开题报告-离心脱水污泥施用对上海青生长及其迁转重金属的影响.doc

华侨大学本科毕业论文(设计)开题报告学院：化工学院 专业班级：环境工程姓名学号指导教师职称学历学生本科课题名称离心脱水污泥施用对上海青生长及其迁转重金属的影响设计（论文）类型（划）工程设计应用研究开发研究基础研究其它1、本课题的的研究目的和意义：城市污泥（municipal sewage sludge），又称生物固体（bio-solid），是指城市污水处理厂在处理污水过程中产生的沉淀物质。城市污泥中富含作物生长所需的有机质、氮和磷等营养物质，污泥的土地利用可使作物增产，是适合我国国情和最有发展前景的处置方式。若处理不当，污泥中的重金属会对植物生长产生制约作用，并可通过植物的吸收富集作用进入食物链而对人体健康造成威胁。城市污泥中重金属的总量很难表征其污染特性和危害，重金属的迁移转化规律、生物有效性、生物毒性及可能产生的环境危害更大程度上取决于其赋存形态。定性、定量地测定样品中元素的形态是评价元素毒性、生物有效性，研究其迁移转化规律的重要依据。因此，研究重金属在城市污泥中的赋存形态、迁移能力和生物有效性，采取有效对策减少污泥中重金属对生态环境造成的危害，具有重要的理论和现实意义。2、文献综述（国内外研究情况及其发展）：加强城市污泥资源化利用的研究与实践，解决污泥处置中的难题，避免城市生态环境污染，节约处置费用，变废为宝，使之具有良好的生态效益、环境效益、经济效益和社会效益，是城市可持续发展的必然要求和发展趋势。污泥的资源化处理和处置，就是通过适当的技术措施，使污泥得到再利用或以某种不损害环境的形式而重新返回到自然环境中。城市污泥含有大量的有机质、养分，能为作物提供营养成分、改良和培肥土壤，故从经济的发展、资源的开发利用、城市生态环境的保护等方面来看，污泥土地利用被看成是污泥处理的最佳途径。污泥的土地利用包括污泥直接或堆肥后施用于农田、牧场、园林绿地。城市污泥迫切需要寻求一种处理容量大、环境安全和经济可行的处置方法。实践证明，农用资源化正是这样一种具有广阔前景的污泥处置方法，一直深受世界各国重视。污泥的土地利用资源化有利于维持和提高土壤肥力，有利于土壤资源的可持续利用和农业的可持续发展。研究表明，施用污泥或污泥堆肥栽种水稻、玉米、小麦、棉花、蔬菜等作物，植株的生长状况、产量和品质明显比不施肥好，与施用化肥或优质农家肥相当，甚至更好。施用污泥或污泥堆肥能明显改善土壤的物理性质，如有利于团粒的形成和提高团粒的水稳定性；可增加土壤的孔隙度，提高土城的持水能力和保水能力等。施用污泥或污泥堆肥，还能明显改善土壤的化学性质，如能显著地提高土壤氛、磷、钾(全量和有效态)和有机质的含量等。3、本课题的主要研究内容（提纲）和成果形式：随着城市化进程的加快、城市人口的增加，工业废水和生活污水的排放量日益增多，污泥的产量日益增加。如何对产量巨大、成分复杂的污泥进行无害化、资源化利用，已经成为世界瞩目的课题之一。而污泥农用作为污泥的资源化利用的一种方法，既可以利用污泥的养分，提高土壤肥力改善土壤质量，又可以避免农肥滥用带来的危害，还可以便农作物增产，因此，污泥的绿化施用是污泥处理的良好选择。本文以厦门市有代表性的生活污泥厦门筼筜污水处理厂污泥为主要研究对象，本实验为探索性实验，对污泥各成分含量及污泥的绿化施用效果进行实验研究。主要研究内容如下：通过实验，分析厦门普通土壤和筼筜污水处理厂污泥的主要理化性质；研究不同配比污泥的施用对上海青长势和鲜、干重的影响；探索实验前后重金属的形态变化及营养元素在土壤及植株间的迁移转化。在不同污泥含量的土壤中，上海青呈现出不同的长势情况，通过比较得出污泥的最佳施用配比，为后续的污泥农用研究提供依据。4、拟解决的关键问题：在不同污泥与土壤配比下，控制影响上海青生长条件尽量不变。