胺类药物的分析

第六章胺类药物的分析,第一节芳胺类药物的分析,芳胺类药物分为两类,芳伯氨基未被取代,芳伯氨基被酰化,一、对氨基苯甲酸酯类药物,（一）基本结构与典型药物,苯佐卡因,盐酸普鲁卡因,盐酸丁卡因,盐酸普鲁卡因胺,1.芳伯氨基特性：重氮化偶合反应；芳醛缩合成Schiff碱；易氧化变色等。盐酸丁卡因无此特性。,（二）主要理化性质,水解特性：分子结构中的酯键或酰胺键易水解，除盐酸丁卡因外水产物为对丁基苯甲酸外，上述均为对氨基苯甲酸。,3.弱碱性：除苯佐卡因外，其余均含有叔胺氮的侧链，故具有弱碱性。4.其它特性：因结构中有芳伯氨基或同时具有脂烃胺侧链，其游离碱多为碱型油状液体或低熔点固体，难溶于水，可溶于有机溶剂。其盐酸盐则易溶于水。,二、芳酰胺类药物（一）基本结构与典型药物,苯胺酰基衍生物，酰胺基邻位或对位有取代基。,对乙酰氨基酚（扑热息痛）,醋氨苯砜（治疗麻风病，抑制麻风杆菌）,盐酸利多卡因,盐酸布比卡因,1.水解后显芳伯氨基特性：分子结构中含有芳酰氨基，酸水解后显芳伯氨基的特性反应。注意空间位阻的影响。2.水解产物易酯化：对乙酰基酚和醋氨苯砜，酸水解生成醋酸，在硫酸中与乙醇反应，发出醋酸乙酯香味。,（二）主要化学性质,3.酚羟基特性：对乙酰基酚有游离酚羟基；醋氨苯砜酸水解有酚羟基，可与FeCl3发生显色反应，可相互区别。,4.弱碱性利多卡因和布比卡因的脂烃胺侧链含叔胺氮原子，具弱碱性，可成盐，可与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应。5.与重金属离子发生沉淀反应利多卡因和布比卡因酰氨基上的氮可与金属离子生成有色的配位化合物。,三、鉴别试验,（一）重氮化-偶合反应分子结构中含有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物，均可发生此反应。,Ar-NH2,HCl,NaNO2,重氮盐,OH-,-萘酚,橙黄猩红色,直接反应：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸普鲁卡因胺,间接反应：对乙酰氨基酚、醋氨苯砜,利多卡因和布比卡因由于空间位阻很难发生此反应。,丁卡因虽无芳伯氨基，但可与NaNO2反应生成N亚硝基化合物的乳白色沉淀。,盐酸普鲁卡因【鉴别】（1）本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录）取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。,1.盐酸普鲁卡因的鉴别,(二)水解产物反应,2.苯佐卡因【鉴别】取本品约0.1g，加氢氧化钠试液5m1，煮沸，即有乙醇生成；加碘试液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。,（三）与三氯化铁反应,对乙酰氨基酚+FeCl3,蓝紫色化合物,（四）重金属离子反应1.与铜和钴离子反应,2羟肟酸铁盐反应,3与汞离子的反应与对氨基苯甲酸酯类可区别,（五）制备衍生物测熔点1三硝基苯酚衍生物盐酸利多卡因ChP（2000）【鉴别】取本品0.2g，加水20ml溶解。（1）取溶液10ml，加三硝基苯酚试液10ml，即生成沉淀；滤过，沉淀用水洗涤后，干燥，依法测定（附录C），熔点为228232，熔融时同时分解。,2.硫氰酸盐衍生物盐酸丁卡因ChP（2000）【鉴别】（1）取本品约0.1g，加5%醋酸钠溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸铵溶液1ml，即析出白色结晶；滤过，结晶用水洗涤，在80干燥，依法测定（附录C），熔点约为131。,(六)紫外特征吸收光谱法,1.在max处测定供试液的百分吸收系数。