（运动人体科学专业论文）GSPE对运动大鼠腓肠肌能量代谢相关指标影响的研究.pdf

摘要 1 研究目的 通过观察运动训练和服用葡萄籽原花青素( g s p e ) 对大鼠腓肠肌能量代谢和运动能力 的影响，探讨g s p e 对提高机体能量代谢和运动能力的作用，为更好的指导运动训练、增 强运动能力提供科学依据，为研发能量代谢新药的提供一定的科学理论基础。 2 实验方法 选取8 周龄雌性w i s t a r 大鼠1 2 0 只，随机分为四组：a 组( 对照组) 、b 组( 服药组) 、 c 组( 运动训练组) 、d 组( 运动服药组) 。c 、d 组大鼠进行游泳训练，b 、d 组每天灌服g s p e 制剂。8 周后，将各组随机按照处死的状态不同机分为3 个亚组，即：安静组、力竭即刻 组、力竭恢复2 4 小时组，并于相应时刻断头处死后取腓肠肌测定肌糖原含量、l d h 活性、 s d h 活性、m d h 活性、n a + 一k + 一a t p 酶活性。所有数据用s p s s i o 0 统计软件进行独立样本的 t 检验，与对照组比较，显著性差异为p o 0 5 ，极显著性差异为p o 0 1 。 3 实验结果 3 1 安静状态下，肌糖原含量，d 组极显著高于a 、b 、c 三组( p o 0 1 ) ，b 组和c 组显 著高于a 组( p o 0 5 ) ；琥珀酸脱氢酶活性a 组最低，c 、d 两组显 著高于a 组( p 0 0 5 ) ，b 与a 组差异极其显著( p o 0 1 ) ；苹果酸脱氢酶( m d h ) 活性，d 组 极显著高于a 组( p o 0 5 ) ，b 组与c 组无显著性差异， 都显著高于a 组( p o 0 5 ) ；n a + _ k + 一a t p 酶的活性，a 、b 、c 三组之间无明显差异，d 组与其 他三组差异极显著。 3 2 力竭即刻，肌糖原含量，各组之间无明显差异；l d h 活性，d 、c 、b 组极显著高于 a 组( p o 0 1 ) ，d 组显著高于b 、c 组( p 0 0 5 ) ；s d h 活性，d 组最高与a 组差异极显著 ( p o 0 1 ) ，d 组显著高于b 、c 组( p 0 0 5 ) ，c 组极显著高于a 组，b 、c 两组差异不显著； m d h 活性，d 组极显著高于a 组、b 组、c 组( p o 0 1 ) ，b 组显著高于a 组( p o 0 5 ) ，c 组 显著高于b 组( p o 0 5 ) ，并极显著高于a 组( p 0 0 1 ) ；n a + 一k + 一a t p 酶的活性有所降低， 但依然是d 组最高，与其他三组存在极显著性差异( p 0 0 1 ) ，同时c 两组与a 组差异极 显著( p o 0 1 ) ，b 组与a 组存在显著性差异( p o 0 5 ) 。 3 3 力竭恢复2 4 小时，肌糖原含量，d 组极显著高于a 、b 、c 组( p o 0 1 ) ，a 组极显 著低于b 组、c 组( p o 0 1 ) ；l d h 活性，d 组极显著高于a 组( p o 0 1 ) ，b 组极显著高于a 组( p o 0 1 ) ，c 组显著高于a 组( p o 0 5 ) ，d 组显著高于b 、c 两组( p o 0 5 ) ；在力竭恢复 2 4 h ，d 组s d h 活性最高但是与b 、c 两组无显著性差异，a 组最低，b 、c 、d 三组都极显 著高于a 组( p 0 0 1 ) ；m d h 活性，d 最高与a 、b 两组有极显著性差异( p 0 0 1 ) ，与c 组有显著差异( p o 0 5 ) ，a 组最低，b 组显著性高于a 组( p o 0 5 ) ，c 组极显著高于a 组 ( p 0 0 1 ) ：n a + - k + - a t p 酶的活性，d 组与a 、c 两组存在极明显差异( p o 0 1 ) ，b 、c 两 组与a 组存在极显著差异( p o 0 1 ) 。 3 4 运动时间，d 组大鼠力竭时间相比另外三组极显著性延长( p 0 0 1 ) ：a 组比c 组和 b 组显著性缩短，且a 组与c 组之间呈极显著性差异( p 0 0 1 ) 4 结论 4 1 连续8 周有氧耐力训练能够提高葡萄糖转运的速率，加快肌肉肌糖原的合成，提 高运动能力，延长了运动时间。 4 2 单纯服用g s p e 能够提高机体的糖原储备以及能量代谢相关酶的活性，使无氧代谢 和有氧代谢能力增强，减缓运动过程中其活性的降低，具有明显提高机体运动能力和抗疲 劳能力的作用。 4 3 运动加服用g s p e 能够明显提高机体糖原储备，提高l d h 、s d h 、m d h 以及n a + _ k + - a t p 酶的活性，加快机糖原和能量代谢相关酶活性的恢复，改善机体疲劳状态。 