标本采集方法.ppt

标本采集方法,标本的定义：是指采取患者少许的血液、排泄物（粪、尿）、分泌物（痰、鼻分泌物）、呕吐物、体液（胸腔积液、腹腔积液）和脱落细胞（食道、阴道）等样品，经过物理、化学和生物学的实验室技术和方法对其进行检验，作为判断患者有无异常存在的依据。,本章重点：掌握标本采集的原则掌握痰标本、血标本、尿标本、粪标本的采集方法,标本采集的意义明确诊断观察病情指导制定治疗措施,正确标本采集对临床治疗的影响（美国首个感染病微生物学实验室诊断指南）关系到患者的诊断、治疗、预后直接影响实验室检测结果的准确性医院感染控制导致患者住院时间延长费用增加实验室诊断错误,标本处理10原则拒收不符合实验要求的标本临床医师不应要求微生物报告包罗万象应避免“背景干扰”。躯体很多部位的正常寄生菌群很容易污染标本，下呼吸道标本（痰）、副鼻窦、暴露伤口等标本的采集应特别小心体液、组织及提取物是外伤等微生物学常需采集的标本，拭子一般用于鼻、咽部和病毒性呼吸道感染标本的采集,实验室必须严格依照既定的标准操作手册并接受法律的监督标本应在抗生素使用前采集药敏试验应针对临床典型分离株，不必对所有培养获得的微生物进行药敏试验微生物实验室报告结果应准确并与临床密切相关实验室应建立技术规范，更好的相互交流与尊重标本信息应准确、完整，以便于准确地进行临床解释包括详尽的采集部位和临床信息,标本采集的原则,遵照医嘱充分准备：1）患者准备2）用物准备3）护士自身准备严格查对：检查项目、患者姓名、床号、住院号正确采集：方法、时间、量、容器及时送检,明确检验项目、检验目的及注意事项标本的容器贴好标签，附上验单：患者的姓名、科室、床号、住院号、送检目的、送检日期和时间等每次采集血标本时应做到“三个一”：一患者、一化验单、一容器一般培养标本的采集应在使用抗生素之前或停药一周后，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集,打印清晰的条码尽量沿着容器的长轴粘贴，病人的姓名端向上，条码区的任何区域不得被覆盖，注意不要在条码上涂写，保持条码的完整和清晰标本采集后应立即送检，运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌感染,各种标本的采集,一、痰标本的采集二、尿标本的采集三、粪便标本的采集四、血液标本的采集,各种标本的采集,一、痰液标本的采集痰常规标本痰培养标本24小时痰标本,三种痰标本的区别,共同点：验单,能自理的患者：晨起后用清水或漱口液反复漱口以清晨第一口痰为宜深吸气后用力咳出气管深处的痰液不可混入漱口液、唾液、鼻涕等无法咳痰或不合作者：用吸痰法收集（集痰器）气管镜采集法：用支气管镜在肺内病灶附近用导管吸引或用支气管刷直接取得标本,疑诊VAP患者留取痰标本方法1、侵入性方法经气管镜支气管肺泡灌洗（BAL）经气管镜保护性刷（PSB）2、非侵入性方法经气管导管内吸引（ETA）2013呼吸机相关性肺炎诊断、预防和治疗指南推荐与ETA相比，PSB与BAL取气道分泌物用于诊断VAP的准确性更高（1B）,痰标本采集送检注意事项1、如查癌细胞，应立即送检或用95%乙醇或用10%甲醛固定后送检2、不可将唾液、漱口水、鼻涕等混入痰液中3、收集痰液宜在清晨，因此时痰量较多，痰内细菌也较多，提高阳性率。