苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析

第七章苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析,苯乙胺类药物的基本结构,*,常见的苯乙胺类药物,盐酸克仑特罗,硫酸沙丁胺醇,一、结构与性质,1.脂烃胺基侧链，显弱碱性2.酚羟基，易氧化变色，可发生三氯化铁反应3.具手性碳原子，具旋光性,4.溶解性游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂，其盐可溶于水5.UV6.IR7.取代基：具芳伯氨基的盐酸克仑特罗可用重氮化偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量。,二、鉴别试验,1.三氯化铁反应2.氧化反应3.与甲醛硫酸反应4.UV与IR,5.与亚硝基铁氰化钠反应（Rimini反应）脂肪族伯胺的专属反应,三、杂质检查,杂质来源原料残存检查方法比较法（含量测定法）,（一）酮体的检查,检查原理利用酮体在310nm波长处有最大吸收，而药物本身在此波长处几乎没有吸收，规定一定浓度溶液在310nm波长处的吸收度限制酮体的量。,（二）有关物质检查盐酸去氧肾上腺素、硫酸沙丁胺醇等药物检查方法：TLC中高低浓度对比法配制两种浓度对照溶液,（三）盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查检查方法：纸色谱法（PC）分离后，洗脱，照分光光度法于232nm波长处测定吸收度，控制吸收度以控制有关双胍的量,四、含量测定,（一）非水溶液滴定法原料药脂烃胺基侧链，显弱碱性,（二）溴量法盐酸去氧肾上腺素及其注射液、重酒石酸间羟胺反应摩尔比为16,（三）比色法盐酸克仑特罗栓具芳伯氨基，可发生重氮化偶合反应,对照法定量,偶合剂N-（1-萘基）-乙二胺遇亚硝酸也能显色，干扰比色测定，所以在重氮化后，应加氨基磺酸铵将剩余的亚硝酸分解除去，再加偶合试剂N-（1-萘基）-乙二胺。,（四）提取酸碱滴定法硫酸苯丙胺及其制剂,盐类可溶解于水，不溶于有机溶剂,游离碱不溶于水，易溶于有机溶剂,依据性质,碱化,有机溶剂提取,（五）荧光分光光度法,ex410nm、em520nm处测定荧光强度，对照法定量。,（六）HPLC法,重酒石酸去甲肾上腺素注射液离子对反相高效液相色谱法内标法定量调节溶液pH为3.8，加入离子对试剂十二烷基磺酸钠,例1.能和重酒石酸去甲肾上腺素发生颜色反应的试液为（D）A.浓硫酸B.甲醛试液C.氨试液D.甲醛硫酸试液E.茚三酮试液,例2.盐酸异丙肾上腺素的检查项目是（E）A.有关物质B.二苯酮C.盐酸D.醛E.酮体,第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析,常见的芳胺类药物,对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构,具有对氨基苯甲酸酯基本结构。具有游离的芳伯氨基。,苯佐卡因,代表药物有：,盐酸丁卡因,盐酸普鲁卡因胺,酰胺类药物的基本结构,苯胺酰基衍生物，酰胺基邻位或对位有取代基。,非那西丁（对乙酰氨基苯乙醚）,对乙酰氨基酚（扑热息痛）,醋氨苯砜,盐酸利多卡因,盐酸布比卡因,一、结构与性质,（一）具有芳伯氨基或潜在的芳伯氨基，可用重氮化偶合反应鉴别或亚硝酸钠滴定法测定含量，可与芳醛发生缩合反应，易氧化变色。,（二）酯键或酰胺键易水解,（三）具脂烃胺侧链，弱碱性，可与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应进行鉴别或非水碱量法测定含量。,（四）游离碱易溶于有机溶剂，其盐可溶于水。