（茶学专业论文）抗农残乌龙茶种质资源筛选及4种农药降解动态研究.pdf

独创性声明 本人声明，所呈交的学位( 毕业) 论文，是本人在指导教师的指导下独立完 成的研究成果，并且是自己撰写的。尽我所知，除了文中作了标注和致谢中已作 了答谢的地方外，论文中不包含其他人发表或撰写过的研究成果。与我一同对本 研究做出贡献的同志，都在论文中作了明确的说明并表示了谢意，如被查有侵犯 他人知识产权的行为，由本人承担应有的责任。 学位毕业论文作者亲笔签名：考磅啼 日期：如d 1 6 p 论文使用授权的说明 本人完全了解福建农林大学有关保留、使用学位( 毕业) 论文的规定，即学 校有权送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅：学校可以公布论文的全部或 部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。 保密，在年后解密可适用本授权书。口 不保密，本论文属于不保密。日 学位( 毕业) 论文作者亲笔签名：巷秀峰 指导教师亲笔签名2 坪令叶 ，rrt1 日期：硐6 p 日期：溯川 福建农林大学硕士学位论文 抗农残乌龙茶种质资源筛选及4 种农药降解动态研究 抗农残乌龙茶种质资源筛选及4 种农药降解动态研究 摘要 茶叶农药残留影响出口创汇，影响人体健康。本研究以福建省武夷山茶叶科 学研究所和安溪县茶叶科学研究所乌龙茶种质资源圃的资源为试验材料，将目前 部分乌龙茶中超标的4 种化学农药( 联苯菊酯、甲氰菊酯、氯氰菊酯和优乐得) 喷施于茶树，采摘鲜叶，并加工成千茶，烘干固样。用气相色谱法分析检测4 种 农药的残留量，从中筛选出抗农药残留的乌龙茶特异资源，在此基础上，从叶片 形态学和解剖学方面初步研究了低农药残留量的乌龙茶资源的抗农残机制；同时 对4 种农药在茶树上的田间自然降解动态和农药在茶叶加工过程中的降解率进 行了研究。主要研究结果如下： 1 筛选出抗联苯菊酯、抗甲氰菊酯、抗氯氰菊酯和抗优乐得残留的乌龙茶 特异资源各5 ，4 ，3 和7 份。 2 联苯菊酯、甲氰菊酯、氯氰菊酯和优乐得在铁观音鲜叶中的半衰期分别 为6 d 、5 d 、4 d 和4 d ，在武夷肉桂鲜叶中分别为7 d 、4 d 、3 d 和5 d 。 3 乌龙茶加工过程中，联苯菊酯的降解率在1 0 7 2 - 5 3 4 7 ，平均为 2 5 5 9 ；甲氰菊酯的降解率在9 0 9 9 9 4 5 ，平均为3 6 0 7 ；氯氰菊酯的降解 率在2 1 5 9 一9 2 2 3 ，平均为4 3 5 3 ；优乐得的降解率在1 6 6 7 1 0 0 ，平均 为4 1 8 4 研究表明，不同乌龙茶品种不同农药在加工过程中的降解率存在一 定的差异。 4 茶树品种对农药残留的抗性与叶尖形状、锯齿对数、角质层厚栅栏组织 厚的值、角质层厚腩镐组织厚的值、上表皮厚角质层厚的值、下表皮厚角质层 厚的值有密切关系。抗农残的茶树资源具有如下特征：叶尖急尖、锯齿对数多、 角质层与栅栏组织厚度之比低、角质层与海绵组织厚度之比低、上表皮与角质层 厚度之比高、下表皮与角质层厚度之比高；反之为高农残的茶树资源。 关键词：抗农药残留；乌龙茶；种质资源筛选；机制；降解动态 一1 一 福建农林大学硕士学位论文抗农残乌龙茶种质资源筛选及4 种农药降解动态研究 as t u d yo ns c r e e n i n gg e r m 吧i a s mr e s o u r c e s o fo o l o n gt e ap l a n tw 册 p e s t i c m e r e s i s t a n c ea n dd e g r a d a t i o n d y n a m i c so f4p e s i t i c m e s p e s t i c i d er e s i d u e si nt e ai n f l u e n c eo i lc o n s u m e rh e a l t ha n di m p a c te a r n i n g f o r e i g ne x c h a n g e u t i l i z i n go o l o n gt e ap l a n t ( c a m e l l i as i n e n s i s ) 0 勋n t z e ) i nt h e o o l o n gt e av a r i e t yg a r d e no ff u j i a nw u y i s h a na n da n x it e ar e s e a r c hi n s t i t u t ea s m a t e r i a l s ，4p e s t i c i d e s0 , 溉n t h r i n , f e n p r o p a t h r i n , c y p e r m e t h r i na n db u p r o f e z i n ) w h i c h p r e s e n t l ye x c e e dm r l i ns o m eo o i o n gt e a , w e r es p r