关键词：g s p e ；能量代谢；运动能力；运动训练 2 a b s t r a c t 1o b j e c t i v e t h ek e yp o i n to ft h i sp a p e ri sa b o u te f f e c to ft a k i n gg r a p es e e dp r o a n t h o c y a n i d i ne x t r a c t ( g s p e ) a n dt r a i n i n go ng a s t r o c n e m i u sm u s c l ee n e r g ym e t a b o l i s ma n ds p o r tc a p a c i t y ，t h ea u t h o r h o p e st h a tw ec a nk n o wt h er o l eb yg s p eo ni m p r o v et h eb o d ye n e r g ym e t a b o l i s ma n dt h e e x e r c i s ec a p a c i t y ，i no r d e rt op r o v i d es c i e n c eb a s i sf o rb e t t e rg u i d et h ee x e r c i s et r a i n i n ga n d e n h a n c et h es p o r ta b i l i t y ，f o rt h ed e v e l o p m e n to fn e wd r u g st h a te n h a n c et h ee n e r g ym e t a b o l i s m p r o v i d eas c i e n t i f i cb a s i s 2m e t h o d ： s e l e c t1 2 0m a l ew i s t e rm i c e ，8 w e e k o l d r a n d o m l yd i v i d e di n t of o u rg r o u p s ：ag r o u p ( c o n t r o lg r o u p ) ，bg r o u p ( m e d i c a t i o ng r o u p ) ，cg r o u p ( e x e r c i s et r a i n i n gg r o u p ) ，dg r o u p ( m e d i c a t i o ng r o u pe x e r c i s e ) c ，dg r o u pr a t sg i v ee i g h tw e e k so fs w i m m i n gt r a i n i n g ，b ，d g r o u pg i v eg s p ee v e r yd a y e i g h tw e e k sl a t e r ，a l lm i c ew e r er a n d o m l yd i v i d e di n t ot h r e e d i f f e r e n ts u b g r o u p si na c c o r d a n c ew i t ht h ed i f f e r e n te x e c u t e ds t a t u s ，n a m e l y ：q u i e tg r o u p ， i n s t a n t l ye x h a u s t i v eg r o u p ，e x h a u s t i v e2 4 - h o u rr e c o v e r yg r o u p a n dt h ec o r r e s p o n d i n g e x e c u t i o nt i m eb r o k e nh e a r t a n dt h ec o r r e s p o n d i n gt i m ea f t e rt h ed e c a p i t a t i o nd e a t h d e t e r m i n a t i o nf r o mt h eg a s t r o c n e m i u sm u s c l eg l y c o g e nc o n t e n t ，l d ha c t i v i t y , s d ha c t i v i t y , m d h a c t i v i t y , n a + 一k + a t pa c t i v i t ym e a s u r e dd a t as p s s l 0 0s t a t i s t i c a ls o f t w a r et oc o n d u c ta n i n d e p e n d e n ts a m p l e st - t e s t ，c o m p a r e dw i t ht h ec o n t r o lg r o u pw e r es i g n i f i c a n t l yd i f f e r e n t ，p 0 0 5 ；av e r ys i g n i f i c a n td i f f e r e n c e ，p 0 0 1 3 r e s u l t s ： 3 1i nq