4、立即在常温下送检，如1小时内不能送检放入冰箱保存5、疑诊结核患者必须采集连续三天清晨第一口痰,二、尿标本的采集,尿标本的分类尿常规标本尿培养标本12h或24h尿标本,影响因素尿液收集要新鲜，放置时间不宜超过1小时，否则细菌大增，出现假阳性。膀胱内尿液停留时间短（不到6小时），或饮水太多，稀释了尿中细菌，影响了结果的正确性。中段尿收集不合标准，外阴消毒对尿培养影响很大，消毒液过多而混入尿标本，抑制了细菌生长，出现假阴性结果。尿培养前曾使用抗菌药物，可出现假阴性,1、尿常规标本查尿液的性状，有无管型和细胞，并作尿蛋白和尿糖的定性检测用物准备：一次性尿杯,自理的病人：清晨首次尿，留取1/2-2/3满尿液于容器内；行动不便的病人：协助在床上使用便盆或尿壶，收取足量尿液于标本容器中；留置导尿：集尿袋中放出尿液,2、尿培养标本用于细菌培养和细菌敏感试验用物：,采集时间在应用抗菌药物之前或停药1到2天后采集标本，最好采集清晨第一次尿液或者采集在膀胱内贮留6到8小时的尿液。尿液标本的采集一定要防止尿道口污物、粪便、阴道分泌物的污染。,思考：留置尿管者从哪个部位留取尿标本？,采集方法1、中段尿液采集法：女性采样前应先用肥皂水或0.1%高锰酸钾水溶液冲洗外阴部及尿道口，用灭菌的纱布或无菌纸巾擦干；男性需翻转包皮冲洗，用0.1%新洁尔灭消毒尿道口，用灭菌纱布或纸巾拭干，用医院检验科提供的无菌广口瓶收集中段尿5ml10ml，立即加盖送检。该方法简单、易行，是最常用的尿培养标本收集方法，但很容易受到会阴部细菌污染，应由医护人员采集或在医护人员指导下由患者正确留取,2、导尿采集法：按常规方法对会阴局部进行消毒后，用导尿管直接经尿道插人膀胱，采集导尿管的尿510ml于无菌容器中，可减少尿液标本污染，准确地反映膀胱感染情况。但有可能将下尿道细菌引入膀胱，导致继发感染，一般不提倡使用。3、耻骨上膀胱穿刺：使用无菌注射器直接从耻骨上经皮肤消毒穿入膀胱吸取尿液，是评估膀胱内细菌感染的“金标准”方法，但有一定的痛苦患者难以接受。主要用于厌氧菌培养或留取标本困难的婴儿尿标本的采集,留置导尿管收集尿液：分离尿管和尿袋，消毒尿管末端,放出少量尿液后留取标本;应先消毒导尿管与注水处分叉外下端，按无菌操作方法，用10ml注射器穿刺导尿管吸取10ml尿液弃去，再换用另一个新的10ml注射器穿刺导尿管吸取10ml尿液，注入尿培养瓶。操作时应防止混入消毒剂，注意不能从尿液收集袋中采集尿液。长期留置导尿患者，应在更换新尿管时留取尿标本,3、12h或24h尿标本尿生化或尿浓缩查结核杆菌,操作方法嘱病人于清晨7时排空膀胱，弃去尿液（留置尿管病人，排空集尿袋里的尿液，并更换新的集尿袋），记录开始留尿时间，病人解第一次尿时即应加防腐剂（留置尿管病人第一次倒集尿袋尿液时），使之与尿液混合；至次晨7时排尽最后一次尿后（留置尿管病人倒尽集尿袋内尿液），全部尿液混匀量出总尿量并取尿管1/2-2/3满送验。留12小时尿标本，应从19点开始至次晨7点止。,常用防腐剂：甲醛：防腐和固定，用于作尿爱迪计数（12小时尿细胞计数）等每30ml尿液加40%甲醛液1滴浓盐酸：作用：保持尿液在酸性环境中，防止尿中激素被氧化。常用于内分泌系统的检验，如17-酮类固醇、17-羟类固醇24小时尿中加5-10ml,甲苯：保持尿液的化学成分不变，常用作尿蛋白、尿糖的定量测定。用法：每100ml尿液中加入0.5%1%甲苯2ml，使之形成一薄膜，覆盖于尿液的表面，防止细菌感染。如果测定尿中的钠、钾、氯、肌酐、肌酸等需加10ml。