（运动人体科学专业论文）不同运动时间冷水游泳对胃溃疡发生情况的实验研究.pdf

不同运动时问冷水游泳对胃溃疡发生情况的实验研究摘要目的：研究不同运动时间的冷水游泳对小鼠急性胃溃疡模型的影响，旨在探讨冬泳运动对胃溃疡的影响，以丰富冬泳的健身作用、完善冬泳运动动物模型、并从运动时间角度为制定冬泳运动处方提供一定的理论参考。方法：将5 周龄昆明小鼠随机分为6 组，分别为冷泳i 组( ci ) 、冷泳l i 组( c i i ) 、冷泳l 组( c i i i ) 、温泳组( w ) ，模型组( m ) 及对照组( n ) ，其中各冷泳组在4 c 水中、w 组在2 5 水中进行1 次d ，6 d w 的游泳训练，ci 、ci i 、c h i 、w 组每次游泳时间分别为l m i n 、2 m ir l 、力竭、l m i n 。训练1 2 周后，各训练组及模型组造无水乙醇型胃溃疡模型，所有鼠处死，取胃，观察胃粘膜损伤情况，计算各组小鼠溃疡指数、溃疡抑制率。取胃组织匀浆上清液，测一氧化氮及丙二醛的含量。结果：1 各组小鼠一般情况各冷泳组在训练期内未出现明显的应激反应。训练6 周以后，w 组、n组与m 组均出现了逐渐衰老的状况，各冷泳组小鼠健康如初，未见明显异常。2 各组小鼠周摄食量、体重、胃重及训练情况各组小鼠周摄食量相比，ci 、c i i 组无明显差异，w 、m 、n 组也无明显差异，前两组明显大于后三组。c i i i 组在5 周以前与ci 、ci i 组无明显差异，但从6 周以后，其摄食量明显减少，8 周以后与w 组、鹾组及n 组相近。实验开始前4 周，各组小鼠体重均有明显增长，以后逐渐减慢。各组小鼠取材时体重、胃重及胃组织蛋白含量平均值均无明显差异( 尸0 0 5 ) 。从各训练组小鼠进行冷水游泳训练情况可以推测出，ci 组、c i i 组表现出对寒冷刺激的适应，而c l l i 组则表现出由不适应至4 适应再到不适应不同运动时间冷水游泳对胃溃疡发生情况的实验研究的特点。c i i l 组冈训练致死率达3 8 5 ，m 组因病致死率达1 0 ，其它组死亡率为0 。3 各组小鼠胃粘膜损伤情况n 组小鼠胃消化功能好，胃组织形态正常，未见胃粘膜损伤。其余各组均呵见不间程度的胃粘膜损伤。其中，m 组消化功能差、胃组织形态异常，溃疡程度莺，溃疡指数为1 0 9 1 2 7 5 ：ci 、ci i 组胃组织功能稍差，溃疡损伤程度较轻，溃疡指数分别为2 5 5 2 0 4 ，3 2 i 2 4 5 ，与m 组相比差异极显著，溃疡抑制率分别为7 6 6 3 、7 0 3 0 ；w 组胄组织功能、形态接近于m 组，溃疡程度重，溃疡指数为8 1 9 2 6 5 ，低于m 组( p o 0 5 ) ，均低于n ( p 0 0 5 ) 。胃组织m d a 含量：ci 与c i i 差异无显著性( p 0 0 5 ) ，均高于n ，但差异无统计学意义( 乃0 0 5 ) ，低于w ( 尺0 0 5 ) 、c i i i ( p ( 0 0 5 ) 、m ( k 0 0 1 ) 。w 、c i i i 、m 三组均无显著性差异。关键词：冷水游泳；冬泳；胃溃疡；一氧化氮；丙二醛i l不同运动时问冷水游泳对胃溃疡发生情况的实验研究a b s t r a c tp u r p o s e ：t os t u d yt h ee f f e c to fd i f f e r e n tc o l dw a t e rs w i m m i n go nt h em o d e lo fm o a s e sg a s t r i cu l c e r , a n dt oi m p r o v et h ec r e a t u r a lm o d e l ，at h e o r e t i c a lf o t m d a t i o np r e s c r i p t i o n e f f e c ta n dt h eo t h e r so f w i n t e rs w i m m i n gw e r ed e r i v e df r o mi t m e t h o d ：t h em i c eo f5 一w e e k - o l dw e r ed i v i d e ds i xg r o u p sa tr a n d o m r e s p e c t i v e l yc o l di ( ci ) ，c o l di i ( ci i ) ，c o l d l i l ( c i i i ) ，w a r m ( w ) ，m o d e l ( m ) ，a n dn a t u r a l ( n ) e a c hc o l dg r o u ps w i m si n4 w a t e r , w h i l eg r o u pw a h 1 1s w i m si n2 5 。