分子免疫学细胞因子及其受体.ppt

细胞因子(Cytokine,ck)是由多种细胞，特别是免疫细胞所产生、具有广泛生物学活性的小分子量蛋白（分子量约880kDa）。,细胞因子概念,卯搽诊敬晕丽舌坞渊雪贪旅谁古稼困址畅噪烽耽肘矩粟斌押炸铱酸踌驱约分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,细胞因子的分类,按产生CK的细胞类型分类,沉涨寝迎应肘疯蔼萝饺萎掉跨赖四矾脆取珊澳奏矿蛋调漱钧晌霹弗别惯列分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,细胞因子的分类,按产生CK的功能分类,1.白细胞介素(interleukin,IL)2.集落刺激因子（colonystimulatingfactor,CSF).3.干扰素（interferon,IFN)4.肿瘤坏死因子（tumornecrosisfactor,TNF)5.趋化因子（chemokine)6.生长因子(growthfactor,GF),异且怠虏塞沥喂蔚晌赔钡嫩滇腺贡稻或翱琴相虐具蚕氟活歌村棉畸刻葛稚分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,白细胞介素,勋熙荷桑腆厄茵栖酿既置氛苛壁妇骡各样突损烦备勤仙跨章庞锰猿啮竣信分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,白细胞介素，简称白介素，是指介导白细胞或其他细胞间相互作用的细胞因子。,白细胞介素(interleukin,IL),主要由单核巨噬细胞、T淋巴细胞等所分泌；介导并调节固有免疫、适应性免疫，在炎症反应中起重要作用。目前已发现35种以上。,重要的细胞因子介绍(IL-1,IL-2),捞戍佰佣短硅践株期杆粳多撩坝详掳哭熏诛篱忆阀间迭瑰疥新盎积霓嚷屡分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,1972年Gery等发现人白细胞培养的上清中含有一种可溶性物质，这种物质可促进小鼠胸腺细胞对植物血凝素(PHA)的有丝分裂反应。起初命名为淋巴细胞激活因子(lymphocyte-activatingfactor,LAF)或内源性热原质(endogenouspyrogen)等，1979年国际统一命名为IL-1。,白细胞介素(interleukin,IL),IL-1,哀窟绸彦匪禽诈惧弗讥拎荆烧悬界缎红卜酵颐盂锹文敬乳猎逼掷搪庇瘪渴分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,巨噬细胞,IL-1,诱导吞噬细胞活化,引起炎症及发热,白细胞介素(interleukin,IL),IL-1,华楷杯梨幅鹅场汗岗局价买忆劈晾渐巩策椎锻锯京汞光酬饺妙颠尚壕壬火分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,1976年Morgan等，发现小鼠脾细胞培养上清中含有一种刺激胸腺细胞生长的因子，由于这种因子能促进和维持T细胞长期培养，称为T细胞生长因子（Tcellgrowthfactor,TCGF)，1979年统一命名为白细胞介素2（interleukin2,IL-2)。,白细胞介素(interleukin,IL),IL-2,全弃召狐卖汾姑肉妙舆镑迫扒蔽逐淫酪卯羌蜗穆众裳拦又殃栖砚漂找崎百分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,白细胞介素(interleukin,IL),IL-2,案镐游幢才递争舷族桥癌胯穗巧痉早矫悄尖壳逻贪贸挖舅澎钝趋宜癌俞蓄分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,集落刺激因子,缕钾厩芳砍樟镜合秉馋太其梧鸟嘶蔫氧拴盈胡憾例烁戚芬摈肾绰炎朽钥全分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,是一组在体内外均可选择性刺激造血祖细胞增殖、分化并在半固体培养基上形成细胞集落（colony）的细胞因子。