（内科学专业论文）ho1在胃腺癌中的表达及其病理关系的研究.pdf

目录 中文摘要- 1 英文摘要2 研究论文h o 1 在胃腺癌中的表达及其病理关系的研究 前言4刖舌。4 材料与方法5 结果8 附图9 附表1 2 讨论1 3 结j 沧15 参考文献16 综述诱导性血红素氧合酶的研究进展1 9 致调 31 个人简历3 2 中文摘要 h o 1 在胃腺癌中的表达及其病理关系的研究 摘要 目的：胃腺癌是我国最常见的恶性消化道肿瘤之一，在我国其发病率 居各类肿瘤的首位，并呈逐年上升趋势，严重威胁着人们身心健康。胃腺 癌发生和发展与许多基因和蛋白质的表达密切相关，是一个复杂的多步骤 过程。在众多基因中，诱导型血红素氧和酶( h e i n eo x y g e n a s e 1 ，h o 一1 ) 是近年来引起关注的一个新的增值指标，国内有关h o 1 在胃腺癌中的表 达研究报道很少。本研究通过检测h o 1 在胃腺癌中的表达，分析h o 1 在胃腺癌发生发展中的作用。 方法：本研究采用免疫组织化学方法检测病理科6 8 例胃腺癌( 分高、 中、低分化组) 存档的石蜡标本；对照组：2 0 例慢性萎缩性胃炎标本， 2 0 例慢性非萎缩性胃炎标本，h o 1 c o 分布表达情况，采用s p s s l 3 统 计软件进行贮检验和f i s h e r 精确概率法检验统计学方法分析。 结果：h o 1 在胃腺癌、慢性萎缩性胃炎，慢性非萎缩性胃炎中阳性 率分别是8 8 ( 6 0 6 8 ) 、6 0 ( 1 2 2 0 ) 、1 0 ( 2 2 0 ) 。胃腺癌中h o 1 的 表达明显高于慢性萎缩性胃炎( p o 0 5 ) ，慢性萎缩性胃炎中h o 1 的表达 明显高于慢性非萎缩性胃炎组( p 0 0 5 ) 。重度慢性萎缩性胃炎中h o 1 的表达明显高于轻度慢性萎缩性胃炎组( p o 0 5 ) 。胃腺癌低分化组阳性 数明显大于中分化组，中分化组阳性数明显高于高分化组，两两比较有显 著差异( p 0 0 5 ) 。 结论：h o 1 在胃腺癌病理组织的高表达，表明h o 1 在胃腺癌发生 发展中起重要作用，为胃腺癌早期预防、早期诊断、预后判断及治疗方案 选择提供重要依据。 关键词：血红素氧和酶1 ；胃腺癌；慢性萎缩性胃炎；免疫组化 茎查塑兰 一一一 h e m eo x y g e n a s e 1i ns t o m a c ha d e n o c a r c i n o m a se x p r e s s i o n a n dc l i n i c a lp a t h o l o g yr e l a t i o n sr e s e a r c h a b s t r a c t o b j e c t i v e ：t h eg a s t r i ca d e n o c a r c i n o m a i so n eo ft h em o s tc o m m o n m a l i g n a n td i g e s t i v et r a c tt u m o r si nc h i n a i t si n c i d e n c er a t eo c c u p i e st h ef i r s t p l a c ei na l l k i n d so ft u m o r si nc h i n a ，a n di n c r e a s e sy e a rb yy e a r , w h i c h s e r i o u s l yt h r e a t e n sp e o p l e sp h y s i c a la n dm e n t a l h e a l t h t h eg e n e s i sa n d d e v e l o p m e n to fg a s t r i ca d e n o c a r c i n o m ai s c l o s e l yr e l a t e dw i t hm a n yg e n e s a n dp r o t e i ne x p r e s s i o n s ，a n di t s ac o m p l e xm u l t i s t e pp r o c e s s a m o n gt h e n u m e r o u sg e n e s ，t h ei n d u c i b l eh e m eo x y g e n a s e ( h e i n eo x y g e n a s e - 1 ，h o 一1 ) i s an e wv a l u e a d d e di n d i c a t o r h o 1i nt h er e l e v a n td o m e s t i ca d e n o c a r c i n o m a o ft h es t o m a c hi sf e wr e p o r t e d b yd e