cw a t e r a tas p e e do f1 d 6 d w s w i m m i n gt i m ef o rg r o u p so fci ，ci i ，c i i la n dwi sr e s p e c t i v e l ytm i n ，2 m i n ，e x h a u s t i o na n dim i n a f t e r12w e e k s a na n h y d r o l l sa l c o h o lg a s t r i cu l c e rm o d e lt oa l lt r a i n i n gg r o u p sa n dm o d e lg r o u pw e r em a d e , t h e nk i l la l lm i c ea f t e r1h o u rl a t e r , t a k i n gs t o m a c ho u t a n a l y z i n gt h ed a m a g eo fg a s t r i cm u c o s aa n df i g u r eo u tt h eu l c e ri n d e xa n du l c e ri n h i b i t i o nr a t e t a k eg a s t r i ch i s t i o c y t eo u ta n dc h e c kw h e t h e rt h e r ei sac h a n g eo fn i t r i co x i d e ( n o ) a n dm a t e i cd i 丑l d e h y d e ( m d a ) r e s u i t ：1 g e n e r a lc o n d i t i o n ：t h e r ei sn oo b v i o u sh y p e r i r r i t a b l er e a c t i o nd u r i n gt h et r a i n i n gt e r m a f t e r6w e e k st r a i n i n gg r o u po fw ：na n dma p p e a r e dg r a d u a lc o n s e n e s c e n c e ，w h i l et h ec o l dg r o u pi sa sg o o da sb e f o r e 2 t h ef o o do b s e r v a t i o n b o d yw i g h t , s t o m a c hw e i g h t , a n dt r a i n i n go f e a c hg r o u p f o o do b s e r v a t i o n ：t h e r ei si 婚o b v i o u sd i f f e r e n c ef o rcia n dci l ，t h es r n l ew i t hw ，ma n dn t h ef i r s tt w og r o u p si sa p p m 蜘c d yl a r g e rt h a nt h el a t e rt h r e e g r o u pc h ii sn e a r l yt h es a m ea sg r o u pcia n dcl ii nt h ef i r s t5w e e k s h o w e v e r , 6w e e k sl a t e rf o o do b s e r v a t i o nr e d u c e sg r e a t l y , s i m i l a rt og r o u pma n dna l t e r8w e e k s i nt h el u s t4w e e k so ft h ee x p e r i m e n tm i c ei ne a c hg r o u ph a v ea n do b v i o u si n c r e a s eo nw e i g h t , l a t e rs l o wd o w n t i mb o d yw e i g h t , s t o m a c hw e i g h ta n dt h ea v e r a g ec o n t e n to fa l b u m e ni ng a s t r i ch i s t i o c y t ed on o tc h a n g em u c h c p o 0 5 )w ec a ni n f e rf r o mt h ee a c hg r o u po fm i c e st r a i n i n go fs w i m m i n gi nc o l dw a t e rt h a tl l i不同运动时间冷水游泳对胃溃疡发生情况的实验研究g r o u pcia n dc1 1c a na d a p tt ot h es t i m u l a t i o no fc o l d n e s s ，w h i l eg r o u pc l l ls h o w su n w e l t n e s st h e na d a p t a t i o na n du n w e l l n e s sa tl a s t g r o u pc i i i sd e a t hr a t ef r o mt r a i n i n gi s3 8 5 g r o u pm1 0 a n dt h er e s tn o n e 3 e a c hg r o u p sd a m a g et ot h eg a s t r i cm u c o s