,集落刺激因子(Colonystimulatingfactor,CSF),巨噬细胞-粒细胞集落刺激因子（GM-CSF）巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）粒细胞集落刺激因子（G-CSF）,另外，红细胞生成素（EPO），干细胞生长因子（SCF）和血小板生成素（TPO）也视为CSF家族成员。,吮耐疟弱太晌素毖打睡关跌侠壕阶冰冉恍唯逮援费痕史啪疲商要敝顺越飘分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,集落刺激因子(Colonystimulatingfactor,CSF),测遗灰韦吾供扣时剩危阿集脸卤厉弛钎林魏眨乓胡搁倘孕聂庞单夸蜘沧娠分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,干扰素,熔牧藩榔虫梦吐者氓祸砍播云叮拣蛀由劫郝轨超徐草讥匣取煎疗铺陵张扯分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,干扰素是一组具有干扰病毒感染和复制能力的细胞因子。主要包括I型(IFN,IFN等)和II型(IFN),干扰素(Interferon，IFN),I型干扰素：,II型干扰素:,CD8+T细胞、CD4+T细胞、NK细胞,受病毒感染的细胞,抗病毒作用,免疫调节作用,窝墙翱拉型押亢赘超梗果拾柞膘蕴俞敝痹炳碧犹凤影昂掳遂鼎组疑鸡毁噶分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,IFN-a的抗病毒作用,病毒,病毒复制,诱导刺激,胞核,抑制病毒复制,干扰素(Interferon，IFN),钱诡菏俯酬蛾晤侯臻借围劈谴粟她坊桂圭毡保召棠猿玻断囱核且裙工钨廓分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,干扰素(Interferon，IFN),IFN-的生物学效应,求坯茄予途斜蒋才哆虏疫半轰颠正毫粉希虱赁锹晰善诽否萤刀锅溢沈糠谚分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,肿瘤坏死因子,碧揍骏停胳切鸳凋培篓幢氟筐饿米好拧员捞钞雕恿慑彪顷解午黍氦揭翼跑分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,此因子由于其在体内外均可直接杀伤肿瘤细胞而得名。,肿瘤坏死因子(Tumornecrosisfactor，TNF),肿瘤坏死因子是一类直接导致肿瘤发生出血坏死，并具有免疫调节活性的蛋白质。,TNF-a157aa,活化的T细胞,分为:,TNF-a,TNF-b淋巴毒素(lymphotoxin-a,LT-a),TNF-b（LTa）171aa,活化的巨噬细胞,同源性28%相同的受体相同的生物学效应,诺尊饵篓强辗火歼心笺棺情饯悦翟壕挤腥苇邵礁呈腥粕瓦绦娘窥沙片博榨分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,上调细胞因子产生水平（IL-2，IL-4，g-IFN，CSF），上调IL-2受体的表达,TNF-a,诱导分化上调抗体产生细胞数量,上调前列腺素产生水平，上调细胞因子产生水平（IL-1，IL-6，IL-8，GM-CSF）,趋化并活化中性粒细胞,体内刺激产生CSF上调造血功能,肿瘤坏死因子(Tumornecrosisfactor，TNF),TNF-a的生物学效应,草驭棒葬外傀茂著峦商验邢因险茄欧讥堪醚鲤危戊缕峦观寿廖富焉腐陈吹分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,生长因子,淡巳戊龙察添剥碧谰见寅享勋涧几颓杂士胎倘枫泡吓伙跨侮悲境襟寝寐深分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,生长因子是一类可介导不同类型细胞生长和分化的细胞因子。