毕业设计（论文）-超声波提取器与超声波清洗器提取丹参有效成分的比较.docx

学号122516陕西国际商贸学院本科毕业论文超声波提取器与超声波清洗器提取丹参有效成分的比较 二级学院：医药学院 专业名称：中药学 学生姓名： 指导教师： 二一五年六月郑 重 声 明本人呈交的学位论文，是在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，所有数据、图片资料真实可靠。尽我所知，除文中已经注明引用的内容外，本学位论文的研究成果不包含他人享有著作权的内容。对本论文所涉及的研究工作做出贡献的其他个人和集体，均已在文中以明确的方式标明。本学位论文的知识产权归属于培养单位。本人签名： 日期： 摘 要本文主要是对多功能超声提取器与超声波清洗器超声提取对丹参中丹参酮A的提取效率的比较研究，最终确立哪种仪器的提取效率更高，更有利于提取丹参中丹参酮A的含量。以2015版中国药典为提取标准提取丹参中的丹参酮，其提取工艺条件为25，60Hz，30min，纯甲醇，并按照2015版中国药典标准进行高效测定，并计算出丹参酮的含量。通过对四川产地的丹参用多功能超声提取器与超声波清洗器进行提取比较，从而选出更加优秀的提取仪器，提高丹参的提取率和利用率。实验结果表明多功能超声提取器的提取效率比超声波清洗器的提取效率更高。关键词：丹参；丹参酮A；比较试验；提取效率AbstractThe main purpose of this paper is the comparative research on the extraction efficiency of tanshinone II A in Salvia miltiorrhiza multifunctional ultrasonic extractor and ultrasonic cleaning ultrasonic extraction, and ultimately to establish what kind of instrument the extraction efficiency of higher, more conducive to extract the contents of Tanshinone in Salvia miltiorrhiza. To 2015 edition of Chinese pharmacopoeia standard extraction extraction of Salvia miltiorrhiza in tanshinone, the extraction conditions of 25 DEG C 60Hz. 30min, pure methanol and by 2015 edition of China Pharmacopoeia were were determined by high performance, and calculate the content of tanshinone. Through the origin of Sichuan of Salvia miltiorrhiza with multifunctional ultrasonic extractor and ultrasonic cleaner from, to choose the better extraction instrument, increase rate and utilization rate of the extract of Salvia miltiorrhiza Bunge. The experimental results show that the extraction efficiency of multifunctional