（物理化学专业论文）稀土及其配合物与微过氧化物酶相互作用机理的研究.pdf

摘要 摘要 近年来，由于可以促使农作物增产和品质的改善，稀土微肥在农业上的应用 越来越广泛。大量生物机理的研究表明，稀土离子在合理浓度下使用，可以改善 农作物抗病毒的能力，可以促进光合作用过程中光能的转化，还可以刺激细胞的 生长，提高一些诸如过氧化氢酶( c a t ) ，过氧化物酶( p o d ) 及过氧化歧化酶( s o d ) 等酶的生物活性，但其化学机理尚不明白，这方面的研究也较少。主要原因是由 于这些酶具有高化学活性、结构复杂性、构象易变性等特点，使研究这些酶与稀 土离子相互作用比较困难。因此，本论文选取了与微过氧化物酶具有相似活性中 心和生物活性的微过氧化物酶1 l ( m p 1 1 ) 、微过氧化物酶8 ( m p 8 ) 作为模型化合 物，以e u ”为代表性的稀土离子，通过紫外可见( u v - v i s ) 吸收光谱、电化学方法和 电喷雾质谱等手段研究了m p 1 l 、m p 8 和氯化血红素与e u 3 + 的相互作用，并且还 研究了稀土三元配合物与e u 3 + 的相互作用；为今后进一步研究稀土离子及其配合 物与酶的相互作用打下基础。得到的主要结果如下： 1 e u a + 与m p - 1 1 相互作用的机理研究 ( 1 ) 当m p - ll 溶液中加入e u ”后，由于稀土离子易与氧键合，加上m p - 1 1 分 子中血红素卟啉环上的2 个丙酸基团的羧基氧暴露程度大和带负电荷，e 矿+ 优先与 m p 1 1 分子中这2 个羧基氧发生键合作用，形成配合物。由于这2 个丙酸基团离 卟啉环较近，因此，e u 3 + 与这2 个羧基氧的键合使血红素卟啉环的非平面性增加， 7 t - f f 跃迁所需要的能量减少，但7 - 7 电子跃迁几率降低。由于肽链中氢键的形成， 肽链上的羰基基团被包埋在肽链的疏水基团中，所以，z u 3 + 基本上没有与m p 1 1 肽链中的羰基氧发生键合作用。 ( 2 ) 电喷雾质谱研究发现，m p 1 1 溶液q bj j i l , x e u 3 + 后，形成的配合物, g e u 3 + 与 m p 1 1 的摩尔比为l ，当溶液, e u 3 + 与m p 1 1 的摩尔比增加时，只使反应更加完全而 没有新的配合物产生，说明一分子e u 3 + 只与一分子m p 1 1 相键合。电化学实验也证 实了这个结论，即当e u 3 + 与m p 1 1 的摩尔比小于l 时，z u 3 + 基本上都与m p 1 l 中的含 氧基团发生了键合，因此在循环伏安曲线中，只观察到配合物的氧化还原峰，而 没有e u 3 + 的氧化还原峰。如果当e u 3 + 的浓度大于l 时，除了配合物的氧化还原峰外， i i i 摘要 还能观察n e u 3 + 的一对氧化还原峰，表明当e u 3 + 与m p 1 l 的摩尔比大于l 时，多余的 e u 3 + 离子不再与m p - 1 l 配位。所以，在e u ”与m p 1 1 形成的配合物中，它们的摩尔比 为l 。 ( 3 ) 当m p 1 1 与e u 3 + 形成配合物后，配合物的氧化还原峰峰电位差，e p 比 m p l l 的小，峰电流比m p 一1 1 的大，说明配合物的电化学反应可逆性比m p 1 l 好。 这是由于e u ”和m p 1 l 的相互作用时，e u p 与m p 1 1 分子中血红素卟啉环上的两 个羧基氧发生强的键合作用，使血红素卟啉环的非平面性增加，导致血红素卟啉 环中f e 的暴露程度增加而引起的。另外，配合物对氧还原的电化学活性要高于 m p 一1 l ，表明z u 3 + 与m p 1 l 配位后，能增加m p 1 l ，的生物活性。 2 微过氧化物酶的肽链结构对其与e u p 相互作用的影响 用氯化血红素( h e m i n ) 、m p 8 、m p 1 l 和细胞色素c ( c y tc ) 与e u 3 + 进行相互 作用，来研究微过氧化物酶的肽链长度对其与稀土离子相互作用的影响，为进一 步研究酶与稀土离子相互作用的机理打下基础。 ( 1 ) u v v i s 吸收光谱的研究表明，与e 矿+ 相互作用后，h e m i n 、m p - 8 、m p 1 l 和c y tc 的s o r e t 带吸收峰峰强都下降峰位都发生红移。其中，h e m i n 的s o r e t 带 吸光度的下降和峰位的红移都是最大的，而c y t c 的改变最小。由于h e m i n 的卟啉 环没有与肽链相连，其带负电荷的丙酸基团的两个羧基氧完全裸露，最易与e u 3 + 键合。而c y tc 分子中血红素卟啉环所连的肽链最多，也最复杂，几乎将卟啉环上 的丙酸基团完全包埋，羧基氧裸露程度最低，最不易与e u 3 + 键合。m p - 8 和m p 一1 1 由于肽链长度的不同而引起它们聚集方式的不同。m p 1 1 以头尾相连的无规方式 聚集，各m p 1 1 分子的血红素平面不平行，结构比较松散，所以e u 3 + 与其作用后， 引起的血红素非平面性增加的程度会较大。而m p 8 分子是以血红素平面平行的密 堆积的方式聚集，所以m p 8 血红素原来的非平面性要低于m p 1 1 ，e u 3 + 与其作用 后，血红素非平面性增加也比较困难，m p 8 和m p 1 l 原来的s o r e t 带峰位分别为 3 9 6 和3 9 9 n m 也证明m p 8 原来的平面性要高于m p 1 l 。因此，s o r e t 带峰位红移 程度由大n d , 依次为h e m i n m p 1 i m p 8 c y t - c 。s o r e t 带峰强下降的程度由大到 小依次为h e m i n m p - 8 m p 1l c y tc 。 摘要 ( 2 ) 电化学的研究发现。e u 3 + 与h e m i n 、m p 8 和m p 1 1 都能键合而形成摩 尔比为1 的配合物。