生工实习报告

1 / 22 生工实习报告 认 识 实 习 报 告 学 院 生物与制药工程学院 专 业生物工程类 班 级 学 号 姓 名 起讫日期 11 月 18 日到 12 月 8 日 2016 年 12 月 1 实习目的 认识实习是高等学校培养方案的重要组成部分，也是本科基础理论教学和专业技术课程教育之间重要的连接和实践环节。 在学生基本完成基础理论课程学习的三年级，转入专业课程教育之前，带领学生进入专业相关的 生产企业、研究单位进行认识实习，使学生对本专业相关技术、生产工艺、设备和分析仪器有初步感性认识，激发学生对专业技术的热爱和兴趣，有利于专业课程的学习和理解掌握。 2 实习地点和时间 时间： 2016 年 11 月 19 日 -12 月 7 日 地点：国家生化工程技术研究中心 3 实习内容 2 / 22 江苏生物科技有限责任公司 公司简介 江苏天凯生物科技有限公司是一家集科研、开发、生产、销售于一体的现代化高新技术企业。公司主要利用生物技术从事长链多不饱 和脂肪酸的研发与生产，技术力量雄厚，生产工艺先进，检测手段完备，产品质量可靠。主要产品包括 DHA 精油、 DHA 微胶囊粉、 DHA 胶囊，在研产品包括AA、 GLA、 EPA，公司依托江苏省工业生物技术创新中心，技术来源与南京工业大学代谢工程实验室，有雄厚的科研实力，是产学研结合的技术输出窗口和孵化基地。 公司现有厂房面积 2358 平米，设备总投资 1500 万元，拥有独立的技术研究中心和中试基地。建立了从菌种发酵到成品的全套中试线，包括超净实验室、全自动控制发酵罐、产物后提取及精制、产品分析检测等中试系统，配备 仪器优良精确，实验条件优越，拥有达世界先进水平的中试装备，能独立进行重大课题的研究与开发。天凯与高校科研机构紧密合作，利用海洋微藻生产的 DHA微藻油已进入产业化，利用真菌生产的 AA 项目已进入中试阶段，目前公司正致力于开发微生物生产其他长链多不饱和脂肪酸产品，努力将公司建成国内外脂肪酸专业型生产企业。 - 1 - 产品介绍 3 / 22 海洋微藻 DHA 背景介绍 DHA，又称二十二碳六烯酸，俗称“脑黄金”，属-3 系列长链多不饱和脂肪酸。国内外的众多研究已证明 DHA是婴幼儿生长发育过程中不可缺少的成长因子，对婴幼儿脑部和视力发育具有显著功效。 DHA 也是成年人的保健元素，具有多种功效：降血脂、血压和胆固醇，预防动脉硬化；减少血栓形成，预防冠心病；预防老年痴呆；保护视网膜，改善视力；抗癌、抑制肿瘤；防治糖尿病、抗炎症、延缓衰老等。 DHA 几乎只能来源于海洋食物，如海洋微藻、海鱼、海洋动物、鱼油和鳕鱼肝油等。 DHA 不是海洋鱼类自己合成的，而是通过食物链获取的，而海洋微藻才是 DHA 的真正合成者，有些微藻具有较高的富集能力，占其细胞干重的 40%为脂肪，一些 微藻粗脂肪的 2030%为不饱和脂肪酸。 微藻 DHA 的前景及展望 DHA 对不同年龄阶段的人群都有着积极的保健功效。相对于鱼油 DHA，微藻 DHA 不含鱼腥味、无海洋污染、不破坏生态环境，生物利用率高，因而有着更为广阔的市场应用前景。微藻 DHA 功能性食品在推动人类健康的同时也带来理想的经济效益和社会效益，是保健品和食品行业未来的发展趋势，微藻 DHA 时代已经来临！ 4 / 22 - 2 - DHA 在国内的发展 中国微藻 DHA 的工业化生产始于 2002 年，经过近 10年的发 展，截止到 2016 年 7 月，国内共有 15 家活跃的微藻DHA 生产商，总产能达到了 1,475t/a，产量已从 XX 年的 503吨增加到了 2016年的 946吨。