t e c t i n g h o 一1 e x p r e s s i o n i n g a s t r i c a d e n o c a r c i n o m a ，t h i ss t u d ya n a l y s e st h er o l e o fh o 一1i nt h eg e n e s i sa n d d e v e l o p m e n to fg a s t r i ca d e n o c a r c i n o m a m e t h o d ：i nt h i ss t u d y , i m m u n o h i s t o c h e m i c a ld e t e c t i o no fp a t h o l o g y , 6 8 c a s e so fg a s t r i ca d e n o c a r c i n o m a ( a th i g h ，m e d i u m ，p o o rd i f f e r e n t i a t i o n ) a r c h i v e dp a r a f f i ns p e c i m e n s ；c o n t r o lg r o u p ：2 0 c a s e so fc h r o n i ca t r o p h i c g a s t r i t i ss p e c i m e n s ，2 0c a s e so fc h r o n i cn o n a t r o p h i cg a s t r i t i ss p e c i m e n s ，h u tt n 1 c oe x p r e s s i o no fd i s t r i b u t i o n ，u s i n gs t a t i s t i c a ls o f t w a r es p s s 13w i t hx 2 t e s ta n df i s h e re x a c tt e s tt oa n a l y z et h er e s u l t ss t a t i s t i c a l l y r e s u i t s ：t h ep o s i t i v er a t eo fh o 1i ng a s t r i ca d e n o c a r c i n o m a ，c h r o n i c a t r o p h i cg a s t r i t i sa n dc h r o n i cn o na t r o p h i cg a s t r i t i s i s88 o ( 6 0 6 8 ) ，6 0 ( 12 2 0 ) ，10 ( 2 2 0 ) r e s p e c t i v e l y h o - 1 i ng a s t r i ca d e n o c a r c i n o m a1 s s i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt h a to f c h r o n i ca t r o p h i cg a s t r i t i s ( p o 0 5 ) ，c h r o n i c a t r o p h i cg a s t r i t i si nt h eh o 1e x p r e s s i o ni ss i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt h a t o f c h r o n i cn o n a t r o p h i cg a s t r i t i sg r o u p ( p o 0 5 ) s e v e r ec h r o n i ca t r o p h i cg a s t r i t i s i nt h eh o 1e x p r e s s i o ni ss i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt h o s ew i t hm i l dc h r o n i c a t r o p h i cg a s t r i t i sg r o u p s ( p o 0 5 ) t h ep o s i t i v e r a t eo fp o o rd i f f e r e n t i a t e d g a s t r i ca d e n o c a r c i n o m a i s s i g n i f i c a n t l y h i g h e r t h a nt h a to fm e d i u m 英文摘要 d i f f e r e n t i a t e dg r o u p ，a n dt h ep o s i t i v er a t eo fm e d i u md i f f e r e n