但是，虽然e u 3 + 与h e m i n 的键合最强，可在它们的配合物的 循环伏安曲线中，基本上观察不到氧化还原峰，表明e b 3 + 阻碍了h e r o i n 的电化学 反应。对m p 8 和m p - l l 来说，e u 3 + 能促进它们的电化学反应。由于m p 1 1 的堆 积方式较m p 8 松散，因此，e u a + 与m p 11 作用引起的血红素非平面性增加的程度 要大于m p 8 ，所以e u 3 + 对m p 1 1 的电化学反应的促进作用要大于对m p 8 的。由 于c y tc 中的血红素深埋在长的肽链中，e u 3 + 基本上不能与其血红素键合而形成 配合物。因此，e u ”对c y tc 的电化学反应不产生影响。 3 镧一v b 6 - 甘氨酸三元配合物与m p - 1 1 相互作用 本章选取p o d 的模型化合物m p 1 1 为研究对象，通过u v - v i s 吸收光谱、圆 二色( c d ) 谱和电化学方法，系统研究了镧一甘氨酸( g l y ) - 维生素b 6 ( v b 6 ) 三元配合物 ( l a l c l 2 ) 与m p - 1 1 的相互作用。 ( 1 ) 通过l a l c l 2 三元配合物与m p 1l 的u v v i s 紫外吸收光谱发现，当两者摩 尔比小于5 时，s o r e t 带的峰位几乎没变而峰强有所增加，但当摩尔比逐渐增加到大 于1 0 时，s o r e t 带的峰位发生红移且吸收强度下降。这可能表明m p 1 1 与l a l c l 2 相互 作用有两种方式，即在低摩尔比时对m p 1 l 有促进作用而高摩尔比时有抑制作用。 并且三元配合物与m p 1 l 发生了键合后，导致血红素卧啉环的非平面性增加，丁c 7 【 跃迁所需要的能量减少和霄m 电子跃迁的几率降低。 ( 2 ) 通过l a l c l 2 三元配合物与m p 1 l 的c d 谱发现，l a l c l 2 的加入，影响了与 m p 1 l 肽链的二级结构，使s o r e t 带略有红移，且摩尔椭圆度均下降。随配合物浓度 的增加，有序结构先增加后减少，表明配合物浓度持续增加时反而破坏了有序的 二级结构，而且进一步导致m p 1 l 中血红素的非平面性增加。 ( 3 ) 通过l a l c l 2 三元配合物与m p 11 的电化学实验发现，l a l c l 2 与m p 1 1 配合物的电化学反应为准可逆的和扩散控制的。并且在摩尔比为3 时，l a l c l 2 对 m p 1 1 电化学反应的促进作用最为显著，但当摩尔比再增加时，促进作用反而随 摩尔比的增加而逐步降低。这也反映了l a l c l 2 和m p l l 的相互作用有2 种方式。 总之，三元配合物可与m p 1 1 发生直接键合作用，进而影响m p 1 l 肽链的二 v 摘要 级结构，改变血红素周围的微环境，使血红素的非平面性增大，促进了m p “的 电化学反应。 关键词：微过氧化物酶8 、1 l ：细胞色素c ；氯化血红素：稀土离子e u 3 + ：稀土 三元配合物；配位；紫外可见吸收光谱：电化学方法；电喷雾质谱 a b s t t a c t a b s t r a c t i nr e c e n ty e a r s ，t h er a r ee a r t hm i c r o f e r t i l i z e rh a sb e e ni n c r e a s i n g l ya p p l i e dt ot h e a g r i c u l t u r ei nc h i n aa n do t h e rc o u n t r i e sb e c a u s ei tc a ni n c r e a s et h ey i e l da n dt h eq u a l i t y o fv a r i o u sa g r i c u l t u r a lp r o d u c t i o n s i th a sb e e nf o u n df r o mt h es t u d yo nt h eb i o l o g i c a l m a c h a n i s mt h a tt h er a r ee a r t hi o n $ u s e da tt h er e a s o n a b l ec o n c e n t r a t i o nc a ni m p r o v et h e a d v e r s i t yr e s i s t a n c e ，p r o m o t e t h et r a n s f o r m a t i o no ft h e l i g h te n e r g yd u r i n g p h o t o s y n t h e s i s ，s t i m u l a t et h eg r o w t ho fc e l l sa n de n h a n c et h eb i o l o g i c a la c t i v i t i e so f s o m eg n z y m e s ，s u c ha sc a t a l a s e ，p e r o x i d a s e ，s u p e r o x i d ed i s m u t a s e ，e t e h o w e v e r , t h e i n t e r a c t i o nm e c h a n i s mi ss t i l lu n c l e a ra n dt h er e l a t e ds t u d yi sl e s sb e c a u s et h e s ee n z e m y p o s s e s sh i g hc h e m i c a la c t i v i t i e s ，c o m p l e xs t r u c t u r e