u i e ts t a t e ，m u s c l eg l y c o g e nc o n t e n t ，dg r o u pw a ss i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt h ea b ， cg r o u p s ( p 0 0 1 ) ，bg r o u pa n dc g r o u pw a ss i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt h eag r o u p ( p 0 0 5 ) s u c c i n a t ed e h y d r o g e n a s ea c t i v i t yag r o u po ft h em i n i m u m ，c ，dg r o u p sw e r e s i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nag r o u p ( p 0 0 5 ) ，ba n dav e r ys i g n i f i c a n tg r o u pd i f f e r e n c e s ( p 0 0 1 ) m a l a t ed e h y d r o g e n a s e ( m d h ) a c t i v i t y , dg r o u pw a ss i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt h ea g r o u p ( p 0 0 5 ) ，bg r o u pa n dcg r o u p n os i g n i f i c a n td i f f e r e n c e ，w e r es i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt h ea g r o u p ( p o 0 5 ) n a + - k + 一a t p e n z y m ea c t i v i t y , ab ，cb e t w e e nt h et h r e eg r o u p sn os i g n i f i c a n td i f f e r e n c e ，dg r o u pa n dt h e o t h e rt h r e eg r o u p sas i g n i f i c a n td i f f e r e n c e 3 3 2a tt h ei m m e d i a t ee n d so fe x h a u s t i v ee x e r c i s e m u s c l eg l y c o g e nc o n t e n ta n dn os i g n i f i c a n t d i f f e r e n c eb e t w e e ng r o u p s l d ha c t i v i t y ，d ，c ，bg r o u pw a ss i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt h ea g r o u p ( p 0 0 1 ) ，dg r o u pw a ss i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt h eb ，cg r o u p ( p 0 0 5 ) ；s d ha c t i v i t y ， d g r o u pag r o u pd i f f e r e n c e sb e t w e e nt h eh i g h e s ta n ds i g n i f i c a n t ( p 0 0 1 ) ，dg r o u pw a s s i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt h eb ，cg r o u p ( p 0 0 5 ) ，cg r o u pw a ss i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt h ea g r o u p ，b ，cg r o u pn os i g n i f i c a n td i f f e r e n c e m d ha c t i v i t y ，dg r o u pw i l l ss i g n i f i c a n t l yh i g h e r t h a nt h ea g r o u p ，bg r o u p ，cg r o u p ( p 0 0 1 ) ，bg r o u pw a ss i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt h eag r o u p ( p 0 0 5 ) ，cg r o u pw a