t i a t e dg r o u pi s s i g n i f i c a n t l yh i g h e r t h a nt h a to fw e l ld i f f e r e n t i a t e d g r o u p ，p a i r w i s e c o m p a r i s o n sa r es i g n i f i c a n t l yd i f f e r e n t ( p 0 0 5 ) c o n c l u s i o n ：t h eh i 曲e x p r e s s i o no fh o 1i ng a s t r i ca d e n o c a r c i n o m ao f p a t h o l o g y , s u g g e s t st h a th o - 1p l a y sa ni m p o r t a n tr o l ei nt h eg e n e s i sa n d d e v e l o p m e n to fg a s t r i ca d e n o c a r c i n o m a ，w h i c hp r o v i d e sa l li m p o r t a n tb a s i s f o re a r l yp r e v e n t i o no f g a s t r i ca d e n o c a r c i n o m a ，e a r l yd i a g n o s i s ，p r o g n o s i sa n d s e l e c t i o no ft r e a t m e n t k e yw o r d s ：g a s t r i ca d e n o c a r c i n o m a ；h e m eo x y g e n a s e 一1 ；c h r o n i c a t r o p h i cg a s t r i t i s ；i m m u n o h i s t o c h e m i s t r y 研究论文 h o 1 在胃腺癌中的表达及其病理关系的研究 l - j 一 刖罱 胃恶性肿瘤中最为常见的是胃腺癌( g a s t r i ca d e n o c a r c i n o m a ) ，胃腺 癌系源自胃粘膜上皮细胞的恶性肿瘤，占胃恶性肿瘤的9 5 ，胃腺癌在 我国发病率很高，根据我国1 9 7 3 年1 9 7 5 年死因调查，每年约有1 6 万人 死于胃腺癌，几乎接近全部肿瘤死亡人数的1 4 ，且每年还有2 万以上 新的胃癌病人被确诊，胃腺癌确实是一种严重威胁人民身体健康的疾病 。随着现代人类劳动强度显著下降，不健康的饮食习惯，生活节奏 提高，应激因素的增加，胃腺癌的发生率呈现年轻化趋势。目前对胃腺癌 的治疗方案虽能适当延长患者寿命，但多数患者确诊后均己进入晚期状 态，失去治疗机会。己知其发生发展与许多基因和蛋白质表达有关，因此 对于深入研究胃腺癌易感性尤为重要，为胃腺癌早期预防提供思路。 肿瘤基本生物学特征为失控性生长，即过度增殖，是机体在各种致癌 因素作用下，局部组织的某一个细胞在基因水平上失去对其生长的正常调 控，在众多基因中，诱导型血红素氧和酶( h e m eo x y g e n a s e 1 ，h o 1 ) 成为人们的研究热点，血红素氧合酶( h e m e o x y g e n a s e ，h o ) 是一种血红素 降解的催化酶和限速酶，可将血红素分解成一氧化碳( c a r b o nm o n o x i d e ， c o ) 、胆红素和铁。已发现h 0 有3 种同工酶眩1 ，分别为h o 1 、h o 2 及h o 3 。h o 1 为诱导性，分子量3 2 k d ，也称热休克蛋白3 2 ，主要分布 单核巨噬细胞系统的微粒体中，在心、肺、肾、肝脏、脾脏、骨髓和网状 内皮细胞中表达较多，以脾脏中活性最高，脑中则很难检测出。h o 1 也被称为应激蛋白，与多种应激相关性疾病发生密切相关，具有抗氧化、 抗炎、抗细胞增殖及抗细胞凋亡作用，且被膳食中多种抗氧在化剂诱导， 引起人们广泛重视。且在一些癌基因及其产物诱导的转化细胞核以及许多 肿瘤细胞中表达增高嵋1 。胃粘膜即是与多种应激因素相关性疾病发生密 切相关的器官，易受热刺激、应激及感染诸因素的各种刺激而致癌h 巧1 。 在胃腺颈部，细胞即多分化潜能干细胞及胃粘膜上皮尚未分化，细胞最易 受损，最易发生癌变。胃粘膜在持续有害刺激下发生癌变的过程中h o 1 合成不断增加。最近的研究表明h o 1 与多种肿瘤密切相关，h o 1 可能 研究论文 参与多种恶性肿瘤的发生、发展及转移过程，并可作为相关免疫佐剂治疗 肿瘤。目前h o 1 在肿瘤中研究诸多，但国内外有关h o 1 在胃腺癌中表 达研究很少。 本研究用免疫组织化学技术，对胃腺癌组织、慢性萎缩性胃炎及慢性 非萎缩性胃炎组织中h o 1 表达水平进行测定，探讨h o 1 在胃腺癌发 生、发展中的作用，为进一步对胃腺癌早期预防及预后判断提供理论基础。 