ad i g e s t i v ef u n c t i o no fg r o u pnw o r k sw e l lw i t h o u td a m a g et ot h eg a s t r i cm u c o s a t h e r ea r ed i f f e r e n te x t e n t so fd a m a g e st oi t g r o u pmh a sab a dd i g e s t i v ef u n c t i o na n da b n o r m a lg a s t r i ch i s t i o c y t ew i t has e v e ru l c e lu l c e ri n d e x10 9 1 2 7 5 ：g r o u pcia n dci ih a san o r m a lf u n c t i o na n dh i s t i o c y t ew i t has l i g h tu l c e r , u l c e ri n d e x2 5 5 2 0 4a n d3 24 _ + 2 4 5r e s p e c t i v e l y a n du l c e ri n h i b i t i o nr a t ea r e7 6 6 3 a n d7 0 3 0 ；g r o u pwi ss i m i l a rt og r o u pm i t su l c e ri n d e xi s8 1 9 + - - 2 6 5 。l e s st h a nm ( j p o 0 5 ) ，l e s st h a nn( p o 0 1 ) ，h i g h e rt h a ng r o u pc l i l 、w ( p o 0 5 ) t h ec o n t e n to fm d ai ng a s t r i ch i s t i o c y t e ：g r o u pcia n dci la r ea l m o s tt h es a m el p o 0 5 ) ，h i g h e rt h a nn ( p o 0 5 ) ，l o w e rt h a nw ( _ p o 0 5 ) ，c i h ( p o 0 5 ) ，m ( p o 0 1 ) w ，c f i ia n dma r ea l m o s tt h es a m e k e yw o r d s ：s w i m m i n gi nc o l dw a t e rg a s t r i cu l c e rw i n t e rs w i m m i n gn om d ai v学位论文独创性声明本人郑重声明：所提交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作所取得的研究成果。尽我所知，除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得河北师范大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中明确注明并表示谢意。学位论文作者签名囊奇彤签字日期：年月，乒日学位论文使用授权说明本人同意研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权属河北师范大学。本人完全了解河北师范大学有关保留、使用学位论文的规定。学校有权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版。有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆被查阅。有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索。有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。学位论文作者签名：微签字日期；西年占月j 乒日导师签名：签字日翳：，z 目不同运动时间冷水游泳对胃溃疡发生情况的实验研究l 前言一般认为，冬泳运动是在立冬至春分这段时间里，气温在o 左右，水温在1 4 以下的室外游泳活动 1 。近几年来冬泳爱好者越来越多。估计我国目前有几十万人从事冬泳锻炼。全国许多地方相继成立了冬泳协会，国内己举办多次全国冬泳锦标赛，运动员人数多达1 5 0 0多名。中国游泳协会冬泳委员会的成立为冬泳在我国的普及和推广仓0造了有利条件。随着冬泳运动研究的深入，冬泳运动可增强抵抗力、抗衰老、防治老年人易患的高血脂症、心脑血管硬化等慢性病已成为人们的麸识。、“。冬泳健身的主要机制是机体对寒冷刺激引起的应激反应的适应= 。“。冬泳运动所具有的短时高效、出汗少( 从而减少矿物质的丢失) 、能耗大( 从而促进新陈代谢) 等独特优点，是其它运动项目所不能取代的。目前国内外对冬泳的研究主要集中在冬泳的健身作用上，对冬泳运动的不安全性、不适当的冬泳运动对人体造成的伤害、如何预防冬泳运动伤害事故的发生等方面的研究较少，丽这些不利因素正是限制冬泳运动发展的最主要的因素。从研究冬泳健身作用的文献可以看出，其研究内容多集中在心脑血管系统、呼吸系统、免疫系统、内分泌系统。冬泳与消化系统之关系的研究较少。