GB12290-1990水果、蔬菜及制品山梨酸含量的测定.pdf

中华人民共和国国家标准水果、蔬菜及制品 山 梨酸含量的测定GB 1 2 2 9 0 - 9 0Fr u i t s , v e g e t a b l e s a n d d e r i v e d p r o d u c t s一De t e r mi n a t i o n o f s o r b i c a c i d c o n t e n t 本标准参照采用国际标准I S 0 5 5 1 9 -1 9 7 8 水果、 蔬菜及制况 一山 梨酸含量的测定) o1 主题内 容与适用范围 本标准规定了水果、 蔬菜及制品中山 梨酸的提取方法和提取物中山梨酸的两种测定方法。 本标准适用于水果、 蔬菜及制品中山梨酸的测定。2 原理 匀化样品，存在于试样中 的山 梨酸通过蒸汽蒸 馏，可定量地蒸出。 所得馏出物在铜催化剂的作用下使二氧化硫氧化以除去F 扰，然后用紫外分光光度法测定山梨酸含量，或者通过铬酸氧化后用硫代巴比妥酸处理得到粉红色溶液，用分光光度法测定。3 试剂和溶液 本标准 所用试剂均为 分析 纯试剂， 使用 蒸 馏水 或相应 纯度 的水。3 . 1 酒石酸，结 晶状;3 . 2 山 梨酸标准 溶液，0 . 0 1 g / L e 准 确 称取0 . 1 0 0 9 山 梨酸 溶于1 0 一 1 2 m L 0 , 1 mo l / L 氢 氧化 钠 溶液中， 定量 的 移人 1 0 0 0 m L 容量瓶里，用水 稀释至刻 度。 吸取上 述溶液5 0 . 0 m L 置于5 0 0 m L 容 量瓶中 用水 稀释至刻 度;3 . 3 氢氧化钙溶液:0 . 0 2 M o l / L;3 . 4 铜催化剂溶液: 称取0 . 5 9 碳酸氢钠 ( G B 6 4 0 )和0 . 0 0 1 9 硫 酸铜 ( GB 6 6 5 ) ( C u S O 5 H, O) 用 蒸馏水溶 解并稀释至1 L o3 . 与 铬酸一 硫酸溶液:3 . 5 . 1 0 . 1 5 m o l / L 硫 酸 溶 液 : 取 8 . 4 m L 比 重 1 . 8 4 9 / - L 的 浓 硫 酸( G B 6 2 5 ) 加 人 水 中 ， 稀 释至1 L。3 . 5 . 2 铬酸一 1 溶液:称取0 . 0 5 9 重铬酸钾 ( G B 6 2 4 )溶于g o mL水，移人2 0 0 m L容量瓶中， 加人 0 . 1 5 m 0 1 / L 硫酸溶液， 用水 稀释至刻度;3 . 硫代巴比妥酸溶液: 称取。 . 5 0 0 g 硫代巴比 妥酸 溶于5 0 m L 水中 。加人1 0 m L l mo l / L 氢氧化 钠溶液， 移至1 0 0 m L 容量 瓶中 ， 加人1 1 m L l m o l / L 盐 酸溶 液， 用 蒸 馏水 稀 释至 刻 度 。 该溶液不稳定，必须在配制后5 h 内使用。4 仪器、设备 常用实验室仪器、没备。4 . 1 分析天平:感量0 . 0 0 1 g ;国家技术监督局1 9 9 0 一 0 3 - 2 9 批准1 9 9 0 一 1 2 一 0 1 实施免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载GB 1 2 2 9 0 -9 04 . 2 捣碎机或胡 钵;4 . 3 电热恒温水浴;4 . 4 蒸汽蒸馏装置，见下 图燕汽发生器 4 . 4 . 1 蒸汽蒸馏仪图4 . 4 . 1 蒸汽发生器: 烧瓶容量为1 0 0 0 . 1 5 0 0 m L，4 . 4 . 2 起泡器: 玻璃管直 径3 0 m m，高 2 7 0 m m 下部封闭， 末 端扩大为直 径6 0 m m 的球体， 试样放在球体内， 供气管末 端与 起 泡器底部 之间距离为l o m m 。 用电 炉或火 焰加 热均可，若 用火焰加 热时， 起泡器底部应放在一个具有孔径为 4 0 m m金属板的孔上， 使火焰反射，避免试样焦化。控制加热使起泡器中 试 样的 体积的 蒸 馏期间减少或增加的量不超过5 m L e4 . 