（药剂学专业论文）辛伐他汀、氟伐他汀对厄贝沙坦药代动力学影响的研究.pdf

目录 删川f i l f 川i f | i jj 0 f y 19 0 0 7 斟4 中文摘要”1 英文摘要5 研究论文辛伐他汀、氟伐他汀对厄贝沙坦药代动力学影响的研究 引言1 0 第一部分) l c 荧光检测法测定新西兰大白兔血浆中厄贝沙坦的浓度 前言1 2刚舌1 2 材料与方法1 2 结果1 4 附图1 6 附表18 讨论2 0 小结2 2 参考文献2 2 第二部分辛伐他汀对厄贝沙坦药代动力学影响的研究 前言2 4日i j 舌2 4 材料与方法2 5 结果- - 2 7 附图2 8 附表3 0 讨论4 1 小结- 4 4 参考文献4 4 第三部分氟伐他汀对厄贝沙坦药代动力学影响的研究 前言4 6月l j 舌4 6 材料与方法4 6 结果4 8 附图4 9 附表5 0 讨论5 9 小结6 0 参考文献6 0 结论6 1 综述心血管药物的代谢酶及其遗传药理学6 2 致谢7 7 个人简历7 8 中文摘要 辛伐他汀、氟伐他汀对厄贝沙坦药代动力学影响的研究 摘要 厄贝沙坦( i r b e s a r t a n ) 为血管紧张素i i 受体拮抗药。能特异性地拮抗 a t l ，通过选择性地阻断血管紧张素与a t l 受体的结合，抑制血管收缩和 醛固酮的释放，从而产生降压作用。体外实验显示厄贝沙坦主要由细胞色 素p 4 5 0 酶c y p 2 c 9 氧化代谢，同工酶c y p 3 a 4 几乎没有效应， 氟伐他汀( f l u v a s t a t i n ) 是第一个全合成的降血脂药物，和辛伐他汀 ( s i m v a s t a t i n ) 都是羟甲戊二酰辅酶a ( g c o a ) 还原酶抑制剂，具有抑 制内源性胆固醇( c h 0 1 e s t e r 0 1 ) 的合成，降低肝细胞内胆固醇的含量，刺 激低密度脂蛋白胆固醇( l d l c ) 受体的合成，有效降低血液中低密度脂 蛋白胆固醇及甘油三脂水平，升高高密度脂蛋白胆固醇水平。是临床常 用的血脂调节药。 由于临床高血压患者常伴有肥胖和甘油三酯胆固醇水平的升高，辛 伐他汀、氟伐他汀临床常与降压药厄贝沙坦联用。厄贝沙坦在肝脏主要经 c y p 2 c 9 代谢。辛伐他汀在肝脏中主要经c y p 3 a 4 代谢，大多数降血脂药 物均经此酶代谢。由于药物体内过程非常复杂，经不同种代谢酶代谢的药 物是否存在相互作用，还需进一步探讨。氟伐他汀经c y p 2 c 9 代谢，且 为c y p 2 c 9 抑制剂，与厄贝沙坦为同一种酶代谢，可能会对厄贝沙坦的 代谢有影响，有关此方面的研究尚未见报道。因此，研究二者与厄贝沙坦 的相互作用具有重要的临床意义。 目的： l 建立 玎) l c 荧光法检测新西兰大白兔体内厄贝沙坦血药浓度的方法； 2 探讨辛伐他汀相同剂量( 5 m g l ( g ) 诱导不同时间( 3 天和5 天) 对新西 兰大白兔体内厄贝沙坦药代动力学的影响； 3 探讨氟伐他汀不同剂量( 1 0 m g l ( g 和5 0 m g k ) 诱导3 天对新西兰大白 兔体内厄贝沙坦药代动力学的影响。 方法： 1 动物实验：新西兰大白兔随机分为6 组，分别是：3 天对照组：2 羧甲 基纤维素( 灌胃1o m l 只，1 次日，连续3 天) + 厄贝沙坦( 灌胃5 0 m g l ( g ) ； 速为1 om l m i n ，柱温为室温。 4 数据处理：测得的血药浓度时间数据用d a sv e r s i o n3 o ( b o n t z i n c ，b e i j i n g ，c h i n a ) 进行智能化处理，分别计算出各组厄贝沙坦的药代动力 学参数。c m 觚和t m 觚为实验测得。主要药代动力学参数用s p s s 软件包进 行统计分析。 结果： l 姐，l c 荧光法测定新西兰大白兔体内厄贝沙坦血药浓度的方法：替米沙 坦和厄贝沙坦的保留时间分别为4 2 m i n 和5 9 m i n ，厄贝沙坦检测浓度在 o 0 5 5 p g m l 。