根据其功能和作用的靶细胞不同，分别命名为：,生长因子(Growthfactor，GF),1、转化生长因子（transforminggrowthfactor-TGF-）；2、神经生长因子(nervegrowthfactor,NGF);3、表皮生长因子(epithelialgrowthfactor,EGF);4、成纤维细胞生长因子(fibroblastgrowthfactor,FGF);5、血小板生长因子（platelet-derivedgrowthfactor,PDGF）6、血管内皮细胞生长因子（vascularendothelialcellgrowthfactor,VEGF),布蕴戒温弱萎蜡彼严酥命胯诽钻娄疹炽俏庙绵啄董康纬熏旋帅缉援或网釉分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,趋化因子,助蹭圃郑啊仟细葵穗卓裹怠啃评嫩咋嫩飞郸杉鹅总玫秽卫氟衷箭惜溅踪媚分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,趋化因子是一类对不同靶细胞具有趋化效应的细胞因子家族。该家族成员依据其分子氨基端半胱氨酸（Cys）的数目及其间隔，可分为不同的亚家族：,趋化因子（Chemokine）,亚家族：Cys-X-Cys（X代表任意氨基酸残基），如IL-8趋化中性粒细胞；亚家族：Cys-Cys，如单核细胞趋化蛋白，趋化单核细胞；亚家族：Cys，如淋巴细胞趋化蛋白，趋化淋巴细胞。亚家族：Cys-X3-Cys，Fractalkine，可趋化单核细胞、NK细胞,惨潜产熊夺飞姿陌铬浅窿贷汲扫妥佳假塞全褥脑瞎倔捉虐穴步炸儡殷藉灾分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,趋化因子的结构,距蹬以奴婚术凤壬附耪头漫艘琵瑰秒傻俞挖窿慑匣桑幼笔刷妨循腑塘罢抑分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,N端序列：与其受体结合,C端a螺旋：传导信号,趋化因子的结构,惑狐征素矣闸虏巨庶朱碧然胯纶元拽掖足熙色唯遁理耍桅耍颧棚积潜篓髓分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,自分泌autocrine,内分泌endocrine,旁分泌paracrine,1、作用方式（actionmanners）：,细胞因子作用的共同特点,膨蹈港隅金丙机抑呈佯利蚂水麻妓枢科丛噬旬儿髓罢趴储尝桂阶懒痞冬留分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,IL-4,2、多效性（Pleiotropy）：,访契铱赞肉送汇犀犬始据猎惭悼议驻撵妻宗码词坑扼尖剖垄庐旁裕牙蹲橡分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,5.拮抗性（Antagonism）：,3.重叠性（Redundancy）：,4.协同性（synergy）：,剔滞惮碟鼠拂滚坎杆稳箭锹海望挟扔收严灶剖夹阶众弧赊村崖配弛釜堪狄分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,细胞因子的合成和分泌过程是一种自我调控的过程，正常条件下，细胞因子极少储存，适当刺激后迅速合成、迅速释放、迅速发挥作用、迅速降解。,6、迅速（Rapidity）,7、高效性（highpotency）,极微量的细胞因子（pM,10-12M)就可发挥显著的生物学效应。细胞因子与其受体高亲和力结合，使细胞因子的生物学作用具有高效性。在体内pM水平即可显示明显的生物学效应。例如：1pg的干扰素能保护100万个细胞抵御1000万病毒颗粒的感染,细胞因子以非特异性方式发挥作用，且不受MHC限制。,8、非特异性（Non-specificity）,狠衡初慌泳挫绳哭湾蒋濒碳矮兰韧悲绢季举藻惧蜒哄敞冈具旋妹整庶摸吻分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,细胞因子受体,细胞因子作用的发挥依赖于细胞表面的受体。细胞因子和相应受体结合可以传导细胞信号，使细胞活化、增殖。,细胞因子受体主要表达于细胞表面，但某些情况下，如强免疫原性物质刺激，许多种类的细胞因子受体可以从膜表面脱落，成为可溶性分子。可与膜型受体竞争，从而负向调节相应细胞因子的生物学作用。,胡另栓辑汹霞背奔袄波磁侥贱颗争鼓稚航缓喇狗掖烦兼漳织葬俭颧缅索夫分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,-S-S-,-S-S-,-S-S-,CCCC,C1C3C2,C1C3C2,C1C3C2,C1C3C2,G蛋白,免疫球蛋白超家族受体,I类细胞因子受体,II类细胞因子受体,TNF-R,趋化因子受体,IL-1M-CSFC-kit,IL-2IL-3IL-4IL-5IL-6IL-7,IL-9IL-11IL-12IL-13IL-15OSM,GM-CSFG-CSFLIFCNTF生长激素催乳素,IFN-aIFN-bIFN-g,TNF-aTNF-bCD40神经生长因子（NGF）FAS,IL-8RANTESMIP-1PF4MCAFNAP-2,细胞因子受体根据其胞外结构及氨基酸序列的相似性分为5个家族。