ultrasonic extractor is higher than the extraction efficiency of the ultrasonic cleaner.Key words： Salvia miltiorrhiza；tanshinone II A；Comparative test；extraction efficiency 目录1绪论61.1选题的背景及意义61.1.1丹参的药用历史考证71.1.2丹参的形态特征、生物学特征、生长环境分布及资源状况71.1.3 丹参提取方法的研究状况81.2丹参的现代研究101.2.1丹参的化学成分111.2.2丹参的药理作用概述112实验部分132.1仪器与试药剂132.1.1材料132.1.2试剂与试药132.1.3实验仪器132.2实验方法及结果132.2.1色谱条件132.2.2对照品的配置142.2.3供试品的制备142.2.3.1超声波清洗器超声处理142.2.3.2多功能恒温超声波萃取仪超声处理142.2.4精密度试验142.2.5线性关系的考察142.2.6稳定性试验152.2.6.1数控超声波清洗器超声处稳定性试验152.2.6.1多功能恒温超声波萃取仪超声稳定性试验162.2.7重复性试验162.2.7.1数控超声波清洗器超声重复性试验162.2.7.2多功能恒温超声波萃取仪重复性试验162.2.8回收率试验162.2.8.1四川数控超声波清洗器超声处理回收率测定162.2.8.1四川多功能恒温超声波萃取仪超声回收率测定172.2.9丹参含量测定172.2.9.1丹参含量的计算方法172.2.9.2超声波清洗器超声处理丹参的含量测定182.2.9.3多功能恒温超声波萃取仪超声处理丹参的含量测定182.3讨论19总结20参考文献21致谢231绪论1.1选题的背景及意义丹参为唇形科植物丹参的干燥根及根茎，国家药典（2015版）归纳丹参的功效为“活血祛瘀，通经止痛，清心除烦，凉血消痈。用于胸痹心痛，脘腹胁痛，癥瘕积聚，热痹疼痛，心烦不眠，月经不调，痛经经闭，疮瘍肿痛”1，丹参根据其在中国古代医学著作上的记载，按功效分丹参在现代经常被用于肝病、心血管疾病等的治疗，并取得了显著疗效，按人群分丹参被用于治疗小孩、成年以及中老年人的治疗并且治疗效果相当不错。随着生活节奏加快，物质生活的飞跃性发展，工作压力的增加，以及地球温度的反复变化，人类的生活环境无论是内在环境还是外在环境都发生着巨大的变化。同时伴随着国内人口老龄化的加重，老年病发率也较高，其中比较常见的是：高血压、高血脂、高血糖，时时刻刻危害着人类的身心健康，据统计学显示：在我国老年人群中，有83.3%的老年人患有此类型的病。并且越来越多的女性都对丹参青睐有加，因为丹参能够治疗很多的妇科疾病。并且丹参资源广泛，药用价值很好，在治疗这类型疾病上有着很好的效果。如何更好的开发和运用中药材丹参，需要不懈的研究和探索。在丹参提取有效成分提取中，提取设备不同提取效率差异很大，通过比较多功能超声波提取器与超声波清洗器这两种提取仪器能够选出提取率高的仪器，提高丹参利用率，创造更大的价值。1.1.1丹参的药用历史考证中国具有悠久的药用，作为传统中药的丹参从古至今被各代医家所认可，并且在治疗疾病上运用十分的广泛。丹参最早记载在神农本草经上，被分为上品药，大多分布于西北、西南、华北、华东等地，并且在妇人明理论本草纲目本草图经等古代医书上均有记载。古代医书上曾有这样一种说法，并且被历代医家所认可，“一味丹参，功同四物”从这可以看出丹参具有四物汤的功效，并且丹参的药效十分的惊人。丹参的常用药用部位为根及根茎部，以形状粗长、颜色为内紫黑色并且有菊花状白色小点者为上好药材。对比古代医书记载和现代丹参的植物形态，丹参的古代形态特征与现在所用唇形科植物丹参基本相同。