精确测定重金属元素含量，阐明重金属元素在土壤/污泥中的存在形态及其含量，探讨城市污泥中重金属的生物有效性。5、研究思路、方法和步骤：1实验方法1.1样品采集与处理：1）样品采集样品均为污水厂经过脱水后的新鲜污泥，在现场以四分法采集新鲜污泥（3.0 kg），带回实验室进行风干处理。把风干后的污泥以木锤轻轻敲碎后按照等质量比例混合均匀，再以四分法污泥取样，装入密封袋中以备进一步处理。盆栽土壤取自华侨大学厦门校区裸露土，为酸性红壤。挑选沙粒和杂质少的土壤，以四分法采集土壤，取回实验室。2）样品预处理污泥样品采集带回实验室后，取一部分新鲜样品进行含水率(Water Content)的测定；其余均于室内进行自然风干处理。风干后污泥样品，首先以木锤轻轻敲碎，拣出其中的毛发、沙子以及其它杂物；然后以玛瑙研钵研磨后过20目尼龙筛网，于干燥玻璃瓶中储存待进一步分析。土壤自然风干，磨细过筛，装袋备用。1.2样品理化指标分析方法主要分析的土壤/污泥理化指标有pH，EC， CEC，TN， TP，TK，有机质，含水率，速效氮，速效磷，速效钾，碳酸钙等。 (1) pH和EC的测定方法称取4.0000+0. 0005 g经研磨过20目筛后的样品于50 ml烧杯中(采用水土比5: 1)，加入20 ml去离子水，混匀。用玻璃棒搅拌3-5分钟，静置10分钟。用pH计将电极插入悬液中(上层上部)测定其pH值，同时用电导率仪测定其电导率EC。(2)有机质的测定方法采用重量法测定有机质和含水率。有机质测定操作步骤：1.用已恒重为m1，的瓷坩埚在天平上称取约10 g的样品。2.将称有样品的瓷堵竭放在水浴锅上蒸，待其中水分蒸发近干，将其移人烘箱内103105烘干2h，取出放人干燥器内，冷却约。.5h后称重，反复几次，直到恒重为m2。3.将烘干后的样品和瓷坩埚放人马弗炉中(550士50)灼烧1h，关掉电源，待炉内温度降至200左右时取出，放人干燥器，冷却后称重为m3。含水率测定操作步骤： 1.用已恒重为m1的蒸发皿称取经捣碎均匀的污泥样品约20 g，该样品准确称至0. 001 g记为m。2.对于含水较高的污泥样品，应先将盛放样品的蒸发皿置于水浴锅上蒸干；对于经脱水后的污泥样品，可直接放入103105烘箱中千燥2 h，取出放人干燥器中冷却至室温，称重，反复多次，直至恒重记为m2。(3)样品中总氮(TN)的测定污泥的TN采用-半微量开氏法（开氏消煮，分光光度法）测定。操作步骤：1.在分析天平上称取通过60号筛(孔径为0.25mm)的风干样品0.51g(精确到0.001g)，然后放入150ml开氏瓶中。2.加浓硫酸(H2SO4)5ml，并在瓶口加一只弯颈小漏斗，然后放在调温电炉上高温消煮15分钟左右，使硫酸大量冒烟，当看不到黑色碳粒存在时即可(如果有机质含量超过5%时，应加12g焦硫酸钾，以提高温度加强硫酸的氧化能力)。3.待冷却后，加5ml饱和重铬酸钾溶液，在电炉上微沸5分钟，这时切勿使硫酸发烟。4.消化结束后，在开氏瓶中加蒸馏水或不含氮的自来水70ml，摇匀后接在蒸馏装置上，再用筒形漏斗通过Y形管缓缓加入40%氢氧化钠(NaOH)25ml。5.将三角瓶接在冷凝管的下端，并使冷凝管浸在三角瓶的液面下，三角瓶内盛有25ml 2%硼酸吸收液和定氮混合指示剂1滴。6.将螺丝夹打开(蒸汽发生器内的水要预先加热至沸)，通入蒸汽，并打开电炉和通自来水冷凝。7.蒸馏20分钟后，检查蒸馏是否完全。检查方法：取出三角瓶，在冷凝管下端取1滴蒸出液于白色瓷板上，加纳氏试剂1滴，如无黄色出现，即表示蒸馏完全，否则应继续蒸馏，直到蒸馏完全为止(或用红色石蕊试纸检验)。8.蒸馏完全后，降低三角瓶的位置，使冷凝管的下端离开液面，用少量蒸馏水冲洗冷凝的管的下端(洗入三角瓶中)，然后用0.02mol/L盐酸(HCl)标准液滴定，溶液由蓝色变为酒红色时即为终点。