由于 DHA行业毛利润超过 75%，高利润的吸引，越来越多的公司计划扩大生产或进入该行业。 目前中国 DHA 的消费仍然有限，这是由于应用领域和高价格的限制。 2016 年 DHA 总消费量 2260 吨，与此同时，DHA 市场容量已达 3700 吨。 DHA 主要用于配方食品和保健品两大消费领域。配方食品占 DHA 总消费量的 67%，其中婴幼儿配方奶粉中的应用最多，此外 DHA 还应用 于婴儿米粉和孕妇奶粉，以及儿童乳饮料中。食用油是一个新兴的终端用途。由于微藻 DHA 较高的品质及良好的口味，受到的重视日益加深。 尽管中国的 DHA 行业发展迅速，但与一些发达国家相比，仍处于发展初期，因此中国的 DHA 的产业拥有足够的发展空间。随着国内消费者健康意识的不断提升以及购买力的提高，国内 DHA 的需求将进一步增加，未来五年 DHA 行业将保持高速发展。 3生产工艺 5 / 22 从微藻中获得 DHA 目前从海洋微藻中提取多不饱和脂肪酸的工艺还处于实验室阶段，目前主要采取以下的 步骤：藻体收集 冷冻干燥 脂肪酸萃 - 3 - 取 脂肪酸转酯化 分离 纯化。 发酵过程的组成 除某些转化过程外，典型的发酵过程可以划分成六个基本组成部分： 繁殖种子和发酵生产所用的培养基组份设定； 培养基、发酵罐及其附属设备的灭菌； 培养出有活性、适量的纯种，接种入生产的容器中； 微生物在最适合于产物生长的条件下，在发酵罐中生长； 产物萃取和精制； 过程中排出的废弃物的处理 。 六个部分之间的关系如图所示。研究和发展计划，总是围绕着就逐步改善发酵的全面效益而进行的。在建立发酵过程以前，首先要分离出产生菌，并改良菌种，使所产生的产物符合工业要求。然后测定培养的需求，设计包括提取过程在内的工厂。以后的发展计划，包括连续不断的改良菌种、培养基和提取过程 6 / 22 发酵过程示意图 - 4 - 认 识 实 习 报 告 学 院生物与制药工程学院 专 业生物工程与生物技术 班 级生工类 1001 班 学 号 1309100104 姓 名 武晴 起讫日期 2016,11,19-2016,12,7 2016 年 11 月 前言 实习目的： 了解典型发酵工厂的基本组成及企业各部门之间的协作关系； 通过对本专业领域典型工厂或生产车间的参观学习，加深对基础理论及专业基础理论课程的理解； 通过对部分典型发酵产品的生产过程参观学习，强化对设备、工程全局观的意识，并能够获得对后继专业理论课程的感性认识。 回顾并加深理解生 物技术与生物工程原理、生物工程机械基础、生物化学、微生物学等基本内容。 实习时间 7 / 22 2016 年 11 月 19 日 -12 月 7 日 实习单位 南京工业大学国家生化工程技术研究中心 百威英博啤酒有限公司南京分公司 实习准备 根据学校所给资料，对所参观实习的单位及公司进行了大体的了解，包括公司概况以及其主要产品。 进图书馆，利用馆藏资源，查阅相关产品的工艺流程以及生产环节中的控制点和影响的关键因素。 一、 实习单位 概况 1. 南京工业大学国家生化工程技术研究中心 南京工业大学国家生化工程技术研究中心是于 1996年 4 月经国家科学 技术部批准依托南京工业大学组建而成的高新技术研发实体，以基因工程、酶、蛋白质工程、细胞工程及发酵工程等生物技术为主的生化工程领域的科学研究、研究成果的工程化、产业化开发。