银杏叶黄酮的逆流浸提工艺条件研究.pdf

70 食品安全导刊 2013年5月刊 TECHNOlOGy THESIS 科技文苑 银杏 （Ginkgo Biloba L.） 为我国特有孑遗植物， 又名白果树， 其资源占世界总 量的70%以上13。 银杏的叶、 果、 树皮均可入药， 尤以叶的药用价值最高。 银杏叶中 含有多种生理活性成分， 如黄酮类化合物、 萜内酯等， 具有改善心脑血管循环、 抗过 敏、 抗病毒、 抗癌、 抗衰老及降低胆固醇等作用， 而且银杏叶提取物毒副作用很小， 食用安全4， 5， 我国卫生部已批准将银杏叶提取物作为新的保健食品添加剂6。 银杏 叶的提取方法包括有机溶剂萃取法、 水提取法、 碱性稀醇或碱性水提取法、 超临界 萃取法、 超声波提取法、 酶法等7， 本文主要研究采用乙醇逆流萃取工艺从银杏叶 中提取有效成分的工艺设计。 1 材料与方法 1.1 试验材料 干银杏叶： 泰兴收购； 芦丁 （生化试剂） ： 上海生化试剂厂 ； 食用酒精 （95%） ： 符合GB 10343-2002标准； 氢氧化钠 （分析纯） ： 国药集团化学试剂有限公司； 硝酸铝 （分析纯） ： 国药集团化学试剂有限公司； 亚硝酸钠 （分析纯） ： 国药集团化学试剂有限公司； 722光栅分光光度计： 上海第三分析仪器厂 。 1.2 试验方法 1.2.1 银杏叶总黄酮浸出率的计算 总黄酮浸出率 （%） （提取液所含黄酮质量 （g） /银杏叶质量 （g） ） 100% 银杏叶黄酮的逆流浸提工艺条件研究 李 英 不二制油（张家港）有限公司 季万兰 江苏梁丰食品集团有限公司 摘 要： 本文对银杏叶黄酮的逆流浸提工艺进行了研究， 结果表明， 采用70%浓度乙醇溶液， 在v （乙醇） m （银杏 叶） 4 1， 浸提温度60条件下 ， 对银杏叶进行每级20分钟的6级逆流浸提， 符合企业生产实际的工艺条件。 关键词： 银杏 温度 逆流浸提 1.2.2 影响银杏叶总黄酮提取的 因素 影响银杏叶总黄酮提取的因素有： 浸提时间、 乙醇浓度、 浸提温度及浸提 液固比等。 1.2.3 银杏叶总黄酮提取工艺条件 选择 根据企业现有平转逆流浸提设 备的实际，实验 计划为6级 逆流浸 提，每级20 分钟，分别选取对浸提 效果影响显著的乙醇浓度（60%、 70%、 80%） 、 浸提温度 （50、 60、 70） 、 两因素三水平进行交互试验， 以确定银杏叶浸提的乙醇浓度和湿 度， 再在适合的条件下确定浸提液固 比， 以达到浸提工艺的确定。 1.2.4 银杏叶总黄酮的检测 准确称 取在12 0烘 至恒重的 芦丁20mg， 以60%乙醇溶解定容置 至100mL。取25mL芦丁乙醇溶液用 蒸馏水稀释至50mL（即芦丁浓度为 May 2013 CHINA FOOD SAFETY 71 0.1mg/mL） ， 准确吸取1.0mL、 2.0mL、 3.0mL、 4.0mL、 5.0mL分别置于10mL 具塞试管中， 蒸馏水空白对照， 以30% 乙醇补足至5mL。 加5%亚硝酸钠溶液 0.3mL， 摇匀， 放置6min； 再加10%硝 酸铝溶液0.3mL， 摇匀， 再放置6min； 再加4%氢氧化钠溶液4mL； 用蒸馏 水补足至l0mL，放置20min， 在波长 510nm处测定各试管中溶液的吸光 度(蒸馏水作空白)。 以吸光度为纵坐 标， 浓度为横坐标，绘出标准曲线图 8。 