记下消耗标准盐酸的毫升数。(4) 样品中全磷(TP)的测定全磷的测定采用硫酸一高氯酸消煮法。操作步骤：1.在分析天平上准确称取通过100目筛(孔径为0.25mm)的样品1g(精确到0.0001)置于50ml三角瓶中，以少量水湿润，并加入浓H2SO48ml，摇动后(最好放置过夜)再加入7072%的高氯酸(HClO4)10滴摇匀。2.于瓶口上放一小漏斗，置于电炉上加热消煮至瓶内溶液开始转白后，继续消煮20分钟，全部消煮时间约为4560分钟。3.将冷却后的消煮液用水小心地洗入100ml容量瓶中，冲冼时用水应少量多次。轻轻摇动容量瓶，待完全冷却后，用水定容，用干燥漏斗和无磷滤纸将溶液滤入干燥的100ml三角瓶中。同时做空白试验。4.吸取滤液210ml于50ml容量瓶中，用水稀释至30ml，加二硝基酚指示剂2滴，用稀氢氧化钠(NaOH)溶液和稀硫酸(H2SO4)溶液调节pH至溶液刚呈微黄色。5.加入钼锑抗显色剂5ml，摇匀，用水定容至刻度。6.在室温高于15的条件下放置30分钟后，在分光光度计上以700nm的波长比色，以空白试验溶液为参比液调零点，读取吸收值，在工作曲线上查出显色液的Pmg/L数。7.工作曲线的绘制。分别吸取5mg/L标准溶液0，1，2，3，4，5，6ml于50ml容量瓶中，加水稀释至约30ml，加入钼锑抗显色剂5ml,摇匀定容。即得0，0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,mg/LP标准系列溶液，与待测溶液同时比色，读取吸收值。在方格坐标纸上以吸收值为纵坐标，Pmg/L数为横坐标，绘制成工作曲线。(5)样品中全钾(TK)的测定土壤全钾的测定可用NaOH熔融火焰光度计法。操作步骤：称取烘干样品(100目)0.25xxg于银坩埚底部，加几滴无水酒精湿润之，然后加0.2g固体NaOH，平铺于样品的表面，暂放于大干燥器中，以防吸湿。将坩埚放在高温电炉内，由低温升至720保持此温度15分钟。(坩埚必须在低温时放入电炉)，当炉温升至400时关闭电源15分钟后继续升温。这样可以避免坩埚 内NaOH和样品溢出。取出稍冷，加入10ml水，加热至80左右，待熔块溶解后，再煮沸5分钟，转入50ml容量瓶中，然后用少量0.2mol/LH2SO4溶液清洗数次，一起倒入容量瓶内，使总体积至约40ml,再加1：1HCl5滴和4.5mol/LH2SO45ml用水定容，过滤。吸取滤液5.00或10.00ml于50ml容量瓶中(钾的浓度最好控制在1030mg/L，用水定容，直接在火焰光度计上测定，记录读数，同时测得钾标准系列溶液的读数值，绘制工作曲线，然后从工作曲线上查得待测液的钾浓度mg/L。(6)样品中阳离子交换量(CEC)的测定采用氯化钡一硫酸快速测定法。操作步骤:称取样品1. 000g摊放入离心管中(称重)，加入1N BaCl2 20-25mL，用BaCl2溶液调节各管重量一致。搅拌样品1分钟离心3分钟，倒出上清液再加入BaCl2 20-25mL交换一次。加入20-30mL蒸馏水于离心管中，搅拌离心一次，倾净上清夜，称重。准确加入25mL0. 05N H2S04溶液，充分搅拌样品，放置数分钟后离心。精确吸取l0mL上清夜放入小三角瓶中，加入酚酞1-2滴，用半微量滴定管，以标准NaOH滴定。同时用标准NaOH滴定1份10mLH2S04溶液。两份滴定结果之差，即可计算交换量。 (7) 样品中速效氮的测定样品中速效氮的测定采用碱解蒸馏法测定。操作步骤：1.称取过0.25mm筛孔的风干土样15g（有机质含量高的样品称0.51g，精确至0.001g）。