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文档简介

练案36微生物的培养和应用一、选择题1(2016海淀质检)通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长;在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌的生长;在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出 (A)大肠杆菌霉菌放线菌固氮细菌A BC D只有解析缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长,而固氮细菌能生长;在培养基中加青霉素可以抑制细菌和放线菌等原核生物细胞壁的合成,而霉菌属于真核生物,故能生长;在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长,对放线菌的生长无影响。2(2016广州质检)利用农作物秸秆为原料可生产乙醇,生产过程中可采用微生物将秸秆水解或用酶水解,基主要技术流程如下图所示,下列相关说法错误的是(B)秸秆碎屑反应罐水解压滤出渣酒精发酵真空分馏A可用刚果红染色法筛选过程所需的纤维素分解菌B过程加入的是葡萄糖苷酶C酒精发酵接种的酵母菌需在无氧条件下发酵D酒精发酵前需对培养基进行高压蒸汽灭菌解析筛选纤维素分解菌可采用刚果红染色法;纤维素酶为复合酶,至少包含三种组分,C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶;酒精发酵需在无氧条件下进行;酒精发酵前需对培养基进行高压蒸汽灭菌。3下列有关微生物培养与应用的说法,正确的是(C)A天然培养基是指直接取自自然界不需加工的培养基B接种前需对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理C大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段D分离分解尿素的细菌时,尿素是培养基中唯一的氮源和碳源解析天然培养基是指用天然物质制成的培养基,但也需要加工;实验操作者的双手应消毒,不能灭菌;分离分解尿素的细菌时,尿素是培养基中唯一的氮源,不是碳源,需加入不含氮元素的有机物(如葡萄糖)作为碳源。4平板划线法和稀释涂布平板法是接种微生物的两种常用方法,下列描述正确的是(D)A都要将菌液进行一系列的梯度稀释B平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环连续划在固体培养基表面C稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基中进行培养D都会在培养基表面形成单个的菌落解析平板划线法不需要进行梯度稀释;稀释涂布平板法需要将不同稀释度的菌液涂布到固体培养基的表面;平板划线法和稀释涂布平板法都能在培养基表面形成单个的菌落。5做“微生物的分离与培养”实验时,下列叙述正确的是(D)A高压灭菌加热结束时,立即开启锅盖,拿出培养基和工具待用B倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上C为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底上解析高压灭菌加热结束,等待压力表指针回到零后,才能开启锅盖,不能打开放气阀使压力表指针回到零,A错误;倒平板过程中不能打开培养皿的皿盖,B错误;接种环火焰上灼烧后,待冷却后才可以快速挑取菌落,C错误;用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底上,D正确。6消毒和灭菌是两个不同的概念,灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。下列哪些事物适用于消毒处理(A)皮肤 饮用水牛奶注射器培养皿接种环培养基果汁酱油手术刀ABCD以上全部解析消毒指用比较温和的方法杀死微生物的营养细胞,适用于那些不耐高温的液体,如牛奶、果汁、酱油,这样可以使其中的营养成分不被破坏。 另外对要求不是很严格的皮肤、饮用水也用消毒的方法处理;而对于严格要求的注射器、培养皿、接种环、培养基、手术刀等必须进行灭菌处理。 所以,立该用消毒的方法处理。7下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述,其中错误的是(D)A用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板B取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL,分别涂布于各组平板上C将实验组和对照组平板倒置,37恒温培养2448小时D确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数解析首先要进行培养基的制备、用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板,A正确;然后将土壤稀释液涂布于各组平板上,B正确;将实验组和对照组平板倒置,37恒温培养2448小时,C正确;确定对照组无菌后,选择菌落数在30300的进行记数,求其平均值,再通过计算得出土壤中细菌总数,D错误。8微生物培养过程中,要十分重视无菌操作,现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作,防止杂菌污染,请分析下列操作,错误的是(D)煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢接种操作要在酒精灯火焰附近进行无菌繁殖脱毒苗时,植物的外植体要进行消毒家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌培养基要进行高压蒸汽灭菌加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌ABCD解析100煮沸56 min可以杀死微生物细胞和一部分芽孢,正确;酒精灯火焰附近存在一个无菌区,为了无菌操作,接种操作要在酒精灯火焰附近进行,正确;无菌繁殖脱毒苗,植物的外植体要进行消毒,正确;葡萄制作葡萄酒利用的是附着于葡萄皮表面的野生型酵母菌,所以制作葡萄酒时葡萄不进行灭菌,以免杀死酵母菌,错误;培养基的灭菌方法是高压蒸汽灭菌,正确;指示剂和染料混有微生物,故加入培养基前需灭菌,错误。