4 . 3 分 馏柱:直 径2 0 mm，高5 0 0 m m的玻璃柱内装螺旋形1 0 0 号不锈钢网，螺旋环间距1 5 m m. 或是直 径2 0 mm,高6 0 0 m m具有玻璃定心孔的分 馏柱。 或是具有同等分 馏功能的其他装置。4 . 4 . 4 冷凝 器: 有 效长 度 4 0 0 m m ， 垂直 放 置， 以 保 证 蒸 汽的 冷凝 和 馏出 物 的完 全 冷却。4 . 4 . 5 接收烧瓶:2 0 0 、5 0 0 m L容量瓶。4 . 4 . 6 蒸 馏装置效果检查: 在正 常蒸 馏条 件下，用 2 0 m L 0 . 1 mo 1 / L 乙 酸溶液加 人 起泡器中， 在1 5一 2 0 mi n 内收集蒸 馏液2 0 0 m L，乙酸的回收率应达9 9 . 5 % -4 . 5 分光光度计:检测波长2 5 6 n -或5 3 2 n m e5 分析步骤5 . 1 试样的制备免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载GB 1 2 2 9 0 -9 05 . ， . 1 液体样品 ( 汁、 液、搪浆等)和粘稠样品 ( 果酱、 菜泥等) ，将样品充分混合后匀化。5 . 1 . 2 固体样品 ( 水果、蔬菜) 将 样 品切成 小 块， 检 去 种子 和果壳， 取约 4 0 g ， 在 捣 碎 机 或 研 钵中( 4 . 2 ) 使 其 匀 化。 冷冻的样品，首先 在密闭容器中 融化 ，将 融化 的液体与样品合并后匀化。5 . 2 试样的分 取5 . 2 . 1 液体样品 吸取l o . o -L 试样 ( 5 . 1 . 1 ) 放到起泡器 ( 4 . 4 . 2 ) 里。或称取试样1 0 9 ，精确至0 . 0 1 g .5 . 2 . 2 粘稠或固体样品 称 取l o g 试样 ( 5 . 1 . 1 ) 精确至0 . 0 1 g ，放人 起泡器 ( 4 . 4 . 2 ) 里，加水量至少 需要 淹没全部 样 品，摇匀，使其充分液化。若需要可将试样在水里浸泡1 一2 h .5 . 3 蒸馏 将。 . 5 g 酒石酸 ( 3 . 1 ) 放进 盛有试 样的起泡器里， 把起泡器与 烧瓶 ( 4 . 4 . 1 ) 和冷凝器 ( 4 . 4 . 4 ) 连结，同时加热烧瓶和起泡器，进行 蒸馏，保持起泡器内容物体积增减在5mL以内。5 . 3 . 1 对 液体样品 ( 5 . 2 . 1 ) ，收集 蒸馏液于2 0 0 m L 的容量 瓶 ( 4 . 4 . 5 ) 内 ，当 达 到刻 度 时， 停止蒸馏。5 . 3 . 2 对 粘稠或固 体样 品 ( 5 . 2 . 2 ) ， 收集 蒸 馏液于5 0 0 m L 容量 瓶 ( 4 . 4 . 5 ) 内， 蒸馏液的体积至少比 起泡器内容物体积大2 0 倍。5 . 4 测定5 . 4 . 1 方法A : 用 紫外分光光度法测定5 . 4 . 1 . 1 如果原产品含有大 蒜、 洋葱、韭菜的香精油时，为消除香精油的吸光度，用移液管取2 5 mL蒸馏液 ( 5 . 3 ) 移人小蒸发皿中，加1 . 5 一 2 . 0 m L的氢氧化钙溶液 ( 3 . 3 ) 使其呈碱性，在沸水浴( 4 . 3 )上 蒸 卜 ，5 . 4 . 1 . 2然后用 蒸馏水 溶解残 渣使 其恢复到原来的体积。 吸取1 0 . 0 m L 蒸 馏液 ( 5 . 3 ) 或 蒸干 后重新得到 的溶液 ( 5 . 4 . 1 . 1 ) 置于5 0 mL 锥形 瓶内， 加l o mL 铜催化剂 ( 3 . 4 ) , 摇动， 静置与 空气接触几分 钟。以 试剂空白 作对照，于 分光光度计 ( 4 . 5 ) 2 5 6 n - 波长处测定溶液的吸光度。5 . 4 . 1 . 3通常分取1 0 . 0 m L，相当1 2 0 0 m g / L 或k g ，对于高含量的样粼只取5 . 0 或2 . 0 .L月水稀释p I O . O .L。 标准曲线的绘制 吸 取山 梨酸标 准 溶 液 ( 3 . 