灵芝菌丝体乙酸乙酯提取物的体外抑菌作用

上笔坚焉= 一研究与段讨 颥雠a n d 死西肋蛔o fF o o dI n d u s t r y ”一 王晓玲。江芸 ( 中南林业科技大学生命科学与技术学院，湖南长沙4 1 0 0 0 4 ) 摘要：从灵芝发酵茼丝体中制备了乙酸乙酯提取物，实验了其对三神典型细菌生长的抑制作用。结果表明，灵芝茼 丝体乙酸乙酯提取物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长有较明显的抑制作用，而对枯草芽孢杆菌的抑制作用很弱。 该提取物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最小抑茵浓度为3 0 m g m L ；而对枯草芽孢杆菌的最小抑茵浓度为 1 0 0 m g m L 。此外，该提取物的抑茵成分在4 0 和6 0 下( 处理2 h ) 较稳定，但在8 0 。C 以上的温度下，热稳定性较差。 关键词：灵芝，茵丝体，乙酸乙酯提取物，抑茵作用，最小抑茵浓度 Inv i t r ob a c t e r i o s t a s i so ft h ei n t r a c e l l u l a rg a n o d e r i ca c i d sf r o m t h ef u n g u sG a n o d e r m al u c i d u m W A N GX i a o - f i n g ，J U u N GY u a ( C o l l e g eo fL i f eS c i e n c ea n dT e c h n o l o g y ，C e n t r a lS o u t hU n i v e r s i t yo fF o r e s t r y T e c h n o l o g y ，C h a n g s h a4 1 0 0 0 4 ，C h i n a ) A b s t r a c t ：T h ee t h y la c e t a t ee x t r a c tf r o mm y c e l i u mo fG a n o d e r m al u c i d u mw a sp r e p a r e d ，a n di t sa n t i b a c t e r i a l a c t i v i t yo nt h r e et y p i c a lb a c t e r i aw a st e s t e d T h er e s u l t ss h o w e dt h a tt h ee x t r a c th a do b v i o u si n h i b i t o r ye f f e c to n t h eg r o w t ho fE c o i l ( G 一) a n dS t a p h y l o c o c c a la u r e s ( G + ) 。h o w e v e r ，i th a dl i t t l eo nt h eg r o w t ho fB a c i l l l u ss u b t i t i s , T h em i n i m a li n h i b i t o r yc o n c e n t r a t i o n ( M I C ) o ft h ee x t r a c tt oE c o l i ，S a u r e sa n dB s u b t i t i sw a s3 0 ，3 0 ，l O O m g m L T h ea n t i b a c t e r i a lc o m p o n e n t so ft h ee x t r a c ts a m p l ec o u l d n tb ed e s t r o y e da t4 0 0 Ca n d6 0 0 C ( 2 ht r e a t m e n t ) ，b u ti t c o u l db ep a r t l yd e s t r o y e da t8 0 K e yw o r d s ：G a n o d e r m al u c i d u m ；m y c e l i u m ；e t h y la c e t a t ee x t r a c t ；b a c t e r i o s t a s i s ；m I n i m a Ii n h i b i t o r yc o n c e n t r a t i o n ( M I C ) 中图分类号：1 r 5 2 0 1 3文献标识码：A文章编号：1 0 0 2 0 3 0 6 ( 2 0 0 8 ) O l O 一0 1 0 4 0 3 灵芝( C a n o d e m al u c i d u m ) 是我国最为名贵的药 用真菌之一。