加还原剂锌铁粉1.2g，置于小烧杯中，拌匀后倒入定氮蒸馏室，并用少量蒸馏水冲洗壁上面的样品，加4N NaOH溶液12ml，液体石蜡油1ml（防止发泡），使蒸馏室内总体积达50ml左右，此时剩余碱的浓度约1N。2.吸取10ml 2%的硼酸溶液，放入150ml三角瓶中。加定氮混合指示剂一滴，置于冷凝管的承接管下，将管口浸入硼酸溶液中，以防氨损失。3.通气蒸馏，待三角瓶中溶液颜色由红变绿时记时，继续蒸馏10分钟，并调节蒸汽大小，使三角瓶中溶液体积在50ml左右用少量蒸馏水冲洗浸入硼酸溶液中的承接管下端。4.取出后用0.01N的盐酸滴定，颜色由兰变至微红色即为终点。测定时须做空白实验，即除不加土样外，其它均与样品操作方法相同。(8) 样品中速效磷的测定样品中速效磷的测定采用NaHC03溶液浸提，钼锑抗比色法测定。操作步骤：1.称取通过18号筛(孔径为1mm)的风干土样5g(精确到0.01g)于200ml三角瓶中，准确加入0.5mol/L碳酸氢钠溶液100ml,再加一小角勺无磷活性碳，塞紧瓶塞，在振荡机上振荡30分钟(振荡机速率为每分钟150180次)，立即用无磷滤纸干过滤，滤液承接于100ml三角瓶中。最初78ml滤液弃去。2.吸取滤液10ml(含磷量高时吸取2.55ml；同时应补加0.5mol/L碳酸氢钠溶液至10ml)于50ml量瓶中，加硫酸钼锑抗混合显色剂5ml充分摇匀，排出二氧化碳后加水定容至刻度，再充分摇匀。3.30分钟后，在分光光度计上比色(波长660nm)，比色时须同时做空白测定。4.磷标准曲线绘制：分别吸取5mg/L磷标准溶液0、1、2、3、4、5ml于50ml容量瓶中，每一容量瓶即为0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/L磷，再逐个加入0.5mol/L碳酸氢钠10ml和硫酸一钼锑抗混合显色剂5ml，然后同待测液一样进行比色。绘制标准曲线。(9) 样品中速效钾的测定样品中速效钾的测定采用NH40Ac浸提，火焰光度法测定。操作步骤：称取风干土样(1mm孔径)5.g于150ml三角瓶中，加1mol/LNH4OAc溶液50.0ml(土液比为1：10)，用橡皮塞塞紧，在2025下振荡30分钟用干滤纸过滤，滤液与钾标准系列溶液一起在火焰光度计上进行测定，在方格纸上绘制成曲线，根据待测液的读数值查出相对应的mg/L数，并计算出土壤中速效钾的含量。(10) 土壤碳酸钙的测定土壤碳酸钙的测定采用中和滴定法。操作步骤：1.准确称取l.000 g土壤样品于称量瓶中，加入5 mL含4 mol/L HCl，并迅速盖好瓶盖，称取此时小烧杯的总重量。同时做一个挥发空白。2.称取0.1000 g CaCO3粉末于同一型号的称量瓶中，另取一个称量瓶加入5mL含4 mol/L HCl溶液，并分别称量这两个称量瓶的重量记为W1、W2，然后将盐酸溶液倒入碳酸钙粉末中，称量盛放盐酸溶液的称量瓶的重量记为W3，得到碳酸钙加盐酸后的重量为（W1+W2-W3）。3.不时轻轻搅拌小烧杯，使HCl与土壤样品充分接触，2 h后，准确称重，得到反应前后的重量之差再减去空白重量之差为P（称完后保留，待测S2-），得到碳酸钙反应前后的重量之差再减去空白重量之差为Q。样品中的CaCO3的含量可用下式表示：CaCO3(%)=0.1P100/Q。1.3污泥中金属总量与形态分析方法1.3.1重金属指标的选择为确定样品中金属种类，预先对各污泥中各类重金属总量进行了预测定，考虑到实验过程中存在的误差，选取其中含量较高，并且在实验操作过程中相对稳定的8中金属，Cd, Cr, Cu, Mn, Hg, Ni, Pb和Zn。1.3.2污泥/土壤中重金属的总量分析取样1.000g于50ml离心管中，加7mL浓HCL，逐滴加入2.3mL浓HNO3，室温下放16h（过夜），水浴逐渐加热至微沸并保持2h。