复合膳食纤维对大鼠急性胰腺炎时肠粘膜屏障的保护研究.doc

复合膳食纤维对大鼠急性胰腺炎时肠粘膜屏障的保护研究 张利东1,2武华3 1.山西医科大学，山西太原030001；2.山西省清徐县人民医院普外科，山西清徐030400；3.山西医科大学第一临床医学院普外科，山西太原030001 摘要目的探讨复合膳食纤维（dietaryfiberplex，DFC）在大鼠急性胰腺炎（acutepancreatitis,AP）时对肠粘膜屏障功能的作用。方法采用5%的牛黄胆酸钠（0.1mL/100mg）逆行注射入胰胆管法制备AP模型，44只大鼠随机分为4组，单纯模型组（A组），肠内营养剂（能全素）组（B组），能全素+复合膳食纤维可溶性膳食纤维（SDF）：不可溶性膳食纤维（IDF）=1:3(C组)，能全素+复合膳食纤维SDF：IDF=3:1(D组)，分别于造模后12、24、48h时取门静脉及腹主动脉血并比较各时段各组大鼠血清中内毒素、D-乳酸的变化。结果C组和D组血清内毒素和D-乳酸的释放低于A组和B组(P0.05)，B组血清内毒素和D-乳酸释放低于A组（P0.05）。结论复合膳食纤维对急性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障功能有一定的保护作用。 关键词急性胰腺炎;大鼠;复合膳食纤维;能全素;内毒素;d-乳酸 R576A1672-5654（xx）03（c）-0022-03 Protectionofdietaryfiberplexonratintestinalmucosalbarrierofacutepancreatitis ZHANGLidong1,2WUhua3 1.ShanxiMedicalUniversity,Taiyuan030001,China;2.DepartmentofGeneralSurgery,thePeoplesHospitalofQingxuCounty,Qingxu030400,China;3.DepartmentofGeneralSurgery,theFirstHospitalofShanxiMedicalUniversity,Taiyuan030001,China AbstractObjectiveToexploredietaryfiberplex(DFC)onacutepancreatitis(AP),smechanismofactionoftheintestinalmucosalbarrier.MethodsAPratmodelwasestablishedwith5%sodiumtaurocholatewhichwasinjectedintopancreaticocholangretrogradely.44ratswererandomlydividedintofourgroups.Simplemodelgroup(groupA),EnteralNutritiongroup(groupB),Nutrison+positedietaryfibersolubledietaryfiber(SDF):insolubledietaryfiber(IDF)=1:3(GroupC),Nutrison+positedietaryfiberSDF:IDF=3:1(GroupD).RespectivelyextractedbloodsamplesofratsportalveinandaortaabdominalisthenparedexpressionofendotoxinandD-lacticacidinthebloodserumofratsineachgroupduring12h,24h,48h.ResultsThereleaseofthegroupCandDinserumendotoxinandD-lacticacidislowerthaningroupAandgroupB(P0.05).thereleaseofthegroupBislowerthangroupA(P0.05).ConclusionDFChasaprotectiveeffectongutbarrierinratwithacutepancreatitis. KeywordsAcutepancreatitis；Rat；Dietaryfiberplex；Nutrison；Endotoxin；D-lacticacid 急性胰腺炎其发病较急，病情往往严重。尤其是重症急性胰腺炎，往往发病凶险，病死率高，伴随并发症者死亡率更甚1。主要引起严重的全身炎症反应和全身多脏器的损害。其中肠黏膜屏障功能受损所引起的肠道菌群易位是继发感染及全身脓毒症的主要原因2。有研究表明在急性胰腺炎时某些炎性介质及细胞因子的释放是肠黏膜通透性增加、肠道屏障损伤甚至肠源性感染的主要原因。膳食纤维可促进机体消化，维护肠道微环境稳定，减轻肠黏膜损害，有利于肠黏膜屏障功能的恢复。本实验采用大鼠急性胰腺炎模型，研究膳食纤维对肠黏膜屏障功能的影响，为临床肠内营养制剂的选择提供依据。 1材料与方法 1.1动物和材料 清洁级健康Wister大鼠60只，体重200250g，雌雄各半，由山西医科大学动物中心提供，饲养于山西医科大学生理实验室动物室25恒温房，12h光照和黑暗交替，期间饲以标准颗粒饲料及自由饮水。能全素（整蛋白型肠内营养粉剂）购自纽迪希亚制药（无锡）有限公司。复合膳食纤维（可溶与不可溶性膳食纤维）购自无锡华瑞制药有限公司。D-乳酸试剂盒购自北京博奥森生物技术有限公司，鲎试剂盒购自厦门市鲎试剂实验厂有限公司。 1.2模型建立 采用5%牛黄胆酸钠溶液(0.1mL/100g)胰胆管逆行注射法造大鼠AP模型。造模前24h禁食，期间自由饮水。3%戊巴比妥钠液麻醉后，取腹部正中切口开腹，于十二指肠乳头处夹闭胰胆管，用1mL注射器在距左右肝管汇合处1cm处穿刺胰胆管，且在该处夹闭胰胆管以防止逆流，缓慢注入牛黄胆酸钠溶液并远近端夹闭胰胆管10min。5-0线缝合穿刺孔。可见胰腺发生水肿充血且局部呈暗红色，并出现散在出血点，建模成功，关腹。 1.3实验分组 60只大鼠，由于造模成功24h内部分大鼠不能耐受，16只大鼠死亡，存活后44只大鼠雌性21只，雄性23只。雌雄基本相当随机分为4组，每组按125mL/(kg.d)分四次给予不同的肠内营养制剂。A组给予等量生理盐水；B组给予能全素；C组给予能全素+复合膳食纤维20g/L(SDF:IDF=1:3)；D组给能全素+复合膳食纤维20g/L(SDF:IDF=3:1)。饲养期间大鼠自由饮水。 1.4检测指标 分别于饲养的第12天的时候随机取各组的3只麻醉开腹，于24h随机取各组的4只麻醉开腹，于48h的时候随机取各组的4只麻醉开腹麻醉后开腹，并取腹主动脉血及门静脉血各5ml，离心后吸取上清液，置于-20冰箱中保存。取材完成后处死大鼠。 1.4.1D-乳酸含量测定取腹主动脉血，采用ELISA法测定血清D-乳酸含量，过程严格按照试剂盒使用说明书进行操作。 1.4.2内毒素含量测定取门静脉血，采用鲎试剂偶氮显色法测定血清内毒素浓度，过程严格按照试剂盒使用说明书进行操作。 1.5统计学方法 应用SPSS13.0软件进行统计分析；定量资料采用（xs），多组间比较采用单因素的方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验的分析方法；P0.05为差异有统计学意义。 2结果 2.1内毒素表达及含量 建模12、24、48h时C、D组大鼠血清内毒素表达较A、B组明显降低（P0.05），B组低于A组（P0.05），见表1。 表1各组大鼠血清