得回归方程C=0.1816A-0.0049； R2=0.9990。 用同样方法可测得各浸提液样品的 吸光度值， 准确吸取样品溶液1mL置于 10mL具塞试管中， 空白取蒸馏水1mL， 以下操作同标准曲线制作。 由对应的吸 光度标准曲线可计算出浸提液中总黄酮 含量。 2 结果与分析 2.1 浓度、 温度对浸提效果的影响 以液固比41，分别以6 0 %、 70%、 80%的乙醇浓度在50、 60、 70条件下， 进行6级逆流浸提， 单级 浸提时间为20分钟。 交互试验方案和 结果见表1。 从表1结果的方差分析得出， 温度 对浸提效果的影响大于乙醇溶液浓度 的影响。 其中， 浸提温度对银杏叶总黄 酮浸出率的影响达到显著水平， 温度 的提高， 有利于银杏叶总黄酮的浸提。 在选定的水平范围内， 溶液浓度提高 则浸出率升高， 但各水平间的差异极 小， 对银杏叶总黄酮浸出率的影响不 是很明显。从分析结果来看， 最佳的 水平组合应为A5B5， 即在60条件下 用70%浓度的乙醇溶液进行浸提效果 最好。 2.2 液固比对浸提效果的影响 采用液固比为3、 4、5、6四种比 例， 在60条件下用70%浓度的乙醇 溶液， 进行6级每级20分钟逆流浸提。 结果见图1。 从图1可看出， 提高液固比有利于 提高银杏 叶总黄酮的 浸出率,但提高水平不 大。 由于银杏叶吸附浸 提溶液量大 （为银杏叶 2倍） ， 在企业连续逆流 浸提过程中无挤压 （或 真空）脱溶操作，故液 固比小会直接影响到浸 提总得率。液固比大固 然能获得更大的银杏叶 总黄酮的浸出率， 但也会提高浓缩和 溶剂回收成本。 因此， 选择液固比为4 是较理想的。 3 结论 在设定的6级逆流浸提， 每级20分 钟的条件下， 不同的乙醇浓度、 浸提温 度和液固比对银杏叶黄酮提取效果均 产生不同程度的影响， 其中温度和浓度 的影响显著。 银杏叶黄酮乙醇浸提的理 想条件为： 4倍 （v/w） 的70%浓度乙醇 溶液于60条件下进行6级 （单级20分 钟） 逆流浸提。 参考文献 1李明新.我国银杏产销态势与发 展策略.林业科技开发，2000， 14(1)： 13-14. 2梁立兴等.我国银杏产业发展 前景预测及战略调控.林业科技开发， 1999， 13(3)： 6-7. 3江德安.叶用银杏研究进展.孝感 学院学报， 2002， 21(6)： 63-66. 4中国科学院植物研究所等 治疗 冠心病的银杏叶制剂及其药理实验.中草 药通讯， 1972， 4： 15-48 5江苏新医学院 中药新辞典(上). 上海科学技术出版杜， 1966： 36. 6刘俊红.银杏叶的保健作用及其 功能保健食品.食品研究与开发， 1999， 20(6)： 4B 51. 7冯晓萍等.银杏叶黄酮提取工艺 研究现状 四川化工与腐蚀控制， 2002， 5(2)： 13. 8李纯等 银杏叶总黄酮提取测 定方法研究 安徽农学学报， 1998， 14(3)： 20. 表 1 银杏叶总黄酮乙醇浸提浓度、温度试验方案及结果 试验号 因 素 浸出率 % 乙醇浓度 %(A)温度 (B) 160501.692 260602.523 360702.576 470501.872 570602.739 670702.637 780502.342 880602.724 980702.528 K1j2.2641.969