实验7感觉器官结构观察血蛋白含量测定血型鉴定.ppt

人体解剖生理学实验,实验课件之七,临沂大学生命科学学院王学斌,实验七感觉器官结构观察血红蛋白含量测定ABO血型鉴定,一、实验目的：,1.掌握比色法测定血红蛋白含量的方法。2.掌握ABO血型鉴定的原理和方法，观察红细胞凝集现象。3.掌握眼和耳的形态；视网膜的组织结构；耳的分部、中耳的构成、内耳迷路的构成和组织结构。,二、实验原理：,在一定量的血液中，加入少量盐酸，破坏RBC膜，同时使红细胞内亚铁(Fe2+)血红素变成高铁(Fe3+)血红素，呈现较稳定的棕色。用蒸馏水稀释，与血红蛋白计的标准色目测比色，可得每100ml血液中所含的血红蛋白克数或百分率。,（一）比色法（酸化法）测定血红蛋白：,（二）血型鉴定：血型多指红细胞血型，根据红细胞膜外表面的特异性抗原(凝集原)确定。抗体(凝集素)存在于血清，可与红细胞膜上的相应抗原起反应，产生凝集反应，最后发生RBC溶解。,三、实验器材,感觉器官标本、模型、血红蛋白计、0.1mol/LHCl、酒精棉球、一次性刺血针、一次性20l定量毛细取血管、滤纸、滴管、蒸馏水。双凹载玻片、标准血清（A型和B型）、酒精棉球、一次性刺血针、消毒牙签。,血红蛋白计：标准比色架，镶有棕色的标准色柱；血红蛋白稀释管，方形，两侧有刻度，一侧以g为计数单位，对侧以百分率计，是按国人血红蛋白正常值14.5g/100ml为100进行百分率刻度标记。,四、方法与步骤,（一）血红蛋白含量的测定：,1.用滴管加0.1mol/LHCl于血红蛋白稀释管的刻度10处（用百分率计算的一侧）。,2.消毒指尖，用刺血针刺破指尖，采血（血滴宜大些）。用毛细取血管的尖端接触血滴，吸血至刻度20mm3处（0.02ml）。,3.用滤纸片或棉球擦净毛细取血管口周围的血液，将毛细取血管插入血红蛋白稀释管的盐酸内，轻轻吹出血液至管底部，反复吸入并吹出稀释管内上层的盐酸，洗涤吸管多次，使毛细取血管内的血液完全洗入稀释管内。摇匀后，放置10min，使盐酸与血红蛋白充分作用。,4.把稀释管插入标准比色架两色柱中央的空格中，使无刻度的两侧面位于空格的前后方，便于透光和比色。5.用滴管向稀释管内逐滴加入蒸馏水（每加一滴要搅拌），边滴边观察颜色，直至颜色与标准玻璃色柱相同为止。此时稀释管上液面的刻度读数即为100ml血液血红蛋白的克数。,【注意事项】1吹血液入稀释管及洗净吸管时，不宜用力过猛。2蒸馏水需逐滴加入，多做几次比色，以免稀释过量。每次比色时，应将搅拌用的玻璃棒取出，以免影响比色。3由于操作过程过长而造成吸管内血液凝固，堵塞管孔时，按下列溶液的顺序重复冲洗吸管，即用水95%酒精乙醚或丙酮。,【附录】市售盐酸浓度是3638%，即10.6511.24N。以12N计算的话，若要配1NHCl100ml，则100ml1mol/L=12mol/LXX8.3ml,（二）血型测定：1.加标准血清：取双凹载玻片一块，A型标准血清(抗B)、B型标准血清(抗A)各一滴分别加入左、右凹陷内。2.采血：消毒，刺破左手无名指指尖一侧，玻片的每侧凹陷各放入12滴血。用牙签搅拌，使抗血清和血液充分混和(每边用一牙签，勿混用)。3.反应：静置室温下1015min，观察有无凝集现象。,凝集反应的强度因人而异，有时需借助显微镜才能确定是否出现凝集.仅A侧凝集，为B型；仅B侧凝集，为A型；两侧均凝集，为AB型；两侧均未凝集，为O型。,（三）眼和耳的形态结构：1.眼球壁和内容物的组成和功能；视网膜的组织结构。2.耳的分部、中耳的构成、内耳迷路的构成和组织结构。3.皮肤、舌与鼻腔的感受器。,1.填写自己的血红蛋白含量（保留小数点后一位）。说明是否正常，为什么？2.填写自己的血型。根据自己的血型，说明你能接受何种血型的血液及输血方式，说明你能输血给何种血型的人及输血方式。3.绘眼球冠状切面示意图。,本周值日：3组：王爱帅李敏王彦金赵倩2组：宁守强张倩杨波常馨月1组：高宗宝张春良徐希亮董晓华,1.填写自己的血红蛋白含量（保留小数点后一位）。说明是