1 范围内线性关系良好( f o 9 9 9 8 ) ，最低检测浓度为 o 0 2 5 p g m l 一。低、中、高3 种浓度( o 0 8 、o 8 、4 肛g m l 1 ) 的平均相对 回收率分别为( 9 8 4 4 士3 1 5 ) 、( 1 0 2 2 1 士5 3 3 ) 、( 1 0 1 1 9 士6 3 2 ) ， 提取回收率为( 7 8 0 4 士6 6 7 ) ，日间、日内r s d 均小于l o 。样品多次 冻融及在2 0 冰箱长期放置稳定性良好。 2 各组厄贝沙坦的统计矩药代动力学参数分别是： 3 天对照组：2 羧甲基纤维素( i g 1 0 m l 只，1 次日，连续3 天) + 厄贝沙坦( i g 5 0 m g 瓜g ) ：a u c ( o 3 6 ) ：1 0 0 3 士4 8 1 ；a u c ( o 。) ：1 1 9 4 士5 6 7 ； t i t 姒：1 3 4 士o 2 4 ；c m a x ：2 3 8 士1 8 3 ；t l 2 ：4 3 7 士1 0 9 ； c l ：1 0 5 3 士5 2 9 ； 中文摘要 m r t ( o 3 6 ) ：5 0 9 士1 4 2 ；m i ( o ) ：6 0 4 士1 3 4 5 天对照组：2 羧甲基纤维素( i g 1 0 m l 只，1 次日，连续5 天) + 厄贝沙坦( i g 5 0 m g l ( g ) ：a u c ( o 3 6 ) ：9 8 8 士9 0 7 ；a u c ( o 啪) ：1o 2 3 土9 o o ； t m a x ：1 3 4 士o 2 2 ；c m a ) ( ：2 3 8 士2 5 6 ；t 1 2 ：4 2 5 土2 0 5 ；c l ：1 1 4 8 士8 3 7 ；m r t ( o 3 6 ) ： 5 1 4 土1 3 5 ；m r t ( o 曲) ：6 1 3 土1 6 2 辛伐他汀诱导3 天组：辛伐他汀( i g 5 m g l ( g 连续3 天) + 厄贝沙坦 ( i g 5 0 m k g ) ； a u c ( o 3 6 ) ：1 1 51 士4 8 1 ；a u c ( o 啪) ：15 4 3 士7 4 4 ； t r n a ) ( ： 1 6 1 士1 1 4 ： c m a ) ( ：3 1 4 士o 9 2 ；t 1 2 ：6 3 6 士5 7 0 ；c l ：4 o o 士1 9 8 ；n 嬲( o 3 6 ) ： 5 18 士3 5 8 ；哪o ) ：7 8 0 5 6 5 辛伐他汀诱导5 天组：辛伐他汀( i g 5 m g 厥g 连续5 天) + 厄贝沙坦 ( i g 5 0 m g l ( g )； a u c ( o 3 6 ) ：2 2 6 5 士8 5 9；a u c ( o 。) ：31 6 3 士1 4 0 9 ； t m a ) 【：o 8 3 士o 2 6 ； c m a x ：6 3 5 士3 5 0 ；t 1 陀：1o 5 3 士5 4 0 ；c l ：1 7 7 士0 5 3 ；t ( o 3 6 ) ： 8 8 3 士2 8 5 ；m r t ( o 瑚) ：18 9 4 土9 6 6 氟伐他汀低剂量组：氟伐他汀( i g 1 0 m g 爪g 连续3 天) + 厄贝沙坦 ( i g 5 0 m g 瓜g ) ；a u c ( o 3 6 ) ：7 6 9 士3 2 1 ；a u c ( o 啪) ：8 6 9 士3 0 5 ； t i l l a x ：o 6 7 士o 2 0 ； c m a x ：3 5 8 士1 7 0 ；t 1 ，2 ：2 7 4 土o 7 7 ； c l ：6 4 3 士2 3 3 ； t ( o 3 6 ) ： 2 8 6 士o 8 2 ； m r t ( o ) ：4 17 士2 7 2 氟伐他汀高剂量组：氟伐他汀( i g 5 0 m g l ( g 连续3 天) + 厄贝沙坦 ( i g 5 0 m g 1 ( g ) ；a u c ( o 3 6 ) ：1 9 3 5 士7 5 0 ；a u c ( o 哟) ：2 0 4 9 士7 7 2 ；t m a x ：o 8 8 士o 1 9 ； c m a ) c ：4 4 8 士2 8 0 ；t l 2 ：8 7 3 士2 6 5 ； c l ：2 7 9 土1 15 ； t ( o 3 6 ) ： 8 31 士2 3 9 ； m r t ( o 栅) 18 8 6 士拿3 2 经统计分析，与对照组比较，辛伐他汀( 5 m 剑蟾) 诱导三天对厄贝沙 坦的药代动力学无影响( p o 0 5 ) ；辛伐他汀( 5 m g l ( g ) 诱导五天对厄贝 沙坦的药代动力学有显著影响，诱导组的主要药代参数a u c 。o - 3 6 ，、a u c ( o 哟) 、脚( o - 3 6 ) 、m r t ( o 耐、c m a x 显著增加( p o 0 5 ) c l 显著降低( p o 0 5 ) ：氟伐他汀高剂量( 5 0 m g l ( g ) 诱导三天对厄贝沙坦的药 代动力学有影响，诱导组的t ( 1 ，2 ) 和褓t ( o - 3 6 ) 显著延长( p o 0 5 ) ；t h e r ei ss i g n i f i c a m i n n u e n c eo nt 1 1 e p h a r m a c o k i n e t i c s o fi r b e s 棚 a 盘e r i n d u c i n g w i m s i m v a s t a t i n ( 5 m g l 吗) f o r5d a y s ( p o 0 5 ) ，t h ei m p o r t a 芏1 tp h a r m a c o k i n e t i c p a r a m e t e r ss u c ha sa u c ( o 3 6 ) 、a u c ( o 哪) 、哏t ( o 3 6 ) 、 r ( o 哟) 、c m 舣a r ei n c r e a s e o b v i o u s ( p o 0 5 ) a n dc li sd e c r e a s eo b v i o u s ( p o 0 5 ) ；t h e r ei ss i g n i f l c a n ti n n u e n c e o n t h ep h 跚n a c o k i n e t i c so fi r b e s a r t a na r e rm d u c i n gw i mf l u v a s t a t i n ( 5 0 m g l ( g ) f o r3d a y s ( p o 0 5 ) ，m e p h a n m c o k i n e t i cp 删e t e r ss u c ha st 1 ，2a n dm r t ( o 3 6 ) a r ei n c r e a s eo b v i o u s ( p 3 5 姗0 1 l 的，也应当接受他 汀类药物治疗瞄1 。因此他汀类降脂药与厄贝沙坦临床经常联用。目前多从 药效学角度研究辛伐他汀与厄贝沙坦的相互作用，有关辛伐他汀对厄贝沙 坦药代动力学的影响，目前尚未见报道。辛伐他汀在肝脏主要经c y p 3 a 4 代谢晗3 。厄贝沙坦在肝脏主要经c y p 2 c 9 代谢，几乎不经c y p 3 a 4 代谢n 1 。二 者经不同途径代谢，虽然理论上二者在体内代谢不存在酶竞争作用，但药 物代谢酶的作用机制非常复杂。口服药物溶解后，经过肠壁吸收，通过肝 门静脉进入肝脏，经肝脏代谢和胆、肾等排泄从体内消除 ，其过程非常 复杂。因此辛伐他汀对厄贝沙坦药代动力学的影响值得探讨。因此本课题 研究了新西兰大白兔灌胃服用不同时间辛伐他汀后对厄贝沙坦的药代动 力学的影响。旨在为临床药物相互作用提供理论参考。 