Quawell微量紫外分光光度计.ppt

微量分光光度计,型号：Q3000Q5000品牌：,目录,一.概述二.Q5000使用详解,一.概述,Q3000使用高能量LED灯提供260nm、280nm的光谱检测，不需要暖机，开机即可使用，配有简易操作界面，以及硅电二极管检测器，不需用比色杯，在5秒钟内就可以完成对0.5-2.5ul的样品的测量，检测吸收值可达80Abs(dsDNA浓度0-4000ng/ul)，大部分纯化后的生物大分子几乎都不需要稀释、浓缩就可以上机检测。,Q5000使用高能量氙灯提供200-850nm的全光谱检测，不需要暖机，开机即可使用。搭配高感度的CCD-array检测器，检测吸收值可高达100Abs(dsDNA浓度1ng/ul-5000ng/ul)大部分纯化后的生物大分子几乎都不需要稀释浓缩即可上机检测。不需用比色杯，在5秒钟内就可以完成对0.5-2.5ul的样品的测量。,产品用途,1.核酸浓度检测：检测dsDNA、ssDNA、RNA等核酸浓度；2.探针检测：检测荧光标记探针的吸光度值，可用于去除未能标记探针的样品；3.蛋白浓度检测：检测普通纯化后蛋白质的浓度；4.蛋白标记检测：可检测被BCA、Bradford或Lowry精确定量待测蛋白浓度，自动画出标准曲线并计算出浓度；5.糖类、醛类等生物大分子检测：常规紫外光波下检测样品吸光值；6.细胞培养物检测：检测细胞培养物在600nm处的Abs。（Q5000）,工作原理,应用液体的表面张力特性，只需要0.5-2.5ul的液体样品，便能在上下检测臂之间拉出一个标准的小液柱，仪器检测通过小液柱的光线的变化情况，得到溶液的吸光值，进而计算出所含溶质浓度。,产品特点,样品体积小：0.5-2.5ul的样品就可以完成检测；检测浓度范围宽：无需浓缩或稀释样品就可以检测；操作简单：无需比色杯，减少了反复清洗比色杯带来的麻烦，减少了实验误差；检测方便快捷：不需要预热，开机就可使用；数据处理简便：操作界面便捷，数据可轻松转存到Excel中。,技术参数,1.样品量：0.5-2.5ul2.波长范围：200-850nm/260nm、280nm、380nm(Q5000/Q3000下同)3.波长精度：1nm4.分辨率：1nm5.其他：1mm光程长度（可自动调整到0.05mm）6.检测下限：1ng/ul7.检测上限：5000ng/ul/4000ng/ul8.吸光率精确度：0.002Abs(1mm光程)9.吸光率准确性：1%（at0.76at257nm）10.吸光率范围：0.01-100Abs/0-80Abs11.检测器类型：3648个单元硅CCD阵检测器/硅电二极管检测器12.核酸检测周期：8s/2s13.光源：氙灯/LED14.软件兼容性：WindowsXP,Vista(32bit)15.操作电压：12V16.运作功率：15W17.待机功率：1.5W/5W18.通过CE认证,注意事项,1.对于一般的核酸、蛋白质样品，检测前徐使用漩涡振荡器震荡均匀为最佳，或至少以移液器吸放数次混匀。若担心DNA可能因前述动作而断裂，可改以55加热约一分钟，使样品在检测前呈均匀状态，以确保用于上样检测的2ul样品具有代表性。2.检测后应当立即用拭镜纸擦净上下检测孔。3.同一滴液体只能做一次检测，欲重复定量同一样品，请擦掉前一滴，重新取出一滴进行检测。4.核酸上样为1ul-2ul，蛋白为2ul，上样需一次完成。5.大部分检测错误源于未成形正确的液柱，正确液柱如下图所示。如若未出现正确液柱，应当擦掉液滴，重新加样。6.不能使用含有腐蚀性的液体。,定期维护,仪器使用一段时间后，可能出现检测孔污染，这时候仪器会自检并提醒维护，可用0.5的次氯酸钠和无水乙醇进行清洗，方法如下：1.使用去离子水润洗30秒，擦镜纸擦干；2.使用漂白剂氧化去污，通常0.5次氯酸钠即可，半分钟后擦镜纸擦干；3.使用无水乙醇清洗30s左右，半分钟后擦镜纸擦干；4.重复步骤1，擦干净后将仪器放在无尘环境中。,二.Q5000使用详解,软件安装,插入光盘，双击“Setup”文件，按照提示完成软件安装。使用USB数据线将仪器与电脑相连，驱动将自动安装。注意：在软件安装前不要将Q5000与电脑相连。当在Vista或者Win7中安装软件时，若出现“版本冲突”对话框，请选择选项“是”。若出现对话框有“放弃”、“重试”、“忽略”三个选项时，请选择选项“忽略”，使安装继续进行。点击主界面下的获得软件升级或产品新闻。,MAINMENU,TheMeasurementtab:1.NucleicAcids2.Microarray3.UV-VisMeasure4.ProteinA2805.LabeledProtein6.CellCultureTheToolstab:1.LightIntegration:Allowstheusertoadjustthelightintegration.2.DyeList:editthedyedata,APPLICATIONMODULEINTERFACE,1.CheckboxPanel:containsonline-helpandotheroptions.Theusercanselecttheoptionbasedontheparticularneed.2.Currentdatadisplaywindows:displaythedataandinformationofthesamplebeingmeasured.3.MainfunctionPanel:containsallmainfunctionsforsamplemeasuringanddatahandling.4.Grapharea:displaystheabsorbance(Y-axis)andspectrum(X-axis).5.DataTable:usedforholdinganddisplayingtheaccumulateddata.Themaximumnumberofrowsis1000.,Measurement,1.