丹参在中国古代的运用十分的广泛，并且具有较好的疗效，历代医家都对丹参有很高的评价，并且在现代医疗临床上也有很广泛的运用。悠久的药用历史，和现代大规模的临床运用，充分说明了丹参这味传统中药材的价值。1.1.2丹参的形态特征、生物学特征、生长环境分布及资源状况唇形科鼠尾草属丹参为多年生草本植物，一般植株高3080厘米。根茎细长，圆柱形，外皮朱红色。茎四棱形，上部分枝。叶对生；单数羽状复叶，小叶35片。顶端小叶片较侧生叶片大，小叶片卵圆形。轮伞花序项生兼腋生，花唇形，蓝紫色，上唇直立，下唇较上唇短。小坚果长圆形，熟时暗棕色或黑色。花期510月，果期611月。丹参生于阳坡，河岸，路边的草地或森林,能够承受冷，担心旱灾和涝灾，对土地的要求不是十分的严格，PH在7左右的土壤均可栽培，古代广泛分布于华北、华东、西北、西南等地。丹参现在主产于四川、陕西、河南、山东等地，全国上下均有分布，资源相当丰富，且药用价值很高。1.1.3 丹参提取方法的研究状况据文献报道，丹参中主要含有脂溶性和水溶性两类成分。目前从丹参中分离得到的脂溶性成分和水溶性成分据报道有34种之多2 。丹参中脂溶性成分目前均以丹参酮A为有效成分参考指标水溶性成分以原儿茶醛、丹参素、丹酚酸B为有效成分参考指标3。李向军等4 采用正交实验法对丹参水溶性成分进行了大量的实验研究 ，提出了适合于大生产的有效成分的提取工艺依据。结果显示加11倍量水提取2次，第1次2h，第2次1.5 h提取效率较高且符合工业生产的要求。张荣泉等5通过正交试验设计，以提取物丹参素含量为指标，考察水提取参数。结果以加水12 倍量，提取时间1.5 h，浓缩体积为1115(gv- 1) ，醇沉时含醇量达50 %，可以获得较高的丹参素含量(6468) mgg- 1。刘重芳等6 使用高效液相色谱(HPLC)方法研究传统的水煎煮法煎煮时间，煎煮次数，添加水量对原儿茶醛与提取率的影响，最终结果显示，使用12倍量水煎煮2次，每次1.5 h是最合适的。顾娟等7以药典规定的水溶性总酚酸紫外吸收度为检测标准，把煎煮次数，水溶液用量，煎煮时间作为考察指标，考察了丹参酚酸的提取工艺。最后提出的最佳提取工艺为16倍水煎煮煎煮4次，每次煎煮时间不能超过0.5 h。顾娟等指纹分析丹参注射液和丹参水提取方法进行了研究,实验结论是：0.5 g丹参分散在30毫升的去离子水中，静置过夜热回流2 h，过滤后，滤液pH值调为2.5，加入3倍的乙酸乙酯进行萃取，将萃取物30下减压干燥，残渣溶解在甲醇中，此时得到的总酚酸含量较高。最近几年来，亚临界水提取法这一新兴的提取技术渐渐的引起了人们的高度重视，徐志宏等8通过亚临界水提取丹参药材中的丹参酮 A的研究，建立了中药材中的脂溶性成分的亚临界水提取条件，并且分别对提取物颗粒度、提取时间、温度、压力等因素对提取量的影响的考察。其得出的亚临界水提取的最佳条件为，样品颗粒度 (0.180.15) mm，5 MPa，180 保持10min。张玲莉等9采用正交实验法，以丹参中主要成分丹参酮 A为指标，以乙醇浓度(A)，乙醇加入量(B) (药材重量的倍数)，回流时间(C)，作为优选丹参提取的最佳条件主要因素。徐淑卿等10 采用正交试验法，把丹参中丹参酮 A作为指标，优选提取的最佳条件，其得出的最终结果为：用80%乙醇提取2次，分别为1.5 h，1.0 h，溶媒用量为药材的10倍量且乙醇浓度大于80%。强风霞等11 通过正交设计方法，将乙醇作为溶剂回流提取，将提取频率，提取溶剂用量，提取时间作为因素，将高效液相色谱法测定的丹参酮A的含量作为参照指标，最终结果显示，溶剂的加入量是最重要参照指标，然后是提取时间，影响最小的是提取次数。最后得出的提取过程是：10倍量的95%乙醇回流提取4次，每次75分钟。