标准解读
《WS/T 66-1996 全血胆碱酯酶活性的分光光度测定方法 羟胺三氯化铁法》是一项用于测定全血中胆碱酯酶活性的技术标准。该标准主要适用于医学检验领域,特别是对于有机磷和氨基甲酸酯类农药中毒的诊断具有重要意义,因为这类物质能够抑制胆碱酯酶活性,导致乙酰胆碱在体内积累,进而引发一系列临床症状。
标准详细描述了使用羟胺与三氯化铁反应生成有色化合物的方法来间接测量胆碱酯酶活性的过程。具体步骤包括样品采集、处理以及通过添加特定试剂后观察颜色变化并利用分光光度计读取吸光度值。其中,羟胺作为底物,在胆碱酯酶作用下转化为产物;随后加入三氯化铁溶液,形成的络合物呈现出特定波长下的最大吸收峰,从而实现对酶活性水平的定量分析。
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- 现行
- 正在执行有效
- 1996-10-14 颁布
- 1997-05-01 实施
©正版授权
文档简介
W8中华人民共和国卫生行业标准WS/T66-1996全血胆碱酯酶活性的分光光度测定方法羟胺三氯化铁法Blood-Determinatoinofcholinesteraseactivity-Spectrophotometricmethod-Hydroxylamine-ferricchloridemethod1996-10-14发布1997-05-01实施中华人民共和国卫生部发布中华人民共和国卫生行业标准全血胆碱酯酶活性的分光光度测定方法WS/T66-1996轻胺三氯化铁法Blood-Determinatoinofcholinesteraseactivity-Spectrophotometricmethod-Hydroxylamine-ferricchloridemethod主题内客与适用范园本标准规定了血中胆碱酯酶活性的分光光度测定方法羟胺三氯化铁法。本法最低检测浓度为2.4rmol/L。本标准适用于正常人和接触有机磷农药人员血中胆碱酯酵活性的测定。2原理血液胆碱酯酶使乙酰胆破分解为胆碱和乙酸。未被胆碱酯酶水解而剩余的乙酰胆碱与碱性经胺反应,生成乙酰羟胺,然后,与三氯化铁在酸性溶液中反应,形成红色羟后酸铁络合物。颜色深度与剩余乙酰胆碱的量成正比。在波长520m比色定量,由水解的乙酰胆碱的量计算胆碱酯酶活性。仪器3.1分光光度计,10mm比色杯3.2比色管,10mL。3.3替通漏斗,40mmm。3.4恒温水浴箱,控温士0.5。3.5采血针头。3.6血色素吸管,有20rL刻度。4试剂本标准所用试剂均为分析纯试剂。4.1实验用水,蒸馆水或具同等纯度的去离子水。4.2盐酸,940-1.198/mL。43盐酸溶液(1+2)。4.44碱性羟胺溶液,临用前将139g/L盐酸羟胺溶液和140g/L氢氧化钠溶液等体积混合。4.5磷酸盐缓冲液(pH-7.20),准确称取碑酸氢二钠(Na.HPO,12H.O)8.36g和磷酸二氢钾(KH.PO.)1.36g,用水溶解并稀释到500mL,保存在冰箱内。4.6三氯化铁溶液,称取10g三氯化铁(FeCl,6H.O)加0.84mL盐酸(4.2),然后加水100mL。则存于棕色瓶中。4.7氯化乙酰胆藏标准液,精确称取乙酰胆碱1.2716g,用磷酸盐缓冲液(4.5)溶解,并稀释到100mL,此溶液1mL相当于70“mol乙酰胆碱,为备液。临用前
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