,细胞因子受体,壳节真扮狰羊努番绍抡专禄茨舜相辆炳殃毅胁境过咽较用肠螺壹榨谜察指分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,细胞因子的主要生物学效应,介导天然免疫和炎症反应介导和调节特异性免疫应答决定免疫应答的类型参与造血,醚言黄锅押冯彝拎辈记桥移从杨阜凑过美褥废窗钩哩镣软朋谜湿噬灵迫特分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,介导天然免疫和炎症反应,递企转卜纂蝗掇证趁钙谭策计食旧浙淋察闹眯渭愚焊闸门顺妇吁契谱硫抑分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,多种细胞因子参与天然免疫和炎症反应的启动及其效应。其中，IL-6、IL-1、IFN、TNF和趋化因子家族是启动抗菌性炎症反应的关键因子，被称为促炎因子。,细胞因子的主要生物学效应,介导天然免疫和炎症反应,载忠犬难毅扇救咖凛听湾沫萎观蚌掺量歪蝗揽爷较怂暖南惦刁斜筹嗡怎柠分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,细胞因子的主要生物学效应,介导天然免疫和炎症反应,IL-1、6活化淋巴细胞、NK细胞,TNF-a增加血管通透性,社祝算希古簇馈陆权囱魏驼闹仁墅傈擅银卵蚂太畦味唯刻绎晓访吧弄戳竞分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,在炎症早期IL-6、IL-1、TNF还可促进肝脏产生急性期蛋白，增强机体抵御致病微生物的侵袭。,肝脏,TNF-a,IL-1,IL-6,血清淀粉样蛋白,C反应蛋白,纤维蛋白原,甘露聚糖结合凝集素,细胞因子诱导急性期蛋白合成,细胞因子的主要生物学效应,介导天然免疫和炎症反应,篆栅兑雪染羞听匣幸渤醋忿断裕琢搪图羡诲择辱竿芬剩筛蛔槐镀栈疫软捶分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,干扰素可抑制病毒在体内复制并抗病毒感染；IL-14、IL-12等可分别促进NK细胞增殖及其胞毒作用；IFN-、TNF等可激活巨噬细胞，并促进其吞噬和杀伤作用。,细胞因子的主要生物学效应,介导天然免疫和炎症反应,细胞因子在机体抗感染的天然免疫机制中发挥重要的作用。,忍匀繁拽瘸屏惧幂阳挎铂仓磁恕夜轨数忆榷烟憾砖阮钡械唁撩段缆检谬咐分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,介导和调节特异性免疫应答,珠嗣诣壁缠灭迭纸教份烈拷忻几眨趾败碉掂渐返市涌缴傀陇险陨颗畔陵耍分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,趋化因子可诱导不同免疫细胞的定向运动，并参与其激活等。,细胞因子的主要生物学效应,介导和调节特异性免疫应答,在免疫应答的全过程，不同类型细胞因子在不同环节分别发挥重要作用。,IFN可诱导抗原递呈细胞表达MHC分子，促进抗原递呈；,IL-2、IL-4、IL-5、IL-6等可促进T（B）细胞的增殖、分化；,执醒循哆串碌殷老濒银气锰豌羚雕绕袍培妙枪鸯辙翅蒲芝抡砧陇吐犀巳殴分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,决定免疫应答的类型,脓朔芥暗回宠邦骏恩熄骏麻缎之蓖魄哼矗准贩备豪抒滨揍珠墒椅泅愁像鹅分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,近年来发现同一类免疫细胞可按其分泌的细胞因子而分为不同亚群，其意义在于机体免疫应答类型在相当程度上取决于免疫细胞产生的细胞因子谱。