王介明等12 采用使用不同的溶剂对丹参酮A进行提取，最终结果显示，当使用甲醇作为溶剂进行提取时丹参酮A的提取量比使用乙醇溶剂进行提取丹参酮A的提取量高。再将乙醇作为溶剂单独进行考察，和不同浓度的乙醇提取做比较，最终结果显示，提取率和酒精浓度呈正相关，95%乙醇和无水乙醇提取率较高。增加溶剂的数量、提高提取时间可以明显显的提高丹参的提取率。为了符合工业生产的要求，工业生产上采用的最终结果方案为，三倍量的95%乙醇回流提取两次第1次2h，第2次1.5 h进行提取。郭增军等13 通过正交设计考察了丹参酮A的提取因素对提取率的影响强弱，最终结果显示影响因素的强弱顺序为，酒精浓度溶剂用量提取时间提取次数。当选择加入8倍量的70%乙醇，提取2 次，每次2 h时提取的水平最高。另外杨巧巧等14使用正交设计方法优化丹参的提取工艺条件，将丹参酮A 的浸出量作为考察参照指标，实验得出的最终结果为：乙醇量为药材的3 倍，温度65 ，加热时间为1.5 h 时丹参酮A 的有较高的浸出量。刘重芳等把丹参酮A、丹参素、原儿茶醛作为指标成分，比较3种不同的提取工艺(95%乙醇-50%乙醇-水提取法，水-95%乙醇提取法，95%乙醇-水提取法)，结果表明的提取工艺为95%乙醇-50 %乙醇-水提取法提取效果最佳，即先用12倍量95 %乙醇回流提取1.5 h，药渣用12 倍量50 %乙醇回流提取1.5 h，药渣再用12倍量水煎煮1.5 h，韦英杰等15采用正交试验设计法，选择将提取时间、提取次数、乙醇用量作为考察因素，把丹参酮A和丹酚酸B的含量作为考察指标，对丹参的提取工艺进行全面优选，使丹参的提取工艺更加科学。最终的实验结果显示，丹参药材最为基础，加入6倍量的90%乙醇连续回流提取2次每次1 h，然后添加7倍量的的纯化水于残渣中再煎煮两次每次1 h。超临界流体萃取技术是一种可以通过在萃取时加入适当的溶剂，能够改变选择性，能够对药材的成分进行充分的提取的一种新兴的技术。姚建国等16 对二氧化碳超临界萃取参数进行考察，最终的结果显示，采用萃取压力、萃取温度、分离温度、二氧化碳流量、萃取时间分别为20 MPa、45 、35 (2025) kgh- 1，1 Lh- 1，1 h 时萃取物收率最高，可达 0.77%，其中丹参酮含量可达89.5%。查道成17 等比较了丹参酮提取的相关工艺技术也得出了相同的结论。张虹等18利用超临界萃取结合水煎煮法对丹参的提取进行了研究，最终得出提取丹参中有效成分的提取条件是：粉末(过60 目筛)300 g，放入萃取罐中，夹带剂用35 %乙醇，温度55 、压力30 MPa 条件下萃取2.5 h，收集萃取液，滤过，浓缩，浓缩后所得萃取物经过真空干燥，再利用传统的水煎法提取丹参残渣中的水溶性成分如：丹参酮、丹参素、原儿茶醛等，提取条件为：残渣8倍量的水煎煮3次，每次1.5h 。李霞等19建立了二氧化碳超临界流体萃取丹参中有效成分的方法，最后得出的较佳结论为：以95%乙醇为夹带剂，在20 MPa 、45 条件下，萃取丹参药材1 h 后，再在30 MPa、65条件 ，以无水乙醇为夹带剂萃取2 h。焦士龙等23 将丹参的脂溶性成分丹参酮A和水溶性成分丹参素、原儿茶醛作为指标，以微波功率、加水量、提取时间作为因素，用均匀试验设计法对丹参的微波提取工艺进行优化，最终的结果表明：加入6 倍量的95%乙醇、微波功率为320 W，提取30 min，药渣再以12 倍量水，320 W微波提取两次，每次60 min。朱晓微等20 也利用微波这种新兴技术对丹参进行提取，得出了相似的的结果。最近几年以来，微波超声提取法的大规模运用，人们在不间断的探索超声波提取法的优点，这个新兴的提取方法与许多古老的传统提取方法的比较具有很多优点，如消耗小，提取率高。所以这个技术已经在实验室中广泛使用。于纯淼等21利用微波超声波法提取与乙醇加热回流比较得出在最佳提取条件下，微波超声波提取法的提取效率更高。