现代药理学证明，灵芝在抗肿瘤、增强 免疫、防治哮喘、抗病毒、保肝护肝等方面具有明显 的药理活性”“】。近年来，包括我国在内的东南亚国 家以及美国和加拿大的许多学者对灵芝进行厂深入 的研究”，但主要研究集中在灵芝子实体的化学成分 和药理作用方面，而对灵芝液体发酵生产的菌丝体 的药理作用研究较少。秦莲花等( 2 0 0 6 ) 报道 r 灵芝 子实体中水提物和三萜成分对结核分枝杆菌的体外 抑制作用。本文通过灵芝液体发酵获得菌丝体，从 中制备r 乙酸乙酯提取物，检测r 其对大肠杆菌和 金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌生长的抑制作用。 1 材料与方法 1 1 材料与仪器 灵芝、三种细菌( 大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯 收稿日期：2 0 0 8 0 2 2 6 作者简介：王晓玲( 1 9 7 5 一) ，女硕士，讲师，主要从事微生物技术研究。 基金项目：湖南省教育厅资助科研项目资助。 1 0 4 草芽孢杆菌)均由我校生物工程实验室提供。 离心沉淀机上海医药分析仪器厂；旋转蒸发 器德国步琪公司；电热恒温培养箱 南京实验仪 器厂；H Y G B 伞温摇瓶柜太仓市实验设备厂。 1 2 灵芝发酵 培养基组成：葡萄糖：2 0 9 L ，蛋白胨：4 9 L ， K H ：P O 。：1 5 9 L ，M g S O 。：0 7 5 9 L 。培养条件：在 2 8 ，1 4 0 f r a i n 下培养7 d 。 1 3 菌丝体乙酸乙酯提取物的制备 待灵芝发酵结束后，用1 0 0 同筛过滤出菌体，反 复用蒸馏水冲洗3 次后，烘干，粉碎成4 0 目粉末，作 为样品。 称取5 0 9 菌体粉末样品，用4 0 0 r a L 乙酸乙酯回 流提取3 h ，提取液过滤后，在旋转蒸发器上完全挥去 乙酸乙酯，即得提取物。提取物用无水乙醇溶解后， 作为实验试样。 1 4 抑菌实验方法 1 4 1 实验菌的准备将大肠杆菌、金黄色葡萄球 菌、枯草芽孢杆菌分别接入斜面培养基中，3 7 培养 万方数据 礤究与删而丽面万型盟 1 8 h 。再移种至营养肉汤培养基中，在3 7 。C 培养1 5 h ， 取出备用。 1 4 2 混菌平板的制备用无菌吸管分别取大肠杆 菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的肉汤培养物， 在无菌平皿中各滴加4 5 滴，再将已溶化并冷却至 4 5 的琼脂培养基倒入平皿中，制成混菌平板。 1 4 3 抑菌圈直径的测定用无菌镊子取无菌牛津 杯置于混菌平板上，杯中加满试样，将平皿放入3 7 。C 恒温箱中培养2 0 h ，然后测鼍抑菌圈的直径怕oo 。 1 5 最小抑菌浓度的确定 采用连续稀释法“。 1 6 温度对提取物抑菌活性的影响 菌丝体乙酸乙酯提取物分别经4 0 、6 0 、8 0 处理 2 h 后，检测其抑菌活性。 2 结果与分析 实验了灵芝菌丝体乙酸乙酯提取物在不同浓度 下对几种细菌生长的抑制作用( 表1 ) 。从表中可见， 灵芝提取物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长有 较明显的抑制作用，而对枯草芽孢杆菌的抑制作用 很弱；且抑制作用与提取物的浓度成正相关。在提 取物浓度为8 0 m g m L 时，对大肠杆菌、金黄色葡萄球 菌和枯草芽孢杆菌的抑菌圈直径分别为9 7 2 、8 1 6 、 0 3 7 r a m ，提示该提取物对大肠杆菌的抑制作用最强。 枯草芽孢杆菌在提取物浓度低于8 0 r a g m L 时，其生 长基本不受抑制。 表l灵芝菌丝体乙酸乙酯提取物 对几种细菌生长的抑制作用 测试菌种样品浓度( m r , m L ) 抑菌圈直径( r a m ) 8 09 7 24 - 1 1 3 大肠杆菌 5 08 1 14 - 1 0 l 3 06 9 3 O 6 7 8 08 1 6 0 5 2 金黄色葡萄球菌 5 07 3 3 0 3 7 3 05 1 l 0 3 6 8 0 0 3 7 0 1 2 枯草芽孢杆菌 5 00 3 0 0 为了测试提取物样品抑菌成分的热稳定性，样 品分别经4 0 、6 0 、8 0 处理后，检测其8 0 r a g m L 时的 抑菌活性，结果见表2 。从表2 可见，该提取物经 4 0 。C 和6 0 处理2 h 后，其抑菌圈大小与表1 中 8 0 r a g m L 时的抑菌圈大小接近，无显著差异。但在 8 0 。