a y e do ne x p e r i m e n tt e at r e e s ，t h e t e an e ws h o o t sw e r ep l u c k e da n dp r o c e s s e d , a n dt h e i rp e s t i c i d er e s i d u ec o n t e n t sw e r e d e t e r m i n e da n da n a l y z e db yg a sc h r o m a t o g r a p h y t h ec u i t i v a r so rl i n e sw i t h p e s t i c i d e - r e s i s t a n c eh a db e e ns c r e e n e d , a n dt h er e l a t i v e r e s i s t a n c em e c h a n i s mw a s s t u d i e db yt h ea p p e a r a n c ea n da n a t o m i c a ls t r u c t u r eo nt e al e a v e s a tt h es a m et i m e ， t h en a t u r a ld e g r a d a t i o nd y n a m i c so f4p e s t i c i d e so nt e an e ws h o o t sa sw e l la st h e d e g r a d a t i o nr a t eo f4p e s t i c i d e sd u r i n go o l o n gt e ap r o c e s s i n gw e r es t u d i e d t h em a i n r e s u h sw e r ea s 白 1 0 w s ： 1 t h eo o i o n gt e ap l a n tc u h i v a r so rl i n e sw i t hp e s t i c i d e - r e s i s t a n c eh a db e e n s c r e e n e d0 , 洫n t h r i n , f e n p r o p a t h r l n , c y p e r m e t h r i na n db u p r o f e z i no f5 ，4 ，3a n d7 ， r e s p e c t i v e l y ) 2 t h eh a l f - l i v e so f4p e s t i c i d e si nt i e g u a n y i nt e an e ws h o o t sw e r e6 0 , 5 0 , 4 d a n d4 d , r e s p e c t i v e l y i nw u y i r o u g u it e af l e ws h o o t s ，7 d4 0 , 3 da n d5 0 , r e s p e c t i v e l y 3 i no o i o n gt e ap r o c e s s i n gt h ed e g r a d a t i o nr a t eo fb i f e n t h r i nw a s 1 0 7 2 - 5 3 4 7 ，a v e r a g e d2 5 5 9 e e 珥 f o p a t l l r j n ，9 0 9 一9 9 4 5 ，a v e r a g e d3 6 0 7 ， c y p e r m e t h d n , 2 1 5 9 - 9 2 2 3 ，a v e r a g e d4 3 5 3 b u p r o f e z i n , 1 6 6 7 一1 0 0 ， a v e r a g e d4 1 8 4 r e s u l t ss h o w ：t h ed e g r a d a t i o nr a t e s i n o o l o n gt e ap r o c e s s i n g r e v e a l e dq u i t ed i f f e r e n t l yi nb o t h5c u l t i v a r ss u i t a b l et oo o l o n gt e aa n d4p e s t i c i d e s 4 t h er e s i s t a n c eo ft e ap l a n tv a r i e t i e st op e s t i c i d ec o r r e l a t e sw i t hl e a ft i n e s a w t o o t h , r a t i oo fc u t i nl a y e r p a l i s a d et i s s u e ，r a t i oo fc u t i nl a y e r s p o n g yt i s s u e ，r a t i oo f u p p 