杨朝莲等22按照丹参药材按中国药典上的方法，用甲醇加热回流1 h并且超声15min 提取丹参酮A，结果表明两种方法提取丹参酮A的提取率相当。本文就是采用的超声波提取法对丹参酮A的提取效率进行的比较研究。1.2丹参的现代研究据现代药理实验研究显示，丹参对心血管系统、消化系统、呼吸系统、肝病、肾病、骨关节恢复、抗肿瘤等方面均有很好治疗的效果。近年来的实验研究显示，人们已经从丹参中发现了将近3100种左右的化学物质，这些物质是丹参发挥药理作用的物质基础。目前被大家所认可的丹参的药理作用临床表现在心血管系统、消化系统、呼吸系统、肝病、肾病、骨关节恢复、抗肿瘤等方面，并且临床上均有很好的治疗效果。丹参在现代临床上的运用十分广泛，尤其是在治疗小孩、妇女、老年人这类人群的常见疾病上有很好的疗效，如小儿肺炎、妇女妇科疾病、中老年心血管疾病等。丹参作为中国五千年以来一直沿用的传统中药，除了传统中医直接用饮片进行相关配伍以外，丹参这种药材的现代运用更加的宽广。现代人运用技术将丹参制作成各种方便利用的制剂，便于临床运用。丹参在现代医疗上越来越多的应用，充分反映了其临床应用价值，对中药丹参有效成分的提取效率的现代化研究具有重要意义。丹参具有悠久的药用历史，和现代大规模的临床运用，充分说明了丹参这味传统中药材的价值。本文通过对丹参用多功能超声提取器与超声波清洗器进行提取比较，采用中国药典2015版记载的提取方法避免了因为提取方法不同而造成的误差，使实验更加具有科学性，从而选出更加优秀的提取仪器，从而更好对丹参进行合理的运用。1.2.1丹参的化学成分据报道近年来，人们从丹参药材中提取分离出来了很多化合物，经过大量的实验研究发现，大约有100多种有效成分。其主要的有效成分大致可以分为水溶性和脂溶性这两大类，就水溶性成分而言，这类成分大多具有酚酸性结构，最早发现的-3，4-二羟苯乳酸（-3，4-dihydroxybenyllactic acid）丹参素是这类物质的的基本化学结构，其他的这类物质均含有这个基本结构单元，不同的是不同方式的连接。脂溶性成分，就其本身而言，是丹参的主要有效成分，这类成分大多为共轭醌、酮类化合物，这类化合物大多具有颜色跟醌、酮类化合物的性质一样，常见颜色为橙色黄色或橙色红色的颜色。1.2.2丹参的药理作用概述丹参的药理作用表现在对人体几大系统、肝病、肾病、骨关节恢复、抗肿瘤等方面均有很好治疗的效果。就心血管系统而言，从丹参中提取出来的有效成分，拥有很强的的扩张冠状动脉的作用，能够有效的降低患者血液的粘稠度的作用，并且有效成分可用于治疗不稳定型的心绞痛以及冠心病等疾病能够在我们病发或者治疗过程中提供极大的帮助。丹参酮对于心血管疾病有较好的效果，能够很好的解决人的病痛，因而在临床上有较多的运用。就消化系统而言，丹参作为中国五千年一直沿用的一种传统中药具有很多功效，现代研究表明丹参能改善血液循环，扩张血管，缓解疼痛，可以有效地缓解溃疡性结肠炎和急性胰腺炎等疾病。就呼吸系统而言，丹参注射液能够明显的改善动脉血液和氧气的分压，改善心肺功能，并且对肺部损伤具有一定的保护作用，并且能够对肺脏进行修复和保护，丹参能够对我们的身体进行保护，能够让我们的生活更加的美好。就肝病而言，现在在人们的日常生活沟通与酒密切相关，许多年轻人酗酒导致肝脏在一定程度上受到损害，许多人的肝脏都有一定的问题，丹参对饮酒过量，酒精肝、脂肪肝引起的肝损伤具有强有力的保护作用，能够在一定程度上减少肝脏的损伤，保护肝脏，能够让我们能放心的进行社会活动交际。就肾病而言，从丹参中提取的有效成分丹参酮等化合物，拥有理气活血化瘀的功效，能够减轻肾小球的硬化，从而对肾脏进行保护，减轻肾脏的损伤，能够很好的对我们的身体进行保护。就骨关节恢复而言，丹参能够加速人体骨关节局部血液的循环，并且促进骨关节对微量元素进行吸收，同时能够促进骨关节周围细胞对各种蛋白质的吸收，有利于骨关节的修复，加速骨关节的恢复速度。