2 ) 0 . 0 . 1 . 0 , 2 . 0 . 3 . 0 、 5 . 0 、 1 0 . 0 m L 分 别 置入 5 0 m L 锥形 瓶中 ，相应加入 蒸 馏水1 0 . 0 . 9 . 0 . 8 . 0 . 7 . 0 . 5 . 0 、O . O m L 使体积为l o m L ， 所得溶液的 浓度为: 0 . 1 、2 .3 . 5 . j o m g / L 的 山 梨 酸 ， 分 别 向 每 瓶中 加 铜 催 化 剂l o m L 。 以 试 剂 空 白 为 对 照， 于 分 光 光 度 计 2 5 6 n -波长处测定溶液的吸光度。以山梨酸的含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。5 . 4 . 25 . 4 . 2.方法B :分光光度法1 如 果原 产 品中 含 乙 醇， 吸取 2 5 m L 的 蒸 馏液 ( 5 . 3 ) 移 人 小 蒸发 皿中 ， 加1 .5 - - 2 . 0 mL的氢氧化钙溶液使之呈碱性，在沸水浴上蒸发到原体积的一半，用 蒸馏水冲洗皿，定量转移至2 5 mL 的容量 瓶中， 定容、 摇匀。 如果原产品含 ( 柑桔、大蒜、洋葱、 韭菜的) 香精油时，可按步骤5 . 4 . 1 . 1 进行。5 . 4 . 2 . 2 吸取1 0 . 0 m L 蒸馏液 ( 5 . 3 ) 或经处理制 得的溶 液 ( 5 . 4 . 2 . 1 ) 于2 5 m L 容 量瓶中 ， 加 人4 m L铬 酸一 硫 酸 溶 液 ( 3 . 5 ) ， 放人 沸水 浴中 l o m i n 。 加4 m L 硫代 巴比 妥酸 溶液 ( 3 . 6 ) ， 再 置 沸水 浴中2 0 mi n 。 溶液呈 粉红色， 取出 放在冰水浴中 冷却，用 蒸馏水 稀释至刻度。 同时按上述方法制备试剂空白溶液。 在3 0 m i n 内 ，以试 剂空白 作对照，于分光光度计 5 3 2 n m 波长处测定溶液的吸光度。5 . 4 . 2 . 3 标准曲线的绘制 配 制2 . 0 mg / L 山 梨酸标准液，用4 体积水 稀释1 体积 的标准 溶液 ( 3 . 2 ) 。 吸取该液0 . 0 、 z . 0 、免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载GB 1 2 2 9 0 -9 04 . 0 . 6 . 0 . 8 . 0 . 1 0 . 0 m L 分别置人6 个2 5 mL 的容量瓶内，相应加人水1 0 . 0 . 8 . 0 . 6 . 0 . 4 . 0 .2 . 0 、 0 . 0 mL，使体积至l o mL ,所得标准系列的浓度为0 、 0 . 4 . 0 . 8 . 1 . 2 、1 . 6 、2 . 0 mg / L山梨酸。以下步骤按试样的测定 ( 5 . 4 . 2 . 2 ) 进行。 以山梨酸的含量为横坐标，吸光度为纵坐标， 绘制 标准曲 线。6 分析结果表示6 . 1 计算方法和公式6 . 1 . 1 液体样品山梨酸含量以mg / L 表示， 山梨酸按式 ( 1 )( mg / L)计算:m i x 2 0 0 ” ( 1 )一。式中:。; 在标准曲线上查得蒸溜液 ( 5 . 3 . 1 )中山梨酸的含量，mg / L; Vi 在5 . 4 . 1 . 2 或5 . 4 . 2 . 2 中 所取的体积，mL ( 见5 . 4 . 1 . 2“ 注 ) 。6 . 1 . 2 粘稠或固体样 品 山梨酸含量以mg / k g 表示，按式 ( 2 )计算:山梨酸 ( mg / k g )m, xVx1 0二 二 一. . 。.- . .。 x犷 1(2) 阴式中:二 。 试样的重量，9 。 m; 在标准曲线上查得蒸馏液 ( 5 . 3 . 2 ) Y 收集 蒸 馏液的体积 ( 5 . 3 . 2 ) ， m L ;中 山 梨酸的 含量，mg / L; IJ , 在5 . 4 . 1 . 2 或5 . 4 . 2 . 2 中所取的体积，