盯e p i d e r m i s c u t i nl a y e ra n dr a t i oo fl o w e re p i d e r m i s c u t i nl a y c f t h et e ap l a n t ，2 福建农林大学硕士学位论文 抗农残乌龙茶种质资源筛选及4 种农药降解动态研究 v a r i e t i e sw i t hp e s t i c i d e - r e s i s t a n c eh a dc h a r a c t e r sa sf o l l o w s ：s h a r pl e a ft i n e m o s a wt o o t h , l o wr a t i oo f c u t i n l a y e rt op a l i s a d ct i s s u e ，l o wr a t i oo f c u t i nh y 盯t os p o n g y t i s s u e , h i g l lr a t i oo f u p p e re p i d e r m i st oc u t i nl a y e ra n dh i g hr a t i oo f l o w e re p i d e r m i st o c u t i nl a y e r a n dt h et e ap l a n tv a r i e t i e sw i t hh i g hp e s t i c i d er e s i d u ec o n t e n tr e v e r s e d k e yw o r d s ：p e s t i c i d e r c s i s t 目l p _ c c ，o o l o n gt e a , g e r m p l a s ms c r c c n i n 舀m e c h a n i s m , d e g r a d a t i o nd y n a m i c s 3 福建农林大学硕士学位论文抗农残乌龙茶种质资源筛选及4 种农药降解动态研究 第1 章绪论 1 1 我国茶树种质资源的研究进展及展望 我国茶树种质资源极其丰富，是创造新品种的宝贵材料。从2 0 世纪舳年代 开始，我国茶树种质资源的研究系统化，并取得了重要成就与显著进展。本文从 茶树种质资源的考察征集、资源研究、抗性育种、资源筛选等不同角度对茶树种 质资源作一综述，报道如下。 1 1 1 茶树种质资源的考察征集 为了更好地保存和利用自然界茶树资源的多样性，丰富和充实育种工作和生 物学研究的物质基础，种质资源工作的首要环节和迫切任务是广泛发掘和收集种 质资源。 我国的茶树种质资源研究工作早在3 0 年代就开始了，建国后各地也先后开展 了品种调查和征集工作，但系统地、全面地开展考察、征集、分类、鉴定却是在 踟年代【l 】我国于5 0 年代至6 0 年代中期，在全国各重点茶区进行了茶树品种资源 的调查，初步掌握了品种资源概况及其分布随后，陆续展开品种资源的收集和 保存工作。8 0 年代初，再次进行了种质资源的考察与收集，得到了大批的茶树种 质资源。1 9 9 0 年，国家种质茶树资源圃分别在浙江杭州和云南勐海建成，总面积 达4 i l i n 2 【删。1 9 9 1 1 9 9 9 年对桂西北、桂中南1 8 个县市进行茶树资源考察，共收集 野生、栽培和非山茶科植物1 1 5 份。其中国家一级保护珍贵植物金花茶4 份，二级 保护珍贵茶种野生大茶树1 2 份1 4 】。 2 0 0 1 年，共收集到来自1 9 个省( 区) 及8 个国家的野生茶树、农家品种、育 成品种、育种材料、珍稀资源和近缘植物等2 7 2 1 份【5 】，并按2 9 个性状进行了整 理编目，首次编印国家种质茶树圃保存资源名录，建成了“中国茶树种质资 源数据库系统”。福建、湖南、广东、广西、江西、贵州等茶叶主产省区也相继 建起了地方茶树种质资源圃，其中福建省茶叶研究所收集了国内外8 3 2 个茶树品 种( 品系) ，4 0 0 0 多份茶种质，成为我国乌龙茶种质资源的保存中心嘲。湖南省茶 叶研究所至2 0 0 1 年收集保存国外、省外、本省地方良种、特色单株( 或株系) 共 1 0 0 0 余份川，选种材料圃拥有多个杂交组合的f 1 代。此外，我国台湾省保存种 质资源3 0 0 余份嘲。到2 0 0 3 年底，建立在中国农业科学院茶叶研究所的国家种 质杭州茶树圃和云南省农业科学院茶叶研究所的国家种质勐海植物分圃作为茶 树资源的迁地保存基地，共保存各类资源2 6 6 5 份，其中茶组植物2 6 3 6 份( 包括 待定名9 5 份) ，山茶科非茶植物2 3 份，其他非山茶科植物6 份【9 】 福建省农科院茶叶研究所建所6 0 余年来，先后建立了茶树品种观察园、福 建省乌龙茶品种资源圃与选种材料种质库5 处，总面积达5 0 多亩。征集、保存 了1 0 0 0 多份茶树品种资源，4 0 0 0 多个种质，并对茶树品种资源进行了系统研究， 4 福建农林大学硕士学位论文抗农残乌龙茶种质资源筛选及4 种农药降解动态研究 编著出版了我国第一部 川茶群体种 云南大叶种。 