中心的“化学生物学技术重点实验室”包括了仪器装备先进的基因工程、工业微生物、酶工程、生物物理、食品工程、分离工程以及现代仪器分析等实验室。现代仪器分析实验室装备了国内最先进的 LC/MS/MS 系 统、全自动多肽合成仪、基因解析软件、蛋白解析仪和平行计算系统等。中心已建立了生物催化多样性的研究平台、生物催8 / 22 化剂的快速改造技术平台、生物催化技术研究平台、生物分离工程新技术研究平台和生物催化系统集成平台等较完整的工业生物技术研究平台以及不同规模的中试线，已建成了较完善的工业生物技术研究体系和研究团队，在生物质资源代替化石资源和生物基化学品的生物制造、生物材料、大宗化学品，精细化学品和技术装备等领域已取得了一定的成绩。 2. 百威英博啤酒有限公司南京分公司。 百威英博是一家上市公司，总 部位于比利时鲁汶。百威英博是全球领先的酿酒制造商，也是全球五大消费品公司之一。作为一家以消费者为中心、以销售为推动力的大型公司，百威英博旗下经营着 300 多个品牌，其中包括百威、时代 、贝克啤酒等全球旗舰品牌 . Bud Light 、 Brahma 、 Quilmes 、 Michelob 、哈尔滨啤酒、雪津 、科罗娜、 等本土明星品牌。此外，公司拥有此公司 50% 的股份。 此公司是墨西哥领先的啤酒制造商，也是享誉全球的科罗娜啤酒品牌所有者。 百威英博对于传统以及品质的执着追求可以追溯到 1366 年 成立于比利时鲁汶的 Den Hoorn 酒厂和 1860 年成立于美国圣路易斯市的 Anheuser & Co 啤酒公司。 Den Hoorn 酒厂酿造啤酒的悠久传统和 Anheuser & Co 啤酒公司的领先意识都对今天的百威英博产生了巨大而深远的影响。公司业务遍及全球 30 余个国家，拥有员工 12 9 / 22 万余名，多元化的业务版图使得百威英博得以集中发挥双方的综合优势，在发达和发展中国家市场均取得骄人的成绩。 百威英博的梦想是：“酿造更美好的世界”。根据 XX 年的统计，合并后的公司总收入达到 392 亿美 元。更多信息请登陆 世界领先的啤酒公司 “百威英博的业务在全球主要分为 6 大区域，全球各地的消费者都可以享用我们生产的啤酒。” 百威英博公司概况： 百威英博公司是世界啤酒行业的 领导者 全球五大消费品制造公司之一 全球销量位居前四的啤酒品牌中百威英博旗下拥有三个品牌：百威、时代、贝克 公司业务遍及 30 余个国家 其中，在 20 多个市场中占据第一或第二的位置 员工人数约 12 万余名 根据 XX 年的统计，合并后的公司总收入达到 392 亿美元。 旗下拥有 300 余个品牌，包括百威啤酒、时 代啤酒、贝啤酒等全球旗舰品牌； 以及 Bud Light 、博浪、 Quilmes 、 Michelob 、哈尔滨、雪津等地方性知名品牌。 百威英博将为打造最佳啤酒公司 , 酿造更美好的世界的梦想而奋斗。 百威英博中国概况： 全国拥有超过 30 个酒厂 , 遍布 11 个省：黑龙江、吉林、辽宁、福建、江西、广东、江苏、 浙江、湖南、湖北、河北 品牌：百威、哈尔滨、雪津、红石梁、双鹿、 KK 、 金陵、白沙、金龙泉 中国雇员总数近 3 万 5 千名 南京英博金陵啤酒有限公司，创建于 1958 年的10 / 22 金陵啤酒是 江苏省第一家啤酒生产企业，她依托名城，在几代市民的生活中占据着重要的地位。在经历了近半个世纪的蓬勃发展，公司不仅注入了全球第一大啤酒集团 百威英博啤酒集团的雄厚资金和技术力量，更名为南京英博金陵啤酒有限公司，同时引进了国际领先的精良设备和技术以及营销管理经验。