ss i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt h ebg r o u p ( p 0 0 5 ) a n ds i g n i f i c a n t l yh i g h e r t h a na g r o u p ( p 0 0 1 ) n a + - k + - a t pe n z y m ea c t i v i t yd e c r e a s e d ，b u tg r o u pd i ss t i l lt h eh i g h e s t ， w i t ht h eo t h e rt h r e eg r o u p s ，t h e r ew a ss i g n i f i c a n td i f f e r e n c e ( p 0 0 1 ) ，a tt h es a m et i m e ，ca n da g r o u pd i f f e r e n c eb e t w e e nt h et w og r o u p sw a ss i g n i f i c a n to 0 0 1 ) ，bg r o u pa n dag r o u p ，t h e r e w a sa s i g n i f i c a n td i f f e r e n c e ( p o 0 5 ) 3 3a tt h e2 4h o u r se n d so fe x h a u s t i v ee x e r c i s e ，m u s c l eg l y c o g e nc o n t e n t ，dg r o u pw a s s i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt h eab ，cg r o u p ( p 0 0 1 ) ，ag r o u ps i g n i f i c a n t l yl o w e rt h a nt h eb ，c g r o u p ( p 0 0 1 ) l d ha c t i v i t yg r o u pd w a ss i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt h ea g r o u p ( p 0 0 1 ) ，b g r o u pw a ss i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt h eag r o u p ( p 0 0 1 ) ，cg r o u pw a ss i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a n t h eag r o u p ( p 0 0 5 ) ，dg r o u pw a ss i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt h eb ，ct w og r o u p ( p 0 0 5 ) r e s t o r ee x h a u s t e da t2 4 h ，dg r o u pb u tw i t ht h eh i g h e s ts d h a c t i v i t yo fb ，cg r o u pn os i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e ，ag r o u po ft h em i n i m u m ，b ，c ，da r et h r e eg r o u p ss i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nag r o u p ( p o 0 1 ) m d ha c t i v i t y ，dt h eh i g h e s ta n da b g r o u ph a sav e r ys i g n i f i c a n td i f f e r e n c e ( p 0 0 1 ) ，a n dcg r o u pw e r es i g n i f i c a n t l yd i f f e r e n t ( p o 0 5 ) ，ag r o u po ft h el o w e s t ，bg r o u pw a s s i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt h eag r o u p ( p 0 0 5 ) ，cg r o u pw a ss i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt h ea g r o u p ( p 0 0 1 ) n a + - k + a t pe n z y m e ，dg r o u pa n dac ，t h e r ew e r es i g