1 1 3 2 抗旱性研究进展 对水分胁迫下茶树的生理生化变化的研究发现 2 9 , 3 0 l ：在短期水分胁迫下，叶 细胞相对透性和脂质过氧化水平的产物丙二醛o 订d a ) 含量增加，二者呈显著正相 关，茶树的干旱伤害与脂质过氧化之间存在着密切关系。而脂质过氧化是不饱和 脂肪酸共价键上的自由基活动的结果，因此降低细胞中的自由基浓度便可以成为 提高抗旱性的途径。抗旱性强的品种在非胁迫环境下体内有较高的c a t 活性，在 胁迫条件下s o d 、c a t 活性提高到较高水平，以抵抗自由基对叶细胞的伤害，而 m d a 产生相对缓慢，叶片膜系统受损伤较轻，抗旱性弱的则相反；在强度干旱 的胁迫下，耐旱性强的品种能维持相对较高的叶片含水量及蒸腾速率和气孔导 度，并具有相对较高的水分利用率，在灌水处理时耐旱型品种也较敏感型品种具 有较高的水分利用率。 潘根生等1 3 1 l 研究表明，在水分胁迫下：茶树叶片含水量浙农1 1 3 福鼎白毫 云旗 紫笋；叶片内源i a a 、a b a 和p r o 迅速积累，z t 含量下降，a b a 含 量的变 化与i a a 含 量呈线性正相关；i a a 召 量变化与叶片含水量呈线性负相关；p r o 含量 的变化与叶片含水量呈线性负相关，与a b a 含量呈线性正相关，轻度干旱条件下 p r o 的增加与抗旱性有关。耐早型茶树具有相对较高的a b 玎比值和水分利用 率，两者可作为耐旱型茶树的育种指标。 陆德彪等p 2 】应用隶属函数值法，以叶片抗脱水性，叶片相对电导率、干旱处 理后s o d 活性，s o d 干旱胁迫指数、干旱处理前c a t 活性、干旱处理后c a t 活性、 根系长度、根冠比等8 个对抗旱力有不同程度贡献的生理生化及形态指标，对来 源广泛的9 6 份茶树种质材料进行了抗旱性评定。结果表明，我国茶树种质资源抗 旱能力存在较大差异，从中发现了一批抗旱力强的种质材料，同时还发现杂交后 代的抗旱能力均弱于其亲本的抗旱能力。 1 1 3 3 抗病虫性研究进展 高旭晖【l 认为：茶树的机械抗病性在于它固有的防御结构和侵染后形成的机 械防御结构。茶树抗病性的生化基础包括两个方面阻】：先天性的生化防御和病原 物诱导的代谢防御 陈华才l 第1 分析了对茶橙瘿螨抗性和感性的两组无性系茶树新梢叶片下表面 形态特征、叶片组织结构和新梢内含物含量。表明了茶树新梢叶片下表面多茸毛、 低气孔密度的形态学抗螨机制和新梢高氨基酸、咖啡碱含量和低还原糖含量的生 化抗螨机制。刘奕清等 3 6 1 研究结果表明，不同抗侧多食跗螨茶树品种问新梢叶片 的下表面形态学和生物化学方面存在着明显差异。茶树新梢叶片茸毛多、气孔密 度低、下表皮角质化程度高的形态特征成为形态学抗螨机制，主要构成螨类取食 8 福建农林大学硕士学位论文抗农残乌龙茶种质资源筛选及4 种农药降解动态研究 行为的障碍因子；新梢中高咖啡碱和氨基酸含量、低可溶性糖含量的生化特征成 为生化抗螨机制。 黄亚辉吲对虫口密度田间调查和室内水培试验调查表明，茶树品种间对假眼 小绿叶蝉抗性存在着显著的差异显微观测和数理统计分析表明，茶树叶片栅栏 组织厚度( x1 ) 、海绵组织厚度( x 2 ) 、主脉下方表皮厚度( x 3 ) 和主脉下方厚 角组织厚度( x ) 与假l i d , 绿叶蝉的虫e l 密度( y ) 呈极显著负相关，其回归方 程为y = 7 5 2 6 7 7 5 0 x1 1 7 9 4 x 2 + 1 4 2 7 x 3 1 4 6 0 x 4 。 黄亚辉等印】通过分析茶树新梢解剖结构、叶片厚度、新梢有关特性及主要化 学成分含量等方面与茶树受丽纹象甲危害的被害指数之间的相关性，结果表明： 茶树叶片上表皮厚度与被害指数呈显著负相关；新梢叶片厚度与被害指数呈极显 著负相关；茶树发芽期、芽梢持嫩性、芽叶颜色与被害指数有一定相关性，但未 达到显著水平；芽梢几种主要化学成分含量与被害指数的相关性亦不显著。 许宁等i 别以茶树一茶尺蠖单白绵绒茧蜂三级营养关系为模式，从寄主 选择行为和茶树一茶尺蠖交互作用的角度，探讨了茶树借助天敌绒茧蜂间接防 御茶尺蠖危害的机制。结果表明，茶尺蠖取食茶树，其口腔分泌物作用于损伤部 位，致使茶树释放出与完整新梢完全不同的挥发性化合物( 互利素) ，强化了天敌 昆虫( 单白绵绒茧蜂) 的寄生效率，减轻了茶树的受害程度。其间，茶尺蠖幼虫口 腔分泌物中的b 肛葡萄糖甘酶为一使茶树释放挥发性互利素的启动子。初步分析 表明，茶树释放挥发性互利素所消耗的光合产物仅占茶树全部光合量的极少部 分。 1 1 4 我国茶树资源筛选研究进展 1 1 4 1 抗性资源筛选 在抗性茶树资源筛选方面，虞富莲等i 叫共进行y i 5 0 份资源的抗寒性鉴定， 筛选出强抗的资源2 8 份，并认为不同类型茶树受冻的临界温度不同，云南大叶种 为3 ，广西大、中叶种为6 0 ，而北部中小叶种为1 0 ( 2 。洪北边等【4 1 1 进行3 1 6 5 份资源对假眼小绿叶蝉、茶尺蠖、茶橙瘿螨、咖啡小爪螨、茶跗线螨、茶云纹叶 枯病、茶轮斑病、茶苗根结线虫病等的抗性鉴定，共鉴定出高抗假眼小绿叶蝉资 源2 1 份，高抗茶尺蠖资源1 1 份，高抗螨类资源1 5 份，高抗茶云纹叶枯病资源6 份， 高抗茶轮斑病的资源1 0 份，高抗茶苗根结线虫病的5 份，并建立了相应的鉴定指 标。 