材料与方法 1 材料 胃腺癌组：研究对象均是衡水市哈励逊国际和平医院胃镜科2 0 0 8 年 1 月至2 0 0 9 年1 2 月收治的病人，6 8 例病理科存档的胃腺癌石蜡标本，所 有病例均未接受化疗、放疗或免疫治疗。所有患者一级亲属的家庭成员中 均无家族性胃腺癌病史，并经病理学明确诊断，具备完整的临床病理资料， 包括患者年龄、性别、肿瘤的病理组织学分级。平均年龄6 0 3 5 + 8 7 5 岁， 其中男4 8 例，女2 0 例。请病理学教授按胃腺癌w h o 病理分级标准分 级，高、中、低分化组分别是2 6 例，2 8 例，1 4 例。对照组：2 0 例慢 性萎缩性胃炎标本，其中男1 2 例，女8 例。年龄5 5 - 8 1 岁，平均年龄 6 6 5 5 0 4 - 7 6 2 6 岁；2 0 例慢性非萎缩性胃炎标本，其中男1 1 例，女9 例。 年龄5 6 7 8 岁，平均年龄6 5 4 1 7 4 - 4 5 1 3 岁。以上标本均经4 福尔马林 固定，石蜡包埋，衡水市哈励逊和平医院病理科切片，常规h e 染色已确 定诊断。 2 主要仪器 1 ) 石蜡切片机( l e i c a 2 1 3 5 型) 2 ) 微波炉( m g 5 5 1 3 s 型) l g 3 ) 湿盒 4 ) 4 0 0 电冰箱( m d f 3 8 2 e ) 日本三洋 5 ) 显微镜( o l y m p u s c x 3 1 r b s f 型) 6 ) 恒温干燥器( h g 3 0 3 型) 7 ) 高性能无菌实验台( d l c j 1 n ) 哈尔滨东联 3 主要试剂 研究论文 1 ) 一抗山羊抗人h o 1 单克隆i g g 抗体：北京博奥森生物技术有限 公司。 2 ) h i s t o s t a i n 州一p l u sk i t s 免疫组化染色试剂盒：由北京中杉金桥生 物技术有限公司提供。 3 ) d a b 显色试剂盒，北京博奥森生物技术有限公司。 4 ) 辣根酶标记链霉卵白素工作液：北京中杉金桥生物技术有限公司 提供。 5 ) 0 0 1 m o l l p b s 液：n a c l l 8 9 ，k c l 0 2 9 ，n a 2 h p 0 4 1 4 4 9 ，k h 2 p 0 4 0 2 4 9 ， 调节p h 值至7 4 0 ，加d d d h 2 0 定容积至1 0 0 0 m l 。 4 技术路线图 5 实验方法 所有标本均经4 福尔马林固定，石蜡包埋，4 u m 厚连续切片，每份 标本都同时常规h e 染色，用于确定病理类型及确定诊断。采用免疫组化 s p 法，检测h o 1 蛋白的表达，己知阳性切片做阳性对照，以p b s 缓冲 液代替一抗作为阴性对照。 _-_-_-_，j1_li 研究论文 主要步骤： ( 1 ) 石蜡包埋组织块，切片厚度4 u m ，连续5 张，载玻片预先经过 酸泡，水洗，酒精处理，高温烘干后备用。石蜡切片烘片2 3 个小时； ( 2 ) 二甲苯脱蜡，逐步经1 0 0 至7 0 酒精后入蒸馏水； ( 3 ) 抗原热修复； ( 4 ) 3 h 2 0 2 去离子水( 无色液体) 室温孵育5 1 0 分钟，以消除内 源性过氧化酶活性； ( 4 ) p b s 冲洗3 分钟3 次； ( 5 ) 滴加正常山羊血清工作液，室温孵育1 5 分钟，顷去，勿洗； ( 6 ) 滴加1 ：7 5 山羊抗人h o 1 单克隆i g g 抗体，4 0 孵育过夜； ( 7 ) 冷p b s 冲洗3 分钟3 次； ( 8 ) 滴加生物素标记山羊抗兔i g g ，室温孵育1 5 分钟； ( 9 ) p b s 冲洗3 分钟3 次；5 正常动物血清( t b s ) 稀释，室温孵 育1 0 分钟； ( 10 ) 滴加s p 复合物，3 7 孵育1 5 分钟； ( 1 1 ) p b s 冲洗3 分钟3 次； ( 1 2 ) d a b 显色，自来水洗，苏木精复染、脱水、透明、封固。每 次试验设阳性对照和阴性对照，以保证结果的可靠性。 6 免疫组织化学法染色结果 h o 1 阳性细胞计数：h o 1 阳性细胞表达为棕黄色颗粒，高倍镜下 主要存在于细胞核中，细胞浆上也有少量表达。光镜下随机选取1 0 个连 续不重复的高倍( 1 0 x 2 0 ) 视野，综合染色强度和阳性细胞百分数进行半 定量评分：基本不着色，染色与背景相似者为0 分；着色浅，略高于背景 者为1 分；中度着色，明显高于背景者为2 分；强染，着深棕色者为3 分。按阳性细胞数量分为：阳性细胞百分数s 1 0 为0 分； 5 0 为3 分。2 项相加后分为4 级，o 1 分判 为阴性( ) ，2 分为弱阳性( + ) ，3 - - 4 分为阳性( + + ) ，4 分以上为强 阳性( w ) 。