顶山人，检验主管技师，主要从事微生物研究方面的工作，Email:378962445qq.。 手足口病（Hand-foot-mouthdisease,HFMD）是全球性传染病，世界大部分地区均有此病流行的报道，此病流行无明显的地区性，一年四季均可发病，以夏秋季多见，由多种肠道病毒引起，以肠道病毒71型（Humanenterovirus71，EV71）和A组柯萨奇病毒16型（CoxsackievirusA16，CA16）为主要病原引起的丙类传染病。大多数患者症状轻微，主要症状为手、足、口腔等部位的斑丘疹、疱疹，少数病例可出现脑膜炎、脑炎（以脑干脑炎最为凶险）、脑脊髓炎、肺水肿、循环衰竭等，个别重症患儿病情进展快，可导致死亡1。多发于学龄前儿童，尤以3岁以下年龄组发病率最高。病人和隐性感染者均为传染源，主要通过消化道、呼吸道和密切接触等途径传播。为了解平顶山市手足口病的流行特征，对平顶山市手足口病的综合防治提供参考依据，现将xx年平顶山市手足口病病原学监测结果进行总结分析。 1材料与方法 1.1材料 1.1.1样本各县、区疾控中心及各医院在xx年送检的可疑病例，聚集性感染病例和所有重症病例样本，其有肛拭子和咽拭子、疱疹液等，样本采集后用冰盒运送至实验室。 1.1.2检测试剂用于RNA提取的试剂盒是MagMaxTM-96viralRNAIsolationkit（Ambion公司），用于核酸扩增的试剂盒是荧光PCR法核酸测定试剂盒（上海之江生物科技有限公司）。 1.2试验方法 将采集的样本按照Ambion公司试剂盒的说明用核酸自动纯化仪提取RNA；采用实时荧光PCR仪对柯萨奇病毒A16型、肠道病毒71型和其他肠道病毒通用的特异性核酸片段进行荧光PCR检测。 1.3统计学分析 采用SPSS16.0软件进行统计学分析。 2结果 2.1实时荧光定量PCR检测阳性率 平顶山市xx年共采集499例手足口病患者的507份各类样本,检测到84份肠道病毒阳性，167份EV71病毒特异性基因片段阳性和125份CA16特异性基因片段阳性，EV71病毒、CAl6病毒以及肠道病毒的阳性构成比分别为：44.41%、33.24%和22.34%，以肠道病毒EV71型为主。粪便肠道病毒阳性率为83.90%，咽拭子肠道病毒阳性率为78.33%，疱疹液肠道病毒阳性率为53.33%，脑脊液肠道病毒阳性率为38.16%。见表1。 表1不同类型样本检测结果 2.2手足口与性别的关系 从性别来看，499例手足口病病例中，发病男性患儿315例多于女性184例，男女比例为1.71:1,男性肠道病毒阳性率远高于女性(28.436，P0.0040.05)，差异具有统计学意义。 表2手足口与性别的关系 2.3阳性肠道病毒患儿的年龄分布 从年龄看手足口病发病年龄主要集中在5岁以下，其中以04岁散居或幼托儿童发病最高，占总数的80.56%（402/499）。 表3阳性肠道病毒患儿的年龄分布 2.4手足口重症患者肠道病毒检测情况 在已检验的499人中，重症患者133人，阳性109人，阳性率81.95%；其中EV71共91人,占阳性人数83.49%，CA16共9人，占阳性人数8.26%。 表4手足口重症患者肠道病毒检测情况 3讨论 手足口病常常由多种肠道病毒共同引起，而EV71和CA16往往是手足口病暴发流行的最主要病原，二者在遗传学上密切相关2-3。xx年平顶山市共检测出手足口病阳性数为376份，167份EV71病毒特异性基因片段阳性，125份CA16特异性基因片段阳性，84份肠道病毒阳性，这说明平顶山市手足口病流行的优势病原是EV71，但同时也存在着CA16和其它肠道病毒。根据我国山安徽、山东、上海和北京报道，EV71与CA16交替流行，并且不同地域同一时间流行的型别也不一定相同4。因此病原学监测对掌握手足口病的流行规律，更加有效进行防控意义重大；从不同类型的样本检测结果看，粪便和咽拭子肠道病毒的检出率较高，均大于70%；从性别来看，499例手足口病病例中，发病男性患儿315例多于女性184例，男女比例为1.71:1，与男孩喜动的天性有关，这与蒋静等5、秦利平等6、金祝平等7、杜志忠等8的男性报告发病数多于女性的结果相同；从年龄看手足口病发病年龄主要集中在5岁以下，其中以04岁散居或幼托儿童发病最高，占总数的80.56%（402/499），这符合手足口病的年龄特征，其它文献也有类似报道9-10,可能与婴幼儿自身免疫机制尚未发育完善、免疫力低下有关；从月份看平顶山市312月均检测出肠道病毒，7月阳性率缓慢上升，8月出现第一个高峰，到9月份开始下降，以后发病趋于平缓，病例主要集中于每年的7、8月，这个时期平顶山市正值雨季，气候条件适合肠道病毒的生存与传播。 总之，手足口病传染性强，传播速度快，对04岁儿童危害严重，至今无特异性治疗方法，亦无疫苗预防。为遏制疫情蔓延，各地要加强疫情监测，将防控工作的重点放在托幼机构。各托幼机构广泛开展卫生教育宣传，养成良好卫生习惯，做到饭前便后洗手、不喝生水、不吃生冷食物、勤晒衣被、多通风。托幼机构和家长发现可疑患儿，要及时到医疗机构就诊，并及时向卫生和教育部门报告，及时采取控制措施。轻症患儿不必住院，可在家中治疗、休息，避免交叉感染。各级卫生部门要做好教育部门手足口病防制工作的技术指导，切实做到早预防、早发现、早诊断、早治疗，一旦发现疫情要采取果断措施，同时做好疫点、疫区卫生处理和传染源管理工作，遏制疫情蔓延。 参考文献 1郭雪，郑焕英，莫艳玲，等xx年广东省儿童手足口病病原学监测J.中华疾病控制杂志，xx，13（3）:270-272. 2ZhuM，ZhengJX，ChengXF，etalAnalysisoftwoEV71genotypesinMaanshanAreaJChinJHealthLabTechnol，xx，19（10）：23482350 3廖惠贞，朱小洁.惠州地区xx年手足口病实验室检测分析J.中国热带医学,xx,12（2）:224-225. 4周帅锋，张帆，黄威，等xx年湖南省哨点医院手足口病病原学检测与分析J.南华大学学报，xx，38（4）:479-483. 5蒋静，杨小兵，程德明，等xx年湖北省宜昌市手足口病流行病学分析J.疾病监测，xx，25(2):136138 6秦利平，徐蓉芳，张静敏乐山市xx年手足口病流行病学及报告质量分析J.现代预防医学，xx，38(8):15391540 7金祝平，庞志峰xx年浙江省金华市手足口病流行病学特征分析J疾病监测，xx，25(5):374376 8杜