,尿标本采集注意事项女患者月经期不宜留取尿标本会阴部分泌物过多时，应先清洁再冲洗，再收集。做早孕检查试验应留晨尿留取尿培养标本时，无菌操作留取12h或24h尿标本，集尿瓶应放在阴凉处，根据检验要求加防腐剂。必须在规定时间内留取尿标本,三、粪便标本采集意义、目的：1、了解消化道炎症、梗阻、出血、寄生虫感染等2、了解消化道状况，粗略判断胰腺的外分泌功能3、粪便隐血可作为消化道恶性肿瘤的诊断筛查试验4、检查粪便中有无细菌感染，防止肠道感染,蜡纸盒,大便培养,采集粪便标本的注意事项：1、采集培养标本时，如患者无便意，用长无菌棉签蘸生理盐水，由肛门插入6-7cm，顺一个方向轻轻旋转后取出，将棉签插入培养试管内，盖紧送检。2、病人服用驱虫药或做血吸虫孵化实验，应留取全部粪便送检。3、患者如有腹泻，水样便应盛于便盆内送检,四、血标本的分类和目的全血：用作血沉、血常规和测定血液中某些物质的含量，如肌酐、尿素氮、尿酸、血糖等血清：全血自然凝固后析出的液体,用于生物化学、免疫学检测等，如血清酶、脂类、电解质、肝功能血培养标本：查找血液中的致病菌,采集法,1、静脉采血法全血血清血培养2、动脉血标本采集法常用于血气分析3、毛细血管采集法常用于血常规检查,全血标本：紫色血常规，2ml蓝色凝血，2ml黑色血沉，2ml如用注射器采血，取下针头，将血液顺管壁缓慢注入有抗凝剂的试管内，立即轻轻摇匀使血液与抗凝剂充分混合，避免血液凝固,血清标本红色生化检查（肝肾功能、离子、酶），5ml金黄色快速生化检查，5ml血浆标本：灰色血糖检查，2ml绿色快速生化检查，5ml取下针头，将血液顺管壁缓慢注入干燥试管内，避免震荡。做生化检验时，应空腹采血，事先通知患者禁食。,血培养1、预防败血症2、确定致病细菌，确定抗生素3、监控抗生素的浓度和细菌杀死的情况,采血指证1、发热大于38低温小于362、寒战3、白细胞增多（大于10*109/L，特别有“核左移”）4、粒细胞减少5、血小板减少6、皮肤、粘膜出血7、昏迷8、多器官衰竭9、血压降低10、呼吸加快,肉汤,琼脂,抽血培养的注意事项：1、严格无菌操作，尽量选择从周围静脉穿刺抽血，避免从静脉或动脉导管抽血2、检查培养瓶的有效期3、每次血培养的采血量为20-30ml血量（成人），每次血培养抽取2-4瓶血标本，血培养后2-5天不必重复进行，亚急性心内膜炎患者，为提高培养阳性率，采血量增至1015ml4、抽取血液后，不要换针头，直接注入血培养瓶中，轻轻颠倒混匀，以防血液凝固,5、采血培养应尽量在抗菌药物使用之前，在24h内采集2-3份血培养（一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份血培养）,每次两瓶。因为研究已证实，2-3份血培养足以检测所有的菌血症和真菌血症6、入院前2周内接受抗菌药物治疗的患者，连续三天，每天采集2份，可选用能中和或吸附抗菌药物的培养基7、对间歇性寒战或发热的患者，应在寒战或体温高峰到来之前0.5-1h采集血液，或于寒战或发热后1h采集。因为发热时血液中可能没有细菌,8、可疑为急性原发性菌血症、真菌血症、脑膜炎、骨髓炎、关节炎或肺炎的患者，应在不同部位采集2-3份血培养9、不明原因发热，如隐形脓肿、伤寒热和波浪热，先采集2-3份血标本，24-36h估计体温升高之前，再采集2份以上10、可疑为菌血症或真菌血症，但血培养持续阴性，应改变血生长。