王庆森等 4 2 【= ! a m 室内单位叶面积产卵量、蛹壳数、田间虫口密度和世代存活 率为指标，研究了黑刺粉虱对1 2 个茶树品种的选择性。结果表明：黑刺粉虱对供 试的1 2 个茶树品种的选择性存在极显著差异，对g 3 1 ，福云1 0 号、铁观音和白鸡 冠等品种的选择性较强；对丹桂、f f 5 1 0 、优3 、玉龙和九龙袍等品种的选择性较 9 福建农林大学硕士学位论文抗农残乌龙茶种质资源筛选及4 种农药降解动态研究 弱。以网室内单位叶面积产卵量为指标能客观反映出黑刺粉虱对茶树品种的选择 性，为抗虫品种的选育与利用提供依据。 1 1 4 2 优异及特异资源筛选 龚志华等【4 3 i 对品质上具有一定优异性的1 9 个茶树品种的春茶l 芽2 叶固定样 进行了水浸出物、茶多酚、氨基酸、咖啡碱、儿茶素分析，结果表明，白毫早， 3 7 - - 2 ，福安大白具有高水浸出物( 4 5 ) 特性；碧香早，3 7 - - 2 ，福安大白茶具有 高茶多酚( 3 4 ) 特性；苹云具有高氨基酸( 4 5 ) 特性；白毫早，福安大白茶， 水仙8 4 一l 具有高表没食子儿茶素没食子酸酯( 7 ) 特性；水仙8 4 - - 1 具有高咖啡碱 ( 4 ) 特性。 王新超等卅】对云南茶区为主的1 2 0 份茶树资源进行系统的发掘和鉴定，探明 了我国适制红碎茶资源的基本情况，筛选出一批优异红碎茶资源。林金科等【4 5 l 用等度高效液相色谱法，分析检测4 5 个品种或株系的春梢、夏梢、秋梢酯型儿茶 素含量，筛选出高酯型儿茶素含量的茶树特异资源。 1 1 5 我国近期茶树种质资源研究设想和展望 近期我国茶树种质资源研究工作的重点主要有以下几个方面：继续收集种质 资源，加强茶树种质资源持久保存技术研究，在个体与基因水平上深入鉴定评价 研究，加强种质资源创新研究，不断提供新基因源，开展茶树d n a 库研究，加 强计算机在种质资源收集保存管理中的应用，建立茶树种质资源共享平台f 9 】。深 入持久地对茶树种质资源进行研究，必将对发展茶业，提高经济效益和社会效益， 产生重要作用和深远影响p 】。 1 2 我国茶叶农药残留的研究进展及展望 茶叶中的农药残留，除部分源自被污染的环境外，其主要来源是直接施用化 学农药。本文参阅了2 0 世纪7 0 年代以来有关茶叶中农药残留的报道，从农残影 响茶叶出口创汇、茶叶农残自然降解动态、茶叶农残降解技术和茶叶农残分析检 测技术几方面对我国茶叶农药残留研究进展作一简要的综述。 1 2 1 茶叶农药残留影响出口创汇 茶叶作为天然健康饮料越来越受到消费者的青睐。近年来，饮茶在欧洲成为 一种时尚。我国是世界茶叶主要生产和出口国之一，尤以绿茶、乌龙茶、白茶、 花茶等闻名于世。但最近，由于茶叶农药残留量等问题，我国对欧盟茶叶出口开 始呈现急剧下降的趋势，其中对德国尤为明显。加之当地一些新闻媒体的负面报 道，我国茶叶形象严重受损。如不立即采取有效措施，我国在德国茶叶市场上的 份额必将继续萎缩，最后甚至有可能不得不退出德国乃至欧盟市场。 1 2 1 1 农药残留影响茶叶出口 1 0 福建农林大学硕士学位论文抗农残乌龙茶种质资源筛选及4 种农药降解动态研究 由于长期以来茶园病虫害严重，部分山区的茶农忽视农药的正确使用，致使 茶叶中农药残留量高，严重超标，再加上9 , 2 0 0 0 年7 月开始，欧盟制订的新标准 大大缩小了农残限量指标，致使我国茶叶的出口受到了严重影响。因此：a 2 0 0 0 年以来，我国茶叶生产一直处于低迷状态，严重影响了山区农民的经济收入和地 方财政收入 在欧盟实施新的茶叶农残检验标准后，我国对欧盟茶叶出口大幅下降，2 0 0 2 年我国对欧盟茶叶出1 ：3 1 4 5 万吨，金额2 5 5 8 万美元，同比再次分别下降3 2 1 8 和 2 9 0 3 。日本在国内政治和经济的影响下，加强了对进口农产品的农残检验力度， 严重影响了我国对日茶叶出口量。据海关统计，2 0 0 2 年我国对日茶叶出c 1 3 1 9 万 吨，金额7 1 7 0 万美元，同比分别下降1 9 4 1 、2 0 6 2 1 4 6 1 。 据了解，2 0 0 3 年中国农产品因“技术壁垒”而遭受的损失达到9 5 亿美元。2 0 0 4 年欧盟实施新的茶叶农药残留标准。2 0 0 5 年8 月1 日欧共体茶叶农残新标准生效， 对农残的要求更加细致，同时日本、韩国等对农残的要求也逐渐提高，这对我国 茶叶出口造成了新的冲击1 4 7 1 。2 0 0 6 年1 至4 月，我国茶叶出口量8 4 9 万吨，与去年 同期相比，数量下降8 6 1 。2 0 0 6 年5 月2 9 e i 起日本实施新的食品卫生法，其中对 茶叶农药残留限制也有明显的变化，设限农药由8 3 种增加到约1 4 4 种。欧盟、日 本实施新的农药残留标准后，美国、澳大利亚、俄罗斯和非洲的摩洛哥、尼日利 亚等国家纷纷仿效，提高对茶叶农药残留的检测标准，对进口茶叶进行严格的限 制【档】。 1 2 1 2 原因 欧洲各国针对茶叶进口的农药残留检测标准，每年都在不断提高和扩大范 围，有一些标准。