而消化系统中的胃肠道恰恰对冷应激是比较敏感的器官。如有研究证实，小鼠禁食不禁水2 4h 后，缚于铁栅上，放入2 3 1 的水浴中，7h 后可导致所有鼠的应激性溃疡形成，这是一种成熟的鼠的应激性胃溃疡模型造模方法哺“1 。也有人研究发现 1 令大鼠每天在1 0 1 l 水中游泳，每次持续时间6 9 5 分钟，共9 天，可使大鼠产生应激性溃疡。这进一步说明冷应激可导致应激性胃溃疡的发生，对胃肠道产生不良的影响。丽长期冬泳运动是对外界应激刺激的一种适应，那么冬泳运动是会抑制胃溃疡的发生呢，还是会导致应激性胃溃疡的发生，对胃肠道产生损害呢?目前已有一些有关冬泳运动与胃肠功能关系的报导，大多是有关不同运动时间冷水游泳对胃溃疡发生情况的实验研究冬泳运动的个人心得、体会类文章，这些文章中认为，冬泳运动对胃肠功能可产生良好的作用，冬泳后食欲大、消化功能强。还有一些是问卷调查，其结果也证实冬泳人群中胃肠道患病率低，冬泳爱好者普遍反映食欲好，消化功能强“。动物实验、“巾也发现经长期适量时间的冷水游泳训练的小鼠，食量及体重均显著高于非冷水游泳小鼠。但未发现冬泳与胃溃疡之关系的研究。本研究是以胃溃疡为切入点，对实验小鼠进行3 个月的强迫冷水游泳训练，训练结束时，对各训练组小鼠及模型组小鼠造无水乙醇型急性胃溃疡损伤模型，通过比较每次相同运动时间不同水温( 4 、2 5) 组，以及水温相同( 4 。c ) 不同运动时间组，胃溃疡损伤情况，来推测不同运动时间的冬泳是否会产生或预防胃溃疡的发生。本实验的意义在于丰富冬泳的健身作用、完善冬泳运动动物模型、并从运动时间角度为制定冬泳运动处方提供+ 定的理论参考。2 材料与方法2 1 实验动物5 周龄清洁级昆明种雄性小鼠6 3 只，体重2 0g 2 4g ，由河北医科大学动物实验中心提供，合格证编号d k 0 4 0 5 0 0 1 7 。采用架式笼养，每笼6 只，动物实验室温度控制在2 0 。c 一2 5 。c ，湿度控制在5 0 5 范围内，常规饲养。2 2 主要实验用仪器超声波细胞粉碎机( 9 2 一i i 型) ：宁波新芝仪器研究所f s 一2 高速匀浆机：江苏省金坛市宏华仪器厂7 2 1 分光光度计：山东高密电子仪器厂体视解剖镜( x t s 2 0 ) ：北京泰克仪器有限公司x w 一8 0 a 型旋涡混合器v o r t e x ：上海糖科实业有限公司t d a 一8 0 0 2 型恒温水浴锅：天津市泰斯特仪器有限公司l d z 4 0 8 型离心枫：北京医用离心机厂不同运动时间冷水游泳对胃溃疡发生情况的实验研究m p 2 0 0 a 型电子天平：上海第二天半仪器j 一电热恒温干燥箱( g z x d h4 0 4 5b s ) ：卜海跃进医疗器械厂数码相机、手术用常规器械等2 3 实验用药品及试剂2 戊巴比妥钠、7 5 乙醇、碘酊、盐酸、双蒸馏水、硫酸铜、1 0 0 乙酸( 分析纯级) 、无水乙醇、考马斯亮兰蛋白测定试剂盒、氧化氮试剂盒及丙二醛测定试剂盒( 试剂盒均由南京建成生物制品研究所提供) 等。2 4 实验方法与步骤2 4 1 实验分组动物购回后常规饲养，适应性喂养三天后称重、标记，随机分为6组，分别为：盐水对照组( n ) 、模型组( m ) 、温泳组( w ) 、冷泳i 组( ci ) 、冷泳i l 组( c i i ) 、冷泳i i i 组( c i l l ) 。冷泳i i i 组1 3 只，其余每组1 0 只。2 4 2 动物训练过程适应性训练方法：动物适应性喂养三天后，冷泳各组均在2 5 、1 5、5 水温中依次游泳一天、二天、三天，每天均为一分钟；温泳组则在2 5 水温中，进行每天一次，每次一分钟的游泳训练。适应性游泳训练后进行正式训i 练。正式训练方法：各冷泳组及温泳组每周训练6 天，1 次天。各冷泳组游泳水温均为4 ，温泳组游泳水温为2 5 ，ci 、c i i 、c h i 组及w 组每次游泳时间分别为1 分钟、2 分钟、力竭、1 分钟。c i i i 组进行训练时要密切观察，其力竭标准为沉入水下1 0 秒不能上浮 1 0 ，但当动物出现运动极不协调时即将其从水中捞出。n 组及m 组每次只抓取不游泳，在训练组进行训练时不给这两组食水。每天观察并记录动物的一般情况( 毛色、活动、摄食量、死亡率等情况) 及训练情况( 游泳速度、动作协调性、c i i i 组力竭时间、出水后的不同运动时间冷水游泳对胃溃疡发生情况的实验研究表现、出现修饰动作及恢复常态的时间等方面) ，并在每周休息日称重次。正式实验共进行1 2 周，1 2 周后造模、取材，进行各项指标测试。2 4 3 胃溃疡小鼠模型制作方法按蒋氏的方法1 造模，造模前2 4 小时禁食不禁水，造模当天不进行游泳训练，造模时除n 组灌服等量生理盐水外，其余各组均灌服无水乙醇，每只0 2 m l ，l 小时后取材。2 4 4 取材2 戊巴比妥钠4 5 m g k g b w 腹腔给药麻醉后，无菌操作，解剖取胃，用冷生理盐水冲洗后，滤纸擦沈干净，沿胃大弯侧剪开，将胃壁展开，用冷生理盐水漂洗掉胃内容物，将胃壁展平固定在x f 台，照像后，在解剖显微镜下观察胃粘膜损伤的程度和形态，用游标卡尺测量胃粘膜损伤出血点、条、片的大小，随后，各组均取全胃，制备组织匀浆，取上清液，一2 0 以下冷藏，待测各项指标。