在主菜单中选择测量模式；2.选择样品类型；3.输入样品名称；4.空白对照:打开上测量臂，将2.5ul空白对照溶液加到基座上，放下上臂，点击“Blank”按钮；结束后打开上臂，用擦镜纸拭去上下表面的液体；5.吸取2.5ul待测液加到基座上，点击“Measure”按钮进行测量。,CheckingtheBlankingResult,建议把空白对照溶液当做待测液进行测量，在10mm的吸光值结果应该不大于0.04，如果不是，请重新空白对照并检测。原文：Itisrecommendedthatmeasuringtheblankingbufferasifitwereasample:1.Establishablankasabove“4”.2.Measuretheblankingbufferasifitwereasampleasabove“5”.3.Theresultshouldbenomorethan0.04at10mmabsorbanceequivalent,ifnot,repeatthe1and2.,使用图示,SAVINGTHEDATAANDINFORMATION,Note:Q5000programdoesnotsavethedataautomatically.Alldataandinformationforthesamplebeingmeasuredwillbelostifitisnotsaved.Usercansavethedatausingthe“Report”functiontoexportthedatafromthedatatabletoanExcelspreadsheet.,Example1：NUCLEICACIDS,SampleVolumeThereisnospecificrequirementforthesamplevolume;howeverforthebestaccuracyandreproducibilitywerecommend2-2.5ul.SWandAbs(10mm):user-selectedwavelengthandcorrespondingabsorbancethatarenotutilizedinanycalculations.SampleTypeEC:dsDNA,ssDNAandRNA.,Example2：MICROARRAY,TheMicroarraymoduleanalyzesfluorescently-labelednucleicacidprobes.Itsimultaneouslymeasurestheconcentrationofthefluorescenttagandthenucleicacidatappropriatewavelengths.微序列模式用来分析荧光标记核酸探针。它同时测量在合适的波长处的荧光标记和核酸的浓度。,SampleTypeEC:dsDNA,ssDNAandRNA.Dye1andDye2SelectionWindows1.Dye1orDye2drop-downlist:displaysthedyethatispre-predefinedusingtheDyeListEditor.PleaseseeSection11fordetailsonhowtopredefinethelist.2.Abs:absorbanceofDye1orDye2.3.pmol/nl:concentrationofDye1orDye2inpmol/nl.4.VerticalLines:thegreenlineindicatesthepeakpositionofthewavelengthforDye1,andtheblueverticallineindicatesthepeakpositionofthewavelengthforDye2.,Example3：PROTEINA280,ProteinA280measurestheproteinsabsorbanceat280nmandcalculatestheconcentration.Sincenoproteinstandardsarerequired,ProteinA280isfastandconvenient.ProteinA280测量蛋白质在280nm处的吸光值并计算其浓度。因为不需要标准曲线，所以检测快速简便。SampleType:1Abs=1mg/ml,BSA,IgG,andLysozyme.,Example4：LABELED-PROTEINS,TheLabeled-Proteinsfunctionwillsimultaneouslymeasurebothproteinandfluorescentdyeconcentrationsatappropriatewavelengths.,SampleType:1Abs=1mg/ml,BSA,IgG,andLysozymeDye1andDye2SelectionWindows1.Dye1orDye2drop-downlist:displaysthedyethatispre-predefinedusingtheDyeListEditor.2.Abs:absorbanceofDye1orDye2.3.uM:concentrationofDye1orDye2inuM.4.VerticalLines:thegreenlineontheabsorbance-wavelengthgraphindicatesthepeakpositionofthewavelengthforDye1,andtheblueverticallineindicatesthepeakpositionofthewavelengthforDye2.,Example5:UV-VISMEASUREMENT,TheQ5000canfunctionasageneral-uselaboratoryspectrophotometer.TheUV-Vismeasurementmoduleprovidestheoperatorwithasampleabsorbancerangefrom220to850nm.Q5000是一款功能强大的实验室分光光度计。