近乎苛刻”，被称为是我国茶叶对欧洲出口的“绿色壁垒”， 导致我国的茶叶出口量大幅度滑落。 虽然世界上不少国家在一定程度上是为了限制他国农产品进口而设限，但毋 庸置疑的是，对照国际检验标准，目前我国不少茶叶的确存在农药残留和卫生质 量不符合标准的问题。专家认为，相比日本的标准，我国的标准显然还是低很多。 据悉，我国关于茶叶的农残和污染物检测项目只有十几项，即使算上农业部禁止 使用的3 9 种农药，我国现行有关茶叶的农残及污染物的限量项目也就是5 0 多种而 已，与欧盟及日本相比，确实差距甚大m 。 1 2 2 茶叶农药残留自然降解动态研究进展 到目前为止，有关农药在茶叶鲜叶中的自然降解动态研究的报道不少，但所 研究的农药种类大致可以分为3 种：有机磷农药( 亚胺硫磷、辛硫磷、乐果、喹 硫磷、哒螨灵) 1 5 0 - 5 4 1 ，拟除虫菊酯农药( - - 氯苯醚菊酯、溴氰菊酯、速灭杀丁、 氯氰菊酯、联苯菊酯、溴氟菊酯) 5 5 - 4 s 0 1 和其他农药( 赛丹、罗速发、优乐得) 6 1 - 6 3 1 。 1 1 福建农林大学硕士学位论文抗农残乌龙茶种质资源筛选及4 种农药降解动态研究 据研究，亚胺硫磷以喷药后第一天残留量下降最为迅速，平均在5 0 左右， 以后的消失速度较慢，喷药后9 d 鲜叶中的亚胺硫磷消失。药剂的残留时间受实 验期间的降雨量影响较大，与温度关系不大。茶树上喷洒亚胺硫磷后，其消失期 与上药量无关闭。辛硫磷喷在茶树叶表后迅速分解，在自然日照条件下4 小时后， 鲜叶中( 以干重计) 残留量即由基数的5 0 7 8m g k g 下降到6 3 6m g k g ，相当于 基数的1 2 5 0 ；i d 后降到2 4 6m g k g ，相当于基数的5 0 0 以下，2 d 后为痕迹 量到无残留。辛硫磷光敏性极强，可见光线( 特别是紫外光) 对辛硫磷的分解具 有明显的影响，处于遮荫条件下茶叶中的辛硫磷残留量消失速度明显地较处于自 然日照条件下的为慢【5 1 1 。4 0 乐果乳剂8 0 0 倍液喷在茶树叶表，原始附着量为 1 0 3 5 0 - 1 5 8 5 0 m g k g ( 以干重计) ，在茶园自然条件下迅速降解，喷后1 d 鲜叶含 量即降至2 5 0 4 - 3 6 0 3 m g k g ，喷后9 d 鲜叶中含量均低于0 6 0m g k g ，喷后l l d 均低于0 1 0m g k g 乐果在茶树鲜叶上的降解呈现典型的二阶程线性关系：先是 一个迅速降解阶段，然后进入一个缓慢降解的阶段。从乐果残留量在茶树鲜叶叶 表和内部的分配比例的研究表明：除喷药当天( 喷药后半小时取样) 在叶表的乐 果含量占总含量的比例较高外，以后，叶表所占比例很低，并有逐渐下降的趋势。 喷洒8 0 0 倍和1 6 0 0 倍液乐果后，1 6 0 0 倍液处理鲜叶中乐果降解稍快【5 孙。喹硫磷 在茶树叶片上降解速率中等。尽管喹硫磷在不同浓度施药处理中的原始着药量不 同，但其降解速度基本相似。喹硫磷在长沙的降解速度比杭州快，这主要是当地 气候条件和茶树新梢生长速度综合作用的结果【5 ，】。哒螨灵在茶树叶片上降解速率 中等，与喹硫磷降解速度相似。2 0 0 0 倍液处理的降解速度与4 0 0 0 倍液处理相仿， 略慢一些畔l 。 二氯苯醚菊酯在自然条件下相当稳定，降解速度比常用有机磷农药慢。1 0 乳剂3 0 0 0 倍液喷在茶树叶片上，鲜叶中原始附着量( 以干重计) 平均为2 2 5 0 m g k g ，喷后1 2 d 降至1 o o m g k g 以下；5 0 0 0 - - 6 0 0 0 倍液处理l o d 后降至1 0 0 m g k g 以下。二氯苯醚菊酯在茶树鲜叶上的降解呈现二阶程形式。不同施药方法对二氯 苯醚菊酯降解影响较大，超低容量喷雾的降解速度明显较常规喷雾慢。二氯苯醚 菊酯在嫩芽上的降解速度较老叶快。二氯苯醚菊酯的渗透力很弱，在鲜叶表面始 终保持一个较高的比例，而不像一般有机磷农药随着时间的推移叶表所占比例逐 渐减少【5 5 】。溴氰菊酯降解速度很慢，比常用有机磷农药慢，比二氯苯醚菊酯也要 慢。不同浓度药液处理的降解速度基本近似溴氰菊酯在茶树鲜叶上的半衰期： 4 0 0 0 倍液3 2 d ，6 0 0 0 1 0 0 0 0 倍液2 8 0 d 。溴氰菊酯的渗透力与二氯苯醚菊酯属同 等水平，但显著较有机磷农药为弱降】。速灭杀丁较为稳定，降解速度较慢，在长 沙的降解快于杭州，这种差异除了与当地的气候条件( 气温、光照等) 有关外， 茶树品种、生长势也是影响其降解速率的因素。速灭杀丁由叶表向叶内的渗透力 1 2 福建农林大学硕士学位论文抗农残乌龙茶种质资源筛选及4 种农药降解动态研究 很弱田】。氯氰菊酯降解较快，其降解速率快于溴氰菊酯和速灭杀丁，在常用剂量 6 0 0 0 倍施药下，原始附着量为弘8m g k g ，一周后鲜叶中的残留量( 干重计) 平 均为1 1 2n 培k g ，降解率平均为8 4 7 0 。春、夏两季氯氰菊酯在茶叶鲜叶上的 半衰期分别为2 5 0 d 和1 8 0 d ，平均2 2 0 d 。安绿宝和兴棉宝在相同条件下的降解 速率无明显差异，说明这两种制剂的填充剂和乳化剂对氯氰菊酯的降解没有影响 或只具有极小的影响。