,（六）UV苯环,（七）IR苯环,（五）某些特征取代基（如酚羟基）的反应,二、鉴别试验,（一）重氮化偶合反应,芳香伯胺类鉴别反应,直接：盐酸普鲁卡因、对氨基水杨酸钠、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺,盐酸普鲁卡因ChP（2010）鉴别（1）本品显芳香伯类的鉴别反应（附录）取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。,间接：对乙酰氨基酚、非那西丁、醋氨苯砜、贝诺酯,对乙酰氨基酚ChP（2010）鉴别（2）取本品约0.1g，加稀盐酸5m1，置水浴中加热40分钟，放冷；取0.5m1，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用水3ml稀释后，加碱性-萘酚试液2m1，振摇，即显红色。,盐酸丁卡因（芳香仲胺结构）与NaNO2作用生成乳白色N-亚硝基化合物沉淀,（二）三氯化铁反应对乙酰氨基酚,具有酚羟基（如对乙酰氨基酚），可与FeCl3作用显蓝紫色。,（三）与重金属离子反应1.与铜和钴离子反应,2羟肟酸铁盐反应,具有酰胺结构，被H2O2氧化成羟肟酸，羟肟酸与FeCl3反应生成紫红色羟肟酸铁，随即变为暗棕色至棕黑色。如盐酸普鲁卡因胺。,具有酰胺结构的药物,羟肟酸,羟肟酸铁,3与汞离子的反应,（四）水解产物的反应,1.盐酸普鲁卡因ChP（2010）,鉴别（2）取本品约0.1g，加水2ml溶解后，加10氢氧化钠溶液1ml，即生成白色沉淀；加热，变为油状物；继续加热，产生的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消失后，放冷，加盐酸酸化，即析出白色沉淀。,盐酸普鲁卡因的鉴别试验,2.苯佐卡因ChP（2010）,鉴别（2）取本品约0.1g，加氢氧化钠试液5m1，煮沸，即有乙醇生成；加碘试液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。,苯佐卡因的鉴别试验,（五）制备衍生物测熔点,1三硝基苯酚衍生物,盐酸利多卡因ChP（2010）鉴别取本品0.2g，加水20ml溶解。（1）取溶液10ml，加三硝基苯酚试液10ml，即生成黄色沉淀；滤过，沉淀用水洗涤后，干燥，依法测定（附录C），熔点为228232，熔融时同时分解。盐酸布比卡因ChP（2010）,2.硫氰酸盐衍生物,盐酸丁卡因ChP（2010）鉴别（1）取本品约0.1g，加5%醋酸钠溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸铵溶液1ml，即析出白色结晶；滤过，结晶用水洗涤，在80干燥，依法测定（附录C），熔点约为131。,盐酸布比卡因ChP（2010）鉴别（2）取本品，精密称定，按干燥品计算，加0.01mol/L盐酸溶液制成每1ml中含0.40mg的溶液，照分光光度法（附录A）测定，在263nm与271nm的波长处有最大吸收；其吸收度分别为0.530.58与0.430.48。,（六）UV,（七）IR,盐酸布比卡因ChP（2010）鉴别（3）本品的红外光吸收图谱与对照的图谱（光谱集324图）一致。,三、杂质检查,（一）对乙酰氨基酚杂质检查,1.有关物质,杂质来源中间体、副产物及分解产物,对氯乙酰苯胺杂质对照品法,检查方法TLC,其他杂质参比杂质对照品法,对乙酰氨基酚中除检查酸度、氯化物、硫酸盐、重金属、水分、炽灼残渣等一般杂质外，还需要检查：乙醇溶液的澄清度与颜色、有关物质（对氯乙酰苯胺）、对氨基酚等特殊杂质。,对乙酰氨基酚以对硝基氯苯为原料合成。,(1)乙醇溶液的澄清度与颜色对乙酰氨基酚易溶于乙醇中，如乙醇液不澄清或有颜色，则说明有杂质存在。生产工艺用铁粉作还原剂，如带入成品，则导致对乙酰氨基酚乙醇溶液产生浑浊。中间体对氨基酚有色氧化物在乙醇中显橙红色或棕色。,（2）有关物质（对氯乙酰苯胺）,对硝基氯苯为原料合成对乙酰氨基酚时，如发生这样的副反应就能够引入对氯乙酰苯胺。