sa n df l e x i b l ec o n f o r m a t i o n ss ot h a t t h ee f f e c to fr a r ee a r t hi o n so np h y s i o l o g i c a la n db i o c h e m i c a lb e h a v i o r so f b i o m a c r o m o l e c u l e si sd i 所c u l tt ob ei n v e s t i i g a t e da tt h em o l e c u l a rl e v e l s t h e r e f o r e i n t h i st h e s i s ，m p 一8a n dm p - 11 ，w h o s ea c t i v ec e n t e ra n db i o a c t i v i t ya r es i m i l a rt op o d ， w a su s e da st h em o d e lo fp o da n de u 3 + w a su s e da st h et y p i c a lr a r ee a r t hi o nt o i n v e s t i g a t et h ei n t e r a c t i o nm e c h a n i s mo f m p 1 1 m p 一8a n dh e m i n 、i t l le u ”u s i n gt h e e l e c t r o c h e m i c a lm e t h o d ，t h eu v - v i sa b s o r p t i o ns p e c t r o s c o p ya n de l e c t r o s p r a yi o n i z a t i o n m a s ss p e c t r o m e t r y m o r e o v e r , t h ei n t e r a c t i o nb e t w e e ne u + a n dl a n t h a n i d ec o m p l e x e s w i t l lv b 6 g l ys c h i f f b a s ew a sa l s os t u d i e d a l la b o v es t u d i e sw o u l dl a yas t r o n gb a s e o nt h ei n v e s t i g a t i o no ft h ei n t e r a c t i o nm e c h a n i s mb e t w e e nt h er a r ee a r t hi o n sa n dt h e b i o m a c r o m o l e c u l e s t h em a i nr e s u l t so b t a i n e da r ea sf o l i o w s ： 1 1 1 1 ei n t e r a c t i o nm e c h a n i s mo f e u 3 + w i t hm p 1 1 ( 1 ) w h e ne u 3 + i sa d d e di n t ot h em p 11s o l u t i o n , e u 3 + i sp r i o rt oc o o r d i n a t ew i t h t h ec a r b o n y lo x y g e no ft h em e t a c e t o n i ca c i dg r o u pi nt h eh e m eg r o u po ft h em p - 11 m o l e c u l e ，f o r m i n gt h ec o m p l e xo f e u 3 + a n d m p 1 1b e c a u s et h ec a r b o n y lo x y g e n so f t h e m e t a c e t o n i ca c i dg r o u ph a v el a r g ee x p o s e de x t e n ta n dt h en e g a t i v ec h a r g e o nt h e o t h e rh a n d ，t h er a r ee a r t hi o n sa r ep r o n et oc o o r d i n a t ew i t ho x y g e n t h ec o o r d i n a t i o n o fe u 3 + a n dt h et w oc a r b o n y lo x y g e n sl e a d st ot h ei n c r e a s ei nt h en o n - p l a n a d t yo ft h e p o r p h y r i ng r o u pi nt h eh e m eg r o u p ，t h ed e c r e a s ei nt h ee n e r g ya n dt h ep r o b a b i l i t yf o r a b s t r a e t t h e7 c 咀+ t r a n s i t i o nb e c a u s et h et h em c t a c e t o n i ca c i dg r o u pi sc l o s et ot h et h ep o r p h y r i n g r o u pi nt h eh e m eg r o u p e u 3 + i n t e r a c t sh a r d l yw i t ht h ec a r b o n y lo x y g e no ft h ea m i d o g r o u p