顺式氯氰菊酯的降解速率( 半衰期2 7 0 d ) ，慢于混合型 氯氰菊酯安绿宝( 半衰期2 1 0 , 1 ) ，表明在环境中顺式结构较反式结构稳定瞰l 。 联苯菊酯是一种高效、低毒、安全间隔期较短的杀虫杀螨剂，适宜于在茶叶生产 中推广应用。联苯菊酯降解速度较慢，半衰期平均为3 2 0 d ，比氯氰菊酯( 2 5 0 d ) 长，与溴氰菊酯和速灭杀丁相近例。溴氟菊酯降解速度很慢，显著低于常用的有 机磷农药，比溴氰菊酯、二氯苯醚菊酯也低。在茶树鲜叶中的半衰期为；高浓度 处理平均为3 4 5 d _ + 0 2 0 d ，低浓度处理平均为3 9 0 d 0 5 2 d ，不同浓度间差募不大 【卯1 。 赛丹在茶树鲜叶中的降解速率较快，半衰期平均为3 6 6 d _ - - 0 3 1 d 。在常量下， 施药后的安全间隔期为7 d r 6 1 1 。罗速发降解速度中等，2 罗速发1 3 3 3 倍稀释液 ( 常量) 喷药后7 d ，其残留量平均为0 2 5 m g k g ，6 6 7 倍稀释液( 加倍剂量) 为 0 4 1 m g k g ，平均降解率为9 2 3 0 - 9 3 9 0 其安全间隔期常量处理为7 d ，加倍 剂量为1 0 d 1 6 2 1 。优乐得在茶叶中的降解在喷药后的前1 5 d 较快，而后明显减缓， 喷药后1 5 d 的茶叶中优乐得的降解速率达9 9 以上，残留量在0 3 0 m g k g 以内， 但喷药后2 5 d 茶叶中优乐得残留量仍大于0 0 1 m g k g ，建议喷药1 5 d 后为采茶安 全期嘟】。 1 2 3 降低茶叶农残研究进展 1 0 3 1 政策法规 政府要为茶叶安全生产营造良好的环境，大力宣传农药残留的危害性和控制 农药残留的紧迫性。陈荣冰研究员指出t 6 4 1 ，首先，各级政府要高度重视，应成立 茶叶食品安全领导小组，加强领导，狠抓落实，构建茶叶食品安全科学管理体系； 其次，生产管理部门，农资部门，质量技术监督部门等要共同配合，各负其责， 严格禁止销售与使用剧毒高残留农药，尽快建立健全茶叶卫生质量保障体系。其 三，应成立茶叶食品安全技术专家组，对茶业有关人员开展有关茶叶食品安全科 技培训，构建完善的茶叶食品安全生产技术体系。 1 2 3 2 农药残留降解技术研究进展 孙威江教授等【酷】通过试验，确定了降解茶树及土壤中有机氯农药f 六六六、 滴滴涕1 残留的3 项有效农艺措施：一，根部施用n h 4 h c 0 3 与泥炭土混合堆沤的 肥料或单独施用n i l 4 h c 0 3 ；二，茶树修剪，其中以深修剪效果最好，其次为重 1 3 福建农林大学硕士学位论文抗农残乌龙茶种质资源筛选及4 种农药降解动态研究 修剪和轻修剪；三，叶面喷施稀土元素、n a h c 0 3 和腐殖酸钠等，三者的最适宜 浓度分别为1 0 0g 几、2 5 0 i n g l 嘻和4 o o g a 利用微生物所分泌的酶类降解农作物中的农药残留物，最终变成二氧化碳和 水等无害物质。将降解剂直接撤到田中或农作物的茎叶后，经过5 7 d 就可将8 0 的农药残留物除去。陈天霓陋l 采用在茶叶加工过程中添加外源性酯水解酶的方法 可使茶叶中敌敌畏残留量减少8 0 以上。孙继鹏等【6 7 l 发现通过提高加工过程中 茶鲜体内的磷酸酯酶活性也可使敌敌畏分解。 杜德红等【醴l 以茶叶多糖o 甲s ) 为配体与四价的铈( c e “) 结合，形成了水溶性的 茶叶多糖铈配合物( c c t p s ) 。在中性条件下，t p s 及c e - t p s 对质粒d n a ( p l a s m i d d n a ) 有一定的裂解作用，对有机磷农药毒死蜱有很强的降解作用。 作为中长期措施，游小妹p 魄出应提倡林茶、果茶、胶一茶等复 合栽培模式，在茶园周边可适当栽种一些开花植物，营造多种生物共存互惠的环 境，有利于招引一些茶园害虫天敌( 如蜂类、鸟类等) 的栖息，可以有效地控制虫 害蔓延和爆发。 1 2 3 3 提高农药残留检测水平 就目前的技术水平，无法满足收购中对残留物质的快速检测的要求。因此， 政府和科技部门，要大力加强对残留物质快速检测的科技投入，提高茶叶残留物 质快速检测的技术水平，以满足市场的需要据德国茶叶协会称，中国农科院杭 州茶叶研究所由于专业性强，近年来与欧方交流与合作密切，可以检验绝大多数 欧方要求的农残茶样，其结果欧方也认可。建议商检部门尽快派技术交流专家组 赴欧考察，掌握欧方认可的检验方法。如果茶叶卫生质量的检测和认证能够完全 在国内进行，将为我国茶叶出口提供更为便利的条件印】。 1 2 3 4 加大生物农药的科研开发力度，积极进行生物农药防效试验 消除化学农药的危害，己成为各国十分注意的课题。因此，9 0 年代以来全 世界化学农药的销售量不断下降，代之而起的是微生物农药。苏云金杆菌第二代、 第三代生物工程杀虫剂己逐步替代天然菌株生产，成为当今世界该领域发展的方 向【7 1 1 。发展生物农药对于保证茶叶的生产，保障人们的生命与健康，保护生态环 境都有十分重要的作用。使用纯生物农药，改变了过去茶叶害虫防治长期采用化 学农药毒杀、触杀的传统方法，运用了人工制造“虫瘟”的全新杀虫概念。