就抗肿瘤作用而言，从丹参中分离提取出的丹参酮类化合物是抗肿瘤的主要活性成分，能够通过抑制、杀伤、诱导分化、诱导死亡等抗癌方式对肿瘤细胞进行消灭，从而对人体进行治疗和保护，合理运用丹参的这种功效能够让我们对相关肿瘤进行预防和治疗。丹参具有悠久的药用历史，和现代大规模的临床运用，充分说明了丹参这味传统中药材的价值，充分的研究和利用这味药材，能够帮助我们解决更多的疑难杂症，并且对我们的身体健康进行保护。2实验部分2.1仪器与试药剂2.1.1材料丹参药材，购自陕西康盛堂药业有限公司，经中药系雷国莲教授鉴定为为唇形科植物丹参的干燥根和根茎，取四川进行试验研究，粉碎后，粉末过三号筛，备用。2.1.2试剂与试药丹参酮A对照品（中国食品药品检定研究院，110766-200619）、甲醇、磷酸等均为分析纯、水为自制超纯水、乙腈为色谱纯。2.1.3实验仪器E2695高效液相色谱仪（品牌：Water，上海和学国际贸易有限公司）、CP225D电子分析天平（十万分之一，sartoeius）、CHYH-1-2L多功能恒温超声波萃取仪（诚洋生物科技北京有限公司）、FW-100D高速万能粉碎机（天津鑫博得仪器有限公司）、KH5200DE型数控超声波清洗器（昆山禾创仪器有限公司）。2.2实验方法及结果2.2.1色谱条件色谱柱：DiamonsilC18柱（4.6mm250mm，5m）流动相： 以乙腈为流动相A，以0.02%磷酸溶液为流动相B.按表2.1中的规定进行梯度洗脱，流速：1.0ml/min；检测波长：270nm；柱温：20。对照品色谱图见表2.2。表2.1 丹参酮A梯度洗脱标准时间（分钟） 流动相A（%）流动相B（%）0-661396-206190391020-20.59061103920.5-256139表2.2 丹参酮A标准品对照品色谱图2.2.2对照品的配置精密称定0.205mg丹参酮A对照品置于10ml棕色容量瓶中，加甲醇至刻度线，制成0.0205mg/ml的丹参酮A标准品溶液。2.2.3供试品的制备2.2.3.1超声波清洗器超声处理取丹参粉末（过3号筛）0.3g，精密称定，放置于塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，用KH5200DE型数控超声波清洗器超声处理（140W，50Hz，25）30分钟，放凉至室温，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。2.2.3.2多功能恒温超声波萃取仪超声处理取丹参粉末（过3号筛）0.6g，精密称定，放置具于烧杯中，精密加入甲醇100ml，称定重量，用CHYH-1-2L多功能恒温超声波萃取仪超声处理（140W，50Hz，25）30分钟，放凉至室温，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。2.2.4精密度试验取上述丹参酮A对照品溶液，连续进样6次，每次进样10ul，记录峰面积，结果见表2.3，RSD值为1.79%（n=6），其结果表明所使用仪器的精密度良好。表2.3精密度试验数据测定序号123456平均值RSD%峰面积276543286025279035276251286043286054282158.51.79%2.2.5线性关系的考察取上述对照品适量放入高效液相中进行梯度洗脱，进样量分别为5ul、10ul、15ul、20ul、25ul，丹参酮A浓度见表2.4，以丹参酮A浓度（X，mg/ml）为横坐标，峰面积为纵坐标（Y）绘制标准曲线见表2.5标准曲线方程为Y=145267X-4963.1，（R=1）。