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文档简介
细胞中过氧化物酶的显示与观察,(peroxisome),微体(micro-bodies),电镜下的过氧化物酶体,电子致密的核心是尿酸氧化酶的结晶,即类核体,peroxisome,Peroxisomesaresimple,membrane-boundvesicles(ormicrobodies,astheyarealsocalled)Adiameterof0.1to1.0mthatoftencontainadense,crystallinecoreofoxidativeenzymesPeroxisomesaremultifunctionalorganelles,containingmorethan50enzymesinvolvedinsuchdiverseactivitiesglyoxysome乙醛酸循环体:specializedtypeofperoxisome,presentinplants.,过氧化物酶体包括2种酶类:,氧化酶(oxidases)约占过氧化物酶体酶总量的一半各种氧化酶作用于不同的底物将氧还原成过氧化氢。RH2+O2R+H2O2,过氧化氢酶(catalase)是过氧化物酶体的标志酶约占过氧化物酶体酶总量的40%作用是将过氧化氢还原成水RH2+H2O2R+2H2O,过氧化物酶体的增殖,实验原理,氧化还原酶类的原位显示:根据氧化还原的原理,使无色的化合物氧化成有色的物质得以定位。过氧化物酶体系能把许多胺类氧化成有色化合物。本实验用联苯胺混合液处理标本,过氧化物酶可将其氧化为蓝色或棕色产物。根据颜色反应,可判定过氧化物酶的有无或多少。,RH2+O2R+H2O2H2O2+RH2R+H2O,实验步骤,实验一:取洋葱鳞片表皮一薄片;置于0.85NaCl溶液中35分钟。培养皿1浸在溶有0.1%钼酸胺的0.85NaCl溶液中5分钟。培养皿2在使用联苯胺溶液前,每2ml加10%的过氧化氢2滴。培养皿3浸在联苯胺溶液中2分钟,至切片出现蓝色为止。培养皿3在0.85%NaCl溶液中洗1min。培养皿4将薄片置于载玻片上展开,盖上盖玻片,显微镜检查。,实验二:取马铃薯块茎一个,用徒手切片法切取一小薄片置于载玻片上,滴加3的过氧化氢溶液。用煮熟的马铃薯重复上述过程,结果如何?,实验结果,1、在显微镜下可见到细胞中有一些染成蓝色或棕色的颗粒。即为过氧化物酶存在的部位。,2、滴加了过氧化氢溶液的马铃薯组织四周出现气泡,提示植物中过氧化氢酶的存在。,过氧化氢酶能使H2O2分解,生成H2O和O2,H2O2H2O
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