si nt h ep e p t i d ec h a i no ft h em p 一11m o l e c u l eb e c a u s et h ee x p o s e de x t e n to ft h e c a r b o n y lo x y g e ni nt h ep e p t i d ec h a i ni ss m a l ld u et ot h ef o r m a t i o no ft h eh y d r o g e n b o n d si nt h ep e p t i d ec h a i na n d c a r b o n y lg r o u po f p e p t i d ec h a i ni sb a r r i e di nh y d r o p h o b e g r o u po f p e p t i d e ( 2 ) t h es t u d i e so ft h ee l e c t r o s p r a yi o n i z a t i o nm a s ss p e c t r o m e t r ys h o wt h a tw h e n e u 3 + i sa d d e di n t ot h em p 11s o l u t i o nt h em o l a rr a t i oo f e u 3 + a n dm p 11i nt h et o m p l e x f o r m e di s1 n on e wc o m p l e x e sa r ef o r m e dw h e nt h em o l a rr a t i oo f e u 3 + a n dm p 11i s i n c r e a s e d ，i n d i c a t i n gt h a to n ee u 3 + i o nc a l lo n l yc o o r d i n a t ew i t ham p 一1 1 m o l e c u l e ， f o r m i n gt h ec o m p l e xw i t ht w op o s i t i v ec h a r g e s t h ee l e c t r o c h e m i c a le x p e r i m e n t sa l s o p r o v et h i sr e s u l t ，i e t h er e d o xp e a k so fe u 3 + a l m o s td i s a p p e a ra n dt h eo n l yt h er e d o x p e a k so fm p 一11 a r eo b s e r v e dw h e nt h em o l a rr a t i oo fe u 3 + a n dm p 11i sl e s st h a n1 b e c a u s em o s to fe u 3 + i o n sc o o r d i n a t ew i t hm p 11 i ft h em o l a rr a t i oo fe u 3 + a n d m p - 11i sl a r g e rt h a n1 ，ap a i ro ft h er e d o xp e a k so fe u + a p p e a r sa g a i ni nt h ec y c l i c v o l t a m m o g r a me x c e p tt h er e d o xp e a k so fm p 11 ，i n d i c a t i n gt h a tt h es u r p l u se u 3 + i o n s d on o tc o o r d i n a t ew i t hm p 一1 1 t h u s t h em o l a rr a t i oo fe u 3 + a n dm p 1 1i nt h e c o m p l e xf o r m e di s1 ( 3 ) w h e ne u 3 f o r m st h ec o m p l e xw i t hm p 一11 ae po ft h ec o m p l e xi nt h ec y c l i c v o l t a m m o g r a m si ss m a l l e ra n dt h ep e a kc u r r e n t sa r el a r g e rt h a nt h a to fm p 1 1 ， i n d i c a t i n gt h a te u ”c a np r o m o t et h ee l e c t r o c h e m i c a lr e a c t i o no f m p - 1 1 t h er 残l s o n f o rt h i si st h a tt h ei n t e r a c t i o nb e t w e e ne u 3 + a n d m p 一11c a ni n c r e a s et h en o n p l a n a r i t yo f t h eh e m eg r o u po fm p 11a n dt h ee x p o s u r ed e g r e eo ff e ( i i i ) i nt h eh e m eg r o u pd u et o t h a te u + c a l lc o o r d i n a t es t r o n g l yw i t ht h ec a r b o n y lo x y g e no ft h em e t a c e t o n i ca c i d g r o u pi nt h e h e i n eg r o u po ft h em p - 1 1m o l e