2 4 5 实验指标及测定方法2 4 5 1 周摄食量测定用天平称取每天每组要加的颗粒饲料量，第二天称剩余量，两者之差除以该组的样本量即为各组的日摄食量平均值( 计算公式见公式1 ) ，每周日摄食量平均值的总和为周摄食量( g ) 。日摄食量平均值( g ) = ( 加料量一第二天剩余量) 样本量( 公式1 )2 4 5 2 周体重平均值在每周训练的休息日，称取每组总体重，再除以该组的样本量，即为每组鼠的周体重平均值( g ) 。2 4 5 3 冷泳组周平均力竭时间冷泳h i 组力竭时间为从入水开始到力竭的时间。力竭的判定标准为下沉1 0 秒，不能浮出水面。如出现动作极不协调时，即将其捞出。该组所有鼠每周力竭时间总和除以6 ，再除以样本量，为周平均力竭时水同运动时间冷水游泳对胃溃疡发生情况的实验研究间( 秒) 。2 4 5 4 胃粘膜损伤程度评定用溃疡指数( u l c e ri n d e x ，u i ) 及溃疡抑制百分率( u j _ c e ri n h i b i t i o nf a t e ) 评定。溃疡指数：其判定按g u t h 。“1 标准记分：点状出血为1 分，线状m 血长度 1 m m ，分值2 。全胃分数的总和为溃疡指数。溃疡抑制百分率评定：依溃疡指数计算溃疡抑制百分率( 计算公式见公式2 ) 。训练组溃疡抑制百分率= ( 模型组溃疡指数一各训练组溃疡指数) ，模型组溃疡指数1 0 0 ( 公式2 )2 4 5 5 胃组织匀浆的制备经解剖显微镜下观察胃粘膜损伤的程度和形态后，将胃组织用滤纸擦干，称重，加9 倍冷生理盐水，用移液器取总量的2 3 于e p 管中，用眼科小手术剪尽快剪碎组织块。此操作要在冰水浴中进行。用组织匀浆机将剪碎的组织块制备成匀浆液( 匀浆时间l o 秒次，间隙3 0 秒，连续3 - 5 次，将试管放在冰水中进行) 。再用超声粉碎机进行粉碎，5 秒次，间隙1 0 秒，反复3 5 次。将剩余的1 3 冷生理盐水加入匀浆液中，制备成1 0 的组织匀浆液，用低速离心机1 0 0 0 r m i n左右离心1 0 分钟，取离心好的匀浆上清液，- 2 0 。c 以下冷藏，待测各项指标。2 4 5 6 胃组织蛋白含量的测定使用考马斯亮兰蛋白测定试剂盒进行测试。原理：蛋白分子具有一n h 。+ 基团，当棕色的c b b 。显色剂加入蛋白标准液或样品中时，c b b 。染料上阴离子与蛋白一n 也+ 结合，使溶液变为蓝色，通过测吸光度可计算出蛋白含量。试剂及配制：取考马斯亮兰c b b g 。贮备液，加入2 0 0 m l 蒸馏水进不同运动时间冷水游泳对胃溃疡发生情况的实验研究行5 倍稀释，配成应用液。取1ul 的蛋白标准品，加4 9ul 的生理盐水，配成1 2 5 6 m g m l 浓度的标准液。按以下操作步骤进行胃组织蛋白含量的测定：窀自管、标准管及各测定管分别加入蒸馏水、1 2 5 6 标准液、样品，均为0 0 5 m l ，再在各试管中加入3 o m l c b b 。显色剂。各试管混匀，静置l o 分钟，用7 2 1 分光光度计，于5 9 5 n m 处，l c m 光径，窄白管调零，测各管吸光度。蛋白含量计算公式见公式3 。蛋白含量( g t ，) = 测定管吸光度标准管吸光度标准管浓度( g f l )( 公式3 )( 注：g l 为克升)2 4 5 7 胃组织一氧化氮( n i t r i co x i d e ，n o ) 含量测定( 采用硝酸还原酶法)测试原理：n o 化学性质活泼，在体内代谢很快转化为硝酸盐( n 侥)和亚硝酸盐( n 0 ：“) ，而n o ：一又进一步转化为n o 。一，硝酸还原酶能特异性地将n 0 。还原为n o 。一，通过显色深浅测定其浓度的高低，来间接推算n o含量。测试过程按试剂盒说明操作，n 0 含量计算见公式4 。n o 含量( um o l g p r o t ) = ( 测定管吸光度一空白管吸光度) ( 标准管吸光度一空白管吸光度) 标准品浓度样本的蛋白含量( g p r o t l ) ( 公式4 )( 注：l am o l g p r o t 为微摩尔克蛋白，g p r o t l 为克蛋白升)2 。4 5 8 胃组织丙二醛( m a l e i cd i a l d e h y d e ，m d a ) 含量测定( 采用硫代不同运动时间冷水游泳对胃溃疡发生情况的实验研究巴比妥酸法)测定原理：过氧化脂质降解产物中的m d a 可与硫代巴比妥酸( 1 b a )缩合，形成红色产物，在5 3 2 n m 处有最大吸收峰。测试过程按试剂盒说明操作，m d a 含量计算见公式5 。n i d a 含量( n m o l m g p r o t ) = ( 测定管吸光度一测定窄白管吸光度) ( 标准管吸光度一标准空白管吸光度) 标准品浓度样木的蛋白含量( m g p r o t m 1 ) ( 公式5 )( 注：n m o l m g p r o t 为纳摩尔毫克蛋白，m g p r o t m l 为窀克蛋白毫升)2 4 6 数据统计：实验结果以平均数标准筹( i s ) 表求，实验数据由s ? s s l 2 0 分析处理。采用单因素方差分析。3 研究结果3 1 各组小鼠一般情况各冷泳组小鼠在训练期内未出现明显的嘶咬、呜叫、厌食等应激反应，从训练6 周以后，w 组、m 组及n 组均出现了逐渐衰老的状况，表现为被毛逐渐蓬松稀疏，无光泽，喜静卧、扎堆，活动减少，各冷泳组小鼠健康如初，未见明显衰老迹象。