现在生产能力达 12 万吨，年产销量、销售额、利税、市场占有率稳步增长并均在江苏省内名列前茅。 2000 年金陵啤酒被推荐为“国家级优质产品”。公司也于 2002 年通过了 ISO9001 质量体系认证。金陵、亚力先后获得多项殊荣，金陵干啤酒更是多年 稳居南京市场销售榜首。 现在南京人惊喜地看到了金陵啤酒的包装开始变得时尚而现代 - “金陵纯爽”恰到好处地加入了南京城墙的元素而显得脱俗高雅。南京人欣喜地尝到，金陵的口味开始变得多样而清爽 - “ 9 度金陵啤酒”在南京城第一个喊出清爽到底的领“鲜”主张，可以说，金陵啤酒已经脱胎换骨，浴火重生了。 金陵啤酒凭借古都金陵深厚的历史底蕴和丰富的文化元素，张扬自信，激发豪情，为城市个性注入活力，已成为南京一张亮丽的城市名片 二、 产品生产工艺 FDP 的生产 FDP 背景介绍 近十多年来，日益富足的人民群众正把注意力越来11 / 22 越多的投向了对生活质量和身体健康的提高上。而 FDP 作为一种新型的生物药品，其在治疗心血管病、糖尿病和肝炎上的广泛实用性使之成为当今世界各国竞相研究的热点。 FDP是 1,6-二磷酸果糖的英文缩写，是生物体细胞内糖代谢的一种中间产物，纯 FDP 的性状呈白色或类白色的结晶性粉末，易溶于水。研究发现它可作用于细胞膜，调节糖代谢中若干酶活性，尤其是激活磷酸果糖激酶，聚增细胞内高能磷酸池，产生大量的 ATP，促进钾离子内流，恢 复细胞极化状态，从而有益于休克、缺血、缺氧、损伤体外循环和输血等状态下的细胞能量代谢以及对葡萄糖的利用，以促进细胞修复和改善功能。上个世纪八十年代，意大利 Foscama 公司开发成功FDP 静脉注射液，在临床上得到广泛运用，是治疗和急救新脑血管方面疾病的特效药之一。近年来，随着制备工艺的不断改进， FDP 的酶法合成及其应用受到受到世界上越来越多国家的关注。因此，进一步开发新生产工艺，研制新盐类型、开发新剂型和新产品、开拓新应用领域具有十分重要和现实的意义。可以预见，这种来自生物质的新型药物的生产及应用将会获得更大 的发展，并且今后还能创造出巨大的经济效益和不可低估的社会价值。 FDP 生产工艺介绍 目前我们生产工艺是在啤酒酵母的作用下，通过糖酵解途径将葡萄糖和磷酸盐转化为 1,6-二磷酸果糖，再经过12 / 22 过滤、离子交换、脱色、浓缩、结晶、干燥、成品包装等获得最终产品。具体过程见下图： 海南大学 毕业实习报告 姓 名： 学 号： 学 院： 专业班级： 指导教师： 2016 年 1 月 16 日 一、实习的目的 通过下厂实习，巩固、验证和深化已学到的理论知识，为毕业设计收集资料， 并增加对工程背景的感性认识。 了解某生物产品生产工艺的全过程，正确理解和掌握其生产工艺原理和方法，学会从生 产实践中找出与设计相关的控制点及检测方法，收集生产实际状态下的数据。 通过实习，从生产实践中发现问题，并学会综合分析生产中出现的各种现象、事故等， 为搞好毕业设计工作打好基础。 了解本课题国内外发展动态与水平，收集、检索、阅读和翻译有关图书资料。 深入实际，学会调查研究的方法，提高学生的工程13 / 22 意识和素质。 二、齐鲁制药有限公司 1.