冷至室温，离心分离（若离心不好，可用0.45微米滤膜过滤），上清液转于50mL容量瓶中，用3%硝酸溶液洗2-3次（10mL/次），离心，上清液合并于上述50mL容量瓶中，用3%硝酸溶液定容至刻度，4保存，待测。1.3.3污泥中重金属的形态提取方法本文采用改进的BCR四步提取法研究污泥样品中重金属元素的形态分布。该方法已成功的运用于土壤、沉积物、城市污泥等不同样品的重金属的元素形态分析研究。重金属不同形态的提取步骤如下：准确称取1g试样于50ml塑料离心管中，按以下步骤分级提取：A.弱酸溶态-可交换态和碳酸盐结合态：加20mL 0.11mol/L 醋酸溶液。盖紧离心管盖，将离心管置于恒温振荡器上，调节合适振速（802rpm）使样品处于完全悬浮状态，225下振荡16 h。4000rpm离心6-8min。上清液于50mL容量瓶中。超纯水洗涤残渣2次（约10mL/次），离心，上清液合并于上述50mL容量瓶中，加1.5mL浓HNO3，摇匀，用超纯水定容至刻度，冰箱4保存待测。B.可还原态-铁、锰氧化物结合态：向A残渣中加入20mL 0.5mol/L盐酸羟胺溶液（先用2mol/L硝酸调节pH约为1.5），轻摇离心管使管壁的所有样品均进入溶液中。将离心管置于振荡器上，调节合适的振荡频率（802rpm）使样品处于完全悬浮状态。225下连续振荡16h。离心、转移、保存步骤同A。C.可氧化态-有机物和硫化物结合态：缓慢向B的残渣中加5mL的30%H2O2（pH=2-3），以防剧烈反应造成样品损失。松松地盖上盖，间歇摇动离心管，在室温下消解1 h。然后将其移至水浴锅中，于852条件下消解约1h，去盖，继续在852下加热至离心管内溶液近干（剩2-3mL）。再加5mL的30%H2O2，松松地盖上盖，852消解约1h，去盖，温度条件下继续加热至溶液近干（剩2-3mL）。从水浴锅中取出离心管，加入25mL 1.0mol/L的乙酸铵溶液（预先用浓硝酸调节pH=2），225下振荡16h（过夜）。离心、转移、保存步骤同A。D.残渣态-与矿物晶体强烈结合态：向C后离心管内的残渣中加入加7mL浓HCl，逐滴加入2.3mL浓HNO3，室温下放16h（过夜），水浴逐渐加热至微沸并保持2h。冷至室温，离心分离（若离心不好，可用0.45微米滤膜过滤），上清液转于50mL容量瓶中，用3%硝酸溶液洗2-3次（10mL/次），离心，上清液合并于上述50mL容量瓶中，用3%硝酸溶液定容至刻度，4保存，待测。1.4污泥中重金属生物有效性研究1.4.1污泥在农业和园林绿化中的应用植物选择：上海青小白菜。生长期间的浇水及病虫害防治等管理工作均按常规方法进行，要求各处理一致。试验期间观察植物的生长。并对叶片取样测定叶片叶绿素含量。收获后，将地下部仔细地从土壤中分离出来，用蒸馏水洗净，地上部和地下部分别烘干称重，磨碎后过100目筛保存，分别测定地上部和地下部中N. P, K, Cd, Cr, Cu, Mn, Hg, Ni, Pb和Zn的含量。同时，将盆栽土壤各处理分别取样，风干过18目筛，测定土壤中Cd, Cr, Cu, Mn, Hg, Ni, Pb和Zn的含量。1.4.2植物样品预处理 植物样品采集后要及时杀青，杀青的作用是:避免植物发霉，并减少植株体内由酶的催化作用而造成有机质的严重损失。杀青方法是:把采集的植物鲜样(采集植物地下样品时，需要将植物表面的土壤洗尽，然后晾干)放入大的纸质信封中，然后放入烘箱中，先在105时烘半小时，然后将烘箱温度调到60 ,至植物样品烘干为止。将烘干的植物样品用粉碎机粉碎，然后过40目筛孔的筛子，留作备用。1.4.3污泥对植物生长及养分含量的影响 由于实验对植物的考察主要从植物生长状况及对养分的吸收方面进行，所以选择了植物的生物量、全氮、全磷作为测试指标。