n i f i c a n td i f f e r e n c e s ( p o 0 1 ) ，b ，cag r o u po ft h ee x i s t e n c eo ft w og r o u p sw i t hs i g n i f i c a n td i f f e r e n c e ( p 0 0 1 ) 3 4t h ee x h a u s t i v es w i m m i n gt i m e ，dg r o u pi sm u c hs i g n i f i c a n t l yl o n g e rt h a no t h e rt h r e e g r o u p ( p o 0 1 ) ，ag r o u pi ss i g n i f i c a n t l ys h o r t e rt h a nb a n d c g r o u p ，aa n dcg r o u p h a ss i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e 4c o n c l u s i o n s ： 4 1f o re i g h tw e e k so fa e r o b i ce n d u r a n c et r a i n i n gc a ni n c r e a s et h er a t eo f g l u c o s e t r a n s p o r t e r ，t os p e e du pt h em u s c l eg l u c o s eu p t a k ea n dm u s c l eg l y c o g e ns y n t h e s i s ，e x t e n dt h e t i m ef o r t h em o v e m e n t 4 2g s p ea l o n et a k i n gt o i m p r o v et h eb o d y sg l y c o g e nr e s e r v e sa n de n e r g ym e t a b o l i s m r e l a t e de n z y m ea c t i v i t y , s ot h a ta n a e r o b i cm e t a b o l i s ma n da e r o b i cc a p a c i t ya n ds l o wd o w nt h e p r o c e s so fm o v e m e n tt or e d u c ei t sa c t i v i t y , h a sm a r k e d l yi m p r o v e dt h ec a p a c i t yo ft h eb o d y 4 m o v e m e n ta n dt h er o l eo fa n t i f a t i g u ea b i l i t y 4 3t r a i n i n ga n dg s p ec a ns i g n i f i c a n t l yi n c r e a s et h eu s eo ft h eb o d yg l y c o g e nr e s e r v e st o e n h a n c el d h ，s d h ，m d h ，a sw e l la sn a 4 - _ k + - a t pa c t i v i t y ，t os p e e du pt h ed r i v ea n de n e r g y m e t a b o l i s mo fg l y c o g e n r e l a t e da c t i v i t yi nt h er e c o v e r ya n di m p r o v et h es t a t eo ft h eb o d y f a t i g u e k e yw o r d s ：g s p e ，e n e r g ym e t a b o l i s m ，e x e r c i s ec a p a c i t y ，s p o r tt r a i n n i n g 5 英文缩略词表( a b b r e v i a t i o n sa n da c r o n y m s ) 曲阜师范大学硕士学位论文原创性说明 本人郑重声明：此处所提交硕士论文g s p e 对运动大鼠腓肠肌 能量代谢相关指标影响的研究，是本人在导师指导下，在曲阜师范 大学攻读硕士学位期间独立进行研究工作所取得的成果。论文中除注 明部分外不包含他人已经发表或撰写的研究成果。对本文的研究工作 做出重要贡献的个人和集体，均已在文中已明确的方式注明。本声明 的法律结果将完全由本人承担。 作者签名：蝴拎 日期：卅、，7 z 曲阜师范大学硕士学位论文使用授权书 ( g s p e 对运动大鼠腓肠肌能量代谢相关指标影响的研究系本 人在曲阜师范大学攻读硕士学位期间，在导师指导下完成的硕士学位 论文。