， 7 统计学处理 采用s p s s l 3 统计软件包进行统计分析，数据用均数士标准差( x 士s ) 表示，肿瘤与对照组织之间的计数资料采用t 检验，构成比差别采用贮 研究论文 检验，等级资料的相关性检验采用s p e a r m a n 等级相关性分析，检验水准 a = 0 0 5 ，p 茎o 0 5 为差异有统计学意义。 结果 按照患者年龄、性别、癌细胞病理分化程度等进行了分组，采用了 非参数秩和检验比较各组间h o 1 染色强度间的差别，提示：h o 1 在胃 腺癌组织的阳性表达与患者年龄、性别无关，而与组织的分化程度有关， 低分化组h o 1 表达显著高于中分化组， ( x 2 = 7 1p = 0 0 3 0 ) ；中等分化 组h o 1 表达显著高于高分化组，( x 2 = 8 5 4p = 0 0 1 8 ) ，对照组：慢 性萎缩性胃炎6 0 ( 1 2 2 0 ) ，慢性非萎缩性胃炎1 0 ( 2 2 0 ) ，胃腺癌组织 的阳性率8 8 ( 6 0 6 8 ) ，在胃腺癌组织的阳性率明显高于对照组，x 2 检验， 胃腺癌组织和对照组慢性萎缩性胃炎，慢性非萎缩性胃炎间，h o 1 指标 表达差异有统计学意义( p o 0 5 ) 。见t a b e l1 、t a b e l 2 。在慢性萎缩性 胃炎中重度者h o 1 表达呈现弥漫性弱阳性，而轻度者呈现单个细胞弱阳 性表现，见f i g 5 、f i g 6 。 研究论文 附图 f i g 1 a t t a c h e di m m u n o h i s t o c h e m i c a ld e t e c t i o no fh o 一1i n g a s t r i c w e l l d i f f e r e n t i a t e dt i s s u e s ，d a bs t a i n i n g ，c e l l ss h o w e db r o w nn u c l e a rs t a i n i n g ( + ) ( s p x 2 0 0 ) f i g 2i m m u n o h i s t o c h e m i c a ld e t e c t i o no f h o 一1i n t i a t e dt i s s u e s ，d a bs t a i n i n g ，c e l l ss h o w e db r o w nn u c l e a rs t a i n i n g ( 抖) ( s p x 2 0 0 ) 9 f i g 3i m m u n o h i s t o c h e m i c a ld e t e c t i o no f h o 一1i np o o r l yd i f f e r e n t i a t e d g a s t r i ca d e n o c a r c i n o m at i s s u e s ，d a bs t a i n i n g ，c e l l n u c l e ia r eb r o w n y e l l o w s t a i n i n g ( h 斗) ( s p x2 0 0 ) f i g 4i m m u n o h i s t o c h e m i c a l d e t e c t i o no fh o - 1i ns e v e r ec h r o n i ca t r o p h i c g a s t r i t i st i s s u e s ，d a bs t a i n i n g ，h o 1s h o w e dd i f f u s ew e a kp o s i t i v e ( s p 2 0 0 ) ti： j ilifil-l1 jl f i g 5i m m u n o h i s t o c h e m i c a ld e t e c t i o no fh o 1i nt h em i l dc h r o n i c a t r o p h i cg a s t r i t i st i s s u e s ，d a b s t a i n i n g ，s h o w i n gad i f f u s e ，s i n g l ec e l l s p o s i t i v ef o rh o - i ( s p 2 0 0 ) f i g 6i m m u n o h i s t o c h e m i c a ld e t e c t i o no fh o 一1i nc h r o n i cn o na t r o p h i c g a s t r i t i st i s s u e s ，d a bd y e ，n oc o l o r i n gn u c l e u so f g a s t r i cm u c o s a lc e l l s ，w e r e n e g a t i v e ( - ) ( s p 2 0 0 ) 研究论文 附表 t a b l e1g a s t r i cc a n c e r , c h