（洪钦辉）结题报告书

项目类别项目批准号附件3 华南农业大学大学生科技创新活动项目结题书项目名称：粤西地区食用菌资源的调查与开发利用 申 请 人：洪钦辉郭桂珊黄雨杏 所在院部： 食品学院 专业年级：2003级生物工程 联系电话指导教师: 钟青萍 职称 副教授 立项日期： 二五 年 四 月 六 日 结题日期： 二六 年 四 月 十 日华南农业大学大学生科技创新活动项目指导中心 填 表 说 明 一、 填写结题报告书前，请先咨询指导教师或有关专业教师。申请书的各项内容要求实事求是，逐条认真填写。表达明确、严谨，一律要求用打印稿件。 二 、申请书为A4复印纸，于左侧装订成册。一式三份（至少一份原件），由指导教师和所在院（部）审查并签署意见后报大学生科技创新活动项目指导中心。三 、一级标题三号宋体加粗，用“一、二、三”标示；二级标题四号楷体加粗，用“（一）（二）（三）”标示；三级标题四号仿宋加粗，用“1、2、3”标示；四级标题四号仿宋，用“”标示。示例：一、XXXX课题立项与研究的目的意义（一）XXXX课题立项与研究的目的的意义1、XXXX课题立项与研究的目的意义XXXX课题立项与研究的目的意义四、如表格不够，可以加附页。一、简表项目简况项目名称粤西地区食用菌资源的调查与开发利用项目类别A、文科类； B、理科类；申请经费1500元起止年月2005.42006.4项目组成员姓 名性别出生年月年级专业班级所在学院上学年综合测评分项目中的分工本人签字洪钦辉男1984.1003级生物工程（3）班食品学院73.74总体负责郭桂珊女1984.103生物工程（3）班食品学院75.56具体实验黄雨杏女1984.703生物工程（2）班食品学院66.49具体实验指导教师情况姓名钟青萍性别女学位博士职称副教授研究方向微生物的快速检测方法的研究微生物及其功能性的代谢产物的研究与开发抗食源性病原菌的鸡卵黄免疫球蛋白的研究与应用授课名称食品微生物学、微生物学、食品安全性、食品卫生检验、生物分离工程项目简介食用菌不仅营养丰富、味道鲜美，而且还富含多种矿物质、维生素、游离氨基酸、多糖、多肽和生物碱等生理活性物质，因而具有抗肿瘤、降血脂、抗病毒和免疫调节等多种药理作用，因此，开发和利用食用菌资源具有广阔的应用前景。粤西地区具有较丰富的食用菌资源，而目前未有对该资源的调查，本项目对粤西地区的食用菌种资源进行野外调查，采集样品，进行菌种鉴定。并将采集来的食用菌进行分离培养，获得纯菌丝体，并保存菌种。同时，选取其中有较高价值的能产生漆酶的糙皮侧耳进行液体深层发酵，对其发酵工艺进行优化，确定其适宜的培养基和培养条件，为其开发应用奠定基础。本项目为粤西地区野生食用菌资源的开发和利用提供一定的有价值的参考资料。二、项目研究的内容与方法（一）野外调查对粤西地区的菌种资源进行野外调查，并采集样品。（二）菌种鉴定首先通过外观观察，再进行显微形态观察，观察菌丝、孢子的特征以进行初步鉴定。（三）菌种的分离培养及保存采用无菌操作，将采集来的菌种进行分离培养，获得纯菌丝体，并保存菌种。（四）液体深层发酵工艺的优化选取产漆酶活性较高的糙皮侧耳进行液体深层培养，对其发酵工艺进行优化：1、培养基的优化：确定适宜的培养基，并降低成本。2、培养条件的筛选：菌种的培养关键是控制好环境的温度、湿度、空气和光线等条件，其中以温度最为重要。通过实验，确定最适合的培养条件。三、项目研究过程与资料查阅情况通过对南海西樵山公园、三水森林公园、三水侨鑫生态园、陈村花卉世界、高明合水桫椤自然保护区核心区等地区，对这些地区的食用菌进行调查，通过照相、记录其分布地点，并采集带回实验室进行鉴定。了解到这些地区有假芝、裂褶菌、草地蘑菇、细褐鳞蘑菇、小马勃、瓦鳞蘑菇、小射纹鬼伞、东方陀螺菌、具盖侧耳、疣孢褐盘菌、黄柄小菇、血红栓菌、裂褶菌、浅黄鹅膏菌等食用菌。