本论文的研究成果归曲阜师范大学所有，本论文的研究内容不 得以其他单位的名义发表。本人完全了解曲阜师范大学关于保存、使 用学位论文的规定，同意学校保留并向有关部门送交论文的复印件和 电子版本，允许论文被查阅和借阅。本人授权曲阜师范大学，可以采 用影印或其他复制手段保存论文，可以公开发表论文的全部或部分内 容。 作者签名： 导师签名： 翅玲 p 减李 1 日觏：狮- 石，| 1 日期：川、么，矽 远、乃衫 g s p e 对运动大鼠腓肠肌能量代谢相关指标影响的 研究 1 前言 1 1 选题依据 运动性疲劳是机体生理过程不能持续其机能在某一特定水平上或不能维持预定的运 动强度而导致机体运动能力下降的现象，它是困扰运动员运动成绩提高的重要因素之一。 人体是一个对立统一的整体，任何运动都是不同肌群协调有序地收缩和舒张的结果，骨骼 肌的这种收缩和舒张有赖于大量能量的充分供应。人体细胞直接利用的能源来自于三磷酸 腺苷( a t p ) 的分解产生，而a t p 合成最终主要来源于糖的分解代谢，其次是脂肪，蛋白质。 如何提高机体的能量代谢水平特别是糖代谢水平，保证正常训练和比赛中机体能量的供应 始终是运动生理学研究的重点之一。运动过程中由于能源物质消耗，代谢产物积累等使体 内能源供应不足、内环境紊乱以及代谢失调，是导致机体疲劳的重要因素。目前，对能量 代谢的研究主要集中在对代谢途径的研究和如何提高各代谢系统的供能效率方面上，以满 足各种不同运动对能量的需求，从而为提高运动成绩提供保障。 对于葡萄籽原花青素( 6 s p e ) 的研究，目前还多集中在心血管疾病预防有利的方面。 关于抗氧化作用的机制目前己经研究的相当清楚，但葡萄籽原花青素对机体能量代谢方面 的研究甚少见。本实验根据g s p e 的药理作用，选取葡萄籽原花青素作为消除运动性疲劳 及提高运动能力的有效药物，通过大鼠游泳实验模型观察g s p e 对大鼠骨骼肌能量代谢的 影响，并且探讨其作用机理，从而为运动员在运动补剂消除疲劳及提高运动能力方面提供 理论基础，为g s p e 的实际临床应用及开发提供科学依据。 1 2 研究综述 生物体内物质代谢过程中所伴随的能量释放、转移和利用，称为能量代谢。机体所需 的能量来源于食物中的糖、脂肪和蛋白质。这些能源物质分子结构中的碳氢键蕴藏着化学 能，在氧化过程中碳氢键断裂，生成c 0 ：和h = o ，同时释放出蕴藏的能量，这些能量的一半 以上迅速转化为热能，用于维持体温，并向体外散发，其余的能量则以高能磷酸键的形式 贮存于体内，供机体利用。a t p 是高能化合物中最重要的一种，生命过程中的能源直接来 源于a t p 的分解，a t p 在人体内的含量很少，约6 m m o l k g 湿肌，但它的转换效率高，再合 成迅速，从而使能量供应不问断。a t p 再合成的途径很多，除通过磷酸原系统补充外，还 有糖酵解和有氧氧化途径。实际上物质代谢所产生的能量先转移到a t p 的高能磷酸健中， 再被用于各种生理过程，因此a t p 亦被称为“能量流通货币 。 1 2 1 能量代谢与运动能力的关系 骨骼肌能量代谢与运动能力有着密切的关系，并直接影响人体的运动能力。骨骼肌能 量代谢与运动的关系主要与磷酸原系统、糖酵解系统、有氧氧化系统3 大供能系统相关。 1 2 1 1 磷酸原系统与运动 三磷酸腺苷和磷酸肌酸组成了人体最快速的供能系统，即磷酸原供能系统，是通过高 能磷酸化合物三磷酸腺苷和磷酸肌酸来实现的。由于磷酸原系统的特点在长时间的运动项 目中，它在运动开始时最早启动，为激活糖酵解供能系统提供了过渡时间。在运动引起磷 酸肌酸下降6 0 或高能磷酸化合物总量下降，4 0 都将导致二磷酸腺苷，一磷酸腺苷，磷酸 等物质浓度上升，从而激活糖酵解系统，并促使二磷酸腺苷转移进入线粒体，促进氧化磷 酸化过程，提高有氧氧化能力合成三磷酸腺苷，以保证运动继续进行。 1 2 1 2 糖酵解系统与运动 糖酵解的供能能力是决定运动成绩的主要因素，是指糖经过无氧氧化分解生成乳酸， 并释放能量的过程。糖酵解过程释放能量合成三磷酸腺苷构成运动时提供能量的第二条途 径。在超过数秒的激烈运动中，因磷酸原贮量有限，糖酵解系统则成为维持运动肌作功的 重要途径，与磷酸原系统供能所提供的最大输出功率相比，糖酵解约仅为其一半，但可维 持运动的时间较长，是l - - , 2 m i n 大强度运动的主要供能途径。 1 2 1 3 有氧氧化系统与运动 在有氧情况下，糖、脂肪、蛋白质等完全氧化生成二氧化碳和水，释放的能量用以合 成三磷酸腺苷的过程，构成骨骼肌有氧代谢系统。有氧代谢是耐力运动时的基本能量供应 途径。糖、脂肪、蛋白质被称为细胞内燃料。糖有氧氧化可供亚极量运动约9 0 m i n ；脂肪 有氧代谢的时间从理论上讲不加限制；蛋白质在有氧供能中所占比例不大，最多不超过总 量的1 8 - - 2 0 ，供能时间从运动开始3 0 - - - 6 0 m i n 起，直至运动结束。在超过3 m i n 以上的 全力运动中，基本上由有氧代谢提供能量，随着运动时间的延长，最大输出功率逐渐降低， 供能燃料由糖氧化为主转为以脂肪氧化为主。 