例如：对乙酰基酚在0.4%NaOH中于max=240nm;E1%1cm=715在HCl(0.1nol/L)-甲醇于max=249nm;E1%1cm=880,2.在规定的浓度测定max例如：醋氨苯砜5g/ml;max=256nm;284nm再例如：盐酸普鲁卡因胺5g/ml;max=280nm,(一)盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查,为什么要检查？,怎样检查？,采用TLC法中的杂质对照品法进行检查。,四、特殊杂质检查,（二）对乙酰氨基酚中的特殊杂质检查1.乙醇溶液的澄清度与颜色：因其生产工艺用铁粉作还原剂，可能带入，致使乙醇溶液产生混浊，中间体对氨基酚易氧化产生有色化物，在乙醇溶液中显橙红色或棕色。,检查方法：配制0.1g/ml本品乙醇溶液，溶液应澄清，无色;如显混浊，与1号浊度标准液比较，不得更浓;如显色，与棕红色2号或橙红色2号标准液比较，不得更深。,2.有关物质检查：Ch.P是以对氯苯乙酰胺为对照品，采用TLC法中的杂质对照品法。,3.对氨基酚检查：利用对氨基酚在碱性条件下可与亚硝基铁氰化钠生成蓝色配位化合物，采用比色法。,（一）亚硝酸钠滴定法Ar-NH2;Ar-NHCOR;Ar-NO2均可采用此法Ch.P中的苯佐卡因；盐酸普鲁卡因和盐酸普鲁卡因胺及其制剂可直接采用本法；醋氨苯砜及注射液水解后用本法。,五、含量测定,1.原理：,Ar-NHCOR+H2O,Ar-NH2+RCOOH,H+,Ar-NH2+NaNO2+2HCl,Ar-N2+Cl-+NaCl+2H2O,测定主要条件：,(1)加KBr增加反应速度,重氮化的反应历程为：,NaNO2+HCl,HNO2+NaCl,HNO2+HCl,NOCl+H2O,KHCl,KBr+HCl,HBr+KCl,HNO2+HCl,NOBr+H2O,KKBr,KHBr比KHCl大300倍,生成NOBr量大得多加快反应速度,(2)加过量HCl加速反应：重氮化速度加快；重氮盐在酸性介质中稳定；防止生成氨基偶氮化合物。Ar-N2+Cl-+H2N-ArAr-N=N-NH-Ar+HCl一般摩尔比为Ar-NH2:HCl=1:2.56。,(3)室温条件下滴定:温度高反应速度快；每升高10加快2.5倍,太高,可使Ar-N2+Cl-+H2O,Ar-OH+N2+HCl,(4)滴定管尖端插入液面下滴定,3.指示终点的方法(1)用停滴定法溶液检流计终点前：无过量无电流HNO2终点时：有过量有电流（使指针偏离零HNO2永停在某一位置）(2)外指示剂法用KI-淀粉指示剂指示终点的原理：2NaO2+2KI+4HCl2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O,(二）非水溶液滴定法,基于盐酸丁卡因、盐酸利多卡因和盐酸布比卡因侧链叔胺氮在滴定盐酸丁卡因时，因其在冰醋酸中碱性弱，加醋酐可增加其碱性。因醋酐合乙酰氧离子比醋酸合质子的酸性强，可增加碱性。,2(CH3CO)2O,(CH3CO)3O+CH3COO-,相当于,BHCl+Hg(Ac)2,BHAc+HgCl2,BHAc+HClO4,BHClO4+HAc,1.对乙酰基酚原料的含量测定在0.4%NaOH介质中；257nmD%E1%1cm样E1%1cm标100；E1%1cm7152.对乙酰基酚片溶出度测定（测定条件同上）1片稀HCl24ml+H2O1000ml精密量取5ml+0.4%NaOH10ml+H2O100ml257nm测定A。W110005100100C（g/100ml)W(g)=200C;C=A/715溶出度W标示量10080为合格,（三）分光光度法,第二节苯乙胺类药物的分析,一、结构与性质（一）基本结构与典型药物苯乙胺类药物的基本结构,盐酸克仑特罗,硫酸沙丁胺醇,（二）主要化学性质1.弱碱性脂烃胺基侧链，为仲胺氮，显弱碱性。游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂，其盐可溶于水。