公司简介 齐鲁制药有限公司建立于 XX 年，注册资本 500 万美元，员工 500 余人，是 海南省政府实施“大企业进入大项目带动”的工业战略重点招商引资大型企业，也是中国 大型综合性现代化制药企业齐鲁制药集团为海南省的投资环境和政策所吸引，斥巨资在海口 打造的“出口制剂生产基地”，主要从事心脑血管类、抗肿瘤类、小分子靶向药物等附加值 高，市 场前景好的高新技术产品的研制、生产与销售。 公司占地面积达 130 亩，一期厂房建筑面积 25000余平方米。严格按照药品生产质量管 理规范的标准进行设计施工并参照了欧洲先进制药公司的设计特色进行建设。定 位于“出口制剂生产基地”的齐鲁海南公司主要从事心脑血管类、抗肿瘤类、生化与生物技 术制剂等市场前景好的高新技术产品的研制、生产与销售。现已建成多个生产车间以及辅助 动力车间：抗肿瘤冻干粉针剂生产线、抗肿瘤类小14 / 22 容量注射剂生产线、普通类小容量注射剂 生产线等，并全部通过了国家 GMP 认证。公司的全自动生产线和其他主要生产设备及检测 仪器均购自于世界主要专业制药设备制造商。全部生产活动始终坚持“高起点、高质量”的 指导思想，在采用一流生产工艺的同时加以严格规范的生产管理和严谨完善的质量保证体系 作为根本，从各个环节确保产品的高质量，从而切实保证人民用药安全和身体健康。公司现 已做好了二期规划，预计年内动工：拟追加投资 2亿余元再扩展 60 余亩土地建成：符合美 国 FDA 标准的抗癌口服制剂车间和基因 工程车间。计划生产范围为：小输液注射剂、乳剂、 胶囊剂、片剂和生物基因药物等。 国内技术领先的研发中心，严格按照 cGMP 建设的生产厂房，国际先进的生产设备， 严谨完善的质量保证体系和安全有效的环保措施使公司具备国际化水平，这都为产品出口到 欧美高端市场，以及承接法规市场的委托加工业务奠定了坚实的基础。 公司已先后成功上市了注射用奥沙利铂、替加氟注射液、注射用异环 15 / 22 磷酰胺、美司钠注射液、 酒石酸长春瑞滨注射液、盐酸伊立替 康注 射液、注射用顺铂、盐酸帕诺洛司琼注射液等10 余个新产品，为治疗危害 人类健康的重大疾病提供了广泛而有效的药物，创造了良好的社会效益。 自建厂以来，齐鲁制药有限公司先后荣获“中国新型工业化贡献奖”、“海南 省工业经济发展十大功勋企业”、 XX 年“海南省最具竞争力 30 强企业”、 XX 年“海南 省最具影响力 10 大品牌企业”、 2016 年“海南省非公有制经济人士突出贡献奖”、 2016 年国家“高新技术企业”、 2016 年“科技工作先进单位”、 2016 年“海南省药品 公共检验 检测平台”、“海南省模范劳动关系和谐企业”、“海南省企业技术中心”等荣誉称号。 依托强大的齐鲁集团实力和科技含量高的储备产品、凭借抗肿瘤药物知名品牌的优势和 28 年抗肿瘤药物临床推广的专业经验，齐鲁制药有限公司愿为各方经销商提供学 术和市场等全方位的优质服务，携手共进、共创共赢！ 16 / 22 2.工艺流程 原料的准备工作： 在无菌分装操作前一天，无菌原料经物料员凭批生产指令从仓库领取后，在缓冲间擦拭 干净，由物料员和 QA 检查员依据领料核料单审核原料名称，规格，批号、重量，是否有检 验合格证等，审核合格后，由车间生产人员用消毒液揩擦桶外壁后，放到物料传递间原料经 净化后传入万级 B 区，第二天方可经传递窗紫外灯照射 30 分钟后传入万级 A 区。原料传入 万级 A 区后需对原料铝桶外壁用消毒液擦拭，做好状态标识摆放于后待用。 胶塞的洗涤硅化灭菌与干燥 粗洗漂洗中间控制硅化漂洗 2中间控制灭菌真空干燥出料打印 西林瓶的清洗和灭菌 理瓶粗洗 精洗检查洗瓶中间控制灭菌查看 铝盖的准备 a.