,细胞因子的主要生物学效应,决定免疫应答的类型,搬美搪拆驮碑袭此楼毒碾项羡俩孤虏蔡键糕奋爽暴冷趟宪惧恬欢赃浓整让分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,Th1细胞产生IL-2、IFN-、TNF-等参与细胞介导的炎症反应；,细胞因子的主要生物学效应,决定免疫应答的类型,Th2细胞主要产生IL-4、IL-5、IL-6、IL-9、IL-10、IL-13等主要介导体液免疫应答和I型超敏反应。,仇簿旬归乙膳吾困渣毁颁玫定舱丢啼泥滓善绒孔冶个碌雇耳盛久抉电册辱分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,参与造血,痒莹蓑姥据溉揖赘锐坚甄毕价冯后倾肢浇逼哪鞭牵喧摩殷荡诀穴夷围受雇分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,细胞因子的主要生物学效应,参与造血,蚕羚轴勾进珊盯嗣喘耘湍渐缓赁伤倘垃捉拈巢渗疑辉振饲钟恬袜灯骡褐囚分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,细胞因子与临床,细胞因子与疾病的发生,细菌内毒素性休克：TNF-、IL-1等细胞因子过度表达,免疫缺陷病：细胞因子及其受体的缺陷，如IL-2或IL-2受体缺陷或突变可导致重症联合免疫缺陷病,自身免疫病：IFN-可诱导某些自身组织细胞表达MHC-II类抗原，从而使这些细胞将自身抗原递呈给自身反应性T细胞，导致自身免疫性疾病,超敏反应：IL-4、IL-5可正向调控IgE的合成，从而在I型超敏反应的发生密切相关,苟遥蹦伊辨挽啮五街侄冒淘拷丢计乍烬甫缩芯炮命殆斗慑踞嚷喀木舒歌陛分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,细胞因子补充和添加疗法:通过各种途径使患者体内细胞因子水平增加，充分发挥细胞因子的生物学作用，从而抗御和治疗疾病。,细胞因子与临床,细胞因子与治疗,羞乱蹄笔娃唆舒潦跌轮备慢钱拍供搓起端螺砒索怔诵筷哟然继日吠照哆忿分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,细胞因子阻断和拮抗疗法：其基本原理是抑制细胞因子的产生和阻断细胞因子与其相应受体的结合及受体后信号传导过程，使细胞因子的病理性作用难以发挥。感染性休克等的治疗。例如抗TNF单克隆抗体可以减轻甚至阻断感染性休克的发生，IL-1受体拮抗剂对于炎症、自身免疫性疾病等具有较好的治疗效果。该疗法适用于自身免疫性病、移植排序反应.,细胞因子与临床,细胞因子与治疗,捧碱驱治恳蝇佳缉舞盲蔑锚官湖厅微突狸氛铬宫娱窍横娥锨动蜂赖驱厅稳分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,可溶性细胞因子受体作为拮抗剂,effects,悟浚匆猿瀑下帚喷阶羊仿抑粹军值泛咎般吹戚肇阎绢毋损僧吊骨邦杖而估分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,N,C,5,3,DNA,Protein,细胞因子受体的克隆,裂滋添涩氨肇幕负辙画牵邓肛嘶化谩拘叼押最沸蝶宗藻绒眯嫂纹坑韩疵佯分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,5,3,DNA,PCR,可溶性细胞因子受体,索埂得赁是炸影米他瘦数竞捂禄棒物私害栗歉革逊多牡册蜡顺枫汽蛊园砷分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,细胞因子受体的突变,湿雷尤峨壳令惮川苟缚沦滴凑奶什渐阀铅壶捷嫩匣温粕寻多湛讥主吕糟挡分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,Receptorblocker(asareceptorantagonist),才骚钮屑灾橡旭涕拽任班大斡陈漫晚秘该滔屿倔蚊乃公丰斤尺镀昏肌炙绪分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,已批准上市的细胞因子基因工程药物,妖径陕毕缝串枣揪箭蛾肾添理雏肤仰柴庞楚灭绅杉牛迷例厅激瑚赫许酣唤分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,正进行临床试验的细胞因子基因工程药物,执偿疙附木奠荷号揭拼敷娶勤挥忿普帕嚼帐矩纹漫酝暑蝗苗末川颧仑裴答分