药物对离体豚鼠回肠收缩的作用.ppt

药物对离体豚鼠回肠收缩的作用,浙江大学医学院生理教研室,张雄,目的,学习离体小肠平滑肌的制备和灌流。观察小肠平滑肌的自律性收缩，理解其原理。观察药物acetylcholine(Ach、乙酰胆碱），histamine(His、组胺），BaCl2分别对离体豚鼠回肠平滑肌的作用，并以atropine(阿托品)、chlorpheniramine(氯苯那敏、扑尔敏）为工具药，初步分析以上药物的作用原理。,原理（1）,胃肠平滑肌收缩的自动节律性（慢波理论：Cajal细胞的生电性钠泵活动的结果）。,原理（2）,乙酰胆碱：M胆碱能受体激动药。Ach与M受体结合，使平滑肌Ca2+通道开放，Ca2+内流，肌浆Ca2+，平滑肌收缩幅度增高。阿托品：M胆碱能受体阻断药。阿托品与平滑肌细胞膜M受体结合，阻断乙酰胆碱与M受体结合，阻断乙酰胆碱与M受体的激动作用。,原理（2）,组胺：激动平滑肌细胞膜H1受体，通过激活G蛋白-磷脂酶C系统，使细胞内Ca2+增高，导致平滑肌收缩。扑尔敏：H1受体阻断药。扑尔敏与平滑肌细胞膜H1受体结合，阻断组胺与H1受体结合，从而阻断组胺对H1受体的激动作用。,原理（3）,氯化钡：肌肉兴奋剂。Ba2+经钙通道进入胞浆，使肌浆Ba2+，平滑肌收缩幅度增高，但泵出障碍；另一方面BaCl2能兴奋胆碱能受体，使平滑肌收缩幅度增高。,材料,豚鼠1只：WT为300g左右麦氏浴槽，生物信号采集系统，张力换能器。台氏液，10-2g/L乙酰胆碱、1g/L硫酸阿托品、10-2g/L组胺，10-3g/L扑尔敏、10g/LBaCl2溶液。,方法,1.实验装置准备：打开恒温水浴37-加台氏液于麦氏浴槽中-95%O2+5%CO2持续通气（气泡一个个逸出为宜）。2.标本准备：击昏豚鼠-开腹-减取回肠-冲洗内腔-截取肠段-肠段两端对角穿线-固定于麦氏浴槽和换能器上。3.实验记录：打开配置（药物对离体豚鼠回肠的作用）-零点设置-调节换能器张力2g-稳定10-30分钟（基线和收缩幅度稳定）,找到盲肠，在离回盲部1cm处剪断，取出回肠约10cm左右一段，置于盛有冰冷台氏液的培养皿中，冲洗干净，将回肠剪成1-1.5cm的几小段。,标本准备（1）,标本准备（2）,取一段肠管置于盛有台氏液的培养皿中，在其两端对角处分别用缝针穿线，并打结。一端系于浴槽固定钩上，另一端系在张力换能器的悬臂梁上。,换能器,肠管,观察项目,记录肠段基础张力，收缩张力，收缩频率。加入10-2g/LAch0.2ml，观察并记录曲线，作用明显时换液。重复以上Ach剂量，待收缩到最高点时加入1g/L阿托品0.2ml，观察曲线，此时不换液，待曲线基本稳定后，再加入相同量的Ach，观察并记录收缩曲线，换液。加入10-2g/L组胺0.3ml，作用明显时迅速换液。预先加入10-2g/L扑尔敏0.2ml，5min后（不换液）加入同量组胺，观察并记录收缩曲线，换液。加入10g/LBaCl2溶液1ml，当作用达到最高点，加入1g/L阿托品0.2ml，观察并记录收缩曲线。,实验结果,Ach换液Ach阿Ach换液His换液扑HisBacl2阿(每次换液后稳定15min),稳定20min,注意事项,注意保持肠管通畅，勿使其封闭。不要把药物直接滴加到回肠上。每次加的台氏液量保持相等。加的台氏液量必须预先加热到37。药物作用明显后，尽早冲洗。每次换液后稳定1020min。,实验结果（1）,曲线描记：标上加药时间点，药物名，洗脱时间点。对曲线进行测量：基础张力，收缩张力。填入表格。,实验结果（2）,表3.药物对离体豚鼠回肠平滑肌张力的影响组别标本数基础张力（g）收缩幅度（g）乙酰胆碱阿托品+乙酰胆碱组胺扑尔敏+组胺BaCl2BaCl2+阿托品,实验报告,针对实验数据，进行结果描述总结Ach、阿托品、His、扑尔敏、BaCl2分别对离体豚鼠回肠有什么作用。2.讨论和结论分析Ach、阿