3 ，2 各组小鼠摄食量、体重及胃重的变化图1 所示，各组小鼠周摄食量相比较，ci 、c i i 组小鼠差异无显著性，w 组、m 组、n 组差异也无显著性，前两组明显大于后三组。ci i i 组在5 周以前，与ci 、c i i 组无明显差异，但从6 周开始，其摄食量明显减少，到8 周以后与m 组及n 组相近。图2 所示，各组小鼠实验开始前4 周，体重均有明显增长，以后不同运动时间冷水游泳对胃溃疡发生情况的实验研究逐渐减慢。表1 所示，各组小鼠取材时体重平均值差异无显著性( 胗0 0 5 ) 。表2 所示，各组小鼠胃重及胃组织蛋白含量平均值差异均无显著性( 胗0 0 5 ) 。表l实验莳体重、取材时体重( i s ) 及实验前后体重变化量备组取材时体重比较，无统计学差异( 尸 0 0 5 ) 。表2 各组胃重、胃组织蛋白含量平均值( i s )备组比较，无统计学差异( 7 0 0 5 ) 。3 3 各组小鼠游泳训练情况各冷泳组小鼠开始进行冷水游泳训练时表现出游泳速度快，动作不协调等应激特点，出水后表现出打寒战、哆嗦、不能站立、下肢僵直、没有自主活动动作等。一段时间后出现修饰动作，下肢恢复正常8不同运动时间冷水游泳对胃溃疡发生情况的实验研究姿势，能行走，但有点摇摆，站立不稳，再经过一定的时间才能基本恢复正常并主动进食。w 组从训练开始动作就比较舒缓协调，出水后未出现明显哆嗦，能正常行走及理毛。冷泳各组相比，按ci 、c i i 、c i 【i 组顺序，出现修饰动作及恢复常态的时间依次延长。随着训练时间的延长，ci 、c 【i 组出现修饰动作及恢复常态的时间逐渐缩短。c i i i 组此h 寸间无明显缩短。经过四周的训练，ci 组约在前、 分钟左右游泳速度较快，约在后半分钟游泳动作变得比较舒缓协调。c i 组约在前1 分钟游泳速度较快约在后1 分钟游泳动作既变得比较舒缓协调。c i l i 组约在前1 分钟速度较快，第二分钟动作比较舒缓协调，从第三分钟起又出现应激特点。图3所刀i ，训练前3 周c i i i 组力竭时间逐渐延长，3 周后又逐渐缩短。从各冷泳组的游泳速度、动作协调性、出水后表现以及c l l i 组力竭时间，提示ci 组、c i i 组表现出对寒冷刺激的适应，而c i i 组则表现为由不适应到适应再到不适应的特点。训练3 周时，c i i i 组在训练2 分钟时有2 只相继沉入水下，迅速捞起时有微弱呼吸，抢救无效，死亡。训练6 周、9 周时，同样情况，又相继死亡3 只，死亡率高达3 8 5 。m 组在1 l 周时，患病死亡一只，死亡率1 0 。说明，长时间冷水游泳训练危险性大。所有运动鼠无因病死亡个体，所有非运动鼠因病死亡率为5 ，说明运动鼠抗病力强于非运动鼠。3 4 各组小鼠胃粘膜损伤情况3 4 1 大体观察( 见图4 - 9 )n 组小鼠胃内有少量食物残渣，无血性内容物，胃壁弹性好，较厚，冷生理盐水冲洗后，可见胃粘膜呈淡红色，粘膜皱襞存在完好，粘膜表面未见充血水肿、来见溃疡出血灶。其余各组均可见不同程度的胃粘膜损伤。在造模组中，以m 组损伤程度最重。m 组胃腔内可见食物残渣，混不同运动时间冷水游泳对胃溃疡发生情况的实验研究有咖啡色样血性粘液，量较多，胃壁弹性极差，胃壁极薄，冷生理盐水冲洗后，可见腺胃部粘膜深红色，粘膜皱襞较浅，粘膜明显充血、水肿，呈点状、条索状或片状出血，有的可见粘膜大片脱落。ci 、c i i 组胃腔内有少量血性内容物，胃壁弹性尚a ，胃壁稍薄，冷生理盐水冲洗后，可见腺胃部粘膜呈红色，粘膜皱襞存在尚好，粘膜轻微充血水肿，伴有散在 ：血点或条索状出m ，多位于粘膜的皱折处，且大多与胃的纵轴平行。有的样本胃粘膜面大体形态与l e 常组很接近，除仅可见少量出血点外，其它情况与正常组无明显异常，未见粘膜脱落。w 组粘膜损伤程度接近m 组。c i l i 组粘膜，有5 例胃样本可见陈旧性溃疡瘢痕，发生在胃体部，左右侧均有，较对称，呈片状，5 例的溃疡瘢痕平均直径长1 1 2 4 m m ，色暗黑，突出胃粘膜，突起组织表面也可见条索状皱襞，触之发硬，用解剖刀剥离，几乎无胃粘膜存在( 见图7 ) 。粘膜损伤情况较重，已无法计算其溃疡指数。其余3 例样本胃粘膜的形态学表现接近于w 组和m组。3 4 2 胃组织溃疡指数、溃疡抑制率表3 各组胃组织u i ( i s ) 、u l c e ri n h i b i t i o n与模型组比，+ 尺0 0 1 尺o 0 5一p o 0 5表3 所示，m 组溃疡指数为1 0 9 1 2 7 5 ，ci 组、c i i 组溃疡指数分别为2 5 5 2 0 4 、3 2 4 2 4 5 ，较m 组明显偏低，差异有极显著性( p o 0 1 ) ，其溃疡抑制率分别为：7 6 6 3 、7 0 3 0 。w 组溃疡指数8 1 9不同运动时间冷水游泳对胃溃疡发生情况的实验研究2 6 5 ，较m 组低，差异有显著性( p ( 0 0 5 ) ，溃疡抑制率为2 4 9 3 。3 5 各组小鼠胃组织n 0 及m d a 含量各组小鼠胃组织n o 含量结果见表4 ，胃组织m d a 含量结果见表5 。表4 各组小鼠胃组织n o ( um o l g p r o t ) 含量( i s )t 肚o uj丰，弋u u b一，u u b表4 所示，各组小鼠n o 含量、f 均值由大到小排列顺序如下：n 、ci 、ci i 、w 、c i i i 、m 。