2 1 2 2 运动对能量代谢的影响 能量代谢水平的高低与代谢酶活性大小有直接的关系，代谢酶活性大，可引起相关代 谢途径的循环加快，使单位时间内产生的能量增多。运动对机体无氧代谢的影响主要是影 响磷酸原系统、糖酵解供能系统的主要调控因素。运动对机体有氧代谢的影响主要是三羧 酸循环的底物、限速酶和线粒体呼吸链相关酶活性。如何最有效的增强骨骼肌能量代谢能 力，提高单位时间内的产能量，一直是运动训练领域的热门话题。 1 2 2 1 一次性运动对机体能量代谢的影响 一次性低强度、短时间运动，机体功率输出小，肌肉以有氧供能为主，a t p 消耗和生 成基本平衡，所以，a t p a d p 变化不大，各种酶的活性不变或者稍有增高，能量代谢变化 不大，随着时间的延长肌糖原含量逐渐降低，运动肌肉以很高的速率摄取血糖来补偿肌糖 原供能的下降，这使血糖水平下降，血糖水平下降使大脑供能不足发生中枢性疲劳。研究 发现，运动时当a t p 的利用率超过了氧化磷酸化和糖酵解生成a t p 的能力时，磷酸肌酸可 以作为缓冲通过肌酸激酶反应来维持a t p 的高浓度。随着运动时间的延长，机体以有氧氧 化供能为主，线粒体是细胞有氧代谢合成a t p 的必要场所，其合成a t p 的效率可能是影响 运动能力、导致运动疲劳发生的关键因素。一次性大强度、短时间运动，为了满足机体 的极限功率输出，无氧糖酵解在供能系统中的主导作用强化，无氧糖酵解过程中相关酶如 l d h 的活性增加，乳酸的产生快消除也快，随着时间的延长，乳酸生成超过过其消除的速度， 导致乳酸大量积累，乳酸在体内的积累可导致机体内环境紊乱，进而影响肌肉收缩功能和 运动能力，导致疲劳。 1 2 2 2 长期运动对机体能量代谢能力的影响 长期运动训练会引起骨骼肌产生适应性变化，这早已被大量科学研究所证实，这种适 应性主要表现在肌纤维体积和肌肉代谢酶活性等方面，且这种变化与运动时间和运动强度 密切相关。陆绍中瞄。等采用2 6 米分、3 0 米分、3 6 米分和4 2 米分的训练强度对大鼠进 行了1 6 周跑台耐力训练，并用生化和组化的方法分别测定腓肠肌苹果酸脱氢酶( m d h ) 、 磷酸果糖激酶( p f k ) 和l d h 活性和股四头肌深层的琥珀酸脱氢酶( s d h ) 和l d h 活性的变 化发现，不同强度的耐力训练后，大鼠骨骼肌m d h 、s d h 活性变化出现了不同的适应性变 化，其中中等强度的训练对氧化酶的发展最有效，糖酵解酶p f k 和l d h 活性不变或降低。 刘洪珍p 。等通过实施两种有氧运动处方，发现两运动组于安静状态时和定量负荷运动后， 血乳酸明显下降或呈下降趋势，而乳酸脱氢酶( l d h ) 活性在安静状态下和定量负荷、极 量负荷运动后均显著升高，这充分说明，有氧运动锻炼既能提高机体的有氧代谢能力，又 能提高机体的无氧代谢能力，并且在一定范围内运动强度较大者其效果更好。魏守刚h 1 等 研究发现耐力训练和间歇高强度训练大鼠在力竭运动后2 4 小时，前糖原( p g ) 、大糖原( m g ) 3 以及总糖原的累计合成量均显著高于未训练大鼠( p o 0 5 ) 。其中耐力训练可使力竭运动 后肌糖原再合成量显著增加，主要是p g 和m g 两种形式的糖原。 1 2 3 原花青素的概述 原花青素( p r o c y a n i d i n s ，p c ) 是植物王国中广泛存在的一大类多酚类化合物的总称， 起初统归于缩合鞣质或黄烷醇类，随着分离鉴定技术的提高和对此类物质的深入研究与深 刻认识，现已成为独树一帜的一大类物质并称之为原花青素。原花青素主要分布在葡萄、 银杏、大黄、山楂、小连翘、花旗松等植物中，但研究发现葡萄籽提取物中原花青素的含 量最高。2 0 世纪8 0 年代以来，人们对数十种植物的原花青素低聚体和高聚体进行了生物、 药理活性的研究，发现原花青素是一种很强的抗氧化剂，具有抗氧化、抗肿瘤、保护心血 管等多种生物学活性。 目前对原花青素研究虽取得了一定成就，而且大部分研究都是针对抗氧化性这方面而 进行的。g s p e 具有多种重要生物活性，成为近年研究的热点，但是在体育界原花青素对机 体能量代谢的研究及其具体机制研究较少，目前国内外尚未见报道。所以针对以上研究的 不足之处，本实验利用葡萄籽原花青素对运动大鼠能量代谢的影响进一步进行研究。 2 实验对象与方法 2 1 实验对象 选取8 周龄雌性w i s t e r 大鼠1 2 0 只( 实测9 6 只) ，体重2 0 0 、- 2 2 0 克，购于山东鲁抗 医药股份有限公司。国家标准啮齿类动物干燥饲料喂养，自由饮食。随机分为对照组( a ) 和实验组( b 、c 、d ) ，根据处死状态不同各组分为三个亚组。 a 组对照组( 灌服纯净水) b 组服药组( 灌服葡萄籽原花青素) c 组运动训练组( 运动+ 灌服纯净水) d 组运动服药组( 运动+ 灌服葡萄籽原花青素) 2 2 实验方法 2 2 1 给药方案 以3 0 0 m g k g 大鼠体重的量配制原花青素溶液，按i m l l o o g 体重标准，于每天上午8 4 点对实验组灌服原花青素，对照组灌服纯净水，1 次天。 