c u l e o nt h eo t h e rh a n d ，t h e e l e c t r o c a t a l y t i ca c t i v i t yo f t h ec o m p l e xf o rt h er e d u c t i o no f o x y g e ni sh i 曲e rt h a nt h a to f m p - 11 i l l u s t r a t i n gt h a te u ”c a ni n c r e a s et h eb i o l o g i ca c t i v i t yo f m p - 11 2 e f f e c t so fp e p t i d es t r u c t u r eo fm i c r o p e r o x i d a s eo nt h ei n t e r a c t i o nb e t w e e ne u 3 + a n d v i i i a b s t r a c t m i c r o p e r o x i d a s e i nt h i ss e c t i o n ，t h ei n t e r a c t i o no f e u 3 + w i t hh e m i n 、m p 一8 、m p - l la n dc y t - ew a s s t u d i e di no r d e rt oi n v e s t i g a t ee f f e c t so fp e p t i d es t r u c t u r eo nt h ei n t e r a c t i o nb e t 、咖 e u 3 + a n dm i c r o p e r o x i d a s e s i tc a nl a yas o l i d ef o u n d a t i o no nf u r t h e ri n v e s t i g a t i o no f t h ei n t e r a c t i o nm e c h a n i s mb e t w e e nr a r ee a r t ha n dm i c r o p e r o x i d a s e ( 1 ) t h eu v - v i ss p e c t r o s c o p i cs t u d i e si l l u s t r a t e t h a tt h ep e a i 【p o s i t i o n sa n d a b s o r b a n c e so fa l lt h es o r e tb a n d so fh e m i n 、m p - 8 、m p 1 1a n dc y t - ca r er e d s h i f t e d a n dd c r e a s e e d ，r e s p e c t i v e l ya f t e rt h e yi n t e r a e t ew i t he u 3 + a m o n gt h e m ，t h ec h a n g eo f h e m i ni nt h ep e a kp o s i t i o na n da b s o r b a n c eo ft h es o r e tb a n d si st h el a r g e s t t h e r e a s o nf o rt h i si st h a tt h ep o r p h y r i nr i n go fh e m i nh a sn op e p t i d e st ob ec o n n e c t e d ，s o t h a ti t sn e g t i v ec h a r g e dc a r b o n y lo x y g e n so ft h em e t a c e t o n i ca c i dg r o u pa r ee a s yt ob e c o o r d i n a t e dw i t he u ”w h i l e t h ep e p t i d eo fc y tci sl o n ga n dc o m p l i c a t e ds ot h a tt h e h e m eg r o u pi sb u r i e di nt h ep e p t i d eo fc y tca n de u j + i sd i f f i c u l tt oc o o r d i n a t ew i t ht h e c a r b o n y lo x y g e no ft h em e m c e t o m ca c i dg r o u pi nt h eh e m eg r o u p t h u s ，t h ec h a n g e o fc y tci nt h ep e a kp o s i t i o na n da b s o r b a n c eo ft h es o r e tb a n d si st h es m a l l e s t p e p t i d e sl e n 舒h o fm p 一8a n dm p i1i sd i f f e r e n t , w h i c h l e a d i n gt h e i rd i f f e r e n t a g g r e g r a t i v e s t r u c t u r e s m p - 11e x h i b i t s p r e f e r e n t i a l l y a n i r r e g u l a ra l i g n m e n t ( s o - c a l l e dh e a d - t o t a i l ) o ft h eh e m ep l a n e sa n de a c hh e m