所有造模组( ci 、c i i 、w 、c i i i 、m ) n o 含量均低于n 组，差异具有极显著性( p o 0 5 ) 。表5 各组小鼠胃组织m d a ( n m o l m g p r o t ) 含量( i s ) p ( 0 0 l p ( o 0 5 一p o 0 5表5 所示，各组小鼠胃组织m d a 含量平均值由小到大排列顺序如不同运动时间冷水游激对胃溃疡发生情况的实验研究下：n 、ci 、c i i 、w 、c i i 、m 。其中，n 组m d a 含量平均值小于其它组，与w 、o i l 、m 组相比，差异均有极显著性( p o 0 5 ) ；cj 、ci i 含量均低于w ( p ( o 0 5 ) 、c i i i ( p ( o 0 5 ) 、m ( p ( o 0 1 ) 。w 、c i i i 、斟三组m d a 含量差异均无显著性。4 讨论4 1 冬泳模型的选取有关动物的冬泳模型很少，从榆索到的文章中发现，这些文章中采用的冬泳模型相同：小鼠，在4 和1 0 。c 水中进行1 次目、1 i t i in 次、持续1 2 周的强迫游泳训练一叫。这些研究均发现该模型对机体有良好的作用，且4 。c 组和i o9 c 组无明显差异。认为该模型能很好地模拟冬泳运动。分析人们之所以选择小鼠作为冬泳模型，这与冬泳运动的特点有关。因冬泳运动只有经过长期适应后才对机体产生良好的作用，因此必须有较长的实验时间才能模拟冬泳运动。小鼠的生命周期短，比较符合冬泳运动特点的要求。本实验的实验对象也选择小鼠作为冬泳运动模型。根据以上的小鼠冬泳模型，发现4 与1 0 对小鼠的影响无明显差异，且都对机体有良好的作用。据此，本实验选择在冬泳常规水温范围( o 。c 一1 4 0 ) 内的4 0 作为训练水温，不再对不同的冷水水温对机体的影响进行比较，而重点探讨在同一水温下的不同运动时间对机体的影响。因为如何选择冬泳运动时间是制定冬泳运动处方的重要内容，所以研究不同的冬泳运动时间对机体的影响很有实际意义。本实验对小鼠进行1 分钟、2 分钟及力竭三个运动时阏的强迫冷水游泳训练。分别命名为：冷泳i 、冷泳珏、冷泳i i i 组。根据实验结果可知，冷泳i 、冷泳i i 组在一般情况、体重、摄食量、溃疡损伤情况及胃组织n o 、m d a含量等指标的差异均无显著性，说明持续1 2 周的4 。c 、1 次d 、2m i n不同运动时间冷水游泳对胃溃疡发生情况的实验研究0 ：的训练方法与持续1 2 周的4 、1 次d 、i m i n 次的冬泳运动小鼠模型训练方法样，町用做冬泳小鼠模型。4 2 冷水游泳对小鼠一般情况、体扈及摄食量的影响4 2 i 对一般情况的影响从实验结果可知，各冷泳组未出现明显的嘶咬、呜叫、厌食等应激反应，说明各组小鼠对实验所造成的应激刺激能够耐受。从训练6 周以后，w 、m 、n 组小鼠均表现为被毛逐渐蓬松稀疏，无光泽，喜静卧、扎堆，活动减少，提示此三组出现了逐渐衰老的状况，而各冷泳组小鼠末出现明显衰老迹象。各组死亡率：m 组与c i i i 组出现死亡，其它组未出现死亡。c i i i 组死亡率高达3 8 5 ，全部都是在游泳中死亡，说明，运动时间过长的冷水游泳训练，危险性大，死亡率高。所有运动组小鼠未出现因病死亡，而非运动组因病死亡率达5 ，提示运动鼠抗病力强于非运动鼠。根据以上的分析可提示，冬泳运动可以延缓衰老、增加抗病力，这与目前冬泳运动的研究结果致。4 2 2 对体重的影响目前普遍认为盼、“，冬泳运动对机体产生良好作用的机理是机体对寒冷引起的应激反应的一种适应。在这一过程中，机体是否会储存脂肪以适应这种变化呢? 也就是有人担心参加冬泳是否会导致肥胖昵?v y b i r a l t “3 i 等研究发现，冬泳者较非冬泳者皮下脂肪仅有轻微增加，无统计学意义。我们曾对石家庄市冬泳爱好者进行了问卷调查，结果表明冬泳者多数认为，与参加冬泳前比，冬泳运动后体重未见明显增加。从本研究结果可以看出，实验各组小鼠体重差异均无显著性，与v y b i r a l t 的研究结果相近，提示参加冬泳运动可能不会导致肥胖。在张美桃曲3 及诸葛慧贞“叫等的两项研究中，与本实验所用的动物模型是一致的，但在这两项研究中均发现冷水游泳组小鼠摄食量及体重均明显高于对照组，与本实验结果不同。如从诸葛慧贞的实验结果不同运动时间冷水游泳对胃溃疡发生情况的实验研究看，经过3 个月的冷水游泳训练，各组小鼠体重比原体重( 1 8 - 2 2 9 )最多增加了3 3 9 ，最少增加了2 o g ，而从本实验结果所示各组小鼠体重比原体重( 平均2 2 7 5 9 ) 最多增加了1 7 2 9 ，最少增加了1 4 9 9 。说明张氏及诸葛氏的实验与本实验小鼠的发育情况相差很大。他们的实验与本实验对小鼠的训练方式相同，从开始训练时小鼠的体重看，= !个实验小鼠的年龄也基本相同，约5 周龄，正处于生长发育期，据资料统计 1 3 ，雌性小鼠3 5 4 0 i 龄、雄性小鼠4 5 6 0 目龄性成熟，7 0 日龄时雌鼠体鼋3 5 克，雄鼠4 0 克，与本实验结果相近。分析造成前两个实验与本实验结果差异性的原因，可能是动物的饲养环境不同。以动物为研究对象进行冬泳运动研究的还很少，因此可能会有其它机制造成两实验结果的差异性。有关冬泳与体重的关系有待于今后进一步深入研究。