各测试指标简单介绍如下: (1)生物量 将收割的植物样品，用清水洗净后，晾干，然后再用吸水性好的纸张吸去植物样品中残留的水分，经过上述处理后，置于天平上所称得的质量即为植物样品的生物量。 (2)全氮全氮采用常规消煮-蒸馏法测定。消煮：称取植物样品(0.5mm)0.30.5g(准确至0.0002g)装入100ml开氏瓶的底部，加浓硫酸5ml，摇匀(最好放置过夜)，在电炉上先小火加热，待H2SO4发白烟后再升高温度，当溶液呈均匀的棕黑色时取下，稍冷后加6滴H2O2，再加热至微沸，消煮约710分钟，稍冷后重复加H22再消煮，如此重复数次，每次添加的H22应逐次减少，消煮至溶液呈无色或清亮后，再加热约10分钟，除去剩余的H2O2，取下冷却后，用水将消煮液无损转移入100ml容量瓶中，冷却至室温后定容(v1)。用无磷钾的干燥滤纸过滤，或放置澄清后吸取清液测定氮、磷、钾。采用蒸馏法方法定氮。吸取定容后的消煮液5.0010.00ml，(V2，含NH4N约1ml)，注入半微量蒸馏器的内室，另取150ml三角瓶，内加入5ml2%H3BO3指示剂溶液，放在冷凝管下端，管口置于H3BO3液面以下，然后向蒸馏器内室慢慢加入约3ml40%(m/v)NaOH溶液，通入蒸气蒸馏，(注意开放冷凝水，勿使馏出液的温度超过40)待馏出液体积约达5060ml时，停止蒸馏，用少量已调节至pH为4.5的水冲洗冷凝管末端。用酸标准溶液滴定馏出液至由蓝绿色突变为紫红色(终点的颜色应和空白测定的终点相同)。用酸标准溶液，同时进行空白液的蒸馏测定，以校正试剂和滴定误差。 (3)全磷植物植株全磷的测定依然采用酸溶钼锑抗比色法测定。但是由于植物中的全磷含量比土壤中高很多，所以在移液时吸取2mL，再稀释至标线，其他步骤同土壤全磷的操作步骤测定。(4)全钾应用火焰光度法。吸取定容后的消煮液5.0010.00ml(v)放入50ml容量瓶中，用水定容(v3)。直接在火焰光度计上测定，读取检流计读数。1.4.4叶绿素含量的测定叶片中叶绿素含量的测定：从植株上选取有代表性的叶片，洗净擦干后剪碎混匀，称取0.5 g叶片置于研钵中，加入2 ml丙酮和少许碳酸钙磨碎，再加入5 ml80%丙酮，研磨成匀浆。将匀浆用80%丙酮定容至10 ml，摇匀后马上吸取2 ml置一试管中，再加入80%丙酮(加入体积可根据色素提取液的颜色深浅决定)进一步提取，静止或离心后，用滴管吸出上清夜，供测定用。 将上述色素提取液放入1 cm光程的比色杯中，用80%丙酮为对照，分别测定663nm, 645nm处的吸光度值。 叶绿素总量(mg/L ) =20.2A645+8.02A663叶绿素a：Ca=12.7A6632.69A645；叶绿素b：Cb=22.9A6454.69A663将测得的叶绿素的吸光度值代入公式中，计算出色素提取液中叶绿素总量的浓度。再根据稀释倍数计算出每g鲜叶中所含叶绿素总量的含量。1.4.5植物样品中硝酸盐的测定硝酸盐含量采用水杨酸-比色法测定。操作步骤：（1）样品液的制备，取一定量的植物材料剪碎混匀后，精确称取2-3克分别放入三支刻度试管中，加入10cm3无离子水，用玻璃塞封口，置入沸水浴中提取30分钟，到时间后取出，用自来水冷却，将是取液过滤到25cm3容量瓶中，并反复冲洗残渣，最的定容至刻度。（2）样口液的测定 吸取样品0.1 cm3分别于三支刻度试管中，然后加入5%水杨酸一硫酸溶液0.4 cm3，混匀后置室温下20分钟，再慢慢加入9. 5 cm3 8%NaOH溶液，待冷却至室温后，以空白作参比，在410nm波长下测期吸光度。在标准曲线上查得或用回归方程计算出NO3-N浓度，再用下公式计算其含量。1.4.6植物样品中超氧化物歧化酶的测定植物样品中超氧化物歧化酶采用邻苯三酚自氧化法测定。