ep l a n ei sn o tp a r a l l e l ，w h i l e m p 8m o l e c u l e sa r ea g g r e g a t e di nam o r er e g u l a rs t a c k e dc o n f o r m a t i o n ，l e a d i n gt h e n o n p l a n a r i t yo f m p 1 1i s l a r g e r t h a n m p 一8 t h u s ，r e a c t e d w i t h e u 3 + ，t h eh e m e p l a n eo f m p - 11d i s t o r t sm u c hm o r et h a nm p 一8 s t h es o r e rb a n d so fm p 一8a n dm p - 11 a r e l o c a t e da t3 9 6a n d4 0 0 n mr e s p e c t i v e l y , r e f l e c t i n gt h e i rd i f f e r e n tp l a n ec h a r a c t e r s t h e r e f o r e t h er e ds h i f io ft h es o r e tb a n dd e c r e a s e si nt h eo r d e ro fh e m i n m p - 11 m p 一8 c y t - e ，w h i l et h ed e c r e a s ei nt h ea b s o r b a n c eo f t h es o r e tb a n di si nt h eo r d e ro f h e m i n m p 8 m p - 1 1 c y t - c 。 ( 2 】t h ee l e c t r o c h e m i c a ls t u d i e ss h o wt h a te u 3 + c a nc o o r d i n a t ew i t hh e m i 玑m p 8a n d m p - 1 1 ，r e s p e c t i v e l y , f o r m i n gt h ec o m p l e xw i t ht h em o l a rr a t i oo f1 a l t h o u g ht h e c o o r d i n a t i o nb e t w e e ne u 3 + a n dh e m i ni st h es t r o n g e s t , t h er e d o xp e a k so ft h ec o m p l e x o fe u 3 + a n dh e m i nc a nn o tb eo b s e r v e di nt h ec y c l i cv o l l a m m o g r a mo ft h ec o m p l e x ， a b s t r a c t i l l u s t r a t i n gt h a te u 3 + w o u l di n h i b i tt h ee l e c t r o c h e m i c a lr e a c t i o no fh e m i n f o rm p 一8 a n dm p - i1 ，t h ee l e c t r o c h e m i c a lr e v e r s i b i l i t yi nt h ep r e s e n to fe u 3 + i sb e t t e rt h a nt h a t w i t h o ue u 3 + ，i n d i c a t i n ge u 3 + c a np r o m o t et h e i re l e c t r o c h e m i c a lr e a c t i o n b e c a u s et h e a g g r e g a t i o no fm p - 11 i sm o r ei n c o m p a c tt h a nt h a to fm p 一8 t h ei n c r e a s ei nt h e n o n p l a n a r i t yf o rm p - 11c a u s e db yt h ec o o r d i n a t i o no fe u 3 + i sl a r g e rt h a nt h a tf o rm p - 8 t h e n ，t h ep r o m o t ee f f e c to fe u 3 + f o rt h ee l e c t r o c h e m i c a lr e a c t i o no fm p - 11i sl a r g e r t h a nt h a to fm p 一8 e u 3 + c a n n o tc o o r d i n a t ew i t ht h eh e m eg r o u pi nc y tcb e c a u s et h e h e i n eg r o u pi sb u r i e di nt h ep e p t i d eo fc y tc t h u s ，e u 3 + c a n n o ta f f e c tt h e e l e c t r o c h e m i c a lr e a c t i o no f c y tc 3 i n t e r a c t i o no fm p - 11a n dl a v b 6 - o l yc o m p l e x i nt h i ss e c t i o n ，m p 11w a ss e l e c t e da st h ep o dm o d e lc o m