r o n i ca t r o p h i cg a s t r i t i s ，c h r o n i cn o na t r o p h i c g a s t r i t i si nt h eh o - 1e x p r e s s i o n + c o m p a r i s o nw i t hc h r o n i ca t r o p h i cg a s t r i t i sp 0 0 5 ，+ b e t w e e n h i g hs c h o o lp o o r l yd i f f e r e n t i a t e dc o m p a r i s o n p o 0 5 1 2 l 研究论文 讨论 h o 一1 即热休克蛋白3 2 ( h s p 3 2 ) ，分子量为3 2 k d ，是细胞内的种 重要的抗氧化酶。h o 1 连同其酶解产物胆红素、铁离子及c o 一起组成 了机体重要的保护系统，参与抗氧化反应、抗炎、抗细胞增殖、抗细胞凋 亡，与细胞内信号传递有关【6 、7 1 。h o 1 属于诱导型，目前已经确定h o 。1 的编码基因定位于人染色体2 2 q 1 2 ，广泛分布于哺乳动物多种组织细胞 中。在细胞处于生理状态即有少量表达，但是健康胃肠道极少表达h o 1 【8 】， 当胃肠道粘膜病变或损伤时，h o 1 会诱导产生，有利于病变、损伤组织的 修复，有研究发现，h o 1 对动物结肠黏膜上皮细胞同样具有保护作用【9 1 0 1 ，p o s s k d 【l l 】等研究认为h o 1 能抵抗氧化损伤，充分发挥抗凋亡和细 胞保护作用。 h o 1 在肿瘤组织中发挥作用机制还不完全清楚，进年来受到广大基 础研究及临床工作者的广泛关注，胃腺癌中增高可能机制为：( 1 ) 胃肿 瘤细胞释放出某些细胞因子；( 2 ) 胃肿瘤细胞生长失控导致低氧；( 3 ) 胃肿瘤细胞生长迅速，血供相对不足，促进v e g f 合成及受体的敏感性 增强。充分激活h o 1 系统，h o 1 表达上调充分影响细胞生长周期，导 致细胞生长过速抗凋亡，从上看均有促进肿瘤生长的作用。b e r b e r a tp o 等【1 2 】报道h o 1 在胰腺癌细胞中表达明显增强，h i r a i k t l 3 】等用c 5 7 b l 鼠 做成l l 2 肺癌动物模型，实验表明，h o 1 抑制肿瘤凋亡，促进肿瘤生长。 也有报道发现h o 1 在前列腺实体肿瘤组织中表达升高【l 刖。国内也有相关 研究显示，h o 1 在人类乳腺癌组织中的表达要明显高于正常乳腺组织【15 1 ， 且高于乳腺增生、乳腺纤维腺瘤【1 6 】。乳头状甲状腺癌【1 7 】，从国内外众多研 究结果中发现，h o 1 发挥抗凋亡，细胞保护作用，促进各种肿瘤增殖， 本组实验结果与上述结论相同，h o 1 c o 可能通过抗凋亡，细胞保护作 用促进胃癌细胞生长。 很多学者研究了h o 1 c o 抗凋亡作用机制。s o a r e s 等【1 引、b r o u a d 等 1 9 1 研究了h o 1 氧化产物c o 抑制内皮细胞凋亡的分子机制，结果表明： c o 的抗凋亡效应是通过p 3 8 m a p k ( p 3 8 m i t o g e n a c t i v a t e dp r o t e i nk i n a s e ) 信号传导途径介导，n f y b ，以及n f 佃依赖的抗凋亡基因亚群的表达而 介导的。b r o u a d 等【19 】研究进一步指出，在内皮细胞中可呈现一定水平的 研究论文 n f y b 活性，该基础水平可激活n f y b 依赖的抗凋亡基因表达，以支持 h o 1 c o 抗凋亡效应。l i uz m t 2 0 】等人认为：h o 1 阻止胃癌细胞凋亡的机 制和突变型p 5 3 抗凋亡机制不相同。k w e o nm h 2 1 】等用a 5 4 9 细胞系实验 发现：由n r f 2 介导的h o 1 过度表达可以阻止细胞凋亡，从而阻止肿瘤 生长。本课题实验结果表明：h o 1 抑制胃腺癌【2 2 j 细胞凋亡的作用可能与 p 2 1 表达上调有关，具体的机制有待进一步研究。 本研究发现h o 1 表达于细胞的胞核内多见，少量见于胞质区。慢性 萎缩性胃炎是慢性非萎缩性胃炎的继续，可由慢性非萎缩性胃炎发展而 来。解放军总医院等6 个医院报告经5 8 年的随访观察非萎缩性胃炎1 6 4 例，其中3 4 例转变成慢性萎缩性胃炎( 2 0 7 ) 。慢性非萎缩性胃炎的病因 均可成为慢性萎缩性胃炎的致病与加重因素。众多研究表明，慢性萎缩 性胃炎视为癌前病变，为自身免疫性疾病，常有免疫指标的异常，据国内 小批病例观察报告，慢性萎缩性胃炎的癌变率约为1 5 - - 2 5 5 w t 2 3 】。 本研究发现从慢性非萎缩性胃炎一轻度慢性萎缩性胃炎_ 重度慢性萎缩 性胃炎一胃癌，见f i g 6 - f 毡l ，此进展过程中，h o 1 递增性增高，尤 其是h o 1 在胃癌中与在慢性非萎缩性胃炎及慢性萎缩性胃炎中表达有显 著性差异( p o 0 5 ) ，见t a b l e1 。