表2.4丹参酮A浓度序号丹参酮A浓度峰面积10.102513923720.20528661930.307543060840.41057767850.5125720040表2.5丹参酮A标准曲线2.2.6稳定性试验2.2.6.1数控超声波清洗器超声处稳定性试验精密取四川产地（陕西康盛堂药业有限公司）的丹参药材1份，按照供试品溶液的制备方法2.2.3.1制备供试品溶液，放置不同的时间，分别检测峰面积，根据色谱条件2.2.1进样测定，记录并计算，结果见表2.6，数控超声波清洗器超声处理RSD值分别为：0.997%（n=6）。结果表明供试品溶液在6小时内稳定性良好。表2.6数控超声波清洗器超声处理稳定性试验测定数据时间产地1h2h3h4h5h6h平均值RSD%四川102599105030105664103389104832104654104361.30.9972.2.6.1多功能恒温超声波萃取仪超声稳定性试验精密取四川产地（陕西康盛堂药业有限公司）的丹参药材1份，按照供试品溶液的制备方法2.2.3.2制备供试品溶液，放置不同的时间，分别检测峰面积，根据色谱条件2.2.1进样测定，记录并计算，结果见表2.7，多功能恒温超声波萃取仪RSD值分别为：0.314%（n=6）。结果表明供试品溶液在6小时内稳定性良好。表2.7多功能恒温超声波萃取仪超声稳定性试验测定数据时间1h2h3h4h5h6h平均值RSD%产地四川106621105747105864106352106478106521106263.80.3142.2.7重复性试验2.2.7.1数控超声波清洗器超声重复性试验取四川产地丹参药材各6份，按照2.2.3.1方法制备供试品溶液，根据色谱条件2.2.1进样测定，分别检测峰面积，记录并计，算结果见表2.8。表2.8数控超声波清洗器提取丹参酮重复性试验序号123456平均值RSD%产地四川104361103964103927104125104089104273104123.16670.1482.2.7.2多功能恒温超声波萃取仪重复性试验取四川产地丹参药材各6份，按照2.2.3.2方法制备供试品溶液，根据色谱条件2.2.1进样测定，分别检测峰面积，记录并计算，结果见表2.9。表2.9多功能恒温超声波萃取仪提取丹参酮重复性试验序号123456平均值RSD%产地四川106263106594107328107159106932105914106698.33330.4652.2.8回收率试验取同一批号丹参酮A标准品（110766-200619）9.4mg置于25ml棕色容量瓶中，加甲醇至刻度线，制成浓度为0.376mg/ml的丹参酮A标准品溶液。2.2.8.1四川数控超声波清洗器超声处理回收率测定精密称取四川产地丹参粉末0.3g，甲醇49ml，另加1ml浓度为0.376ml/mg的丹参酮A标准品溶液，按2.2.3.1超声处理，取续滤液，测定并计算，数据见表3.0。RSD值为0.704%，（n=6）结果显示此方法的回收率符合标准。表3.0四川数控超声波清洗器超声处理回收率测定称取量g样品量mg加入量mg测得量mg回收率%平均值%RSD%0.30110.75250.3761.10593.80.30280.75280.3761.10493.40.30130.75260.3761.10894.594.30.7040.30270.75300.3761.10994.60.30240.75260.3761.10593.70.30150.75290.3761.11295.52.2.8.1四川多功能恒温超声波萃取仪超声回收率测定精密称取四川产地丹参粉末0.6g，加甲醇48ml，另加2ml浓度为0.376ml/mg的丹参酮A标准品溶液，按2.2.3.2超声处理，取续滤液，测定并计算，数据见表3.1。RSD值为0.953%，（n=6）结果显示此方法的回收率符合标准。