免疫组化观察和判断.ppt

免疫组织化学阳性结果的观察和判断,观察内容：目标细胞的标记与观察免疫组化阳性或阴性染色阳性颗粒在细胞中定位阳性细胞的组织学分布特征阳性染色强度和阳性率特异和非特异背景干扰的识别,决定抗原定位和分布的主要因素：肿瘤细胞类型肿瘤细胞抗原种类,干扰抗原定位的主要因素：特异性抗原弥散非特异性背景染色,一、抗原在肿瘤细胞中定位确定目标细胞熟悉标志物表达观察抗原的定位有无异常表达,阳性颗粒在细胞中定位：细胞膜型胞膜-胞浆型细胞核型胞核-胞浆型细胞浆型刷状缘型,1细胞膜型阳性颗粒定位于细胞膜表面良性肿瘤膜层较完整，厚薄均匀而规则恶性肿瘤胞膜不完整，深浅不一，厚薄不均，部分细胞阴性或断续性,常见标记物：淋巴细胞抗原：LCA，CD2，CD3，CD7，CD15，CD20，CD56间皮细胞抗原：MCA，CLT,细胞膜受体：CerbB2，InsulinR上皮膜抗原：EMA，ESA其它标记物：MDR，CD95，粘附分子,EMA,ESA,CA125,PSAP,膜抗原胞浆表达：EMA多数腺癌MCA某些腺癌CD15胃肠腺癌CD3早期T淋巴细胞CD56神经内分泌肿瘤CD30肠腺癌,2胞浆型：弥漫性:阳性颗粒弥漫而均匀分布于胞浆和突起，大部浆抗原的表达形式,HPC,SBSAG,Fascin,VIM,CA242,HMB45,CK7,GFAP,SPA,CD34,斑点状:阳性颗粒呈小斑点状位于胞浆的一侧CK高级别神经内分泌肿瘤GCDFP15乳腺小叶癌,CD30霍奇金淋巴瘤CD2部分T细胞淋巴瘤desmin促纤维增生性小圆细胞肿瘤GH、PRL垂体腺瘤挤压或扭曲细胞,CD2,CD2,CK,CK,PRL,环形状：阳性颗粒围绕核周呈环状分布CK低分化癌，未分化癌VIM低分化癌，未分化癌、神经内分泌肿瘤,VIM,VIM,VIM,CK,胞浆两端：CA19-9胰腺癌CA125胰腺癌,阳性颗粒粗细：颗粒大小与肿瘤细胞类型相关,粗颗粒：恶性黑色素瘤HMB45神经内分泌肿瘤CgA恶性组织细胞肿瘤Lyso,A1ACT肝细胞肿瘤Heppar-1,浆内小泡状,HMB45,HPC,细颗粒：上皮肿瘤肌源性肿瘤软组织肿瘤生殖细胞肿瘤,NSE,CK,CK7,Tg,属于胞浆型的标记物：细胞结构蛋白：微丝蛋白中间丝蛋白微管蛋白,神经内分泌免疫球蛋白细胞内酶细胞功能蛋白肿瘤相关抗原癌基因和抑癌基因蛋白病毒抗原,3胞核型：阳性颗粒定位于细胞核弥漫性分布核膜下分布小斑片状,P63,PR,PCNA,TOPO,P53,Ki-67,颗粒粗细和分布形式与瘤细胞增殖及核抗原类型相关颗粒较细，分布均匀PRERARP63Myogenin,ER,颗粒较粗，分布不均匀PCNAKi-67P53TOPO良性细胞颗粒细而均匀恶性细胞颗粒粗而不均,P53,常见核型抗原：增殖周期蛋白：CyclinA，CyclinB，CyclinD，CyclinE，CyclinG，Ki-67，PCNA，Brdu性激素受体：AR，ER，PR,癌基因：BRCA-1，P16INK4a，P21WAF1，P27，P53，RB，C-fos，Bcl