C 处理2 h 后，对三种细菌的抑菌活性有所下降， 如对大肠杆菌的抑菌圈大小由原来的9 7 2 m m 降到 8 7 1 I t n m ，而且，对枯草芽孢杆菌无抑菌能力( 其抑菌 圈为0 ) ，说明该提取物在8 0 时，热稳定性较低，制 备提取物产品时，应避免在8 0 以上温度下操作。 表3 为采用连续稀释法测定乙酸乙酯提取物对 三种细菌的最小抑菌浓度的实验结果。由表中可以 看出，大肠杆菌和金黄色葡萄球菌在提取物浓度低 于3 0 m g m L 时，仍然可以生长，但当提取物浓度达到 3 0 r a g m L 以上时，不再生长，说明该提取物对大肠杆 菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为3 0 m g y m L 。 而枯草芽孢杆菌在提取物浓度低于1 0 0 m g m L 时，仍 能生长，而当提取物浓度达到1 0 0 m g m L 以上时，不 再生长，因此，该提取物对枯草芽孢杆菌的最小抑菌 浓度为l O O m g m L 。 表2 温度对乙酸乙酯提取物抑菌活性的影响 测试菌种样品处理温度抑菌圈 径( h i m ) 大肠杆菌 金黄色葡萄球菌 枯草芽孢杆菌 4 0 6 0 8 0 4 0 6 0 8 0 4 0 6 0 9 3 1 0 8 6 9 4 3 0 1 4 8 7 1 0 2 9 8 2 1 0 3 3 8 1 3 0 2 4 7 4 2 0 5 l 1 3 l 0 7 9 1 1 9 O 3 3 表3乙酸乙酯提取物对二种细菌的最小抑菌浓度 。、+ 。 样品浓度( m r m L ) 测试菌种了r 毒产坐兰蓊_ 等嚣1 丽一 注：“+ + + ”表示菌生长很多，“+ + ”表示菌生长较多， “+ ”表示菌生长较少，“- ”表示肉眼看不见菌生长。 3 讨论 灵芝具有广泛的药理作用，其中对慢性炎症也 有一定的疗效。已有报道大量分析和研究了灵芝子 实体的化学成分和药理作用，但对灵芝液体培养菌 丝体的相关研究较少。本文通过发酵制备r 灵芝菌 丝体乙酸乙酯提取物，检测了其体外抑菌作用。结 论如下： 3 1 灵芝菌丝体乙酸乙酯提取物对大肠杆菌和金黄 色葡萄球菌的生长有较明显的抑制作用，而对枯草 芽孢杆菌的抑制作用很弱；对三种细菌的抑制作用 与提取物的浓度成正相关。 3 2 该提取物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最小 抑菌浓度为3 0 m g , m L ；而对枯草芽孢杆菌的最小抑 菌浓度为1 0 0 m g m L 。 3 3 该提取物的抑菌成分在4 0 、6 0 下( 处理2 h ) 较稳定，但在8 0 以上温度下，热稳定性较差。 研究结果验证了灵芝可预防和治疗一些炎症的 药理作用，同时，如能进一步分离具体的抑菌成分， 有单开发灵芝相关抑菌产品。但本文中乙酸乙酯提 取物的主要成分尚待进一步分离、鉴定。 参考文献： 1 林志彬灵芝的现代研究( 第二版) M 北京：北京医 科大学出版社2 0 0 1 2 M a u 儿，H s i u C h i n gL ，C h e nc c N o n v o l a t i l ec o m p o n e n t so f s e v e r a lm e d i c i n a lm u s h r o o m s J F o o dR e s e a r c hI n t e r n a t i o n a l ， 2 0 0 1 ，3 4 ：5 2 1 - 5 2 6 3 “uC , Q ，Z h a n gK C M e c h a n i s m so ft h ea n t i e a n c e ra c t i o no f C , a n o d e r m al u c d u m ( t e y s s e LF r ) K a r s L ：An e wu n d e r s t a n d i n g J J o u r n a lo fI n t e g r a t i v eP l a n tB i o l o g y ，2 0 0 5 ，4 7 ( 2 ) ：1 2 9 1 3 5 4 L i uG Q ，Z h a n gK C S t r u c t u r e - a c t i v i t yr e l a t i o n s h i pa n d 1 0 5 万方数据 上些型五i j = _ - 一研究与寝讨 S c i e n c ea n d 死幽l n 细矿F o o d 觑妣砂 。 复合盐溶液对鸡翅肉品质参数的影响 马艳1 王志耕L ，李春保2 ，梅林1 ( 1 安徽农业大学茶与食品科技学院，安徽合肥2 3 0 0 3 6 ； 2 安徽省华泰食品有限责任公司，安徽合肥2 3 0 0 2 5 ) 摘要：采用碳酸氢钠与氯化钠复合盐溶液对鸡翅进行脱脂处理，会对鸡翅肉品质产生一定的影响。