在胃腺癌中高表达，h o 1 在慢性萎缩 性胃炎中也可见表达，而在慢性非萎缩性胃炎中无明显表达，对上述三者 h o 1 的阳性表达率的比较，发现胃腺癌发生发展过程中h o 1 表达增强， 提示h o 1 参与胃腺癌发生。h o 1 高表达增强了肿瘤细胞的抗杀伤能力， 使细胞抑制效应和死亡减弱。 本研究发现慢性萎缩性胃炎，胃粘膜轻度萎缩者参见f i g 2 ，呈现散 在性，单个细胞h o 1 阳性：而胃粘膜重度萎缩者参见f i g 1 ，呈现h o 1 弥漫性弱阳性，提示病情重者h o 1 表达强，病情轻者表达弱，此发生机 制国内外尚未见报道，有待进一步研究。此项结果进一步证实h o 1 参与 轻度慢性萎缩性胃炎_ 重度慢性萎缩性胃炎一胃癌发展历程。表明胃粘膜 进一步恶化有关，提示h o 1 可作为判断癌前病变及恶变的客观指标，成 为区分良恶性胃粘膜病变的一个显著标志物。 本研究中慢性萎缩性胃炎患者中h o 1 的表达高，对慢性萎缩性胃 炎患者及胃腺癌患者进行h o 1 的检测，为慢性萎缩性胃炎和胃腺癌的早 防、早治以及对其预后的评估提供依据【2 4 1 ，特别对慢性萎缩性胃炎作为癌 研究论文 前病变的患者敲响警钟及早调整自身的免疫功能以防癌变具有重要意义。 本研究发现，从慢性非萎缩性胃炎到慢性萎缩性胃炎再到胃癌，h o 1 的 表达呈递增趋势，表明在细胞增殖中具有重要意义。 本研究发现，胃癌h o 1 的表达与患者年龄、性别无显著相关性( p o 0 5 ) ，见t e b e l2 。表现为分化 越低的组织h o 1 表达越高，参见f i g 1 f i g 3 ，提示h o 1 分子还可能参 与了胃癌的进展，这可能对提示患者预后有重要意义。 总之，h o 1 可作为胃腺癌独立的预后指标，预见其生物学行为，评 估预后及选择合适的治疗措施意义重大；f a n g 等1 2 5 1 用聚乙烯乙二酯糖 结合锌原卟啉 p o l y ( e t h y l e n eg l y c 0 1 ) 一c o n j u g a t e dz n p p ，p e g z n p p 在体 内试验有阻止h o 1 活性及抗肿瘤作用，并经药代动力学检测发现血液中 z n p p 的维持时间比单用z n p p 长4 0 倍；体外试验结果发现p e g z n p p 诱发 了氧化应激并导致s w4 8 0 人结肠癌细胞凋亡。也许h o 1 调控表达将成 为胃癌治疗新靶点。 结论 本研究通过免疫组化检测胃腺癌、慢性萎缩性胃炎、慢性非萎缩性胃 炎中的表达得出以下结论： h o 1 在胃腺癌组织中的表达水平明显高于慢性萎缩性胃炎及慢性浅 表性胃炎组织中，且在胃腺癌组织中的表达与肿瘤患者年龄、性别无关， 与细胞分化程度呈负相关，说明h o 1 参与胃腺癌发生发展。h o 1 的高 表达，能预示肿瘤有较高的侵袭性和预后不良，是影响胃腺癌患者预后的 重要因素之一。因此，h o 1 可望成为胃腺癌诊断和评估预后的有用指标。 通过同步测定h o 1 在慢性萎缩性胃炎及慢性非萎缩性胃炎组织中， h o 1 能够早期发现和诊断胃腺癌。h o 1 表达水平可作为肿瘤和癌前期 病变的标志物。h o 1 在临床肿瘤的早期诊断、分级等方面更具参考作用， 具有深入研究价值。 h o 1 在胃腺癌中是一种可靠的细胞增殖指标，对预后与治疗作用有 待进一步研究。以h o 1 作为靶目标，通过调控h o 1 的表达而阻断肿瘤 复制，从而达到治疗肿瘤的目的。故h o 1 不仅可望成为胃腺癌诊断和评 研究论文 估预后的指标，还可作为治疗的新靶点。 参考文献 1 刘彤华肿瘤病理诊断与鉴别诊断学【m 】福建：福建科学技术出版 社，2 0 0 6 ；8 9 - 12 0 2 y i n gs h a n ，r i c h a r dw l a m b r e c h t ，t a h e r e hg h a z i a n i ，e ta 1 r o l eo fb a c h 一1 i nr e g u l a t i o no fh e m eo x y g e n a s e li nh u m a nl i v e rc e l l s jb i o lc h e m 2 0 0 4 ；2 7 9 ( 5 0 ) ；517 6 9 517 7 4 3 胡鹤本，朱人敏热休克蛋白9 0 a 与胃癌的关系 j 】医学研究生报， 2 0 0 4 ；17 ( 8 ) ；5 4 7 5 5l 4v a n 刚nj , v a n d e nb e r gj ，s o u r e nj e ，e ra 1 h e p a t o m ac e l l sa d a p t e dt o p r o l i f e r a t eu n d e rn o r m a l l y l e t h a l h y p e r t