4 2 3 对摄食量的影响有关冬泳运动对消化功能影响的研究较少，但在一些冬泳运动的个人体会、心得等文章中均提到了冬泳运动可提高消化功能，预防和治疗胃病，如胃溃疡、胃炎等。有人对冬泳爱好者进行了问卷调查研究“1 ，结果也表明冬泳者普遍认为参加冬泳运动后，食欲好，食量大，容易消化。从本实验结果看，ci 、c i i 组在1 2 周的训练中摄食量均高于n 组、m 组、w 组。说明，ci 组、c i i 组的食欲好，消化功能强。提示适量运动时间的冷水游泳运动能促进消化功能的提高。c i i i 组在训练5 周以前，与ci 、c i i 组无明显差异，但从6 周开始，其摄食量明显减少，到8 周以后与n 组及m 组无明显差异。从c i i i 组胃粘膜面大体形态学观察结果可见，有5 例出现了陈旧性溃疡瘢痕，说明c i i i 组在训练过程中有部分小鼠产生了应激性溃疡，因此影响了其摄食量。从实验1 2 周取材时各组体重测试结果看，c i i i 组体重虽与各组无统计学差异，但其平均值低于其它各组。这些测试结果整体说明c不同运动时间冷水游泳对胃溃疡发生情况的实验研究i i l 组在训练中后期出现了应激性溃疡，因而导致了其摄食量低、体重稍轻的结果。提示力竭性冷水游泳会使小鼠摄食量减少，影响消化功能，可能会导致应激性溃疡的发生。4 2 4 对摄食量及体重影响的机理及主要因素分析4 2 4 i 机理机体要想保持正常的能量代谢，必须保证能量的摄入与消耗的平衡。有资料证明 1 ，冬泳运动2 分钟，即可消耗1 0 0 卡的热量，相当于是l o o m m i n 的速度步行3 0 m i n 所消耗的能量。水的导热性比空气高2 8 倍，因此在冷水中游泳要散失掉大量的能量。在此情况下，机体通过代偿性地调动神经、内分泌系统，使消化系统活跃，合成代谢加强，为热能消耗提供必要的物质条件。据此可以推测，ci 组、ci i 继摄食量比其它组增大而体重较其它组无明显增大的机理是，冷水游泳能消耗大量的能量，增加的食物摄入量用于提供其本身的能量消耗。4 2 4 2 冷水游泳能耗大的主要因素分析导致冷水游泳能耗大的主要因素是游泳运动量呢? 还是水温? 本实验结果显示，ci 组与w 组相比，每天游泳运动量相等，只是游泳水温的不同，而实验结果是前者摄食量明显高于后者，而体重无明显差异，说明影响结果的主要因素是温度因素；n 组与w 组相比摄食量及体重无明显差异，说明1 分钟温水游泳不能引起机体能量的大量消耗。从以上两方面的分析，可以推测出冷水游泳能耗大的主要因素是水温，是低水温导致的。是否冷水游泳与在其它冷环境中运动，其能量消耗相同昵? 这将有待于今后的进一步研究。4 3 冷水游泳对胃粘膜损伤情况的影响本实验在解剖显微镜下，观察了各组小鼠胃内容物的多少、是否血性，胃壁弹性、厚度、粘膜皱襞存在完好程度，胃粘膜颜色、粘膜表面水肿程度、溃疡出血灶情况等，并根据溃疡出血灶情况计算了各组小鼠溃疡指数及溃疡抑制率。不同运动时问冷水游泳对胃溃疡发生情况的实验研究胃内容物的多少反映了胃的消化功能。胃壁弹性、厚度、粘膜皱襞存在完好程度反映胃壁形态是否正常。内容物是否血性反映了是否有粘膜损伤出血，胃粘膜表面颜色反映粘膜充血情况，它们与粘膜水肿程度及溃疡出姐灶情况一起共同反映了，胃粘膜损伤情况，即溃疡形成程度，溃疡指数及溃疡抑制率是对溃疡程度的客观评定指标。根据本实验结果可知，从胃的消化功能及胃壁形态看，n 组小鼠胃消化功能好，胃壁形态基本正常。m 组消化功能差、胃壁形态异常。ci 、c i i 组胃的消化功能稍差，胃壁形态稍异常，有的与n 组相近。w 组胃的消化功能、胃壁形态接近于m 组。c i i i 组消化功能差，胃壁形态异常，有6 2 5 样本出现了陈旧性溃疡瘢痕，其余样本，其溃疡的形态学表现接近于w 组及m 组。从各组胃组织溃疡指数、溃疡抑制率结果看，ci 组、c i i 组溃疡指数较m 组明显偏低，有极显著的差异性。w 组溃疡指数低于m 组，高于ci 、c i i 组，差异均有显著性。根据以上对实验结果的分析，可以小结如下：( 1 ) m 组所有鼠均有溃疡产生，说明无水乙醇型胃渍疡损伤模型造模成功。( 2 ) ci 、c i i 组溃疡损伤情况相近，溃疡指数无明显差异( b o 0 5 ) ，溃疡损伤情况均较轻，溃疡指数明显低予m 组，差异极显著( p ( o 0 1 ) 。说明ci 、c i i 组均能明显抑制急性胃粘膜损伤。并可提示小鼠在4 。c水温中进行1 次d ，i m i n 次或2 m i n 次，持续1 2 周的游泳训练，均可用作冬泳运动动物模型。( 3 ) w 组胃组织功能、形态接近于m 组，差于n 组，溃疡指数小予m 组，但大于ci 组，说明1 分钟的温水游泳对小鼠实验性胃溃疡发生的抑制作用弱于ci 组。( 4 ) w 组与ci 组的运动时间相同，溃疡程度重于ci 组，差异显著，说明ci 组对胃溃疡损伤的抑制作用的主要因素是冷水，而不是游不同运动时间冷水游泳对胃溃疡发生情况的实验研究泳时间。也说明冷水游泳具有短时高效的特点。4 4 冷水游泳与应激性溃疡应激性溃疡是指由应激因素( 如手术、烧伤、寒冷、缺氧等) ； 起的一种急件胃粘膜表浅损伤，主要发生于胃底和胃体部。有关应激性溃疡的产生机制非常复杂，迄今仍末完全阐明。目前认为，攻击因子和防御因子之间的平衡受到破坏即屏障结构的破坏、碳酸氧盐分泌的减少、粘膜血流减少等防御功能的减弱是导致胃溃疡发生的主要原因。应激性溃疡所采