所以,错误。二、填空题9(2016河南郑州二模)某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌,并统计每克土壤样品中活菌数目,培养基配方如下。将各种物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL,再经高温灭菌,制成固体培养基备用。KH2PO4Na2HPO4MgSO47H2O蛋白胨葡萄糖尿素琼脂1.4 g2.1 g0.2 g1.0 g10.0 g1.0 g15.0 g(1)根据培养基的成分判断,该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌?_不能_(填“能”或“不能”),原因是_培养基含蛋白胨,尿素不是唯一氮源,不能选择出只以尿素为氮源的微生物(培养基含蛋白胨,蛋白胨中含有氮元素)_。(2)培养基用_高压蒸汽灭菌_方法灭菌,培养皿用_干热灭菌_方法灭菌,待培养基冷却到_50_(填“20”、“30”、“40”或“50”)左右时,在_酒精灯火焰_附近倒平板,等平板冷却凝固后,将平板倒过来放置,可以防止_培养皿盖上的水珠落入培养基_,以免造成污染。(3)要统计每克土壤样品中活菌数目,宜采用_(稀释)涂布平板_法接种,根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积,统计平板上的_菌落数目_就能大约推测出样品中活菌数。(4)培养分解尿素的细菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_将未接种的培养基在适宜温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生_。(5)某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234,那么每克样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL)_2.34109_。解析(1)据表分析,表中的蛋白胨可以为微生物的生存提供氮源,所以不能分离尿素分解菌,筛选尿素分解菌,应以尿素为唯一氮源。(2)微生物培养中的培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌,玻璃器皿可以使用干热灭菌。倒平板时需要培养基冷却至50 左右时在酒精灯火焰旁进行,等平板冷却凝固后,将平板倒过来放置,可以防止培养皿盖上的水珠落入培养基造成污染。(3)固体培养基上的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法,稀释涂布平板法适用于微生物的统计计数,根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积,统计平板上的菌落数目或平均菌落数能够推测样品中的活菌数。(4)检测培养基是否被污染,需要将未接种的培养基在适宜温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生,如果有菌落说明被污染,否则没有被污染。(5)依据公式得每克样品中菌落数M1062.34109。10如图所示为分离分解纤维素的微生物的实验流程。回答下列相关问题:梯度稀释 (1)图中采集土样时,一般选择_纤维素_丰富的环境。图中过程所用的培养基以纤维素为唯一_碳源_,选择培养的目的是_使纤维素分解菌得到增殖_。(2)图中过程采用的接种方法为_稀释涂布平板法_(填“平板划线法”或“稀释涂布平板法”),所用的培养基中的染料是_刚果红_,该染料能与纤维素形成_红色_复合物。图中过程挑选菌落的标准是_菌落周围有透明圈_。(3)常采用_高压蒸汽灭菌_法对实验中所用的培养基进行灭菌。解析(1)纤维素分解菌大多分布在富含纤维素的环境中,选择培养基应以纤维素为唯一碳源。选择培养的目的是使那些能够适应选择培养基中的营养条件的微生物得到迅速繁殖。(2)将样品用稀释涂布平板法接种到鉴别培养基上。刚果红是一种染料,它可以与纤维素形成红色复合物,挑选菌落时应选那些周围有透明圈的菌落。(3)对培养基常采用的灭菌方法为高压蒸汽灭菌法。11(2017山东济宁检测)高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉嗜热菌样品中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如下图所示:(1)进行过程的目的是_稀释_,过程所使用的接种方法是_稀释涂布平板_法。(2)从用途上来说,号培养基属于_选择_培养基,配制时仅以_淀粉_作为唯一碳源;从物理状态上来说,号培养基属于固体培养基,配制时应加入_琼脂_作为凝固剂。(3)、号培养基配制和灭菌时,灭菌与调节pH的先后顺序是_先调节pH,后灭菌_。一般对配制的培养基采用_高压蒸汽灭菌_法灭菌。(4)培养一段时间后,应从号培养基上挑出_透明圈大_的菌落,接种到号培养基上。解析(1)分析题图可知,过程是梯度稀释,目的是对样品进行稀释;过程是用稀释涂布平板法进行接种。(2)本题实验的目的是筛选高效产生耐高温淀粉酶的嗜热菌,从用途上来说,号培养基属于选择培养基,本培养基以淀粉为唯一碳源;从物理状态上来说,号培养基属于固体培养基,配制时应加入琼脂作为凝固剂。(3)培养基配制和灭菌时应先调节pH,然后再进行灭菌,如果先灭菌再凋节pH,在调节pH时会污染培养基;一般对配制的培养基采用高压蒸汽灭菌法灭菌。(4)能分解淀粉的嗜热菌在号培养基上生长时可释放淀粉酶,分解培养基中的淀粉,在菌落周围形成透明圈,透明圈越大淀粉酶的活性越强,所以要从号培养基上挑出透明圈大的菌落,接种到号培养基上。12牛奶是微生物培养的良好培养基,牛奶在饮前都要经过巴氏消毒,以杀死有害微生物,为检测消毒前后牛奶中细菌含量变化情况,做如图所示操作。用无菌吸管从锥形瓶中吸取1 mL生牛奶稀释液至盛有9 mL无菌水的试管中,混合均匀,如此再重复2次。请回答下列有关问题:(1)巴氏消毒的方法是_7075_煮30分钟(80_煮15分钟)_,使用这种方法对生鲜牛奶进行消毒的好处是_牛奶的营养成分不被破坏_。(2)取最终的牛奶稀释液0.1mL滴在培养基上进行涂布,应选择的涂布工具是图中的_B_。(3)图中所示方法为稀释培养法,理想情况下,培养一段时间后可在培养基表面形成菌落。若用该方法培养设置了3个培养皿,菌落数分别为35个、3

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