GB9695.6-1988肉制品胭脂红着色剂测定.pdf

中华人民共和 国国家标准UD C 6 3 7 . 5 1 / . 5 2 : 5 4 3 . 0 6肉制品胭脂红着色剂测定GB 9 695. 6一 8Me a t p r o d u c t s -Me t h o d f o r d e t e r mi n a t i o no f a r t i f i c i a l c o l o u r p o n c e a u一4 R1 主题内容与适用范围 本标准规定了肉制品中胭脂红着色剂的测定方法。 本标准适用于仅含 胭脂红着色剂的肉制品中胭脂红的测定。2 引用标准 G B 9 6 9 5 . 1 9 肉与肉制品 取样方法3 原理 试样脱脂后用碱性溶液提取胭脂红色素， 提取液沉淀蛋白 质， 用聚酞胺粉使胭脂红吸附和解吸而纯化，用比色法测定。4 试剂 除另 有说明外。 所用试剂均为分析纯，所用水为蒸馏水或相当 纯度的水。4 . 1 聚酞胺粉 ( 尼龙6 ) : 2 0 0 目。4 . 2 硫酸 ( GB 6 2 5 ) : 1: 1 0 溶液。4 . 3 柠檬酸 ( H G 3 一1 1 0 8 ) : 2 0 %溶液。4 . 4 钨酸钠 ( H G B 3 1 7 2 ) : 1 0 % 溶液。4 . 5 石油醚 ( HG 3 -1 0 0 3 ) :沸程6 0 一 9 0 C ,4 . 6 海 砂:化学纯，先用 1 : 1 0 盐酸溶液煮沸1 5 m i n ， 用水洗至中 性， 再用5 % 氢氧化钠溶液煮沸1 5 m i n ,用水洗至中 性，于1 0 5 干 燥，贮于具 塞瓶中，备用。4 . 7 乙 醇一 氨溶液: 取氨水1 m L ，加7 0 %乙 醇至I O o m L ,4 . 8 氢氧化胺 ( GB 6 3 1 ) : 1 : 9 9 溶液。4 . 9 胭脂红标准溶液:4 . 9 . 1 胭脂红标准贮备液:称取胭脂红食用色素0 . 1 0 0 9 ， 用2 0 % 柠檬酸酸化至p H 6 的水定容至l o o m ,此溶液胭脂红含量为 1 m g . m L ,4 . 9 . 2 胭脂红标准使用液: 临用时吸取标准贮备液5 . O m L ， 用2 0 % 柠檬酸酸化至p H 6 的水定容至5 0 n il此溶液胭脂红含I为0 . 1 m g m L ,5 仪器和设备5 . 1 实验室常规仪器和设备。5 . 2 绞肉机:孔径不超过 4 m m a5 . 3 G, 砂芯漏斗。5 . 4 分光光度计。中华人民共和国商业部1 9 8 8 - 0 2 - 2 5 批准1 9 8 9 一 0 3一 0 1 实施GB 9 6 9 5. 6 一 二6 . 1试样 按G B 9 6 9 5 . 1 9 取样。6 . 2 至少取有代表性的试样2 0 0 g ，于 绞肉机中至少绞两 次使其均质化并混匀， 试样贮存期间必须防止腐败和成分变化，尽快分析试样。7 分析步骤7 . 1 提取 称取试样5 . 0 一1 0 . 0 g 置研钵中，加海 砂少许，仔细研磨至粉末状，吹冷风使试样略为- F . 燥，加人石油醚5 0 m L , 搅拌，放置片刻，倾出石油醚，如此重复处理三 次， 除去脂肪，吹干。加人乙 醇 一氨溶液提取胭脂红，通过砂芯漏斗抽滤提取液，反复多次，直至胭脂红全部提完，收集全部提取液于2 5 0 m L 锥形瓶中。7 . 2 沉淀蛋白质 在水浴上使提取液浓缩至l o m L 以下，依次加人1 : 1 0 硫酸溶液1 . O m L 和1 0 0/ a 钨酸钠溶液1 m L混匀，继续加热5 m i n ，沉淀蛋白 质。取下，彻底冷却至室温， 过滤，用少量水洗涤滤纸， 滤液准确稀释至5 0 m L 或1 0 0 m L ，备用。7 . 8 纯化 吸取滤液2 5 . O m L 于1 0 0 m L 锥形瓶中，在水浴上加热到7 0 C ，加人聚酞胺粉0 . 5 - - 1 g ， 充分搅拌，使胭脂红完全被吸附。将聚酞胺粉全部 转人G 3 砂芯漏斗，缓慢地抽滤。用2 0 % 柠檬酸酸化至p H 4的7 0 水分三次洗涤，每次2 0 m L ，再用7 0 水多次洗涤至滤液为中性。 以上洗涤过程要搅拌。 用 1 : 9 9 氨溶液分次解吸全部胭脂红色素， 收集全部解吸液，于水浴上驱氨， 准确稀释至2 5 m L 或5 0 m 1 ， 备用。 同一试样进行两次测定，并做空白试验。了 . 4 测定 分别吸取胭脂红标准使用液0 . 0 , 2 . 0 , 4 . 0 , 6 . 0 , 8 . 0 , 1 0 . 0 m L 置5 0 m L 容量瓶中， 稀释至刻度，此时瓶中 胭脂红浓度分别为。 、4 , 8 , 1 2 , 1 6 , 2 0 11 g / m L ，上述标准溶液用 l c m 比色 杯，以标准系列空白调节零点，在5 1 0 n m 波长下测定吸光度， 绘制标准曲线。 试液用1 c m 比色 祠，以试剂空白 调节 零点，与 标准同 样条 件测定。根据试液的吸光度从标准曲 线上 查 得相 应的 胭脂红 浓度。8 分析结果的计算x ( g / k g ) cx1 0 一 62 5 1川 x V i- x 不 -, “式中: x 试 样中 胭脂红 含量，g / k g r 。 试液中 胭脂红 浓度，卜 gm L , 。试样质量，9 ， 厂) 试样沉淀蛋白 质后总体积，m L r Vp 试样胭脂红解吸后总体积，m L o 当 分 析 结 果 符 合 允 许 差 的 要 求 时 ， 则 取两 次 测 定 的 算 术 平 均 值 作 为 结 果 ， 精 确 至 0 . 0 0 1 g k g .9 允许差 由同一 分 析 者同 时 或 相 继 进 行 的 两 次 侧 定 结果 之 差 不 得 超 过0 .0 1 g / k g .GB 二 公 肠