骨髓采血量一般为1-2ml11、每一套血培养应该从身体的不同部位采取12、培养瓶应立即送检，如不能及时送检，应将其放在室温，切忌冰箱存放。,无菌操作1、培养瓶消毒程序用70%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子酒精作用60s在血液注入血培养瓶之前，用无菌纱布或棉签清除橡皮塞子表面剩余的酒精，然后培养阳性率会远高于血培养,2、皮肤消毒程序（推荐使用碘酒、二氧化氯、洗必泰）严格按以下三步法进行：、以采血点为中心，由内往外的方向以70%酒用涂抹皮肤待30s以上、碘伏(Povidone-iodine)由内往外的方向直径1.5-2cm用涂抹皮肤，等待约1分钟；如使用碘酊等待约30秒，让碘液干燥以发挥杀菌效果、70%酒由内往外的方向涂抹去除碘酒液，以避免碘酒液污染血培养液,抽取血标本,标本运送1、已采集的标本应视为潜在性生物危险品2、置于防漏、防渗、相对密封的容器中收集、存储和转运3、立即送检，一般不得超过2小时4、如不能及时送检，应放在室温，切勿放入冰箱内冷藏或冷冻,动脉采血法血气分析血气分析是医学上常用于判断机体是否存在酸碱平衡失调以及缺氧和缺氧程度等。酸碱度(pH)，二氧化碳分压(PCO2)，二氧化碳总量(TCO2)，氧分压（PO2），氧饱和度(SatO2)，实际碳酸氢根（AB），剩余碱（BE），阴离子隙（AG），肝素抗凝动脉血2ml，抽血后要求严加密封，不能接触空气，立即送检，天热可放冰箱中，并记录当时患者体温。,普通注射器法1、部位选择桡动脉：穿刺点在前臂掌侧腕关节上2cm动脉搏动明显处股动脉：腹股沟扪及搏动最明显处2、局部消毒：直径大于10cm3、抽吸肝素：抽吸0.5ml入注射器内，湿润注射器内壁后，余液去掉。,4、穿刺抽血戴无菌手套，用左手的食指、中指固定好穿刺的动脉。右手持注射器，在两指之间垂直或与动脉走向呈40刺入动脉，见有鲜红色回血，右手固定穿刺针的方向及深度，左手以最快速度抽取血液。5、拔针按压抽血毕，迅速拔针，同时用无菌纱布加压穿刺点止血510min6、处理标本立即将针头斜面刺入无菌软木塞内，以隔绝空气，连同验单立即送检。7、整理记录,实施(常规消毒皮肤，带无菌手套，铺无菌孔巾),实施(拔出针头，局部加压不少于5min)。,动脉血气分析针,动脉血气分析针的优点：1、螺口乳头2、预设采血量3、自动排气装置4、预置足量固体钙平衡肝素锂抗凝剂5、针塞,毛细血管采血法：微量检测，血常规(thecollectionofcapillaryblood)采血部位：耳垂或手指末梢,采集血标本的注意事项：1、严禁在输液、输血的针头处抽取血标本，以免影响检验结果。应在对侧肢体采取。2、血培养瓶抗凝管干燥试管3、有出血倾向者，谨慎应用动脉采血，并注意延长压迫止血的时间。,导管相关血流感染应留取2份血标本，一份留自导管，一份留在外周静脉留取导管尖端5cm存放在干燥无菌容器即刻送检同时一定要抽血送血培养急性感染性心内膜炎在抗生素使用前30分钟从不同部位抽取2-3套血标本亚急性感染性心内膜炎一天内抽取2-3套血培养，每次间隔30-60分钟如果血培养阴性第二天，第三天可以再抽取血标本（24小时不超过4套）获得病原菌结果比抗感染重要,中枢神经系统感染应留取3-4管脑脊液送检第一管由于被皮肤病菌污染的可能性较大，不应送检微生物室和分子诊断室细菌培养：0.5-1ml真菌培养：2-5ml分