研究论文 材料与方法 l 仪器与试剂 1 1 仪器 w a t e r s 高效液相色谱仪，5 1 5 泵，4 7 4 荧光检测器，e m p o w e r 色谱数 据工作站； z h 一2 涡旋混合器( 天津药典标准仪器厂) ； 8 0 0 型离心机( 上海分析仪器厂) ； 梅特勒a e 2 4 0 电子分析天平( 瑞士) ： s a n y o 低温冰箱。 1 2 药品和试剂 替米沙坦标准对照品( s i g m a a i d r i c h c 0 p o ) ： 厄贝沙坦标准对照品( 中国药品生物制品检定所) ， 乙腈为色谱纯，乙醚、二氯甲烷、磷酸为分析纯， 试验用水为蒸馏水。 羧甲基纤维素c m c s ( 天津市光复精细化工研究所批号：2 0 0 5 年8 月15 日化学纯) 辛伐他汀片( 杭州默沙东制药有限公司批号：1 0 0 2 9 2 规格：2 0 m g 片) 厄贝沙坦片( 赛诺菲安万特( 杭州) 制药有限公司批号：o a 0 2 0 规 格：0 1 5 9 片) 1 3 动物：新西兰大白兔，2 4 只，健康，雄性，体重2 5 3 k g ，购于 河北医科大学动物中心，动物合格证号为7 0 9 1 9 8 。并通过河北医科大学 动物实验伦理委员会批准。 2 实验方法 2 1 动物处置：每只笼子装一只新西兰大白兔，称重，编号，进入动物室， 经一周以上饲养适应后，随机分为四组，分别为：3 天对照组、5 天对照 组、辛伐他汀( 5 m 鲋( g ) 诱导3 天组和辛伐他汀( 5 m g k ) 诱导5 天组， 每组6 只。 3 天对照组：前3 天每天一次灌胃给予2 羧甲基纤维素溶液1 0 m l 只，于第4 天早8 ：o o 灌胃给予厄贝沙坦( 5 0 m g l ( g ) 的2 羧甲基纤维素 研究论文 溶液。 5 天对照组：前5 天每天一次灌胃给予2 羧甲基纤维素溶液l o m l 只，于第6 天早8 ：o o 灌胃给予厄贝沙坦( 5 0 m g l ( g ) 的2 羧甲基纤维素 溶液。 辛伐他汀诱导3 天组：前3 天灌胃给予辛伐他汀( 5 m g l ( g ，q ( 1 ) 的2 羧甲基纤维素溶液，于第4 天早8 ：o o 灌胃给厄贝沙坦( 5 0 m g l ( g ) 的2 羧甲基纤维素溶液。 辛伐他汀诱导5 天组：卜5 天灌胃给予辛伐他汀( 5 m g l ( g ，q d ) 的2 羧甲基纤维素溶液，于第6 天早8 ：o o 灌胃给厄贝沙坦( 5 0 m g l ( g ) 的2 羧甲 基纤维素溶液。 所有动物于灌胃给厄贝沙坦的前一天晚8 ：o o 开始禁食不禁水，所有 药物的给药剂量按人兔体质量的等效剂量换算。 2 2 取血方法 预先为动物置留置针，分别于给药前和给药后o 2 5 ，o 5 ，1 ，1 5 ，2 ， 3 ，5 ，7 ，9 ，1 2 ，2 4 ，3 6 h 从新西兰大白兔的耳中动脉取血2 m l ，置肝素 管中，l o 0 0 0 r m i n q 离心1 0 分钟，取上清液，放入一8 0 低温冰箱保存， 用于测定厄贝沙坦的浓度。 2 3 血浆样品的处理 同第一部分。 2 4 色谱条件 同第一部分。 2 5 药代动力学分析 2 5 1 分析软件和方法 每只新西兰大白兔的血浆厄贝沙坦浓度值均用d a sv e r s i o n3 o ( b o n t z i n c ，b e i j i n g ，c h i n a ) 药代动力学软件进行智能化数据处理，模拟血药浓度一 时间曲线，并计算房室模型的药代动力学参数和非房室模型统计矩参数。 c 一和t m 。x 为实验中直接测得。 2 5 2 模型选择 首先看方差分析的结果，如果方差分析结果表明各隔室模型对数据 的拟合没有差异，则一般选择隔室数最少的模型进行数据拟合；如果方差 分析有差异，比较a i c 值，同一权重下，选择a i c 值最小的模型进行数 研究论文 据拟合。 2 5 3 数据处理和统计分析 统计分析采用s p s s l 3 o 软件，计量资料采用均数土标准差，多组比