实验表明：在复 合盐中，随着碳酸氢钠浓度的升高，处理后肌肉的p H 也随之升高，同时滴水损失降低；而且一定配比的复合盐溶液，在 不同温度条件下，随着处理时间的延长，肉剪切力值表现下降；此外，在处理时间相同的情况下，在实验所设温度条件 下。肌肉剪切力值随着复合盐的加入有下降趋势，且随碳酸氢钠浓度的升高，这种下降趋势更为明显。 关键词：复合盐溶液，鸡翅，肉品质 E f f e c to fc o m p o u n ds a l ts o l u t i o no nm e a tq u a l i t yi n d e x e so fc h i c k e nw i n g M AY a m l 。W A N GZ m g e n 9 1 一，L IC h u n b a 0 2 ，M E IL i n l ( 1 C o l l e g eo fF o o da n dT e a ，A n h u iA g r i c u l t u r a lU n i v e r s i t y ，H e f e i2 3 0 0 3 6 ，C h i n a ； 2 A n h u iH u a t a iF o o dC o ，“d ，H e i f e i2 3 0 0 2 5 ，C h i n a ) A b s t r a c t ：C o m p o u n ds a l ts o l u t i o no fs o d i u mb i c a r b o n a t ea n ds o d i u mc h l o r i d ew a su s e do nc h i c k e nw i n g ，i th a s e f f e c to nm e a tq u a i l t yi n d e x e s T h i se x p e r i m e n tj n d i c a t e dt h a tt h em e a tw a st r e a t e db yd i f f e r e n tI e v e l so fs o d i u m b i c a r b o n a t e ，t h ep Ho fm e a tw a sb e c o m i n gh i g h e ra n dt h ed r i pI O S Sw a sd e c r e a s e di nad o s ed e p e n d e n tm a n n e r ； a n dt h er a z o r b l a d es h e a ro fm e a td e c r e a s e dw i t ht h et i m eu s e d nt h et r e a t m e n tr e g a r d l e s so ft h ed i f f e r e n t t e m p e r a t u r e ；j na d d i t i o n ，t h er a z o r b l a d es h e a rs h o w e dd e c l i n e dw i t ht h ea d d i t i o no ft h ec o m p o u n ds a l ts o l u t i o na t t h es a m et r e a t m e n tt i m e a n dt h i sd e c l i n et r e n db e c a m em o r eo b v i o u sw i t ht h eh i g hI e v e lo fs o d i u mb i c a r b o n a t e K e yW O r d s ：c o m p o u n ds a l ts o l u t i o n ；c h i c k e nw i n g ；m e a tq u a l i t y 中图分类号：鸭2 5 1 5 + 5文献标识码：A文章编号：1 0 0 2 - 0 3 0 6 ( 2 0 0 8 ) 0 1 0 - 0 1 0 6 - 0 3 鸡肉自古以来是为人类提供优质蛋白的一种重 要大宗肉类，因其高蛋白、低脂肪、低胆固醇、低热量 等特点，被认为是一种比红肉更健康的肉类食品而 受到消费者的青睐，但目前市场销售的鸡肉主要来 自于大规模一f 厂化生产，通过短期的催肥而达到上 市体重，使得体脂含量增加，降低了肉的营养价值， 因此人们通过各种手段来脱除禽肉中多余的脂肪。 此前我们研究了不同的脱脂方法对鸡翅脱脂效果的 影响o 】，但是在脱脂的过程中会不会对禽肉品质带来 些不利的影响，是人们非常关注的问题。因此，作 收稿日期：2 0 0 8 0 1 - 1 4通讯联系人 作者简介：马艳( 1 9 8 2 一) ，女。在读硕士研究生，研究方向：畜产品 加工。 基金项目：合肥市2 0 0 6 科