h e r m i cs t r e s s c o n d i t i o n ss h o w r a p i dd e c a yo ft h e r m o r e s i s t a n c ea n dh e a ts h o c kp r o t e i ns y n t h e s i sw h e n r e t u m dt o3 7d e g r e e sc j h y p e r t h e r m i a 1 9 9 5 ；11 ( 5 ) ；6 9 7 - 7 0 8 5 张学庸盾癌的基础研究与临床 m 北京；科学出版社；1 9 9 6 ；3 2 6 o l l i n g e rr ，y a m a s h i t ak ，b i l b a nm ，e ta 1 b i l i r u b i na n db i l i v e r d i nt r e a t m e n t o fa t h e r o s c l e r o t i cd i s e a s e si - j c e l lc y c l e 2 0 0 7 ；6 ( 1 ) ；3 9 7s c h a e rc a ，s c h o e d o ng ，i m h o fa ，e ta 1 c o n s t i t u t i v ee n d o c y t o s i so f c d16 3m e d i a t e s h e m o g l o b i n - h e m eu p t a k e a n dd e t e r m i n e st h e n o n i n f l a m m a t o r ya n dp r o t e c t i v et r a n s c r i p t i o n a lr e s p o n s eo fm a c r o p h a g e s t o h e m o g l o b i nej c i r cr e s 2 0 0 6 ；9 9 ( 9 ) ；9 4 3 8m i l l e rs m ，r e e dd ，s a r rm g ，f a r r u g i ag ，s z u r s z e w s k ij h h a e m o x y g e n a s ei ne m e t i cn e r v o u ss y s t e mo fh u m a ns t o m a c h a n dje ju n u m a n dc o l o c a l i z a t i o nw i t hn i t r i co x i d e s y m h a s e n e u r o g a s t r o e n t e r o l m o t i l 2 0 0 1 ；1 3 ；1 2 1 1 31 9 m u r t h ys ，f l a n i g a na ，c o p p o l ad ，b u e l o wr r d p 5 8 ，al o c a l l ya c t i v e t n fi n h i b i t o r ，i se f f e c t i v ei nt h ed e x t r a ns u l p h a t em o u s em o d e lo f c h r o n i cc o l i t i s i n f l a m mr e s 2 0 0 2 ；51 ；5 2 2 5 31 10b e r b e r a tp o ，a r a h i my i ，y a m a s h i t ak ，w a r n ym m ，c s i z m a d i ae ， r o b s o ns c ，b a c hf h h e m e o x y g e n a s e - 1 一g e n e r a t e d b i l i v e r d i n 1 6 一 研究论文 a m e l i o r a t e se x p e r i m e n t a lm u r i n ec o l i t i s i n f l a m mb o w e ld i s 2 0 0 5 ；11 ； 3 5 0 3 5 9 1 1p o s k d ，t o n e g a w a s r e d u c e ds t r e s sd e f e n s ei nh e m e o x y g e n a s e l d i f i c i e n e c e l l s p r o c n a t l a c a d s c i u s a 1 9 9 7 ；9 4 ；1 0 9 2 10 9 3 12b e r b e r a t p o ，d a m b r a u s k a s z ，g u l b i n a sa ，g i e s et ，g i e s en ，k u n z l i b ， a u t s c h b a c