,副反应,TLC法样品液,对照液对氯乙酰苯胺乙醚溶液（50g/ml）,分离系统硅胶GF254氯仿-丙酮-甲苯（1352）,限量:,点样量样品液：200l点于硅胶GF254薄层板上对照液：40l,判断在254nm波长紫外灯下观察，供试品与对照品主斑点Rf值相同的斑点比较,不得超过其大小与颜色。,2.对氨基酚,杂质来源中间体、水解产物,反应原理,对氨基酚制备中乙酰化不完全或贮存不当发生水解都能引入对氨基酚检查原理：对氨基酚在碱性条件下，与亚硝酰铁氰化钠作用，生成蓝色络合物，与对照液比较判断对氨基酚的限量。,检查方法对照法,取本品1.0g，加甲醇溶液（12）20ml溶解后，加碱性亚硝基铁氰化钠试液1m1，摇匀，放置30min；如显色，与对乙酰氨基酚对照品1.0g加对氨基酚50g用同一方法制成的对照液比较，不得更深（0.005）。,检查方法：,限量：0.005%,（二）盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查,检查方法TLC杂质对照品法,杂质来源水解产生,精密量取本品，加乙醇稀释使成为每1ml中含盐酸普鲁卡因2.5mg的溶液，作为供试品溶液。取对氨基苯甲酸对照品，加乙醇制成每1ml中含30g的溶液，作为对照品溶液。取上述两种溶液各10l，分别点于含有羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶H薄层板上，用苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14114）为展开剂，展开后，取出晾干，用对二甲氨基苯甲醛溶液（2对二甲氨基苯甲醛乙醇溶液100ml，加冰醋酸5ml制成）喷雾显色。供试品溶液如显与对照品溶液相应的杂质斑点，其颜色与对照品溶液主斑点比较，不得更深。,（一）亚硝酸钠滴定法1.原理具芳伯氨基的药物,四、含量测定,具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）经水解，芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法测定。,2.主要测定条件（1）加入适量KBr加速反应KBr为催化剂,NaNO2+HClHNO2+NaClHNO2+HClNOCl+H2O,在盐酸存在下，重氮化反应的机理为：,（1）K1,（2）K2,K1300K2加入KBr，可增大被测溶液中NO+的浓度，所以能加快重氮化反应速度,（2）酸的种类及其浓度,在不同酸中重氮化反应的速度为：HBrHClH2SO4HNO3,盐酸1:2.56；加入盐酸：重氮化反应速度加快；重氮盐在酸性溶液中稳定；防止生成偶氮氨基化合物，而影响测定结果,（3）室温条件下滴定1030（4）滴定速度：先快后慢滴定管尖端插入液面下2/3处，滴定液一次大部分放下，近终点时方改为慢速滴定,3.指示终点的方法（1）永停滴定法ChP（2010）、BP（1998）,永停滴定法（附录A）用作重氮化法的终点指示时，调节R1使加于电极上的电压约为50mV。取供试品适量，精密称定，置烧杯中，除另有规定外，可加水40ml与盐酸溶液（12）15ml，而后置电磁搅拌器上，搅拌使溶解，再加溴化钾2g，插入铂铂电极后，将滴定管的尖端插入液面下约2/3处，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L或0.05mol/L）迅速滴定，随滴随搅拌，至近终点时，将滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，至电流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点。,（2）电位法USP（24）,（3）外指示剂法KI淀粉糊剂或试纸2NaNO2+2KI+4HCl2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O,（4）内指示剂法中性红不可逆指示剂,4.