其中具盖侧耳、血红栓菌具有较高的食药用价值。糙皮侧耳因载培技术易掌握，产量高，我国近年来的栽培面积大幅度增长，其产量都居全国食用菌产量首位，但目前糙皮侧耳的生产主要是进行固体基质培养，存在生长周期长、菌龄不一致、规模化程度小的特点，而采用液体深层发酵可以使生产规模化、工厂化，并具有菌龄整齐、生长周期短的优点。漆酶(Laccase简称LacEC 1.14.18.1)是很早就被认识的一类含Cu原子的多酚氧化酶,广泛分布于真菌中,尤其是与木质素降解酶有关的担子菌中。漆酶主要攻击木质素的苯酚结构单元,可直接与木质素底物相互作用,也可在中间氧化调节物质存在下,与广泛的底物作用。漆酶可用于纸浆漂白、污水去毒、从酒中除去酚类物质以及抗菌素和类固醇的改造等,因而具有重要的应用价值。本实验就糙皮侧耳的培养条件对产漆酶的影响做初步研究和分析，确定其最佳培养基和培养条件。实验结果表明：糙皮侧耳液体培养的最佳培养基配方是葡萄糖 1%，玉米粉 4%，酵母膏 0.7%，硝酸铵 0.5%，KH2PO4 0.1%，MgSO47H2O 0.05%；最佳培养条件：培养基装量120 ml/bottle，摇床转速120r/min，PH5.4，温度25。在这个培养条件下，糙皮侧耳生长较好且表现出较高的分泌漆酶能力。四、项目成果完成形式和价值了解粤西地区的食用菌种资源，确定该地区食用菌资源的分布情况，为其开发利用奠定基础。对有较高食用、药用价值的糙皮侧耳进行液体深层发酵，确定其适宜生长和漆酶产生的发酵条件，为其进一步的开发利用奠定基础。发表论文1篇。五、经费使用情况试剂、药品等消耗性物品购置费 800元调研费 400元资料费 300元六、申请人对该项目研究工作完成后的认识总结通过本项目，我们了解了粤西地区的食用菌种资源，并掌握了糙皮侧耳的液体培养技术及其漆酶活性的测定方法。通过研究确定其最佳的培养基组成及培养条件，并考察该菌所含漆酶在该培养条件下的活性和菌体生物量，以及探究漆酶产生的促进剂。实验过程中，我们熟悉了科学研究的实验方法，加深和巩固了对理论知识的理解和体会，真正实现了理论与实践的相结合；我们掌握了发酵工艺的许多基本操作，比如无菌操作、离心机、紫外分光光度计的应用；也了解了酶活测定、蛋白质含量的测定、以及培养基的配制方法；更重要的是本次研究工作培养了我们的创新能力和提高了我们分析和解决问题的能力，为我们今后更好地完成科研与食品生产实践打下了见识的基础。以前，我们做实验的时候都是遵循着老师的要求去做，缺乏自主性和积极性，而在进行这个创新实验时，我们首先要做充分的准备，通过查阅资料，我们了解到食用菌的生长环境，进而选取了几个对菌体生长有利的因子，通过单因素实验和正交实验，确定最适的培养基的配方；在实验的过程中，我们也遇到一些问题，但通过我们的学习、摸索、实践，最终还是把问题解决了。其实，在做微生物实验的过程中，如很多人所体会到的，这个过程是一个漫长而枯燥的过程，但是就是在反复实验的过程中，让我们得到了真正的锻炼，提高了分析问题解决问题的实际工作能力和综合素质。通过该次研究工作让我们认识到（1）实验前必须大量地阅读相关的资料，使自己对所研究的对象熟悉，汲取前人的经验，取其精华，去其糟粕，并要有所创新。（2）做微生物的实验，必须要有耐心。 (3) 要不怕失败。在研究培养条件时,由于设备不足,导致大部分所培养的菌都被污染.但我们坚持重做,虽然多走了弯路,但最后的结果还是不错,而且让我们发现,糙皮侧耳在潮湿温度不太高的环境下生长得特别好这一特性。七、指导教师对项目完成情况的意见 项目组成员学习态度端正，在进行本项目研究过程中，能积极主动地广泛查阅资料，设计实验方案，认真、细致地进行实验，不怕