-6肌核抗原：Myf-3，MyoD1，Myogenin,病毒抗原：CMV，HPV，HCVAg，EBV其它：TdT，TOPO，TTF1,4膜-浆型阳性染色同时定位于细胞浆和细胞膜淋巴细胞标记物：CD30，CD43，CD56，CD138，CD74，CD75，HLA-DR,上皮细胞抗原：EMA，ESA肿瘤相关抗原：CA家族：CA15-3，CA125，CD19-9，CA242，TAG癌基因蛋白：Cer-Bb-3，bcl-2，MRP，CD99其它标记物：LM-R，EGF-R,PCK,EMA,CA242,Cer-bB-2,5核浆型：阳性染色同时定位于细胞浆和细胞核,常见抗原：S-100神经、胶质、恶黑HMB45恶性黑色素瘤ALK-1间变性大细胞淋巴瘤bcl-10MALT淋巴瘤,PCNA某些癌和霍奇金C-MYC某些癌HSP27某些癌P21胞浆鳞酸化,PCNA,P21,S-100,二、阳性细胞组织学分布组织学特点与下列因素相关：肿瘤自身组织学结构特点肿瘤细胞分化程度肿瘤抗原的表达类型,1局灶型阳性细胞呈不规则小灶性分布，无固定排列形式肿瘤分化不一致性肿瘤细胞异常表达肿瘤细胞多向分化,常见于：低分化癌，癌肉瘤CK低分化腺癌CA242，CA19-9低分化横纹肌肉瘤desmin,神经内分泌癌Syn.Cg-A恶性星形细胞瘤GFAP恶性黑色素瘤S-100,CK,CK,CD68,AFP,AFP,2弥漫型阳性细胞呈弥散性分布细胞间无连接,常见于：非霍奇金淋巴瘤霍奇金淋巴瘤小细胞癌,神经内分泌肿瘤小圆细胞肿瘤恶性纤维组织细胞瘤PNET,NSE,GFAP,CD20,3网状型瘤细胞密度较大，阳性细胞膜与膜间相互紧靠,常见于：大细胞淋巴瘤低分化腺癌肾透明细胞癌胸腺癌脑膜瘤星形胶质瘤梭形细胞肿瘤,CD20,CerbB2,CD20,EMA,EMA,ESA,4腔缘型：阳性颗粒定位于腺癌的腔缘面细胞膜，腔内有阳性不定形物质常见标记物：CA242,CA125，CA15-3,CA19-9,BCA225,TAG72,TN,CD19-9,CD19-9,CA125,三、阳性标记强度特征：染色强度：用于诊断与鉴别诊断弱阳性中度阳性强阳性,阳性细胞数：用于预后评估指标弱阳性：25%(+)中阳性：2550%(+)强阳性：50%(+),CK8,CD79,CD30,肿瘤异常表达与预后关系：细胞功能和结构蛋白：肿瘤分化越低，表达越弱随着肿瘤低分化，获得某些抗原高表达,CK,肿瘤相关抗原：肿瘤分化越差，抗原表达越强,CA125,增殖细胞核抗原：增殖活性高，提示预后差,PCNA,癌基因：高表达，提示预后差抑癌基因：低表达提示预后差,P53,P53,性激素受体：高表达，提示内分泌治疗有效，预后较好,PR阳性,耐药基因：高表达对某些化疗药物产生耐药性,TOPO,四、影响抗原定位主要因素1组织结构不清组织变性坏死固定和脱水不佳抗原修复过度,2组织细胞特殊结构纤维肉瘤神经纤维瘤胃肠间质瘤平滑肌瘤,Nestin,3瘤细胞浸润正常组织陷入肿瘤肿瘤侵犯骨骼肌肿瘤侵犯甲状腺肿瘤侵犯胸腺肿瘤侵犯肝脏富于T细胞B淋巴瘤,CD