2.酚羟基特性邻苯二酚或苯酚结构，易氧化变色，与重金属络合成色（三氯化铁反应）3.光学活性具有手性碳原子，具旋光性,二、鉴别试验,(一)与三氯化铁反应,Ar-OHFeCl3,络合显色碱液,紫红色,。(二）甲醛硫酸反应在此试剂中形成醌式结构而显色。药物三氯化铁甲醛硫酸肾上腺素0.1mol/LHCl显绿色,甲氨试液显红紫红红色重酒石酸去甲肾上腺素绿色,加NaCO3试液显紫色红色淡红色盐酸去氧肾上腺素紫色玫瑰红橙红棕红盐酸异丙肾上腺素深绿色,加5NaCO3试液显蓝紫色红色棕色暗紫色,(三）氧化反应,本类药物具有Ar-OH，易被氧化剂I2,H2O2,K3Fe(CN)6氧化而显色，例如：肾上腺素在中性或酸性条件下，被I2,H2O2氧化后，生成肾上腺素红；盐酸异丙肾上腺素在酸性条件下，被I2氧化，生成异丙肾上腺素红。,（四）UV,（五）亚硝基铁氰化钠反应（Rimini反应）脂肪族伯胺的专属反应。,三、杂质检查（一）酮体检查杂质来源原料残存检查方法比较法（含量测定法）,检查原理利用酮体在310nm波长处有最大吸收，而药物本身在此波长处几乎没有吸收，规定一定浓度溶液在310nm波长处的吸收度限制酮体的量。,（二）有关物质检查盐酸去氧肾上腺素、硫酸沙丁胺醇等药物检查方法：TLC中高低浓度对比法；配制两种浓度对照溶液。四、含量测定（一）非水溶液滴定法脂烃胺基侧链，显弱碱性,(二)溴量法本类药物重酒石酸间羟胺、盐酸去氧肾上腺素及其注射液用此法。,基本原理：,（三）HPLC法重酒石酸去甲肾上腺素注射液离子对反相高效液相色谱法内标法定量调节溶液pH为3.8，加入离子对试剂十二烷基磺酸钠,第三节丙胺类药物的分析,典型药物：马来酸氯苯那敏,基本结构:R1R2,CHCH2CH2N,CH3CH3,马来酸氯苯那敏制剂有片剂、注射剂，又名扑尔敏，抗组胺类药，本品通过对H1受体的拮抗起到抗过敏作用。主要用于鼻炎、皮肤黏膜过敏及缓解流泪、打喷嚏、流涕等感冒症状。,（二）性质,马来酸氯苯那敏分子结构中的顺丁烯二酸是强有机酸，故其水溶液显酸性反应（PH为4.05.0）,顺丁烯二酸又称马来酸。为最简单的不饱和二元羧酸，分子式HO2CCH=CHCO2H。它在自然界中不存在。,分子结构中有叔胺结构，可发生叔胺特有的显色反应（叔胺显碱性，能与酸形成盐）枸橼酸-醋酐反应,二、鉴别试验,（一）顺丁烯二酸的还原反应马来酸氯苯那敏分子结构中的顺丁烯二酸具有碳碳双键，能使高锰酸钾还原，红色即消失,（二）枸橼酸-醋酐试验,取本品约10mg，加枸橼酸醋酐试液1ml，置水浴上加热，即显红紫色。这是叔胺特有的显色反应。无论是脂肪族、脂环族，还是芳香族的叔胺，与枸橼酸醋酐试液在水浴上共热时，会分别显现红色、紫色或蓝色。,（三）紫外特征吸收和红外吸收光谱,紫外特征吸收：苯基和吡啶环最大吸收峰：264nm吸收系数：212222马来酸氯苯那敏也可采用红外吸收光谱鉴别,三、含量测定,马来酸氯苯那敏分子结构中含有两个氮原子，在冰醋酸中均表现为较强碱性，能与高锰酸钾反应生成二高氯酸盐,（一）非水溶液滴定法,每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于19.54mg的C16H19CLN2.C4H4O4,（二）紫外分光光度法,中国药典2005年版采用分光光度法测定马来酸氯苯那敏制剂的含量测定,练习与思考,A型题,1盐酸普鲁卡因注射液中检查的特殊杂质是A.水杨醛B.间氨基酚C.水杨酸D.对氨基苯甲酸E.氨基酚2对乙酰氨基酚中检查的特殊杂质是A.水杨醛B.间氨基酚C.对氨基酚D.苯甲酸E.苯酚3肾上腺素和盐酸去氧肾上腺素中检查的特殊杂质是A.水杨醛B.间氨基酚C.对氨基酚D.酮体E.苯甲酸,B型题,A。硫酸铜反应B.氧化反应C.还原反应D.水解后重氮化-偶合反应E.重氮化-偶合反应1.盐酸利多卡因2.