操作步骤：1、植物超氧化物歧化酶样品1.00g置于研钵中，加入9.0ml蒸馏水研磨5分钟，移入10ml离心管。用少量蒸馏水冲洗研钵，洗液并入离心管中，加蒸馏水至刻度，经4000r/min离心15分钟，取上清液测定。2、在25左右，于10ml比色管中依次加入A液2.35ml，蒸馏水2.00ml，B液0.15ml。加入B液立即混合并倾入比色皿，分别测定在325nm波长条件下初始时和1Min后吸光度值，二者之差为邻苯三酚自氧化速率A325(min-1)为0.060。3、在25左右，于10ml比色管中依次加入20.0ul样液或酶液，A液2.35ml，蒸馏水2.00ml，B液0.15ml。加入B液立即混合并倾入比色皿，分别测定在325nm波长条件下初始时和1分钟后吸光度值，二者之差为样液或酶液抑制邻苯三酚自氧化速率A325(min-1)。加入样液或酶液的量使抑制邻苯三酚自氧化速率为1/2A325(min-1)，即0.030。1.4.7植物组织中丙二醛含量的测定丙二醛含量采用酸化分光光度计法。操作步骤：1. MDA的提取 称取剪碎的试材1g，加入2ml 10TCA和少量石英砂，研磨至匀浆，再加8ml TCA进一步研磨，匀浆离心4000g 10min，上清液为样品提取液。2. 显色反应和测定 吸取离心的上清液2ml（对照加2ml蒸馏水），加入2ml 0.6%TBA溶液，混匀物于沸水浴上反应15min，迅速冷却后再离心。取上清液测定532nm、600nm和450nm波长下的消光度。以0.6TBA 溶液为空白.3. 计算含量：按公式求出样品中糖分在532nm处的消光度值Y532，用实测532nm的消光度值减去600nm非特异吸收的消光度值再减去Y532，其差值为测定样品中MDA-TBA反应产物在532nm的消光度值。按MDA在532nm处的毫摩尔消光系数为155换算求出提取液中MDA浓度。6、本课题的进度安排：2011.8-2010.11完成污泥、土壤样品的采集、前处理工作；污泥施用于土壤中对上海青小白菜初步试验。2011.12-2012.1完成污泥改良土壤对上海青小白菜生长及其富集重金属的影响。包括污泥、土壤中重金属元素含量、重金属形态分析测试；以及小白菜各项生长指标和重金属含量。2012.2-2012.4 资料的全面整理和论文的编写。2012.5-2012.6完善论文，毕业答辩。7、参考文献：1 邹绍文，张树清，王玉军，等中国城市污泥的性质和处置方式及十地利用前景J中国农学通报，2005，21(1)：198-2012 李清秀,张雁秋,李向东. 城市污水处理厂污泥农用研究J. 安徽农业科学, 2008,36(29):12862-12863.3 Piertiaieva E V, Kasatikov V A, Madavnikeva L K. Effects of municipal sludge on the meadow soils chemical characteristics changes and its heavy metal contentsJ. Agricultural Chemistry,2001(10): 73-79.4 Parkpian P, Klankrong K, DeLaune R, et al. Metal leach ability from sewage sludge-amended Thai soils J. Journal Of Environmental Science and Health Part A, 2002, 37:765-791.5 朱启红. 污泥农用资源化研究现状J. 农机化研究,2006,(12):22-24.6吴新民. 生活污泥的性质和