UV-Vismeasurement模式可以在220-850nm的波长范围内对样品的吸光值进行测量。,(1)nm:selectthewavelengthbyusingtheup/downarrows.Abs1(1mm):correspondingabsorbanceat(1)nm.(2)nm:selectthewavelengthbyusingtheup/downarrows.Abs2(1mm):correspondingabsorbanceat(2)nm.1和2设定需要测定吸光值的波长位置。Baseline:ifselected,theabsorbancevalueofthebaselineissubtractedfromtheabsorbanceofAbs1andAbs2.如果选择此项，则基准线处吸光值将从Abs1和Abs2中去除。VerticalLines:thegreenlineontheabsorbance-wavelengthgraphindicatesthepeakpositionofthewavelengthfor(1)nm,andtheblueverticallineindicatesthepeakpositionofthewavelengthfor(2)nm.,Example5:CELLCULTURES,TheQ5000allowslaboratoriestomonitorthedensityofsuspendedcellandmicrobialculturesbymeasuringtheirlightscatterat600nm.Q5000可以通过检测600nm处的光散射情况来观察悬浮细胞或微生物培养物的密度。,Baseline:ifselected,theabsorbancevalueofthebaselineissubtractedfromtheabsorbanceat600nm.Selectednm:userselectwavelength.Abs(1mm):absorbanceatselectednm.Greenverticalline:indicatesthepeakpositionofthewavelengthforselectednm.,THEPREDEFINEDFLUORESCENTDYESLIST,ThelistworkswithboththeMicroarrayandLabeledProteinsmodules.Thislistcontainsapredefinedlistoffluorescentdyesasshownbelow.,Additionalfluorescentdyescanbeaddedbytheuserasneeded.,LIGHTINTEGRATION,Thismoduleisusedforadjustingthelightintegration.Theintegrationnumberissettonormalbeforeshipping.Thelightintegrationanddetectorsystemsarefunctioningnormallyiftheredandblackspectraappearasintheimagebelow.,However,iftheimageappearsasbelow,withthelightintegrationspectrumtoohighortoolow,thelightintegrationcanbeadjustedwiththisfeature.,Adjustingthelightintegration:1.Selectthemodulefromthehorizontaltabandthepathfromtheverticaltab.2.Theoriginalintegrationnumberappearsinthewindow“OriginalValue”.3.Enterthenumberinthewindow“Enternewlightintegrationvalue(1-12)”.4.Clickthe“Check”andtheblackspectrumwilldisplayinthewindow.Increasetheintegrationvaluefrom1upto12,stoppingwhentheblackandredspectraareclose.Ifyouhavequestionsaboutthelightintegration,pleasecontactyourlocaldistributerorQuawellatinfo.,POTENTIALSOURCESOFERROR,样品残留（SampleOverlap）解决办法：1.每次测量后用干的擦镜纸擦净上下检测孔表面；2.测完高浓度样品后用2ul去离子水清洗上下表面；3.全部测量完毕后，用去离子水清洗上下表面及周围；4.样品测量前按下面方法空白仪器（blankthemachine）：1.打开适合的应用模式.2.吸取2.5ul空白溶液加到基座上.3.放下上臂，点击Blank按钮.4.打开上臂，擦干液体并用去离子水清洗.5.吸取2.5ul空白溶液加到基座上.6.放下上臂，点击Measure按钮.7.如果260nm处吸光值高于0.004,重复以上步骤。,样品同质性（SampleHomogeneity）Non-homogenoussampleswouldcausesignificantdeviationinthedatageneratedbyanymeas