测定方法盐酸普鲁卡因ChP（2010）取本品约0.6g，精密称定，照永停滴定法（附录A），在1525，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）相当于27.28mg的C13H20N2O2HCl,（三）紫外分光光度法对乙酰氨基酚在0.4氢氧化钠溶液中，于257nm波长处有最大吸收，其紫外吸收光谱特征，可用于其原料及其制剂的含量测定。,（二）非水溶液滴定法脂烃胺侧链，具弱碱性,对乙酰氨基酚ChP（2010）取本品约40mg，精密称定，置25ml量瓶中，加0.4氢氧化钠溶液50ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5m1，置100ml量瓶中，加0.4氢氧化钠溶液10m1，加水至刻度，摇匀，在257nm的波长处测定吸收度，按C8H9NO2的吸收系数为715计算，即得。,原料药吸收系数法,USP（24）对照法,（四）比色法中性条件下的重氮化反应,（五）荧光法荧光探针技术使荧光衍生化试剂与本身无荧光或荧光效率低的化合物反应，其产物具有强荧光，从而使检测灵敏度大大提高。,ex400nm（激发波长）、em485nm（发射波长）处测定荧光强度，标准曲线法定量。,（六）HPLC法盐酸普鲁卡因注射液ChP（2010）,可同时测定盐酸普鲁卡因及其降解产物对氨基苯甲酸离子抑制色谱法内标法定量,98：133盐酸普鲁卡因胺常用的鉴别反应有（AB）A.重氮化偶合反应B.羟肟酸铁盐反应C.氧化反应D.磺化反应E.碘化反应,97：137采用亚硝酸钠法测定含量的药物有（CD）A.苯巴比妥B.盐酸丁卡因C苯佐卡因D.醋氨苯砜E.盐酸去氧肾上腺素,95：85下列药物中不能用亚硝酸钠滴定法测定含量者（A）A.乙酰水杨酸B.对氨基水杨酸钠C.对乙酰氨基酚D.普鲁卡因E.苯佐卡因,96：81（99：72）.亚硝酸钠滴定法中，加KBr的作用是（B）A.添加BrB.生成NO+BrC生成HBrD.生成Br2E.抑制反应进行,95：75中国药典（1990年版）所收载的亚硝酸钠滴定法中指示终点的方法为（B）A.电位法B.永停法C.外指示剂法D.内指示剂法E.自身指示剂法,96：127亚硝酸钠滴定法中，可用于指示终点的方法有（BCDE）A.自身指示剂法B.内指示剂法C.永停法D.外指示剂法E.电位法,例1.ChP（2010）亚硝酸钠滴定法测定对氨基水杨酸钠的含量时，指示滴定终点的方法为（C）A.自身指示终点法B.电位法指示终点C.永停滴定法D.氧化还原指示剂法E.酸碱指示剂法,例2.以下那种药物中应检查对氨基苯甲酸（E）A.盐酸普鲁卡因B.盐酸普鲁卡因胺C.注射用盐酸普鲁卡因D.盐酸普鲁卡因胺片E.盐酸普鲁卡因注射液,例3.盐酸普鲁卡因采用亚硝酸钠滴定法测定含量时的反应条件是（ABCDE）A.强酸B.加入适量溴化钾C.室温（1030）下滴定D.滴定管尖端深入液面E.永停法指示终点,第三节氨基醚衍生物类药物的分析,茶苯海明,一、结构与性质,1.脂烃胺基侧链，显弱碱性2.UV和IR3.茶苯海明含卤素,二、鉴别试验,1.与硫酸反应呈色2.制备三硝基苯酚衍生物测熔点2.水解反应3.与AgNO3反应形成沉淀4.UV和IR,三、含量测定,（一）非水溶液滴定法原料（二）银量法茶苯海明中8-氯茶碱的测定,（三）酸性染料比色法盐酸苯海拉明片剂及片剂溶出度测定（四）阴离子表面活性剂滴定法（双相滴定法）盐酸苯海拉明注射液,1.原理滴定反应RX+MNaRM+NaXK1（可溶于有机溶剂）终点指示MNa+碱性染料有色物K2（可溶于有机溶剂）,2.测定对象有机碱性药物,3.测定条件,（1）酸性溶液,（2）本法应用前提：药物与滴定剂的反应优于滴定剂与指示剂的反应。若滴定剂不能先与药物作用而先与指示剂作用，则滴定无法进行。即使药物与滴定剂先反应，若滴定剂不在反应完成的等当点稍后与指示剂反应，则纵使可以滴定，也会造成误差。K1K2，但也不能相差太大，相差2个数量级