2 2 2 运动训练模型 大鼠动物房适应环境3 天，第4 天开始进行适应性游泳训练，隔天进行一次，共适应 性游泳3 次，每次游泳时间依次为l o m i n ，2 0 m i n 和3 0 m i n 。游泳环境为高l o o c m 、直径7 0 c m 的塑料桶，水深5 5 c m ，水温3 6 l 。适应性游泳目的是使大鼠熟悉游泳运动，同时凡不 能完成或虽能完成但出现异常表现者( 如动作不协调、直立性泳姿、自然沉降、眼球充血、 口鼻渗血等) 被淘汰。正式训练时，运动训练组大鼠尾部负重3 体质量的铅条，每天下午 1 ：3 0 开始游泳训练，1 次天，5 只桶，游泳结束后用干毛巾擦干大鼠皮毛。 第一周以3 0 m i n d 的轻度训练，然后每周递增l o m i n ，连续8 周，每周训练6 天，休 息1 天。 表1 大鼠训练模型 在处死前进行一次负重7 体重的力竭性游泳，记录游泳时间，力竭的判断标准为：大 鼠沉入水面下l o s 不能自主浮出水面，且放在平板上无法完成翻正反射视为力竭。 力竭即刻组在力竭即刻取材：恢复2 4 小时组从确认大鼠力竭后开始计时，经过2 4 小 时后取材；各组大鼠分别于相应时刻处死，同时迅速取下大鼠左腿腓肠肌，于冰生理盐水 中洗净血液，用滤纸吸干水分后装入样品管中，放入一8 4 超低温冰箱保存。 2 2 3 指标测定 2 2 3 1 组织匀浆液制备 从超低温冰箱中取出样品，解冻，用生理盐水洗净，滤纸吸干，用电子天平称重，按 1 ：9 的比例加入生理盐水后，在冰浴条件下用匀浆器匀浆，剪取0 5 9 组织，按w v = i 9 加 5 入预冷的生理盐水，匀浆后放入低温离心机，以3 0 0 0 r p m 离心1 5 m i n ( n a + 一k + - a t p 酶则以 1 2 0 0 r p m 离心1 0 分钟) ，离心后取上清装入样品管中4 c 冷藏待测。 2 2 3 2 测定指标 表2 测定指标、仪器与方法 2 2 3 3 实验药品 肌糖原试剂盒，乳酸脱氢酶试剂盒，琥珀酸试剂盒，苹果酸试剂盒，a t p 酶试剂盒。 其他试剂为：乙醇、生理盐水、双蒸水、去离子水、浓硫酸等多种实验药品。 2 2 3 4 试验仪器 m d f - u 2 0 8 6 s 型超低温冰箱、7 5 2 型分光光度计、7 2 1 型分光光度计、电动匀浆机、g l - 2 0 一i i 型高速冷冻离心机、h s - 4 型精密恒温浴槽、电子天平、超声清洗器、干燥箱、混匀器、 离心管、百得自动移液器、动物手术器械、大鼠断头器等。 2 3 统计方法 采用s p s s i o 0 统计软件对所得数据进行统计分析，求平均数，标准差，进行独立样 本t 检验，与对照组比较，p o 0 5 差异显著，p o 0 1 差异非常显著。 3 实验结果 3 1 不同状态大鼠腓肠肌肌糖原含量的变化 从表3 可以看出，安静状态下，肌糖原含量，d 组极显著高于a 、b 、c 三组( p o 0 1 ) ， b 组和c 组显著高于a 组( p o 0 5 ) ；力竭即刻，肌糖原含量各组之间无明显差异；力竭恢 复2 4 h ，肌糖原含量，d 组极显著高于a 、b 、c 组( p o 0 1 ) ，b 组、c 组极显著高于a 组 ( p o 0 1 ) 。 6 表3 不同状态下各组大鼠肌糖原含量的变化( r a g g ) 注：与对照组( a ) 比较，宰p o 0 5 ，料p o 0 1 ：与服药组( b ) 比较，p o 0 5 ，p o 0 1 ：与运动训练组( c ) 比 较，p o 0 5 ，p 0 0 5 ) ，d 组少高于c 组( p o 0 5 ) ；力竭即 刻，l d h 活性，d 、c 、b 组极显著高于a 组( p o 0 1 ) ，d 组显著高于b 、c 组( p 0 0 5 ) ；力 竭恢复2 4 h ，l d h 活性，d 组极显著高于a 组( p 0 0 1 ) ，b 组极显著高于a 组( p o 0 1 ) ，c 组显著高于a 组( p o 0 5 ) ，d 组显著高于b 、c 两组( p o 0 5 ) 。 表4 不同状态下乳酸脱氢酶活性的变化( u g p r o t ) 注：与对照组( a ) 比较，i p o 0 5 ，料p o 0 1 ；与服药组( b ) 比较，p o 0 5 ，p o 0 1 ：与运动训练组( c ) 比 较，p o 0 5 ，p o 0 1 。 3 3 不同状态大鼠腓肠肌琥珀酸脱氢酶( s d h ) 的活性 从表5 中可以看出，在安静状态下琥珀酸脱氢酶活性a 组最低，b 、c 、d 两组显著高 于a 组( p 0 0 5 ) ；力竭状态下，d 组最高，a 组最低，d 组都极显著的高于a 组( p 0 0 1 ) ， d 组显著高于b 、c 组( p o 0 5 ) ，c 组极显著高于a 组，b 、c 两组差异不显著；在力竭恢 复2 4 h ，d 组s d h 活性最高但是与b 、c 两组无显著性差异，a 组最低，b 、c 、d 三组都极 显著高于a 组( p o 0 1 ) 。