利用 有益生物进行生物防治是茶园害虫生态调控的有力手段。政府及科研技术部门要 大力研制生物农药，从源头上减少直至消除农药滞留。科研技术部门要加强农药 品种，特别是生物农药的开发、引进和实验推广；要提出不同病虫害的防治对象， 不同常规农药品种的替代品种，重点突破生物农药见效慢的问题。确定化学农药 和生物农药配套使用技术，使茶园生态逐步趋向良性循环，为建立有机茶生产基 1 4 福建农林大学硕士学位论文抗农残乌龙茶种质资源筛选及4 种农药降解动态研究 地打下基础。在防治中，首先使用高效、低毒、低残留农药，逐步降低害虫的发 生量，减少害虫的发生峰次，逐步减少化学防治次数和用量。其次进行生物农药 和植物农药的防效比较试验，以便确立化学农药、生物农药、植物农药的配套使 用技术网 1 2 3 5 做好农药知识的宣传普及工作 要普及茶园中农药使用的新技术和新知识，宣传普及茶园有害生物的综合治 理技术，加强对茶厂的管理和整顿，提高卫生条件。搞好技术培训，提高茶农素 质。通过举办茶叶技术培训班，讲授茶叶生产和科学防治病虫害技术，提高茶农 的科学管理水平。每一批采摘茶叶的有关农药喷洒记录( 其使用的农药、浓度及 喷洒的间隔时间) 要由茶农做成。比如，从茶园采摘茶叶、制作粗茶到贩卖，其 每一过程都应该把喷洒农药的记录一起提出，这是保证农药安全性的一项重要措 施。茶叶收购产地的加工工厂，在混合不同批次的茶叶之前，应先确认喷洒在茶 叶上的农药是否安全并作好确认记录m ，7 2 力l 。 农药高残留问题不好在短时问内解决，但这一问题不是环境造成的，问题主 要出在农业生产的过程上据调查，农药高残留问题由环境造成的还不到1 。 在现有的环境条件下，如果做到了过程控制，农产品质量会很快提高。之所以短 时间内不好解决，就是实现“过程控制”本身存在难度。而要实现“过程控制”， 必须培训、认证、监督抽查三个方面同时推进。 1 2 4 茶叶农药残留分析检测技术研究进展 出于维护本国经济利益和保护人们健康的需要，目前世界各国都十分重视提 高茶叶农药残留检测技术，我国也不例外本文对国内一些新的茶叶农残分析检 测技术的研究进展做一总结，希望能为提高我国的茶叶农残检测技术，加强茶叶 质量安全的监督管理，保障消费者健康提供一些借鉴。 农药残留检测是一个检测低水平含量物质的检测过程，在化学分析中属于微 量分析和痕量分析。茶叶农残检测的整个过程包括了样品制备、浸泡提取、净化 浓缩、仪器测定等多个环节，可以讲茶叶的农残检测过程是一个系统的、高技术 含量得到充分体现的多重交叉技术体系【7 4 1 。 楼玉彤l 采用c _ , c - m s 对样品进行初筛及对阳性样品定性分析，测定了5 种拟除 虫菊酯类农药( 联苯菊酯、甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、氯氰菊酯和氰戊菊酯) 的残留量，回收率均为8 5 1 0 6 ，相对标准偏差均小于1 0 。同时由于欧盟对 茶叶中多种菊酯类农药规定了严格的检出限量，g c - ue c d 用于菊酯类农药的检 测灵敏度高，测定结果可靠，检出限都低于欧盟对茶叶的限量要求，因此可以满 足茶叶出口欧盟的检测要求。 叶江雷【7 6 佣毛细管气相色谱法同时测定了茶叶中优乐得、甲胺磷、乙酰甲胺 1 5 福建农林大学硕士学位论文抗农残乌龙茶种质资源筛选及4 种农药降解动态研究 磷、敌百虫、乐果，甲基对硫磷、水胺硫磷、三唑磷、伏杀硫磷等9 种农药的残 留量，回收率为6 9 2 0 一1 0 1 4 0 ，检出限在0 0 1 - 0 0 3 m g k g ( - v 重) 之间。优化了 张水坝( 2 0 0 4 年) 印l 的方法，该方法具有操作简单、耗时少、灵敏度高和试剂消 耗少等特点，能满足实际生产过程的需要 黄盈煜闱利用g p c 和s p e 相结合的净化方法对茶叶中6 种农药( 六六六、 d d t 、三氯杀螨醇、氯菊酯、氯氰菊酯和氰戊菊酯) 进行了测定，同时采用自己 填充的小型g p c 柱( 1 0m m x 2 7 0m m ) ，消耗的有机溶剂少，可反复使用，投资成 本低廉，且操作简单易行，净化效果显著，同时采用超声波法对样品进行提取， 回收率、精密度均符合农药残留检测要求。 蒋迎【7 9 l 选用h p - 5 和d b 1 7 0 1 不同极性毛细柱对茶叶中拟除虫菊酯类农药残 留进行了双柱气相检测技术的初步研究，该方法是目前提高茶叶农残检测的准确 性，降低单柱气相色谱法检测结果误判率的较佳实用选择，值得进一步研究探讨， 上升为茶叶农药残留检测标准方法。 汤富彬嗍用薄层层析法检测茶叶中甲氰菊酯和氰戊菊酯农药残留量，检出的 结果与用气相色谱法检出的结果基本一致，但所要求的仪器较简单，方法操作重 现性较好，具有一定的准确度和灵敏度，对于田间和市场的快速筛选而言，是一 种有效而快速的方法。 温裕云碑1 i 利用柱后光化学反应荧光检测高效液相色谱法测定茶叶中菊酯类 农药残留，用自制的光化学反应器作为荧光衍生装置，优化了柱后光化学反应的 实验条件，方法的检出限为0 0 1 - 0 0 5 t t g g ( 干重) ；该方法的检测能力完全满足欧 盟对茶叶中农药最高残留量( m r l