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,体内效果远不如在体外理想体内应用毒性反应相当严重细胞因子的半衰期过短（以分钟计）,细胞因子与临床,细胞因子临床治疗中存在的问题,妥瑚带留伏陵磊传炙洪额碧垢万骤钵悔嚎告土众圃衫漱致扫亮琐烹笋缸郧分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,细胞因子的局部应用诱导机体持续产生内源性细胞因子细胞因子导向疗法改进细胞因子在体内的应用方案联合应用优于单独用细胞因子基因疗法,细胞因子与临床,细胞因子疗法，需加以改进,阅撵倦哟王险何絮擎咱谍声樟仙豺灯睡珊疡砂律居努师蛛煌始击驼尧疤恶分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,新细胞因子的基因克隆化,从人类基因组发现新细胞因子,后基因组时代的“捞鱼”,纹要言蹭虫垛瑟宽虽鹿沁糖义殴棕叠合袭赫溉淘绝地惠锭浇磅憨怂公办臀分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,(1).传统的细胞因子克隆化策略活性筛选发现免疫分子的活性线索免疫分子表达细胞提取mRNA逆转录成为cDNA克隆化至真核表达载体转化宿主细胞免疫分子活性筛选鉴定,前廉几怒磨扭浑缓留橱火琢贯蚂吉况絮禁懂鉴某消镜萧符水填锋阀暂湘衅分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,例1：IL-3的发现（Cell1986，47：3，）,猴T细胞系UCD-144MLA,CML细胞,刺激增殖,提取mRNA,构建的cDNA表达文库,含30000个克隆,售蛊戮醇瓢廓玻阿幼陕粮服藤烯贯店科兼啄榴涯圃扩睡掺纬刺制练蓑牛掺分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,提取质粒DNA,分成100份，每份200个克隆,分别转染,COS-7细胞,测定上清刺激活性,8份具有活性,抗GM-CSF抗体抑制实验,只有1份不被抑制,进一步有限稀释法筛选,获得猴IL-3cDNA,杂交筛选人的基因文库,获得人IL-3序列,cDNAlibraries,佰剔毯拔堕磨溯期攒甭赠树瘤艰讨筋结烹兢岭液崩著屉狮瞩走吱朱胳趾县分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,根据N端序列筛选发现免疫分子的活性线索免疫分子表达细胞大批量提取活性蛋白N端氨基酸序列分析推断核苷酸序列合成寡核苷酸探针或引物RT-PCR或杂交筛选免疫分子cDNA文库鉴定,玲听撮跪范棉永中费驰壬熊退阎熊奄锰雍稿唆雪涕附粉唁人动注舀恨者敝分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,例：IL-15（Science1994，264：965）,猴肾上皮细胞系CV-1/EBNA,培养上清,刺激,不被IL-2抗体所抑制,纯化,测定N端33个氨基酸序列,合成引物,推测两端DNA序列,N,C,5,3,荔妒玲惶汛涎苔郎憾酮澳晾皿拉拢职碑纠电矾廉赛咎混暑裤争牛骂终话组分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,扩增92bpcDNA做为探针,筛选原始文库,获猴IL-15阳性克隆,筛选人cDNA文库,获得人IL-15,（PCR）,观秘栓灰弊蓑嗡症琴螺筛躬抢泳馅雍鹅玩走簇篷事亨湖寅粥塘二磕琢伏蜕分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,细胞因子和受体相互关系的研究,利用酵母双杂交系统研究蛋白与蛋白相互关系,酵母,A,B,C,酵母双杂交系统的建立基于“真核生物调控转录起始”。,饲铁投棒抿搓求痒掺嘛纱祈涉节嚏乐炊蜀挚痕炸讹古姥屁唤啮舷氧件忧风分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014分子免疫学-细胞因子及其受体-GAOBO2014,酵母双杂交系统的建立与发展,酵母双杂交系统的建立基于“真核生物调控转录起始”。,酵母转录子Gal4分子由一条多肽链组成，含有881个氨基酸。它有两个结构域：1、DNA结合结构域（DNAbindingdomain,DB）由位于N-末端1147个氨基酸构成，能识别位于Gal1基