p o u n dt oi n v e s t i g a t e s y s t e m l yt h ei n t e r a c t i o nb e t w e e nm p - 1 1a n dl a - v b 6 g l y ( l a l c l 2 ) c o m p l e xu s i n gt h e u v v i sa b s o r p t i o ns p e c t r o s c o p y c ds p e c t r o s c o p ya n dc y c l i cv o l t a m m e t r y ( 1 ) t h eu v - v i sa b s o r p t i o ns p e c t r o s c o p i cr e s u l t si n d i c a t et h a tt h ep c a kp o s i t i o no f t h es o r e tb a n do fm p 一11i sn o tc h a n g e da n di t sa b s o r b a n c ei si n c r e a s e dw h e nt h em o l a r r a t i oo f l a l c l 2a n dm p 11i sl o w e rt h a n5 w h e nt h em o l a rr a t i oi sl a r g e rt h a n1 0t h e p e a kp o s i t i o no ft h es o r e tb a n di sr e d s h i f t e da n di t sa b s o r b a n c ei sd e c r e a s e d i tm a y d e m o n s t r a t et h a tt h e r ea r et w oi n t e r a c t i o nm o d e sb e t w e e nm p 11a n dl a l c l 2 ，i e t h e p r o m o t em o d ef o rl o wm o l a rr a t i oa n dt h er e s t r a i n tm o d ef o rt h eh i 【曲m o l a rr a t i o t h e c o o r d i n a t i o nb e t w e e nm p - 11a n dl a l c l 2l e a d st ot h ei n c r e a s ei nt h en o n p l a n a r i t ya n d t h ee x p l o s u r eo f h e m i na sw e l la st h ed e c r e a s ei nt h ep r o b a b i l i t ya n dt h ee n e r g yo f n - x + e l e c t r o nt r a n s i t i o n ( 2 ) t h ec ds p e c t r o s c o p i cr e s u l t ss h o wt h a tt h ea d d t i o no fl a l c l 2w o u l da f f e c tt h e s e c o n ds t r u c t u r e o f t h e p e p t i d e s i n m p 一1 1 ，l e a d i n g t h er e ds h i f t o f t h es o r e t b a n d a n d t h e d e c r e a s eo ft h em o l a re l l i p t i c i t y w i t ht h ei n c r e a s ei nt h ec o m p l e xc o n c e n t r a t i o n , a t f i r s t ，t h eo r d e r e ds t r u c t u r eo fm p 一11i si n c r e a s e da n dt h e nd e c r e a s e d ，i n d i c a t i n gt h e b r e a k a g eo f t h eo r d e r e ds e c o n ds t r u c t u r ea n dt h ef u r t h e ri n c r e a s ei nt h en o n p l a n a r i t yo f t h eh e i n eg r o u pi nm p 11w i m i n c r e a s i n gt h ec o m p l e xc o n c e n t r a t i o n x a b s t t a c t ( 3 ) t h ee l e c t r o c h e m i c a le x p e r i m e n t sf i n dt h a tt h ee l e c t r o c h e m i c a lr e a c t i o no ft h e c o m p l e xo fm p 一11a n dl a l c l 2i saq u a s i - r e v e r s i b l ea n dd i f f u s i o n 。c o n t r o l l e d l a l c l 2 c a np m m o t et h ee l e c t r o c h e m i c a lr e a c t i o no fm p 11a tt h em o l a rr a t i oo f3 h o w e v e r , t h i sp r o m o t ea c t i o nw o d db ed e c r e a