表3.1四川多功能恒温超声波萃取仪超声回收率测定称取量g样品量mg加入量mg测得量mg回收率%平均值%RSD%0.60251.53120.7522.198396.30.60131.52700.7522.251698.80.60071.52960.7522.222297.496.90.9530.60251.53380.7522.189795.80.60151.53400.7522.212896.80.60091.53060.7522.207296.72.2.9丹参含量测定2.2.9.1丹参含量的计算方法按照2015版中国药典标准精密吸取供试品溶液各10ul，注入HPLC仪器中，进行检测。将丹参酮A对照品作为参照指标，将其相应的峰作为S峰，计算隐丹参酮、丹参酮I的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的5%范围之内。相对保留时间及校正因子见表3.2。以丹参酮A的峰面积为对照，分别乘以校正因子，计算隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮A的总黄酮含量。表3.2丹参酮的计算标准待测成分（峰） 相对保留时间 校正因子 隐丹参酮 0.75 1.18 丹参酮 0.79 1.31 丹参酮A 1.00 1.002.2.9.2超声波清洗器超声处理丹参的含量测定取不同产地丹参药材各6份，精密称取0.3g，按照2.2.3.1方法制备供试品溶液，根据色谱条件2.2.1进样测定，分别检测峰面积，记录结果，按照2.2.9.1进行计算，结果见表3.3。表3.3超声波清洗器超声提取丹参酮的含量产地序号称取量g平均称取量g测得量mg测得平均值mg含量%10.30111.463020.30281.4625四川30.30160.30201.46381.46290.48440.30351.462750.30241.464560.30081.46332.2.9.3多功能恒温超声波萃取仪超声处理丹参的含量测定取不同产地丹参药材各6份，精密称取0.6g，按照2.2.3.2方法制备供试品溶液，根据色谱条件2.2.1进样测定，分别检测峰面积，记录结果，按照2.2.9.1进行计算，结果见表3.3。表3.4多功能恒温超声波萃取仪超声提取丹参酮的含量产地序号称取量g平均称取量g测得量mg平均测得量mg含量%10.60252.983520.60132.9927四川30.60230.60172.99372.99390.49740.60082.998650.60172.997860.60152.9968 2.3讨论将丹参酮A提取率作为考察指标，研究数控超声波清洗器与多功能恒温超声波萃取仪的提取差异，固定提取条件以2015版中国药典为提取标准提取丹参中的丹参酮A，其提取工艺条件为25，60Hz，30min，纯甲醇，单因素考察两种仪器的提取优劣，结果表明，多功能恒温超声波萃取仪数控超声波清洗器，虽然多功能恒温超声波萃取仪的提取率高于数控超声波清洗器，但提取效率高的并不多，并且多功能恒温超声波萃取仪的操作较数控超声波清洗器更为繁琐，定性研究可以考虑数控超声波清洗器，定量研究可以考虑用多功能恒温超声波萃取仪结果更为精确。总结中国具有悠久的药用，作为传统中药的丹参从古至今被各代医家所认可，并且在治疗疾病上运用十分的广泛，人们对丹参的现代研究也在不断的深入。丹参的主要有效成分分为脂溶性和水溶性两类，他们是对疾病起主要治疗作用的物质基础。丹参能够治疗许多疾病，并对一些肿瘤还有一定的治疗和防治效果，对丹参进行研究是非常有必要的，研究结果能够很好的帮助人们解决疾病。近年来，越来越多的人们对丹参各各方面进行深入的研究，随着对丹参药材临床运用的研究和对丹参提取的方法研究的进一步深入，丹参的运用和提取工艺将不断得提高越来越完善，丹