工作区已清洁，不存在任何与现场操作无关的包装材料，残留物与记录，同时审查该 批生产记录及物料标签。 17 / 22 b.根据批生产指令领取铝盖，并检查其是否有检验合格证，包装完整 ,在十万级环境下 , 检查铝盖，将已变形，破损，边缘不齐等铝盖拣出存放在指定地点。 c.将铝塑盖放于臭氧灭菌柜中，开启臭氧灭菌柜 70分钟。灭菌结束后将铝盖放入带盖 容器中，贴上标签，标明品名，灭菌日期，有效期待用 。 工器具的灭菌消毒处理 a.分装机零部件的处理 分装机的可拆卸且可干热灭菌的零部件用注射用水清洗干净后，放入对开门百级 层流灭菌烘箱干热灭菌 ,温度 180oC 以上保持 2 小时 ,取出备用。 分装机可拆卸不可热压灭菌的零部件用注射用水冲洗干净后，用 75乙醇擦洗浸 泡消毒处理。设备不可拆卸的表面部分每天用 75%消毒液进行擦试消毒处理。 其它不可干热灭菌的工器具在脉动真空灭菌柜中 121灭菌 30 分钟 ,后转入无菌 室。 b.进无菌室的维修工具零件不能干热灭菌的 ,必须18 / 22 经消毒液消毒或紫外照射 30min 以上 方可进无菌室。 c.纸张、眼镜经紫外照射 30min 以上方可进入无菌室。 无菌分装 a.按下主电机驱动按钮，观察各运动部位转动情况是否正常，充填轮与装粉箱之间有无 漏粉，并及时给予调整。 b.调试装量，调整好装量后，每台机器抽取每个分装头各 5 瓶，检查装量情况，调试合 格后方可正式生产。 c.西林瓶灭菌后由隧道烘 箱出口至转盘，目视检查将污瓶破瓶捡出，倒瓶用镊子扶正。 d.西林瓶在百级层流的保护下直接用于药粉的分装，分装后压塞，操作人员发现落塞用 镊子人工补齐。 e.装量差异检查，每隔 30 分钟取 5 瓶进行检查，装量应在合格范围。如发现有飘移， 在线微调，如检查超过标准装量范围，通知现场 QA，对前一阶段产品进行调查。如发现不 合格的应将前 10 分钟的瓶子全部退回按规定处理。 f.在分装过程，发现分装后的产品是有落塞和装量19 / 22 不合格等现象，及时挑出，作为不合 格品处理。 g.分装期间，操作人员要求每 30 分钟用 75%酒精手消毒一次。 h.装量的计算，标准装量 轧盖、灯检 a.已灌粉盖塞的合格的中间产品随网带传出无菌间，在轧盖间轧盖，要求轧盖要平滑， 无皱褶、无缺口，并用三手指直立捻不松动为合格，若发现轧口松动、歪盖、破盖应立即停 机调整。 b.逐瓶灯检轧好盖的中间产品，将不合格品挑出，每 1 小时将灯检情况记录于批生产记 录中，在灯检岗位必须查出破瓶、轧坏、异物 、色点、松口、量差等不合品。 包装 贴签装小盒装大箱，打包，单支包装产品需先过塑后装箱，打包将大 箱用胶带封底后放上垫板装大箱包装检查封箱打包入库待检 图例： C 级区 B 级区 * 局部 A 级 三、海南椰岛股份有限公司老城酒厂 20 / 22 1.酒厂简介 2000 年海南椰岛股份有限公司在澄迈县老城开发区投资兴建了老城酒厂，以满足不断增长的市场需求。该厂占地 98 亩、已投资 2100 万元、 2001 年正式投产。 海南椰岛 老城酒厂白酒原酒生产基地按工业旅游标准、高起点进行规划设计，项目工程按整体规划设计、分步实施原则；工程分二期建成；项目设计产能为年产 60 度白酒原酒 6000 吨 /年；工程总建面积 23000 平米，总投资 6500达万元。其中：一期建设和改造工程 11000 平米，投资 2000万元；二期计划建设改造工程 12000 平米，投资 4500 万元。项目充分利